口腔扁平苔藓局部浸润淋巴细胞颗粒酶B和穿孔素蛋白表达与上皮细胞凋亡的关系

目的 检测口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)上皮细胞凋亡状况,观察颗粒酶B、穿孔素在OLP固有层浸润淋巴细胞中的蛋白表达,探讨细胞毒作用对OLP上皮细胞凋亡的影响。方法采用原位缺口末端DNA标记技术,定位检测OLP上皮细胞凋亡情况;分别使用免疫组化法检测颗粒酶B和穿孔素在组织总淋巴细胞以及CD...     

NF-κBp65、TRAF2、cyclinD1在口腔扁平苔藓中的表达及其与细胞凋亡的关系

目的 探讨口腔扁平苔藓(OLP)中NF-κBp65、TRAF2、cyclinD1的表达及其与细胞凋亡的关系.方法 采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的原位缺口末端标记法(TUNEL法)、SP免疫组化方法检测60例OLP(30例糜烂萎缩型、30例非糜烂型)及40例正常口腔黏膜(对照组)中NF-κBp65、TRAF2、cyclinD1的表达及细胞凋亡情况.结果 OLP中上皮细胞凋亡指数(67.32±18.99)明显高于正常对照组(19.43±4.31),而固有层的凋亡指数(34.12±9.89)明显低于正常对照组(60.52±8.42)(P＜0.05).OLP的上皮层角质细胞NF-κBp65、TRAF2、cyclinD1的阳性率分别为85.00%、76.67%和71.67%,明显高于正常对照组(P＜0.05).固有层淋巴细胞NF-κBp65、TRAF2、cyclinD1的阳性率分别为91.67%、86.67%和70%,明显高于正常对照组(P＜0.05).糜烂型组固有层中NF-κBp65阳性表达低于非糜烂型组.OLP固有层淋巴细胞NF-κBp65表达水平与上皮细胞的凋亡指数呈正相关,与其自身的凋亡呈负相关.固有层淋巴细胞TRAF2、cyclinD1表达水平均与其自身的凋亡指数呈负相关.OLP上皮层和固有层TRAF2、cyclinD1表达均与NF-κBp65表达呈正相关.结论 OLP中同时存在角质细胞凋亡亢进及固有层淋巴细胞凋亡的减少,这种凋亡的异常可能与OLP的发生发展密切相关.OLP中NF-κBp65阳性表达,并出现异常核表达,提示NF-κ Bp65在OLP发病中起一定作用.     

口腔扁平苔藓中Caspase-3, TNF-α和TNFRΙ的表达及与细胞凋亡的关系

目的: 探讨口腔扁平苔藓(OLP)中Caspase-3, TNF-α和TNFRΙ的表达意义及其与细胞凋亡的关系. 方法: 采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的原位缺口末端标记法(TUNEL法)、SP免疫组化方法检测33例OLP及7例正常口腔黏膜(对照组)中Caspase-3, TNF-α和TNFRΙ的表达及细胞凋亡情况. 结果: OLP中上皮细胞凋亡指数(AI)明显高于正常对照组(P<0.05),而固有层的AI明显低于正常对照组(P<0.05). OLP的上皮层和固有层Caspase-3阳性表达明显高于正常对照组(P<0.025). OLP中上皮层TNFRI及固有层TNF-α阳性表达明显高于正常对照组(P<0.025),而上皮层TNF-α及固有层TNFRI阳性表达则明显低于正常对照组(P<0.025),糜烂型组固有层中TNF-α阳性表达明显高于非糜烂型组(P<0.05). OLP上皮层Caspase-3阳性表达与其自身AI呈正相关(r=0.631, P<0.05),而固有层淋巴细胞Caspase-3阳性表达与自身的AI无相关性(P>0.05);TNF-α/TNFRI表达与OLP上皮及固有层细胞的AI密切相关. 结论: OLP中同时存在角质细胞凋亡亢进及固有层淋巴细胞凋亡的减少,这种凋亡的异常可能与OLP的发生发展密切相关.     

NLE1在结肠癌中的表达及其对HT29细胞增殖凋亡的影响

目的 验证Notchless同源物1(Notchless homolog 1,NLE1)在结肠腺瘤及腺癌组织中的表达水平,评价其可能作用及机制。方法 通过免疫组化及实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)方法评价NLE1在结肠正常黏膜、腺瘤组织及腺癌组织中的表达水平。通过慢病毒转染,评价NLE1沉默对HT29细胞增殖、凋亡的影响及可能机制。结果 免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)染色显示,NLE1在结肠正常黏膜、腺瘤及腺癌组织中的高表达率分别为14.3% (15/105),44.0% (11/25)及68.6% (72/105),在腺癌中明显高于腺瘤(P<0.05),在腺瘤中明显高于正常黏膜(P<0.001)。实时荧光定量PCR显示,结肠正常黏膜、腺瘤及腺癌组织三组的NLE1 mRNA表达分别为1.38±0.82,5.04±2.09,7.57±1.25。腺癌组织中NLE1表达水平明显高于腺瘤(P<0.05),腺瘤组织中明显高于正常黏膜(P<0.01)。NLE1沉默显著抑制HT29细胞增殖(P<0.05)及克隆形成能力(P<0.05),促进其凋亡(P<0.05),并可促进Bax及Fas的表达。结论 结肠腺癌中高表达的NLE1可能通过影响肿瘤细胞增殖凋亡从而发挥促进肿瘤发生的作用。     

大骨节病关节软骨细胞凋亡及其相关调控因子的表达

目的 探讨大骨节病患者关节软骨细胞凋亡及相关调控因子Bcl-2、Bax、Fas及iNos表达分布的特点。方法 收集15例大骨节病儿童和15例正常对照儿童关节软骨。采用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的脱氧核糖核酸缺口标记(TUNEL)技术和Bcl-2、Bax、Fas及iNos蛋白免疫组化抗生物素蛋白-生物素-碱性磷酸酶(B-SA)法染色,观察大骨节病儿童和正常对照儿童关节软骨的凋亡细胞和Bcl-2、Bax、Fas及iNos蛋白阳性表达细胞的密度与分布。结果 (1)大骨节病儿童关节软骨中层凋亡阳性细胞数[(33.60±2.71)%]较正常关节软骨[(1.33±0.41)%]显著增多(t=11.59,P<0.01);(2)大骨节病儿童关节软骨表层和中层Bcl-2、Bax、Fas及iNos的表达显著高于正常关节软骨中的表达(t=11.75~18.65,P<0.01);大骨节病儿童关节软骨各层Bcl-2、Bax、Fas及iNos表达阳性率有显著性差异(F=73.49~114.42,P<0.01),以表层最多[分别为(41.93±12.26)%、(45.60±15.78)%、(53.60±16.49)%和(45.47±14.02)%],其次为中层[分别为(14.93±3.50)%、(13.87±4.32)%、(23.27±4.83)%、(21.67±6.82)%]。结论 大骨节病患者关节软骨细胞凋亡及相关调控因子Bcl-2、Bax、Fas、iNos表达较正常人显著增多。     

干扰素α治疗慢性乙型肝炎患者肝纤维化的实验研究

目的 观察干扰素α对慢性乙型肝炎(乙肝)患者肝组织纤维化程度的影响。方法 选取病理诊断为S₃～S₄期的16例乙肝患者,干扰素治疗期前后3次进行肝组织炎症程度及纤维化程度病理分析,免疫组化检测肝组织TGF-β1蛋白、Fas及HBcAg抗原,TUNEL方法观察肝细胞凋亡情况。同期检测血清肝纤维化指标及肝功能。结果 在S₃～S₄期,患者Fas、TGF-β1显著表达,肝细胞的DNA损伤严重。干扰素α治疗3个月后Fas抗原、TGF-β1表达程度显著下降(P<0.05);细胞凋亡程度减轻(P<0.05);肝组织HBcAg表达程度无显著改变;连续6～9个月治疗后,肝组织炎症及纤维化程度逐渐改善(P<0.05),血清肝纤维化指标及肝功能水平与治疗前差异显著。结论 干扰素α能显著改善S₃～S₄期患者肝细胞凋亡和肝组织纤维化程度,但需持续治疗。     

不同口腔修复膜用于牙种植引导骨组织再生效果的临床研究

目的 评价不同口腔修复膜在牙种植引导骨组织再生(GBR)的临床效果。方法 选取行牙种植及GBR手术患者90例,随机分为两组,实验组(n=45)采用海奥口腔修复膜,对照组(n=45)采用钛膜,比较两组患者的治疗效果,植骨密度、骨厚度及术后不良反应的发生率。结果 实验组患者较对照组临床效果好,两组比较P<0.05;两组患者植骨密度、骨厚度比较,P<0.05;实验组不良反应发生率较对照组显著降低(P<0.05)。结论 海奥口腔修复膜较肽膜更有利于牙种植GBR,临床效果更显著,不良反应发生率较低,适合在临床推广应用。     

口腔扁平苔藓中Caspase-3, TNF-α和TNFRΙ的表达及与细胞凋亡的关系

目的：探讨口腔扁平苔藓（OLP）中Caspase-3，TNF-α和TNFRI的表达意义及其与细胞凋亡的关系．方法：采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的原位缺口末端标记法（TUNEL法）、SP免疫组化方法检测33例OLP及7例正常口腔黏膜（对照组）中Caspase-3，TNF-α和TNFRI的表达及细胞凋亡情况．结果：OLP中上皮细胞凋亡指数（AI）明显高于正常对照组（P〈0．05），而固有层的AI明显低于正常对照组（P〈0．05）．OLP的上皮层和固有层Caspase-3阳性表达明显高于正常对照组（P〈0．025）．OLP中上皮层TNFRI及固有层TNF-α阳性表达明显高于正常对照组（P〈0．025），而上皮层TNF-α及固有层TNFRI阳性表达则明显低于正常对照组（P〈0．025），糜烂型组固有层中TNF-α阳性表达明显高于非糜烂型组（P〈0．05）．OLP上皮层Caspase-3阳性表达与其自身AI呈正相关（r=0．631，P〈0．05），而固有层淋巴细胞Caspase-3阳性表达与自身的AI无相关性（P〉0．05）；TNF-α/TNFRI表达与OLP上皮及固有层细胞的AI密切相关．结论：OLP中同时存在角质细胞凋亡亢进及固有层淋巴细胞凋亡的减少，这种凋亡的异常可能与OLP的发生发展密切相关．     

复合活性肽复配蛋白对口腔颌面部肿瘤患者术后营养状况及创面愈合的影响

目的 探讨复合活性肽复配蛋白对口腔颌面部肿瘤患者术后营养状况和手术创面愈合的影响。方法 纳入口腔颌面部肿瘤术后患者106名,分为观察组(n=54)和对照组(n=52)。两组患者均给予整蛋白全营养配方粉,观察组补充复合活性肽复配蛋白粉20 g/d。干预前后分别测量体重;检测血清总蛋白、白蛋白、前白蛋白、血红蛋白、淋巴细胞计数;记录伤口红肿、伤口渗出、脓液以及不良反应发生率。结果 观察组总蛋白、白蛋白、前白蛋白、血红蛋白和淋巴细胞计数均显著高于干预前,伤口红肿、伤口渗出发生率显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。对照组白蛋白、前白蛋白显著高于干预前,伤口轻度红肿、伤口有少量渗出液发生率显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组与对照组比较,白蛋白、前白蛋白和淋巴细胞计数,伤口红肿和伤口有中等量渗出发生率均有显著性统计学差异(P<0.05)。结论 复合活性肽强化肠内营养可有效改善口腔颌面部肿瘤患者术后营养状况,促进创面愈合。     

脱氧胆酸诱导正常人食管黏膜上皮细胞凋亡及其机制探讨

目的 观察脱氧胆酸(deoxycholate,DC)能否诱导体外培养的人正常食管黏膜上皮细胞凋亡,并探讨其机制。方法 采用无血清的角朊细胞培养基体外培养人正常食管黏膜上皮细胞;通过流式细胞仪(FCM)观察DC干预的细胞经碘化丙啶(PI)单染色后凋亡细胞百分比;AnnexinV-FITC结合PI双染色观察早期凋亡细胞比率;TUNEL试验凝胶DNA梯度电泳确定凋亡的发生。通过FCM分析干预细胞激活的Caspase3变化,免疫印迹法观察Fas蛋白、Bcl-2和Bax蛋白的表达情况。结果 4种凋亡检测方法确定DC可诱导体外培养的食管黏膜上皮细胞凋亡,并成浓度时间正相关性变化。500μmol/LDC干预30min,含激活状态Caspase-3的细胞达21.3%,明显高于对照组的1.5%(P<0.01)。免疫印记法示细胞经DC干预前后Fas受体蛋白均为阴性表达,但Bcl-2蛋白表达水平下降,而Bax蛋白则上升。结论 DC可诱导人正常食管黏膜上皮细胞凋亡;此过程与Fas-L/Fas凋亡信号系统无关;而存在Caspase-3激活、Bcl-2减少和Bax增加,即与线粒体凋亡调节途径密切相关。     

Fas／FasL和颗粒酶B在口腔扁平苔藓中的表达及意义

OBJECTIVE: To define the association of the expressions of Fas/FasL and granzyme B with cell apoptosis in oral lichen planus (OLP) and progression of the disease. METHOD: Immunohistochemical method and TUNEL were employed to study the expressions of Fas, FasL and granzyme B and cell apoptosis in 50 OLP cases (including 20 cases of atrophic-erosive OLP and 30 nonerosive OLP cases) and 10 normal oral mucosa specimens. RESULTS: Compared with the control group, the OLP cases showed increased apoptotic index (AI, 95.32+/-28.99) in the epithelial layer and the decreased AI (35.12+/-9.89) in the lamina propria (P<0.05), with the apoptotic cells confined within the basal or suprabasal cell layer instead of the superficial cell layer in the control group. The positivity rates of FasL and granzyme B expression were both 68/ in the lamina propria of the OLP cases, remarkably higher than those in the normal control group (P<0.05); significantly higher rates were noted in atrophic-erosive than in nonerosive OLP cases (P<0.05). CONCLUSIONS: The AI significantly differs between the epithelial layer and lamina propria in OLP cases, for which the expressions of Fas, FasL and granzyme B might be held responsible. The over-expressions of FasL and granzyme B are closely related to the progression of OLP.     

氯沙坦对糖尿病大鼠肾组织MT3-MMP及TIMP2 mRNA表达的影响

目的 观察糖尿病大鼠肾组织膜3型基质金属蛋白酶(MT3-MMP)及组织2型金属蛋白酶抑制物(TIMP2)mRNA表达的变化及氯沙坦对它们的影响。方法 建立糖尿病大鼠模型并将之分为正常对照组(A组)、糖尿病组(B组)、糖尿病+氯沙坦组(C组)。饲养18周后取出肾脏以RT-PCR法检测MT3-MMP、TIMP2及TGF-β1mRNA的表达,电镜观察大鼠肾小球基底膜厚度及系膜基质密度(系膜基质面积/系膜面积),收集24h尿检测尿白蛋白。结果 B组大鼠肾组织MT3-MMPmRNA、TIMP2mRNA和TGFβ1mRNA表达以及均显著高于A组,C组显著低于B组,但与A组无显著差异。B组尿白蛋白、基底膜厚度及系膜基质密度显著高于A组,C组均显著低于B组。P<0.05。结论 氯沙坦治疗可延缓糖尿病肾病的发生,并可抑制糖尿病大鼠肾组织MT3-MMP及TIMP2mRNA表达。     

Th17细胞在口腔扁平苔藓中的作用

目的 观察黏膜上皮和黏膜下结缔组织中白细胞介素-17（IL-17）、白细胞介素-23（IL-23）mRNA的表达,探讨Th17细胞在口腔扁平苔藓（OLP）中的作用。 方法 选取山东大学口腔医院口腔扁平苔藓患者病损区黏膜为实验组（n=10）,健康志愿者提供的正常口腔黏膜为对照组（n=6）,应用荧光实时定量PCR技术检测OLP黏膜和正常口腔黏膜的上皮和固有层结缔组织中IL-17、IL-23mRNA的表达量。 结果 实验组OLP黏膜上皮及固有层结缔组织中IL-17、IL-23mRNA的表达量均高于对照组（P<0.05）;OLP固有层中IL 17mRNA表达量明显高于其上皮组织（P<0.05）;但OLP黏膜上皮和固有层中IL-23mRNA的表达量差异无统计学意义（P>0.05）。 结论 Th17细胞功能相关细胞因子表达量增多可能与OLP的发病有一定联系。     

p38丝裂原活化蛋白激酶在口腔扁平苔癣及口腔鳞状细胞癌中的表达及意义

目的：探讨口腔扁平苔癣（oral lichen planus,OLP）及口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma,OSCC）病变组织中p38丝裂原活化蛋白激酶（mitogen activated protein kinases,MAPK）、磷酸化p38MAPK及其下游核转录因子κB（nuclear factor kappa B,NF-κB）的表达情况,初步探讨p38MAPK通路在OLP及OSCC发病过程中的作用。方法：收集53例OLP、45例OSCC及18例正常对照口腔黏膜组织的石蜡切片,免疫组织化学染色分析法检测p38MAPK、磷酸化p38MAPK及NF-κB在3组中的表达及分布情况。同时收集11例OLP、5例OSCC及7例正常对照组织的新鲜冰冻组织,采用Western blotting法进一步比较p38MAPK、磷酸化p38MAPK在3组中的表达情况。结果：免疫组织化学染色分析显示：p38MAPK及NF-κB在细胞核及细胞质中均有表达,在OLP中主要在固有层淋巴细胞中呈高表达,而在上皮细胞表达阳性率低;磷酸化p38MAPK在OSCC中阳性表达率显著高于OLP及正常对照组。Western blotting结果显示：p38MAPK在OLP、OSCC及正常对照组中均有表达;磷酸化p38MAPK在8例（8/11）OLP、5例（5/5）OSCC和4例（4/7）正常对照组中有表达。结论：p38MAPK广泛存在于口腔黏膜的各种生理、病理过程中,它的磷酸化形式可能参与了OSCC的发生和发展,其在OLP发病和进展中的作用仍需进一步探索。     

短波与激光疗法治疗膝骨关节炎的疗效比较

目的:比较短波疗法与激光疗法治疗膝骨关节炎(KOA)的疗效,优化膝骨关节炎发作期物理因子治疗方案。方法:膝骨关节炎患者48例,随机分为短波组和激光组,每组24例,均口服扶他林,并进行全关节活动度牵伸和床边等长股四头肌训练,激光疗法组应用激光治疗,短波治疗组应用短波治疗。比较治疗15次后,WOMAC评分的疼痛、僵硬和功能障碍的变化。结果:15次治疗后短波治疗组患者较治疗前WOMAC评分的疼痛项（10.58±3.98 vs 3.54±2.15,P<0.05）、僵硬项（3.17±1.69 vs 1.17±0.87,P<0.05）和功能障碍项（33.54±12.96 vs 20.67±11.98, P<0.05）均明显改善。15次治疗后,激光治疗组较治疗前的WOMAC评分的疼痛项（10.50±3.53 vs 7.04±2.14, P<0.05）和功能障碍项（29.38±11.93 vs 21.29±7.89,P<0.05）均较治疗前有明显改善;僵硬项（2.79±1.96 vs 1.92±1.44, P>0.05）无明显改善。15次治疗后,短波治疗组和激光治疗组相比,WOMAC评分中疼痛项差值改变（6.96 vs 3.46, P<0.05）具有统计学意义,僵硬项差值（2 vs 0.88,P<0.05）具有统计学意义。结论:短波疗法缓解膝骨关节炎发作期疼痛、改善僵硬的疗效明显优于激光疗法,这可能与短波的穿透深度较深有关,提示软骨下骨病变是KOA的重要病理机制之一。     

维生素D受体对低氧下结肠细胞屏障蛋白的作用

目的 探究低氧环境对结肠细胞DLD-1屏障蛋白影响及补偿机制。方法 将DLD-1分别给予低氧(l% O₂)、维生素D(100 nmol/L)及低氧联合维生素D处理48 h。Western blot法检测各组细胞中紧密连接蛋白封闭小带-1(ZO-1)、闭锁蛋白、Claudin-1和上皮细胞钙黏蛋白及维生素D受体(VDR)的表达情况。采用慢病毒包装的方法建立DLD-1的VDR稳转敲降细胞系及对照,给予低氧处理后,检测上述蛋白的表达情况。结果 与对照组相比,DLD-1低氧处理48 h后紧密连接结构蛋白闭锁蛋白、Claudin-1及VDR表达均增加(P均<0.001),低氧+维生素D联合处理组较单独维生素D处理组除闭锁蛋白、Claudin-1及VDR表达增加外,ZO-1及上皮细胞钙黏蛋白表达也明显增加(P均<0.001)。VDR敲降细胞系低氧处理后,ZO-1(P<0.001)、闭锁蛋白(P<0.05)、Claudin-1(P<0.01)及上皮细胞钙黏蛋白(P<0.001)表达均显著降低。结论 VDR对于低氧状态下结肠细胞系DLD-1肠上皮屏障蛋白表达有调节作用,提示VDR通路可能为低氧环境下保护肠黏膜屏障的另一重要机制。     

接纳承诺疗法对脑梗死偏瘫患者负性情绪及自我效能影响

目的 探讨接纳承诺疗法(ACT)对脑梗死(CI)偏瘫患者负性情绪及自我效能影响。方法 采用便利抽样法选取某三级甲等医院神经内科CI偏瘫患者81例作为研究对象,其中对照组41例,试验组40例。对照组给予常规护理,试验组在常规护理基础上给予ACT。比较两组患者干预前、后的负性情绪改善情况及自我效能水平。结果 ACT干预2、4周时,试验组CI偏瘫患者的GAD-7评分为(10.62±1.38)、(8.91±1.81),分别低于对照组的(11.04±1.32)、(10.14±1.84)(P均<0.05);重复测量方差分析,两组患者时间效应、组间效应、交互效应有统计学意义(P均<0.05)。试验组CI偏瘫患者GDS-15评分为(7.87±0.49)、(5.91±0.31),分别低于对照组的(8.03±0.42)、(7.39±0.49)(P均<0.05);重复测量方差分析,两组患者时间效应、组间效应、交互效应有统计学意义(P均<0.05)。ACT干预2、4周时,试验组CI偏瘫患者GSES评分为(24.32±4.71)、(25.42.±4.41),分别高于对照组的(22.06±3.05)、(23.11±3.06)(P均<0.05);重复测量方差分析,两组患者时间效应、组间效应、交互效应有统计学意义(P均<0.05)。两组患者各时点GAD-7、GDS-15、GSES评分分别进行组内两两比较,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论 ACT改善CI偏瘫患者的负性情绪,提升患者的自我效能水平,值得临床推广应用。