Bcl-2和Bax蛋白在人早孕胎盘绒毛和蜕膜组织中的表达

目的探讨Bcl-2和Bax蛋白在人早孕绒毛和蜕膜组织中的表达及其意义。方法应用免疫组织化学ABC法检测Bcl-2和Bax蛋白在孕5~7周绒毛和蜕膜组织细胞中的表达,用真彩色病理图像分析系统4.0图像分析软件测定Bcl-2和Bax蛋白表达的积分吸光度值。结果Bc1-2蛋白主要分布于孕5~7周绒毛合体滋养层细胞、蜕膜细胞的细胞质和细胞核中,蛋白表达积分吸光度值依次降低,其差异无统计学意义(P>0.05)。Bax蛋白在孕5~7周绒毛细胞滋养层细胞、合体滋养层细胞中均未见表达;孕6周,Bax蛋白表达于极少部分蜕膜细胞的细胞质中。结论Bc1-2和Bax蛋白在人早孕过程中参与了绒毛滋养层细胞增殖和分化、子宫内膜蜕膜化的过程,在绒毛的发生、发育、胎盘形成和组织结构改建及功能完善等方面发挥着重要作用。     

TNF-相关诱导凋亡因子及其受体在人胎盘组织中的免疫组织化学定位

目的 探讨TNF相关诱导凋亡因子(TRAIL)及其DR4、DR5受体在人胎盘组织的表达及其意义。方法 免疫组织化学结合图像分析定量方法观察TRAIL及其DR4、DR5受体在人胎盘组织的表达及其含量的周龄变化。结果 人胎盘滋养层细胞、绒毛基质细胞及毛细血管的内皮细胞均呈TRAIL及DR4、DR5受体免疫反应阳性，阳性反应物分布于胞膜及胞质，胞核阴性。在人胎盘绒毛的不同发育阶段中，TRAIL的含量相对稳定，而其受体DR4、DR5的含量随着周龄的增加而升高。结论 结果显示胎盘不仅能产生TRAIL，而且也是TRAIL的靶器官，TRAIL及其DR4、DR5受体系统可能参与胎盘的特免调节。     

人胚胎生长发育过程中Bcl-2和Bax蛋白在食管组织中的表达

目的探讨人胚胎食管发育过程中食管壁细胞增殖与凋亡的变化规律,以及B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和Bcl相关X蛋白(Bax)在食管生长发育中的表达意义。方法应用免疫组织化学ABC法检测第2、3、4月龄段人胚胎(共14例)食管壁组织内Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果第2、3、4月龄段,人胚胎食管壁肌间神经丛、黏膜下神经丛和黏膜层内均有Bcl-2蛋白阳性表达,在食管上皮Bax蛋白呈弱阳性表达。结论Bcl-2和Bax细胞周期调控蛋白与人胚胎食管的生长发育关系密切。     

一株与正常人细胞成分反应的巨细胞病毒单克隆抗体的鉴定

用ＨＣＭＶ－ＡＤ１６９株抗原建立了一株分泌ＨＣＭＶＭｃＡｂ的杂交瘤细胞株Ｎ４Ｅ６。经Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析发现ＭｃＡｂ与ＨＣＭＶ抗原和正常人成纤维细胞（ＨＥＦ）抗原均有多条免疫沉淀带出现：与ＨＣＭＶ－ＡＤ１６９株抗原反应的沉淀带为８９Ｋ，８７Ｋ，７３Ｋ和４２Ｋ；与Ｄａｖｉｓ株抗原反应的为８９Ｋ，８７Ｋ，４４Ｋ；与８１６地方株抗原反应的为８９Ｋ，８７Ｋ，７３Ｋ，４４Ｋ；与ＨＥＦ抗原反应的为８９Ｋ，８７Ｋ，４４Ｋ。表明Ｎ４Ｅ６除能识别ＨＣＭＶ－ＡＤ１６９株和８１６地方株特异成分７３Ｋ，外，尚能识别ＨＣＭＶ和ＨＥＦ共同成分８９Ｋ，８７Ｋ和４４Ｋ。     

人胎发育过程中Bcl-2和Bax蛋白在小肠中的表达

目的 探讨人胎小肠发育过程中肠壁细胞增殖与凋亡的变化规律,及相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和Bcl相关蛋白(Bax)在小肠生长发育中的表达意义.方法 应用免疫组织化学ABC法检测第2、3、4三个月胎龄段,人胎小肠肠壁组织内Bcl-2和Bax蛋白的表达.结果 第2、3、4三个月胎龄段,小肠肠壁肌间神经丛和黏膜下神经丛内均有Bcl-2阳性细胞分布,Bax在小肠黏膜层上皮细胞的细胞质内广泛表达.结论 Bcl-2/Bax蛋白在人胎小肠的生长发育过程中起重要的调节作用.     

同型半胱氨酸诱导基因在正常和畸形人胚心脏中的表达

目的 研究同型半胱氨酸诱导基因(HCY-2)在发育不同时期的正常人胚和畸形人胚心脏中的表达,揭示HCY-2表达蛋白在人胚心肌细胞发育和分化中的作用。方法 取正常和先天性畸形人胚心脏,采用免疫组织化学及图像分析技术对心脏内HCY-2表达变化进行定量测定分析。结果 HCY-2在人胚心脏发育整个时期均表达,其表达部位主要在心肌纤维内;先天性畸形人胚心脏中的HCY-2表达增强。结论 HCY-2表达蛋白通过影响心肌细胞的增殖而影响人胚心脏发育过程,其表达异常与先天性畸形的发生密切相关。     

兔抗脱氢表雄酮抗体的鉴定及脱氢表雄酮在人胎盘的定位

为了鉴定脱氢表雄酮抗体的特异性及使用效价,观察脱氢表雄酮在人早期胎盘绒毛的细胞定位。方法：免疫组织ＡＢＣ法。结果：脱氢表酮抗体烃度为１：１０００～１：２０００时,胎盘切片仍显示较强的脱氢表雄酮免疫反应阳性,抗体经过量的脱氢表雄雄酮－ＢＳＡ偶联复合物吸收后,再进行孵育时,胎盘切片呈阴性反应,提示该脱氢表雄酮本有较高的使用效价及特异性。人胎盘绒毛两层滋养层细胞和基质细胞均早脱氢表雄酮免疫反应性,阳性反     

离体培养人肿瘤细胞和正常细胞对~3H-血卟啉衍生物的摄取和存留

用液闪计数测定经组织培养的6株人肿瘤(MGC 80-3、SGC-7901、BEL-7402、Os-732、Detroit-6和 HeLa)细胞及1株正常成纤维细胞对~3H-HPD 的摄取和存留。MGC 80-3和成纤维细胞的摄取量,在测定的24h 内,随温育时间延长而增加;温育30 min 换液,再培养30 min,血卟啉衍生物含量就明显减少,MGC 80-3和成纤维细胞分别只含原摄入量的32.01%和40.75%;但在以后的24h 内,维持在类似的水平上。7株细胞温育30min 摄入~3H-HPD 量,按多少顺序依次为成纤维细胞、HeLa、BEL-7402、Detroit-6、SGC-7901、MGC 80-3 及 Os-732;但是,培养24h 后,由于各株细胞排出量不同,~3H-HPD 存留率大小顺序为 Os-732、Detroit-6、BEL-7402、HeLa、SGC-7901,MGC 80-3 及成纤维细胞。环境因素对细胞摄取~3H-HPD 起重要作用,提高 pH 值、加入血清或降低温度都使摄入减少。本文结果提示,恶性组织比正常组织血卟啉衍生物含量高,不是因为恶性细胞摄入多,而是由于存留时间长,与体内实验结果一致,可供 HPD 光敏治疗恶性肿瘤作参考。     

用初纯抗原和免疫耐受法制备抗卵巢囊腺癌相关抗原的抗血清

将卵巢囊腺癌的盐水提取液通过抗正常人血浆和抗正常人卵巢的混合亲和层析柱,获得初纯的卵巢囊腺癌抗原。以这种初纯抗原免疫对正常人血浆和卵巢处于免疫耐受状态的成年绵羊,可获特异性很高的抗卵巢囊腺癌抗血清。     

人胎盘脱氢表雄酮的免疫组织化学研究

目的　观察脱氢表雄酮 (DHEA)在人胎盘的定位及其含量的周龄变化。　方法　用免疫组织化学及定量方法。　结果　人胎盘两层滋养层细胞和基质细胞均呈 DHEA免疫反应性 ,反应物质分布于胞质 ,胞核无免疫反应。在人胎盘绒毛的不同发育阶段中 ,DHEA的相对含量随周龄的增加而增加。　结论　 DHEA对胚胎及胎盘的发育可能具有重要的调节功能。     

腺苷三磷酸对人横纹肌肉瘤细胞系P21和c-myc蛋白表达的影响

为进一步研究腺苷三磷酸抑制癌细胞增殖诱导分化的作用机理，用ＡＴＰ作用于人横纹肌肉瘤单细胞克隆亚系ＲＤＬ６细胞，用免疫荧光细胞化学方法观察ＡＴＰ作用后的ＲＤＬ６细胞核内Ｐ＾２１蛋白表达增强，ｃ－ｍｙｃ蛋白表达降低，膜下胞质内微丝束－应力纤维组改善，粘着斑内的主要粘附蛋白－纽蛋白（ｖｉｎｃｕｌｉｎ）表达增强，正常小鼠成肌细胞Ｃ２Ｃ１２细胞核内Ｐ＾２１蛋白高表达，ｃ－ｍｙｃ蛋白不表达。结果表明：ＲＤＬ６     

铅对孕鼠脑垂体卵巢胎盘及人胎盘绒毛毒性作用的研究

用妊娠第7d大鼠,实验Ⅰ和Ⅱ组分别每日灌服硝酸铅100mg/kg和200mg/kg,连续5d。于妊娠第12d检查,实验Ⅰ组血铅浓度27.90±8.47μg/dl,黄体和胎盘可出现轻度损害。实验Ⅱ组孕鼠血铅浓度48.77±16.15μg/dl,相当于人亚中毒血铅水平,黄体和胎盘的光镜或超微结构损害严重,黄体3β-羟甾脱氢酶为对照组的1/20,31.69％的胚胎被吸收。垂体前叶细胞未见明显变化。人胎盘绒毛体外培养,实验组的培养液内分别加入硝酸铅0.5μg/ml、2.5μg/ml、5μg/ml,培养3～4d后进行形态学观察。培养液中含铅量2.5μg/ml以上者,绒毛的光镜及超微结构均有明显损害,培养液中hCG含量也明显减少。本文结果提示,铅使孕鼠的黄体、胎盘及胎鼠毒性损害明显,对人胎盘绒毛也有直接毒害作用。     

人瘦素基因在胎盘中的分离鉴定及在大肠杆菌中的融合表达

目的 克隆人瘦素(leptin)基因,构建融合表达载体,实现在大肠杆菌中的高效表达.方法 从人胎盘中提取RNA,利用反转录聚合链式反应(RT-PCR),克隆到人的leptin基因编码序列,对该基因片段进行T载体克隆、酶切和PCR鉴定,并且对其进行序列分析.将leptin基因插入到原核表达载体PET-28a中,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,利用IPTG进行诱导,对表达产物进行SDS-PAGE电泳分析,并利用脱氧胆酸钠对表达蛋白进行纯化.结果 DNA序列分析表明,从胎盘中克隆的人leptin序列与文献报道的一致,酶切鉴定证实leptin基因正确地插入到了表达载体中,经IPTG诱导和SDS-PAGE电泳分析,人leptin基因在大肠杆菌中实现了高效融合表达,表达产物的分子量为20kD,经过纯化,得到了较纯的融合表达蛋白.结论 从人胎盘中成功克隆了leptin基因,构建了原核表达载体,实现了在大肠杆菌中的高效表达,为进一步研究leptin的生物学功能奠定基础.