黄连碱对胆固醇代谢关键基因的调节作用

该文主要研究胆固醇和25-羟胆固醇诱导对HepG2细胞胆固醇代谢的影响和黄连中黄连碱的降胆固醇活性及调节机制.用生化法检测了总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-c)和高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-c)水平;用qRT-PCR和Western bolt技术检测了胆固醇代谢关键基因LDLR,HMGCR,CYP7A1 mRNA和蛋白的表达水平.结果显示胆固醇和25-羟基胆固醇诱导能导致LDLR,CYP7A1的mRNA和蛋白的表达下降从而使TC和LDL-c含量上升.黄连碱能上调LDLR和CYP7A1的mRNA和蛋白表达水平而下调HMGCR的mRNA和蛋白表达水平,从而降低TC,LDL-c水平.这些结果表明黄连碱具有潜在的降胆固醇的药理活性,其分子机制可能是通过调节胆固醇代谢的关键基因LDLR,CYP7A1和HMGCR的mRNA和蛋白表达而达到降胆固醇的效果.该研究为开发新的具有降胆固醇活性的天然药物奠定了良好的理论基础.     

橄榄降脂胶囊对高脂血症大鼠血脂及其肝脏低密度脂蛋白受体基因表达的影响

目的:探讨中药橄榄降脂胶囊的降脂机制,为临床应用提供实验依据。方法:采用酶法检测大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG);采用磷钨酸-镁沉淀法检测HDL-c、LDL-c,RT-PCR法测定肝低密度脂蛋白受体(LDLR)基因表达。结果:模型组大鼠TC、TG、LDL-c均显著高于正常组,HDL-c显著低于正常组(P<0.05)。与正常组比较,模型组大鼠肝LDLR mRNA表达降低,P<0.05。各治疗组肝LDLR mRNA表达升高,与模型组比较P<0.05。结论:橄榄降脂胶囊可能通过调节肝LDLR mRNA表达而纠正脂质代谢紊乱。     

高效快速降脂动物模型研究

探讨斑马鱼作为降脂药物筛选模型的可行性以及盐酸小檗碱(BBR)对高脂斑马鱼的影响。用含4%胆固醇饲料喂养3月龄斑马鱼0,2,4,8,14,20,25,30 d,检测血清总胆固醇含量的变化;测定对照组、高胆固醇组、0.01%辛伐他汀组、0.1%BBR组和0.2%BBR组斑马鱼血清总胆固醇(TC)、总甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)的水平;RT-PCR检测肝脏HMGCR,LDLR和CYP7A1a mRNA的表达水平;油红O染色检测肝脏中脂肪含量的变化。结果显示4%胆固醇喂养斑马鱼后血清TC水平升高且有时间依赖性,20 d基本达到稳定水平;BBR组斑马鱼血清TC,TG和LDL-c水平显著下降,肝脏HMGCR mRNA的表达下降,LDLR和CYP7A1a mRNA的表达升高,脂肪含量减少。4%胆固醇饲料喂养斑马鱼20 d即可建立高脂斑马鱼模型,研究结果为进一步开展降脂药物的筛选奠定基础。     

双蓣调脂汤对高胆固醇血症模型大鼠肝组织HNF1α/PCSK9/LDLR信号通路的影响

目的 观察高胆固醇血症大鼠肝组织中肝细胞核因子1α（HNF1α）,前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶kexin 9型（PCSK9）,低密度脂蛋白胆固醇受体（LDLR）的表达水平,探讨双蓣调脂汤调节胆固醇代谢、缓解高胆固醇血症的作用机制。方法 40只雄性SD大鼠随机抽取8只为正常组予普通饲料喂养,其余32只予高脂饲料喂养,高胆固醇血症模型造模成功后,分为模型组,双蓣调脂汤低剂量组（7.8 g·kg^-1）,双蓣调脂汤高剂量组（15.6 g·kg^-1）,辛伐他汀组（4 mg·kg^-1）,每组8只,连续灌胃给药8周。生化法检测血清总胆固醇（TC）,甘油三酯（TG）,低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）及高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）含量;苏木素-伊红（HE）染色观察大鼠肝组织病理形态学变化;免疫组化检测大鼠肝组织中PCSK9和LDLR的表达;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测大鼠肝组织HNF1α,PCSK9和LDLR mRNA与蛋白表达。结果 与正常组比较,模型组大鼠血清TC,TG,LDL-C水平显著升高（P<0.01）,肝脂肪变性明显,HNF1α,PCSK9 mRNA与蛋白表达水平明显上升（P<0.05）,LDLR mRNA与蛋白表达水平明显降低（P<0.05）;与模型组比较,双蓣调脂汤高剂量组大鼠血清TC,TG,LDL-C水平显著降低（P<0.01）,双蓣调脂汤低剂量组和辛伐他汀组大鼠血清TC,LDL-C水平明显降低（P<0.05,P<0.01）,各给药组HDL-C水平没有明显变化,各治疗组肝脂肪变性明显改善,各治疗组大鼠肝脏HNF1α mRNA和蛋白表达水平明显降低（P<0.05,P<0.01）,双蓣调脂汤低、高剂量组大鼠肝脏PCSK9 mRNA与蛋白表达水平明显降低（P<0.05,P<0.01）,辛伐他汀组大鼠肝脏PCSK9 mRNA水平显著升高（P<0.01）,蛋白表达水平呈降低趋势,各治疗组大鼠肝脏LDLR mRNA水平显著升高（P<0.01）,双蓣调脂汤高剂量组大鼠肝脏LDLR蛋白表达水平显著升高（P<0.01）,双蓣调脂汤低剂量组和辛伐他汀组大鼠肝脏LDLR蛋白表达量呈升高的趋势,免疫组化结果显示各治疗组PCSK9阳性表达减弱,LDLR阳性表达增强。双蓣调脂汤高剂量组的治疗效果略优于辛伐他汀组,双蓣调脂汤低剂量组的治疗效果与辛伐他汀组比较,差异无统计学意义。结论 双蓣调脂汤可能通过HNF1α/PCSK9/LDLR信号通路降低血脂水平,在调节胆固醇代谢和减轻大鼠高胆固醇血症中发挥积极作用。     

橄榄降脂胶囊对高脂血症大鼠肝脏脂蛋白受体基因表达的影响

目的：在基因水平上探讨中药橄榄降脂胶囊的降脂作用机制,为中药新药开发提供科学依据。方法：48只雄性SD大鼠,根据血中总胆固醇水平随机分为正常组,模型组,血脂康组,橄榄降脂胶囊低、中、高剂量组,每组8只。采用RT-PCR测定高脂血症大鼠肝脏高、低密度脂蛋白受体基因表达。结果：模型组大鼠肝LDLR/SR-B1 mRNA表达降低,与正常组比较有显著性差异（P<0.05）。经橄榄降脂胶囊治疗后肝LDLR/SR-B1 mRNA表达升高,与模型组比较有显著性差异（P<0.05）,与正常组无显著性差异。结论：橄榄降脂胶囊可调节脂质代谢紊乱治疗高脂血症,其机制与上调肝LDLR/SR-B1mRNA表达有关。     

小型猪痰瘀互结证冠心病“痰、毒、瘀”病机演变规律的实验研究

目的：探讨小型猪痰瘀互结证冠心病病机演变的规律。方法：将18只中国小型猪随机分为正常对照组,模型组,丹蒌片组,每组6只。除正常对照组外,其他各组高脂饲料喂养 2周后,采用介入技术球囊损伤冠状动脉左前降支内皮,继续高脂饲料喂养8周,制备小型猪痰瘀互结证冠心病模型。于0周（实验前）、高脂2周（术前或给药前）、高脂6周（给药后4周）、高脂10周（给药后8周）,分别观察各组动物体重指数（BMI）、血液流变性参数、血脂水平、血清炎症因子水平的动态变化,并在实验结束时观察肝脏甘油三酯（TG）和总胆固醇（TC）水平及冠状动脉组织病理改变。结果：与对照组比较,模型组自第2周起至实验结束,血清TC,TG,LDL-C及VLDL-C水平均升高（P<0.01）,5 s^-1和60 s^-1切变率下的全血黏度均明显增加（P<0.05或P<0.01）;第6周时BMI和血清TNF-α水平均明显升高;第10周时BMI及血清hs-CRP,IL-6,TNF-α水平均明显升高,同时冠脉管腔狭窄率、内膜厚度,及内膜厚度/中膜厚度比值均明显增加（P<0.05或P<0.01）;肝脏TC和TG水平明显升高（P<0.01）。与模型组比较,丹蒌片组的冠状动脉病变程度明显减轻,其内膜厚度、管腔狭窄率,及内膜厚度/中膜厚度比值均明显减少（P<0.01）,BMI,血清TC,TG,LDL-C,VLDL-C,肝脏TC,TG,以及血清hs-CRP,IL-6,TNF-α水平亦均明显降低（P<0.05或P<0.01）,5 s^-1和60 s^-1切变率下的全血黏度均明显降低（P<0.05）。结论：痰浊、邪毒、瘀血三者的相互影响促进动脉粥样硬化（AS）斑块的发生和发展,是痰瘀互结证冠心病的关键病机所在。     

疏血通注射液对急性脑梗死患者血脂的影响及作用机制

目的： 探讨疏血通注射液对急性脑梗死患者血脂的干预作用及血清超敏C-反应蛋白（hs-CRP）、脂联素（APN）、氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的影响。 方法： 67例患者采用随机按住院前后分为对照组22例和观察组45例。对照组给予西医常规治疗,降脂采用阿托伐他汀钙片,10 mg/次,1次/d,晚饭后服用。观察组在对照组治疗的基础上加用疏血通注射液,6 mL/次,静脉滴注,1次/d,两组疗程均为14 d。于第0,7,14天评价采用美国国立卫生院卒中（NIHSS）量表评估神经功能缺损严重程度;检测治疗前后甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）及低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平;采用酶联免疫吸附法检测超敏hs-CRP,APN,ox-LDL和TNF-α;进行治疗前后血液流变学检测。 结果： 治疗后7 d,两组NIHSS评分均较治疗前下降（P<0.01）,组间比较差异无统计学意义;治疗后14 d,两组NIHSS评分继续下降（P<0.01）,观察组NIHSS评分低于对照组（P<0.01）;两组治疗后血清hs-CRP,ox-LDL和TNF-α水平均较治疗前下降（P<0.01）,观察组低于对照组（P<0.01）;两组治疗后血清APN水平均较治疗前上升（P<0.01）,观察组高于对照组（P<0.01）;两组TC,TG和LDL-C水平均较治疗前明显下降（P<0.01）,观察组TC和TG水平低于对照组（P<0.01）;两组治疗后HDL-C水平较治疗前升高（P<0.01）,组间比较差异无统计学意义;观察组全血黏度、血小板聚集率、血浆黏度及红细胞压积的改善优于对照组（P<0.01）。 结论： 疏血通注射液对急性脑梗死患者神经功能有改善作用,并能改善患者脂代谢,具有多靶点效应及抗炎、抗氧化、改善脑微循环等作用。     

桑白皮水煎液及化学拆分组分降糖作用研究

目的：研究桑白皮水煎液及各化学拆分组分对糖尿病小鼠模型的降糖作用。方法：雄性昆明种小鼠,腹腔注射大剂量链脲佐菌素（STZ）（170 mg ?kg-1）,建立Ⅰ型糖尿病小鼠模型,连续给药4周,检测体质量、饮水量、饮食量、空腹血糖（FBG）、胰岛素、C肽、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-c）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-c）等指标,光镜观察肝脏、胰腺病理形态。结果：桑白皮水煎液高剂量组能增加Ⅰ型糖尿病小鼠体质量,明显降低饮水量、饮食量,并能不同程度地降低FBG、TC、TG、LDL-c水平（P<0.05或P<0.01）,升高C肽、HDL-c水平（P<0.05或P<0.01）。桑白皮30%乙醇组分及脂肪油组分给药量约为桑白皮水煎液的1/2和1/4时,均能显著改善糖尿病小鼠糖脂紊乱状况,修复肝脏细胞,改善肝脏组织损伤,且作用优于桑白皮水煎液。结论：桑白皮水煎液具有较好的降糖作用,其有效部位为30%乙醇组分和脂肪油组分,降糖作用机制可能与促进胰岛素分泌、调节血脂紊乱,保护肝脏结构和功能有关。     

黄连生物碱抗高脂血症及动脉粥样硬化实验研究

目的 研究黄连4种主要生物碱对高脂血症及动脉粥样硬化的影响.方法 采用HPLC测定药物对HMG - COA还原酶活性的抑制;利用外源性胆固醇和高脂饲料饲养鹌鹑建立高脂血症及动脉粥样硬化模型,小檗碱、黄连碱、巴马汀、总生物碱及阳性药脂脉康连续灌胃4周,测定血清胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇( LDL -C)、高密度脂蛋白胆固醇(H DL - C)含量;实验第8周末称量体重,计算肝脏系数,对主动脉和肝脏病理切片进行光镜组织学检查.结果 与模型组相比,小檗碱、黄连碱和巴马汀能明显降低TC、TG和LDL -C,三者的TC分别降低了35.6％、32.5％、26.8％,TG分别降低了51.5％、53.1％、47.6％,LDL -C分别降低了39.2％、42.3％、26.7％;病理结果显示主动脉粥样硬化斑块病变程度可明显减轻,黄连生物碱对HMG - COA有抑制作用.结论 黄连生物碱有显著降血脂和抑制动脉粥样硬化作用.     

荜茇宁降血脂和急性毒性实验研究

目的:研究荜茇宁对动物血脂的影响及急性毒性作用。方法:以大鼠食饵性高脂血症为模型,给予高脂饲料的同时灌服荜茇宁,连续14d,测定血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)含量;采用高脂饲料喂养建立家兔高脂血症模型,观察荜茇宁对血脂、肝脏脂质和动脉粥样硬化的改善情况.通过小鼠急性毒性实验观察其对小鼠产生的毒性反应。结果:荜茇宁显著降低大鼠血清TC、TG、LDL-c和动脉硬化指数(AI),升高HDL-c的含量;能降低家兔血清TC、TG、LDL-c和肝脏TC、TG,并且显著改善动脉粥样硬化。小鼠急性限量毒性实验显示,给药后小鼠未出现死亡及毒性反应。结论:荜茇宁具有明显地降血脂和改善动脉粥样硬化作用,而且毒性极低。     

温和灸对高脂血症大鼠脂蛋白代谢酶的影响

目的:观察温和灸对慢性高脂血症大鼠血脂及脂蛋白代谢酶的影响,探讨艾灸可能的调脂机制。方法:采用高脂饲料喂养造模方法制备慢性高脂血症模型。将48只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、艾灸组、药物组,药物组以洛伐他汀混悬液灌胃,治疗结束后取大鼠血清,测定胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-c)、高密度脂蛋白(HDL-c)含量及脂蛋白酯酶(LPL)、肝酯酶(HL)活性。结果:①与正常组相比,模型组TC、TG、LDL-c明显升高,HDL-c显著降低,差异具有显著统计学意义(P<0.01)。与模型组相比,艾灸组、药物组均具有降低TC、TG、LDL-c,升高HDL-c的效应(P<0.01);②与正常组比较,模型组LPL活性显著降低,差异有统计学意义(P<0.05),HL活性有下降趋势,但无统计学差异(P>0.05);与模型组相比,艾灸组LPL、HL活性明显高于模型组(P<0.05),药物组无统计学意义(P>0.05)。结论:艾灸发挥调节血脂组分代谢的作用,可能与调控LPL和HL的活性有关。     

温胆汤对高脂血症大鼠脂质代谢的影响

目的 :探讨温胆汤对高脂血症大鼠低密度脂蛋白受体基因表达的影响。方法 :在建立大鼠高脂血症模型基础上 ,观察温胆汤对大鼠血脂水平、总脂解酶 (LA)、脂蛋白脂酶 (LPL)和肝脂酶 (HL)活性以及肝脏低密度脂蛋白受体 (LDLR)基因表达的影响。结果 :温胆汤能显著抑制高脂模型大鼠血清总胆固醇 (TC)、血清总甘油三酯 (TG)浓度 ,提高LPL和LA活性 ,但对HL活性无明显影响 ;逆转录聚合酶链反应 (RT-PCR)实验显示高脂模型大鼠肝脏LDLRmRNA表达降低 ,温胆汤能显著上调高脂血症大鼠肝脏LDLRmRNA水平。结论 :温胆汤可能通过调节大鼠肝脏LDLR转录水平预防脂质代谢紊乱。     

Hypolipidemic Effect and Mechanism of Palmatine from Coptis chinensis in Hamsters Fed High‐Fat diet

Palmatine (PAL) is one of the main alkaloids in Coptis chinensis. The present aim was to investigate the hypolipidemic effect and mechanism of palmatine in hamsters fed with high‐fat diet (HFD). PAL treatment decreased serum total cholesterol (TC), triglyceride (TG), and low‐density lipoprotein cholesterol (LDL‐C) levels, as well as increased fecal excretion of TC and total bile acids (TBA) in hyperlipidemic hamsters. Furthermore, PAL treatment up‐regulated low‐density lipoprotein receptor (LDLR) and cholesterol 7α‐hydroxylase (CYP7A1) mRNA and protein expression and down‐regulated apical sodium‐dependent bile salt transporter (ASBT) mRNA and protein expression. These results demonstrated that PAL as a potential natural cholesterol lowering agent works by up‐regulating LDLR and CYP7A1 mRNA and protein expression, down‐regulating ASBT mRNA and protein expression, as well as enhancing fecal excretion of TC and TBA. The findings in our study suggest that palmatine could be a potential natural agent for treating hyperlipidemia. Copyright © 2015 John Wiley & Sons, Ltd.     

黄连总生物碱与小檗碱对嗜水气单胞菌细胞膜损伤机制的研究

为探索黄连总生物碱及小檗碱对嗜水气单胞菌的抑菌活性及作用机制,测定了黄连总生物碱和小檗碱对嗜水气单胞菌的最小抑菌浓度、膜通透性、膜流动性、膜蛋白构象及毒力因子的影响.结果显示,黄连总生物碱和小檗碱对嗜水气单胞菌均有抑菌活性,其最小抑菌浓度分别为62.5,125 mg·L^-1.黄连总生物碱和小檗碱能增加膜脂流动性,改变膜蛋白构象,并使菌体膜通透性分别增加24.52%,19.66%.此外,黄连总生物碱和小檗碱显著性地抑制菌体外毒素的溶血活性及aerA和hlyA mRNA的表达(P <0.05,P <0.01),同时降低嗜水气单胞菌内毒素的分泌量和LpxC mRNA 的表达(P <0.05,P <0.01).结果表明,黄连总生物碱和小檗碱对嗜水气单胞菌的抑菌作用可能与细胞膜损伤有关,通过改变膜脂流动性和膜蛋白构象使菌体膜通透性增加从而抑制了细菌生长;同时降低了细菌的毒力因子的分泌,使得菌体的致病性降低.     

五首活血化瘀方对实验性动脉粥样硬化家兔血脂、载脂蛋白变化的影响

目的：探讨五首活血化瘀方对实验性动脉粥样硬化(As)家兔血脂、载脂蛋白的影响，比较其作用间的异同。方法：采用高脂喂饲复制家兔动脉粥样硬化模型，观察各组家兔血脂、载脂蛋白及主动脉的病理改变。结果：血府逐瘀汤显著降低家兔血清TC、TG、LDL—c含量以及TC／HDL—c、TG／HDL—c比值(P＜0．01)，亦能降低apoB105含量(P＜0．05)，升高apoAl／apoBl00比值(P＜0．05)；活络效灵丹能明显降低血清TC、LDL—c含量以及TC／HDL—c比值(P＜0．01)，亦能降低TG、apoBl00含量以及TG／HDL—c比值(P＜0．05)，升高apoAl／apoB100比值(P＜0．01)；失笑散能降低血清TC、TG、LDL—c含量(P＜0．05)；桃红四物汤明显降低血清TG含量以及TG／HDL—c比值(P＜0、01)，亦能升高apoAl含量(P＜0．05)；丹参饮亦能降低血清TC、LDL—c的含量(P＜0．05)。形态学观察，各方均能不同程度地减少斑块面积，降低斑块灰度(0D)，改善主动脉病变。结论：五首活血化瘀方均有不同程度地调降脂、载脂蛋白代谢、抑制高脂喂伺家兔动脉粥样硬化形成的作用，其中以血府逐瘀汤、活络效灵丹的作用较强。     

活血化瘀方对高脂饮食致家兔动脉粥样硬化的影响

目的 探讨五首活血化瘀方对高脂喂饲家兔动脉粥样硬化(AS)的影响。方法 采用高脂喂饲复制家兔动脉粥样硬化模型,观察各组家兔血脂、载脂蛋白、血液流变学改变。结果 血府逐瘀汤组家兔血清TC、LDL-c明显低于丹参饮组、桃红四物汤组(P<0.01),血清TC/HDL-c明显低于丹参饮组、失笑散组、桃红四物汤组(P<0.01),血清TG低于丹参饮组(P<0.05),血清TG/HDL-c比值低于丹参饮组、失笑散组、活络效灵丹组(P<0.01);血清apoB100低于失笑散组、桃红四物汤组(P<0.05);血浆粘度明显低于活络效灵丹组、桃红四物汤组(P<0.01),全血粘度(低切、高切)明显低于失笑散组(P<0.01);活络效灵丹组家兔血清TC、LDL-c低于丹参饮组、桃红四物汤组(P<0.05),血清TC/HDL-c明显低于丹参饮组、桃红四物汤组(P<0.01),亦低于失笑散组(P<0.05);家兔血清apoB100低于丹参饮组、失笑散组、桃红四物汤组(P<0.05),血清apoA1/apoB100比值高于丹参饮组、失笑散组、桃红四物汤组(P<0.05);丹参饮组家兔全血粘度(低切、高切)明显低于失笑散组(P<0.01),红细胞比容低于桃红四物汤组(P<0.05);桃红四物汤组血清TG低于丹参饮组(P<0.05),血清TG/HDL-c低于丹参饮组、失笑散组(P<0.05),全血粘度(低切、高切)低于失笑散组(P<0.05)。结论 五首活血化瘀方均可不同