仿生杂交膜纳米药物联合光动力治疗和化疗用于食管癌的研究

目的构建了具有靶向性的仿生纳米药物HASGA@TK-AKR(HG@TA),利用光动力治疗联合化疗策略治疗食管癌。通过对其理化性质、体外抗肿瘤活性、体内分布和成像等研究,验证该策略的抗肿瘤效果。方法(1)HG@TA的合成与表征:采用去溶剂交联法和膜融合技术制备纳米药物。观察其形貌特征及粒径,测定其包封率和释药率,检测其产生氧气的能力,测定其降低GSH的特性。(2)体外抗肿瘤活性研究:观察并定量分析食管癌细胞系AKR细胞对其摄取能力和胞内分布情况。考察了纳米药物对AKR细胞活力的影响。(3)体内分布和成像研究:考察纳米药物在小鼠体内的同源靶向功能及体内分布情况。结果成功构建HG@TA。体外产氧实验表明HG@TA表面的H2O2酶能催化H2O2生成大量O2。GSH实验结果表明,激光照射下HG@TA能显著降低细胞内GSH水平。体外抗肿瘤活性结果显示,激光照射下HG@TA能降低细胞活力,具有增强的细胞摄取和细胞杀伤效果。活体成像结果显示,由EPR效应引起的被动靶向和主动同源靶向,纳米药物在肿瘤部位的荧光强度高于其他组织,说明HG@TA具有良好的肿瘤靶向能力。结论制备的纳米药物HG@TA创新性地融合类囊体膜与食管癌细胞膜形成仿生杂交膜包载的白蛋白藤黄酸纳米颗粒,改善肿瘤乏氧的同时降低GSH水平,进步提高光动力治疗联合化疗的抗肿瘤效果,且能在近红外窗口产生荧光,实时非侵入性地指导体内治疗,为肿瘤的治疗提供了新策略。     

主动包载维替泊芬阳离子脂质体用于新生血管和肿瘤靶向光动力治疗

本研究设计了一种主动稳定包载维替泊芬(verteporfin, BPD)的新生血管及肿瘤靶向阳离子脂质体(cationic liposome with drug active-loaded in lumen, CLL),并对其体内外理化性质进行探究。采用醋酸钙梯度法对光敏剂BPD进行主动包载,并通过后插法加入阳离子脂质(2,3-二油酰基-丙基)-三甲胺[(2,3-dioleoy-loxy-propyl)-trimethylammonium, DOTAP]成功制备CLL。体外表征结果显示, CLL粒径约100 nm,电位在28 mV左右,体外稳定性较被动载药制剂显著增强。此外,包载于脂质体内腔的BPD通过分子间荧光共振能量转移(homo-FRET)可在递送过程中关闭光敏效应,使光毒性降低。细胞摄取及毒性实验结果证明,正电荷靶向可显著提高血管内皮细胞及肿瘤细胞中药物摄取量, CLL光动力药效显著增强。体内实验结果显示,相比于被动载药制剂, CLL血浆清除速率降低且在肿瘤中特异性蓄积增强。离体组织定量结果显示, CLL在正常组织中分布少,有利于提高其体内安全性。动物实验均按照北京大学医学部实...