TGFβ1及其受体在大鼠整胚及胎肺发育过程中的表达

目的：观察TGFβ1及TβRⅠ、 TβRⅡ在大鼠整胚及胎肺发育中的表达, 探讨它们与大鼠整胚及胎肺发育间的相互关系和作用机制.方法：半定量RT-PCR分析3种因子在13 ～17 d 全胚中的变化情况;免疫组化法检测3种因子在15 ～17 d 胎肺中的表达及该组织发育结构特点.结果：半定量RT-PCR示, 3种因子在发育13 ～15 d表达呈递增趋势, 16 ～17 d 出现下降.免疫组化结果显示, TGFβ1主要位于发育中支气管上皮细胞内, TβRⅠ、 TβRⅡ位于原始肺泡组织.结论：TGFβ1及TβRⅠ、 TβRⅡ在大鼠整胚及胎肺发育过程中起着重要的调控作用, 尤其是对组织器官形态的发生.     

抗纤灵方对单侧输尿管梗阻大鼠TGF-β1-Smad通路的影响

目的:研究中药复方抗纤灵对单侧输尿管梗阻(UUO)所致肾纤维化大鼠TGF-β1-Smad通路的影响,借以初步探讨其发挥疗效的作用机制。方法:雄性SD大鼠18只随机分为3组,假手术组、模型组、中药治疗组。用单侧输尿管结扎术建立大鼠肾纤维化模型,抗纤灵治疗两周后检测梗阻肾羟脯氨酸含量;HE染色和电镜观察肾组织病变;采用RT-PCR检测肾组织TGF-β1 mRNA水平;蛋白免疫印迹法检测肾组织转化生长因子I型受体(TβRI)、转化生长因子II型受体(TβRII)、Smad2蛋白表达及磷酸化变化。结果:与假手术组比较,模型组大鼠梗阻肾羟脯氨酸含量明显增多;病理观察可见肾小球毛细血管基底膜明显增厚,间质成纤维细胞和胶原沉积明显增多;肾组织TGF-β1mRNA及TβRI、TβRII蛋白表达显著增多,Smad2蛋白磷酸化及总蛋白表达水平均显著增多。与模型组比较,中药干预组大鼠梗阻肾羟脯氨酸含量明显减少;肾小球和肾小管基底膜仅见轻度增厚,间质成纤维细胞和胶原沉积较模型组减轻;肾组织TβRI、TβRII蛋白表达明显下调,Smad2蛋白磷酸化及总蛋白表达水平均明显下调。结论:抗纤灵可抑制单侧输尿管梗阻大鼠TGF-β1-Smad通路,抑制梗阻肾TβRI、TβRII、Smad2蛋白表达及Smad2蛋白磷酸化,从而改善梗阻性大鼠的肾间质纤维化,减少纤维化肾脏中胶原蛋白含量。     

抗纤灵方对单侧输尿管梗阻大鼠TGF-β1-Smad通路的影响

目的： 研究中药复方抗纤灵对单侧输尿管梗阻（UUO）所致肾纤维化大鼠TGF-β₁-Smad通路的影响，借以初步探讨其发挥疗效的作用机制。方法: 雄性SD大鼠18只随机分为3组，假手术组、模型组、中药治疗组。用单侧输尿管结扎术建立大鼠肾纤维化模型，抗纤灵治疗两周后检测梗阻肾羟脯氨酸含量；HE染色和电镜观察肾组织病变；采用RT-PCR检测肾组织TGF-β₁ mRNA水平；蛋白免疫印迹法检测肾组织转化生长因子I型受体（TβRI）、转化生长因子II型受体（TβRII）、Smad2蛋白表达及磷酸化变化。结果: 与假手术组比较，模型组大鼠梗阻肾羟脯氨酸含量明显增多；病理观察可见肾小球毛细血管基底膜明显增厚，间质成纤维细胞和胶原沉积明显增多；肾组织TGF-β₁ mRNA及TβRI、TβRII蛋白表达显著增多，Smad2蛋白磷酸化及总蛋白表达水平均显著增多。与模型组比较，中药干预组大鼠梗阻肾羟脯氨酸含量明显减少；肾小球和肾小管基底膜仅见轻度增厚，间质成纤维细胞和胶原沉积较模型组减轻；肾组织TβRI、TβRII蛋白表达明显下调，Smad2蛋白磷酸化及总蛋白表达水平均明显下调。结论: 抗纤灵可抑制单侧输尿管梗阻大鼠TGF-β₁-Smad通路，抑制梗阻肾TβRI、TβRII、Smad2蛋白表达及Smad2蛋白磷酸化，从而改善梗阻性大鼠的肾间质纤维化，减少纤维化肾脏中胶原蛋白含量。     

转化生长因子β1信号通路在糖皮质激素抑制人卵巢癌细胞HO-8910增殖中的作用

目的 :转化生长因子 β1(transforminggrowthfactorβ1,TGFβ1)是一个分泌型的多肽 ,它对多种类型的肿瘤细胞均具有增殖抑制作用。TGFβ1受体分为I、II型 (TβRI、TβRII) ,属丝 /苏氨酸激酶受体家族。能与TGFβ1结合的是TβRII,TβRII与配体结合后与TβRI形成寡聚体 ,并使后者磷酸化 ,激活的TβRI通过激活的Smad蛋白 ,调节靶基因的转录 ,抑制细胞增殖。本教研室既往的研究表明 ,糖皮质激素能够抑制人卵巢癌细胞系HO - 8910细胞的增殖 ,但其机制尚不明确。本研究拟探讨TGFβ1信号通路在糖皮质激素抑制人卵巢癌细胞系HO - 8…     

转化生长因子βⅡ型受体在小鼠肾发育中的表达

目的:观察转化生长因子βⅡ型受体(TβRⅡ)在小鼠肾发育中的时空性表达,探讨转化生长因子β(TGF-β)与肾发育的关系。方法:采用免疫组织化学法、体视学和免疫印迹法测定不同胚龄(E)12、14、16和18d及生后日龄(P)1、3、7、14、21、28和42d小鼠肾内TβRⅡ的表达及其含量变化。结果:免疫组织化学结果显示TβRⅡ在各期肾小体、肾小管及集合管内均有表达,但在各期近端小管强烈表达,各期集合管表达较强,而各期肾小体、远端小管内表达较弱。体视学测量结果显示TβRⅡ在各期肾小体、肾小管及集合管的表达量均逐渐增加。免疫印迹结果显示TGF-βRⅡ随着肾的发育其表达量逐渐增加。结论:TGF-β可能对肾各结构的发育以及成熟肾各结构的维持起重要作用,尤其在近端小管的发育方面作用更为显著。     

子痫前期患者胎盘组织TGF-β1、TGFβRⅠ和TGFβRⅡ的表达及其意义

目的检测胎盘组织中TGF-β1(transforming growth factor-beta1,TGF-β1)及其受体(TGF-beta receptor,typeⅠandtypeⅡ,TGFβRⅠ,TGFβRⅡ)的表达,评估TGF-β1及其受体在子痫前期发病中的作用。方法采用SP免疫组化法检测正常妊娠组和轻、重度子痫前期组胎盘组织中TGF-β1、TGFβRⅠ和TGFβRⅡ的分布与定位,并通过高清晰度彩色病理图像分析系统对其进行定量分析。结果重度子痫前期组TGF-β1和TGFβRII的平均光密度较正常妊娠组显著增加(P<0·01),TGFβRI的平均光密度也较正常妊娠组增加(P<0·05)。结论TGF-β1、TGFβRI和TGFβRII在滋养细胞的浸润过程中发挥重要作用,它们可能与子痫前期的发病有着重大的关系。     

小鼠胚胎心脏发育过程中转化生长因子的表达特点

目的：探讨不同转化生长因子(TGF)β异构体在小鼠胚胎心脏的时空表达规律和心脏发育关系。方法：小鼠胚胎连续切片,免疫组化PAP法染色。结果：TGFβ1和TGFβ3的表达开始于胚胎发育第9d,第12d达高峰,第13d后,表达下降,尤以室间隔和左心室致密心肌下降明显。直到第10～11d,各部才出现较强的TGFβ2染色,第12d后,TGFβ2染色明显下降。心肌TGFβ2和TGFβ3表达增强的同时,流出道嵴表面和半月瓣原基表面内皮细胞变为立方形,显较强的TGFβ2和TGFβ3染色。结论：TGF／3类生长因子集中表达于小鼠胚胎心脏发育的9～13d,3种TGFβ异构体可能以旁分泌和内分泌的形式在心肌分化、外形演变和内部分隔过程中发挥重要调节作用。     

石蜡包埋人胰腺癌组织中Smad4蛋白和转化生长因子β1及其Ⅱ型受体的表达

目的：探讨转化生长因子（TGF）－β通路中Smad4蛋白,TGFβ1和转化生长因子βⅡ型受体（TβRⅡ）的关系及它们在胰腺癌中的可能作用机制。方法：用EnVision免疫组织化学技术检测56份石蜡包埋人胰腺癌标本Smad4蛋白,TGFβ1和TβRⅡ蛋白表达的情况。结果：56份胰腺癌组织Smad4,TGFβ1和TβRII阳性率分别为58．93％（33）,66．07％（37）和60．71（34）,对应正常胰腺组织阳性率分别为89．29％（50）,25．00％（14）和25．00％（14）,TGFβ1的表达与临床分期,肿瘤的有无转移相关（P＜0．05）,TGFβ1和TβRII之间也有相关关系（P＜0．05）,结论：胰腺癌组织中Smad4表达降低,TGFβ1与TβRII则呈过表达,TGFβ1和TβRII对胰腺癌的发生可能有协同作用。Smad在TGF－β诱导基因表达调控和随后的生长抑制中是关键的转录因子,但TGFβ有时也可能以与Smad4无关的形式起作用。     

肾癌转化生长因子β1表达及与预后的关系

目的 探讨转化生长因子β1(TGFβ1)肾癌发生、发展中的作用及与预后关系。方法 采用免疫组化ABC法对45例肾癌组织中TGFβ1表达进行了研究，对患者存活率进行回顾性随访。结果 癌旁肾组织中TGFβ1阳性表达率显著高于肾癌组织。TGFβ1阳性表达率随肾癌病理分级和临床分期的上升而下降，染色强度也减弱。TGFβ1阳性表达组3年及5年存活率高于阴性表达组。结论 TGFβ1为肾癌的负性调节因子，对抑制肾癌的恶性转化和进展可能有重要的意义。临床上检测TGFβ1可作为肾癌恶性度及预后评估的参考指标之一。     

鸡胚肾（小管）发生中相关活性物质的表达及调控意义

目的观察表皮生长因子受体(EGFR)、转化生长因子-β(TGF-β)和水通道蛋白-2(AQP-2)及Bax蛋白在鸡胚肾(小管)发生过程中的表达,探讨它们的生物活性作用及相互之间的调控意义。方法应用免疫组织化学染色和体视学半定量方法,检测EGFR、TGF-β(β1、β2、β3)、AQP-2及Bax蛋白在10~46期鸡胚共36例肾组织发生中的表达,用IPP专业图像分析软件对其表达强度进行定量分析。结果第26~46期鸡胚肾的近端小管上皮细胞呈EGFR免疫反应阳性;第26~37期中肾的近端小管上皮细胞和远端小管上皮细胞呈TGF-β免疫反应阳性,第33~40期后肾的近端小管上皮细胞和远端小管上皮细胞呈TGF-β免疫反应阳性,第44~46期近端小管上皮细胞呈TGF-β免疫反应阳性,远端小管上皮细胞呈TGF-β免疫反应阴性;第26~46期鸡胚肾的集合小管上皮细胞呈AQP-2免疫反应阳性;第26~37期中肾近端小管和远端小管上皮细胞呈Bax反应阳性,第33~46期后肾近端小管上皮细胞呈Bax免疫反应阳性。图像分析显示,在鸡胚肾发生过程中,EGFR、TGF-β(β1、β2、β3)和Bax蛋白的阳性反应呈现先增强后减弱的变化,AQP-2阳性反应呈持续增强的趋势。结论鸡的中肾具有排泄功能,中肾肾小管的退化可能与TGF-β和Bax蛋白的大量表达有关。EGFR、TGF-β、AQP-2和Bax蛋白的协同表达调控着后肾肾小管和集合小管的发生及分化成熟。在肾脏发育过程中AQP-2可能介导胚胎发育过程中水平衡的稳定。     

石蜡包埋人胰腺癌组织中Smad4蛋白和转化生长因子β_1及其Ⅱ型受体的表达

目的　探讨转化生长因子 (TGF) β通路中Smad4蛋白、TGFβ1和转化生长因子 βⅡ型受体 (TβRⅡ )的关系及它们在胰腺癌中的可能作用机制。 方法　用EnVision免疫组织化学技术检测5 6份石蜡包埋人胰腺癌标本Smad4蛋白、TGFβ1和TβRⅡ蛋白表达的情况。 结果　 5 6份胰腺癌组织Smad4、TGFβ1和TβRⅡ阳性率分别为 5 8 93%(33)、6 6 0 7%(37)和 6 0 71%(34 ) ,对应正常胰腺组织阳性率分别为 89 2 9%(5 0 )、2 5 0 0 %(14)和 2 5 0 0 %(14)。TGFβ1的表达与临床分期、肿瘤的有无转移相关 (P <0 0 5 )。TGFβ1与TβRⅡ之间也有相关关系 (P <0 0 5 )。 结论　胰腺癌组织中Smad4表达降低 ,TGFβ1与TβRⅡ则呈过表达。TGFβ1与TβRⅡ对胰腺癌的发生可能有协同作用。Smad4在TGF β诱导基因表达调控和随后的生长抑制中是关键的转录因子 ,但TGFβ有时也可能以与Smad4无关的形式起作用。     

TGF-β1对醛糖还原酶在大鼠系膜细胞及Thy-1肾炎中表达的影响

目的　研究转化生长因子β1(TGF- β1)对醛糖还原酶(AR)在大鼠系膜细胞(MsC)及大鼠抗Thy 1肾小球肾炎模型 (ATG)中表达的影响。方法　采用RT PCR和Westernblot技术分别检测TGF β1刺激后体外培养大鼠系膜细胞AR的表达以 及TGF -β1和AR在ATG中的表达;应用免疫组化检测ATG中TGF -β1、AR的表达,并对染色强度进行图像分析。结果　外源 性TGF- β1作用后,大鼠系膜细胞中AR表达升高,并显示出一定的时间与剂量依赖性。ATG中,随着病程的延长,TGF -β1、AR 表达升高,对免疫组化结果进行图像分析显示,二者表达之间具有相关性(r=0.65,P<0.05)。结论　TGF -β1可以上调其相 关反应性基因AR的表达,后者可能参与了肾小球肾炎发生发展的过程。     

肾小管间质纤维化中成纤维细胞的转化生长因子β1及其Ⅰ型受体蛋白及基因表达检测

目的 :研究腺嘌呤致大鼠肾小管间质纤维化模型的肾组织成纤维细胞中转化生长因子 β1(TGF β1)及其Ⅰ型受体的表达。方法 :腺嘌呤灌胃法建立大鼠肾小管间质纤维化模型 ,由模型肾组织培养肾间质成纤维细胞 ,应用免疫组化、逆转录PCR分别检测TGF β1及其Ⅰ型受体蛋白及mRNA的表达。结果 :成纤维细胞TGF β1、TGF β1I型受体免疫组化阳性 ;逆转录PCR可见 2 94bp的TGF β1及 34 5bp的TGF β1的Ⅰ型受体mRNA特异扩增带。结论 :在肾小管间质纤维化进程中 ,肾间质成纤维细胞是TGF β1的一个来源 ,而且也是其效应细胞 ,从而在TGF β1的作用下出现增生和合成细胞外基质的效应。     

肠道缺血再灌流对肾内源性碱性成纤维细胞生长因子和转化生长因子β基因表达的影响

目的和方法:研究肠道缺血再灌流过程对肾脏内源性碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和转化生长因子β(bTGFβ)基因表达的影响.采用肠系膜上动脉夹闭45min与再灌流6 h和24 h动物模型,用原位杂交与逆转录PCR(RT-PCR)技术研究两种生长因子基因在正常、缺血以及再灌流肾组织中的表达.结果:两种因子的mRNA在正常肾脏均有少量表达.缺血45min后,两种因子基因表达减少.再灌流6 h,肾组织中TGFβ基因表达明显增加,而bFGF基因表达仍然较少.再灌流24 h,两种因子基因表达恢复至正常对照.结论:肠道缺血再灌流可以引起肾组织内源性bFGF与TGF β基因表达的改变,这种变化过程与肾缺血性损伤后自我修复机制密切相关.     

转化生长因子β及其信号转导分子Smad4在肾小球硬化中的作用研究

目的：探讨转化生长因子β（TGF-β1）及其信号转导分子Smad4在肾小球肾炎中的表达及其意义。 方法： 以20例正常肾组织为对照组,对38例各种不同组织学类型肾小球肾炎的肾活检标本,分别行免疫组化方法观察TGF-β1、Smad4、胶原Ⅰ（collagen type Ⅰ）在肾小球中的染色强度,并对其检测结果作图像分析处理;以体外培养的人系膜细胞为对象，观察TGFβ1对系膜细胞表达Smad4、胶原Ⅰ的影响，Smad4、胶原Ⅰ的基因表达用RT-PCR检测，蛋白表达用Western blotting检测。 结果： 所有增生、硬化病理类型肾炎中病变肾小球TGFβ1、Smad4、胶原Ⅰ蛋白表达均高于对照组（P<0.05）,且TGFβ1、Smad4两者在肾小球中的表达与胶原Ⅰ在肾小球中的堆积呈多重相关（P<0.05）；外源性TGFβ1刺激人肾系膜细胞后，细胞的Smad4基因表达和蛋白表达增高（P<0.05）；胶原Ⅰ的基因表达和蛋白表达也相应增高（P<0.05）。 结论： TGFβ1及其信号转导分子Smad4可能参与病变肾小球ECM的过量堆积，在肾小球硬化过程中起重要作用。     

TGF-β1及TGF βR Ⅱ mRNA在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

目的检测胎盘组织中TGF-β1(transform ing growth factor-beta1,TGF-β1)及其受体TGFβRⅡ(TGF-beta receptorⅡ)的表达,探求TGF-β1在子痫前期发病中的作用。方法用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术对10例正常妊娠组和26例子痫前期组(包括12例轻度和14例重度)胎盘组织中TGF-β1、TGFβRⅡmRNA的表达水平进行检测,并通过紫外凝胶图像分析进行定量分析。结果重度子痫前期组TGF-β1和TGFβRⅡmRNA的表达量均升高,与轻度子痫前期组及正常妊娠组相比有明显意义(P<0.05)。结论TGF-β1、TGFβRⅡ在转录水平就已经上调,它们的异常表达它们可能与子痫前期的发病有着重大的关系。     

血管紧张素-(1-7)对肾性高血压大鼠肾组织纤维化的影响

目的 :观察血管紧张素 ( 1 7) [Ang ( 1 7) ]对实验性肾性高血压大鼠肾组织纤维化的影响。方法 :采用微渗泵植入技术 ,建立Ang ( 1 7)对二肾一夹 ( 2K1C)高血压大鼠干预模型 ,在光镜下观察肾脏纤维化 ,免疫组化法检测肾组织转化生长因子β1 (TGF β1 ) ,RT PCR检测肾组织内TGF β1 、TGF β1 受体ImRNA水平。结果 :Ang ( 1 7)能减轻2K1C高血压大鼠肾纤维化 ,减少 2K1C高血压大鼠肾组织TGF β1 的蛋白表达 ,降低肾组织内TGF β1 、TGF β1 受体ImRNA水平。结论 :Ang ( 1 7)对 2K1C高血压大鼠肾纤维化作用机制之一是通过减少肾组织内TGF β1 及其受体的表达而实现     

肝纤维化大鼠转化生长因子β1／Smad蛋白的动态表达及意义

目的探讨转化生长因子TGF—β1／Smad信号通路在实验性肝纤维化发生中的作用。方法50只健康雄性SD大鼠分为2组：正常组和模型组,模型组大鼠利用40％CCl4油剂诱导形成肝纤维化模型,于6周及9周观测肝标本的病理,免疫组化法检测肝组织TGF—β1／Smad蛋白表达。结果①肝组织病理：与正常组比较,模型组大鼠肝组织都有不同程度的炎症和纤维化产生。模型组纤维化程度较正常对照组明显,差异有统计学意义（P〈0．05）;②TGF—β1／Smad基因蛋白：免疫组织化学检测显示,与正常对照组相比,模型组大鼠肝脏中TGF—β1、转化生长因子βI型受体（TβR—I）、Smad2、3、Smad,蛋白表达均显著增强（P〈0．01）,模型组大鼠肝脏TGF—β1、TβR-I、Smad。和Smad,之间存在正相关关系（P〈0．05或0．01）;模型组大鼠肝脏纤维化分级与TGF—β1、TβR—I、Smad2/3和Smad,之间存在正相关关系（P〈0．05或0．01）。结论肝组织TGF—β1／Smad蛋白表达水平与肝纤维化程度相关,TGF-β1／Smad信号的增强可能促进了肝纤维化的进展。     

结缔组织生长因子在单侧输尿管梗阻大鼠肾组织中的表达

目的：检测大鼠单侧输尿管梗阻（UUO）模型不同时期，肾组织中结缔组织生长因子（CTGF）、转化生长因子β1（TGF-β1）和α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达，观察比较在间质纤维化不同阶段，3者的动态变化及关系。 方法： 采用雄性SD大鼠36只，分为假手术组和模型组，模型组行左侧输尿管结扎术，再分3、7、14、21和28 d共6组，每组6只，于各时点处死大鼠，取肾组织，常规HE、Masson染色，按小管间质损害的特征进行半定量评分。免疫组化检测CTGF、TGF-β1和α-SMA表达。 结果： 随梗阻时间的延长，小管间质纤维化加重，28 d间质已基本被纤维化组织所代替。随间质纤维化程度的加重，CTGF和α-SMA表达逐渐增加，两者与小管间质损害积分呈正相关，CTGF与α-SMA的表达之间也呈正相关。TGF-β1表达在7-14 d达高峰后，逐渐减少，但仍高于对照组。 结论： UUO致CTGF表达增加可能与TGF-β升高有关，CTGF可能通过促进间质中肌成纤维细胞的形成而参与肾间质纤维化。     

IgA肾病大鼠外周血、肾组织γδT细胞分泌TGF-β1功能的实验研究

目的研究IgA肾病大鼠外周血、肾组织γδT淋巴细胞分泌细胞因子TGF-β1的功能。方法流式细胞仪分析IgA肾病大鼠外周血、肾组织γδT淋巴细胞比例以及血清IgA水平,并体外选择性扩增γδT细胞,在体外培养条件下,测定培养体系中细胞因子TGF-β1的表达。结果IgA肾病大鼠外周血、肾组织中γδT淋巴细胞比例升高,并能异常分泌TGF-β1细胞因子。结论γδT细胞可能是通过分泌TGF-β1参与IgA肾病的发生与进展。