抗VCAM-1靶向超声微泡对体外循环相关骨髓中性粒细胞释放的可逆性影响

目的评价抗骨髓窦状内皮细胞表面的血管细胞粘附分子-1(vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1)靶向超声微泡减少体外循环相关炎症条件下骨髓中性粒细胞释放的有效性和可逆性。方法 36只SD雄性大鼠随机分为6组,每组6只,分别为抗体组(A组)、抗体+超声组(AU组)、靶向微泡组(T组)、靶向微泡破裂组(TU组)、体外循环后血浆刺激对照组(MC组)和空白对照组(C组),并建立股骨骨髓原位灌注模型进行灌注。C组进行4个周期的缓冲液灌注;其余各组各5个灌注周期,第1周期灌注缓冲液后,第2~5周期灌注大鼠体外循环后血浆。第2周期结束后,A组和AU组推注等量抗VCAM-1抗体,T组和TU组注入等量抗VCAM-1靶向超声微泡,AU组和TU组在第3周期灌注的同时,给予同样的高声压超声辐射。分别收集各组灌出液直至灌注结束,检测灌出液的中性粒细胞总数。结果在体外循环后血浆刺激模拟炎症条件下,A组和T组骨髓释放的中性粒细胞总数与MC组相比均明显减少,且T组中性粒细胞减少得更加显著,差异有统计学意义(P0.05)。经过超声辐射后,TU组骨髓中性粒细胞释放恢复,中性粒细胞总量相比T组差异有统计学意义(P0.05);AU组与A组各周期灌出液中中性粒细胞总数差异无统计学意义(P0.05)。结论抗VCAM-1靶向超声微泡可以识别阻断骨髓窦状内皮细胞表达的VCAM-1,并与其配体结合,同时微泡在骨髓窦状内皮表面形成物理阻挡屏障,进一步有效减少中性粒细胞释放。通过高声压超声辐射击破微泡,其空化效应还可使VCAM-1与微泡表面抗体间的结合分离,骨髓窦状内皮恢复炎症条件下释放中性粒细胞的能力,实现了中性粒细胞释放的可控性。     

抑肽酶对缺血肺组织ICAM-1和P-选择素基因mRNA表达的影响

目的 探讨抑肽酶对在体缺血冷存再灌注后肺组织细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和P-选择素基因mRNA表达的影响。方法新西兰白兔30只，随机分为3组：对照组、PLD组和抑肽酶组。建立兔在体肺缺血冷存再灌注模型，对照组左肺不灌注肺保护液，阻断左肺门后直接将左肺下叶在体冷存于10℃肺保存器内2h，再灌注2h；IPD组左肺门阻断后经肺动脉灌注IPD液，余同对照组；抑肽酶组灌注液为含抑肽酶的改良IPD液，余同LPD组。分别于左肺门阻断前、缺血2h、再灌注2h取左肺组织。以RT-PCR技术检测P-选择素和ICAM-1基因mRNA表达。结果再灌注2h，对照组和IPD组P-选择素基因mRNA的表达量明显高于缺血前和缺血2h，抑肽酶组则无明显变化。缺血2h和再灌注2h。对照组和LPD组ICAM-1基因mRNA表达量较缺血前均显著升高，且明显高于抑肽酶组。结论抑肽酶可抑制缺血冷存再灌注后肺组织P-选择素和ICAM-1基因mRNA表达上调，有利于减轻肺组织缺血再灌注损伤。     

缺血后处理对大鼠缺血再灌注肾损伤后尿NGAL蛋白表达的影响

目的:评估缺血后处理(ischemic postconditioning,IPO)对大鼠缺血再灌注肾损伤(ischemia/reperfusion injury,IRI)的保护作用,及其对尿中性粒细胞明胶酶脂质相关运载蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL)表达的影响。方法:雄性SD大鼠144只,体重180~200 g,随机分为3组(n=48):缺血再灌注组(IRI组):夹闭双侧肾蒂45 min后恢复灌注;缺血后处理组(IPO组):在IRI组基础上进行短暂反复6遍再灌注10 s/缺血损伤10 s处理后恢复灌注;假手术组(sham组):仅开腹,游离双侧肾脏,分离肾蒂不夹闭;每组于术前及术后2 h、6 h、12 h、24 h、48 h、72 h、96 h收集血、尿液及肾组织标本,苦味酸法检测大鼠血清肌酐(Scr),自动生化分析仪检测大鼠血尿素氮(BUN),ELISA法检测尿NGAL表达改变,显微镜下观察肾组织病理学改变。结果:肾组织病理检查结果示:12 h、24 h、48 h IPO组大鼠肾损伤程度较相应时间IRI组均明显减轻,与肾功能(Scr、BUN)结果一致(P0.05);与sham组相比:IPO及IRI组大鼠尿NGAL均在术后2 h开始升高,12 h到达峰值,除再灌注0 h、2 h外,IPO组各时间点尿NGAL表达均明显低于IRI组(P值均0.05)。结论:IPO对大鼠缺血再灌注肾损伤肾功能有保护作用,并可降低IRI所致的尿NGAL蛋白表达水平,NGAL可能成为肾IRI新的治疗靶点。     

拮抗选择素对缺血/再灌注损伤皮瓣的保护作用

目的 探讨E-、P-选择素单克隆抗体在缺血/再灌注损伤皮瓣中的作用.方法 将36只健康的Sprague-Dawley雄性大鼠平均分成三组,在其腹部制作缺血/再灌注损伤皮瓣模型后,分别应用生理盐水,E-、P-选择素单克隆抗体,观察皮瓣成活面积及组织改变.结果 应用后7 d皮瓣成活面积生理盐水对照组为(18.3±19.60)%;E-选择素单克隆抗体组为(54.38±40.49)%;P-选择素单克隆抗体组为(83.75±17.87)%.组织学观察生理盐水对照组有大量的炎细胞浸润、组织肿胀、部分皮肤组织坏死;E-、P-选择素单克隆抗体组炎症反应明显轻,坏死组织少,而P-选择素单克隆抗体组的效果尤为明显.结论 E-、P-选择素单克隆抗体可以减轻缺血/再灌注皮瓣的损伤,从而提高缺血/再灌注损伤皮瓣的成活面积.     

拮抗选择素对缺血/再灌注损伤皮瓣的保护作用

目的探讨E-、P-选择素单克隆抗体在缺血/再灌注损伤皮瓣中的作用。方法将36只健康的Sprague-Dawley雄性大鼠平均分成三组,在其腹部制作缺血/再灌注损伤皮瓣模型后,分别应用生理盐水,E-、P-选择素单克隆抗体,观察皮瓣成活面积及组织改变。结果应用后7d皮瓣成活面积:生理盐水对照组为(18.3±19.60)%;E-选择素单克隆抗体组为(54.38±40.49)%;P-选择素单克隆抗体组为(83.75±17.87)%。组织学观察:生理盐水对照组有大量的炎细胞浸润、组织肿胀、部分皮肤组织坏死;E-、P-选择素单克隆抗体组炎症反应明显轻,坏死组织少,而P-选择素单克隆抗体组的效果尤为明显。结论E-、P-选择素单克隆抗体可以减轻缺血/再灌注皮瓣的损伤,从而提高缺血/再灌注损伤皮瓣的成活面积。     

瑞香素激活Keap1/NRF2通路减轻小鼠肝脏缺血再灌注损伤的实验研究

目的:探讨瑞香素对小鼠肝脏缺血再灌注损伤(IRI)的保护作用及机制。方法:构建小鼠70%肝脏IRI模型,将小鼠随机分为假手术组(Sham组)、瑞香素组(Dap组)、缺血再灌注组(IRI组)、缺血再灌注+瑞香素组(IRI+Dap组),每组8只。Sham组和IRI组小鼠腹腔注射0.9%氯化钠溶液,Dap组和IRI+Dap组小鼠肝脏缺血前1 h腹腔注射Dap(1.5 mg/kg)。IRI术后12 h处死小鼠收集标本,检测血清转氨酶及炎症因子的表达水平,取肝组织行苏木紫-伊红(HE)染色观察肝组织病理损伤,通过免疫荧光检测肝组织炎症因子的表达,通过ELISA检测肝组织氧化应激相关因子表达,通过蛋白印迹实验检测肝组织NRF2/HO-1通路相关蛋白的表达。结果:和IRI组小鼠相比,IRI+Dap组小鼠肝脏IRI 12 h后,血清中ALT、AST、TNFα、CCL2的表达显著降低,肝组织坏死面积显著减小,肝组织中CD11b、Ly6g阳性炎症细胞浸润属相显著减少,肝组织中MDA水平显著降低、SOD、GSH水平显著升高,同时肝组织中Keap1表达显著降低、HO-1、p-NRF2表达显著升高。结论:瑞香素能够显著抑制小鼠肝脏IRI后的炎症和氧化应激。瑞香素对肝脏IRI的保护作用可能是通过激活Keap1-NRF2通路实现。     

不同意识状态下大白兔单侧睾丸急性缺血对健侧睾丸影响的实验研究

目的:比较麻醉态与清醒态兔单侧睾丸急性缺血对健侧睾丸血流动力学和病理的影响。方法:42只雄性健康大白兔,随机均分为麻醉组(A)和清醒组(B),各组内再设对照组5只(A0/B0)、不全缺血组8只(A1/B1)、完全缺血组8只(A2/B2)。超声监测下制成单侧睾丸急性缺血模型。缺血组于精索结扎前、后及松解前后相应时间行睾丸超声造影;对照组于相应时间行睾丸超声造影并监测心率、血压。分析两种意识状态下健侧睾丸造影及组织结构变化情况。结果:戊巴比妥钠麻醉后,A组兔心率、血压明显受抑制。单侧睾丸急性缺血后,A组健侧睾丸各造影参数无显著变化;B组健侧睾丸短时间内造影参数峰值基础强度差(PBD)减少,显影时间(AT)、峰值减半时间(HT)延长。精索松解后,A1组、B1组、B2组短时间内PBD增高、HT延长。缺血组健侧睾丸均存在局灶性病理损伤和超微结构变化,但Johnsen's评分各组无显著差异;A1组、B1组、B2组健侧睾丸凋亡细胞显著增多。结论:急性睾丸血运障碍可对健侧睾丸造成一定程度的损伤。清醒状态下一侧睾丸急性缺血可引起健侧睾丸血流动力学短期内的变化,神经血管反射可能是一重要原因。麻醉剂对兔神经及心血管的抑制作用可使健侧睾丸血流灌注变化不显著。     

磷酸甘油酸变位酶5调控细胞焦亡在肝脏缺血-再灌注损伤中的作用

目的 研究磷酸甘油酸变位酶5(PGAM5)调控细胞焦亡在肝脏缺血-再灌注损伤(IRI)中的作用及分子机制.方法 建立C57小鼠肝脏IRI模型,随机分别予再灌注6 h(6 h组)与12 h(12 h组),并设立假手术组(Sham组),每组10只.分析IRI对小鼠肝组织及血清学指标的影响;分析小鼠肝脏IRI过程中PGAM5...     

中介素减轻大鼠肾脏缺血再灌注损伤

目的 探讨中介素(IMD)对大鼠肾脏缺血再灌注损伤(IRI)的影响,及其过程中一氧化氮合酶(NOS)的作用和机制.方法 将健康雄性Wistar大鼠分为4组:假手术组,行右肾切除术,1周后单纯分离左侧肾蒂及肾动脉,而不夹闭肾动脉；肾脏缺血再灌注(IR)组,行右肾切除术,1周后行左肾缺血再灌注手术；IMD基因转染组,右肾切除后左肾行超声微泡介导的IMD-pCDNA3.1(+)质粒转染术,饲养1周,再行左肾缺血再灌注手术；空质粒转染组,右肾切除后左肾行超声微泡介导的pCDNA3.1(+)质粒转染术,饲养1周,再行左肾缺血再灌注手术.大鼠于缺血再灌注术后24 h处死,用免疫组织化学方法检测肾组织IMD表达,取肾组织进行病理学观察,取血清测定尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)浓度,检测肾组织中内皮型NOS(eNOS)、诱导型NOS(iNOS)以及神经型NOS(nNOS) mRNA及其蛋白的表达.结果 假手术组大鼠肾组织中IMD位于肾小管及间质细胞胞浆内,其表达灰度值为66±35;肾脏IR组大鼠肾小管上皮细胞和间质中IMD表达灰度值为176±48,高于假手术组(P＜0.01)；IMD基因转染组肾组织中IMD表达灰度值为262±68,高于肾脏IR组(P＜0.01)；空质粒转染组IMD表达灰度值为180±51,和肾脏IR组间表达的差异无统计学意义(P＞0.05).与肾脏IR组相比较,IMD基因转染组大鼠肾脏组织病理损伤程度较轻,血清BUN和Cr较低(P＜0.05),eNOS mRNA及eNOS表达升高(P＜0.05),iNOS mRNA及iNOS表达降低(P＜0.05),而两组间nNOSmRNA及nNOS表达的差异无统计学意义(P＞0.05).结论 中介素可能通过促进eNOS表达、抑制iNOS表达从而减轻大鼠肾脏IRI.     

吡咯烷二巯基氨甲酸对大鼠肾缺血再灌注的保护作用及机制

目的 探讨吡咯烷二巯基氨甲酸(PDTC)对大鼠肾缺血再灌注的保护作用及可能的机制.方法 选择成年、健康及雄性的Wistar大鼠56只,随机分为缺血再灌注损伤(IRI)组,PDTC组及对照组.IRI组:24只,建立大鼠肾缺血再灌注模型;PDTC组:24只,缺血再灌注前15 min经鼠尾静脉注射PDTC 150 mg/kg,其余步骤同IRI组;对照组:8只,不给予缺血再灌注处理.IRI组和PDTC组分别于再灌注后2、6和24 h检测大鼠血清肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)水平;检测肾组织中自细胞介素8(IL-8)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肾组织中核因子-κB(NF-κB)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达水平;苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠肾组织的病理变化.取对照组的各项数据作为正常对照.结果 IRI组大鼠再灌注后各时间点的血Cr、BUN、IL-8及TNF-α含量、NF-κB和iNOS mRNA表达水平均高于对照组和PDTC组(P<0.05).再灌注后6 h时,PDTC组大鼠肾组织中IL-8和TNF-α含量与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).再灌注后24 h时,PDTC组大鼠各项生化指标与对照组相比,差异均无统计学意义(P>0.05).PDTC组大鼠肾损伤的病理变化较IRI大鼠明显减轻.结论 PDTC通过抑制NF-κB,有效减少IL-8,TNFα和iNOS的产生,对肾缺血再灌注有良好的保护作用.     

【原创论文】同侧和对侧大鼠睾丸缺血再灌注损伤的生化效应和褪黑激素对此的保护作用

睾丸扭转（TT）,是一个多发于青春期男性的泌尿急症,如果不及时治疗,可致不孕不育。睾丸扭转所致缺血再灌注（I／R）损伤在睾丸损伤的病理生理过程中起一定作用。我们研究了褪黑激素在单侧睾丸扭转大鼠中同侧和对侧睾丸的氧化损伤效应：将21只青春期雄性Wistar大鼠分成三组,每组七只,处理如下：第1组（假手术组）：行左睾丸和双边睾丸假切除术;第2组（I/R组）：通过以下方式诱发缺血再灌注损伤（顺时针720°旋转左侧睾丸2小时,2小时后复位）：第3组（I／R＋MEL组）：大鼠经诱导缺血再灌注损伤和一次性褪黑激素注射（50mgkg-1,i．p）。处理后离体分离各组大鼠双侧睾丸,用于检测睾丸组织中抗氧化过氧化氢酶、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶的活性,丙二醛、蛋白质羰基和一氧化氮的组织水平。较对照组,褪黑激素注射组同侧睾丸的脂质过氧化水平,相关酶活性降低,具有显著性（P〈0．05）,而在对侧的睾丸中相关酶活性变化无统计学意义（P〉0．05）。在对侧睾丸中,丙二醛水平改变具有明显统计学意义（P=0．009）。应用褪黑素能减轻老鼠同侧睾丸扭转所致缺血再灌注损伤的不利影响,而对于对侧睾丸,睾丸扭转影响不大。     

大鼠肾缺血再灌注后炎症反应和间质血管病变研究

目的：探讨在缺血再灌注（ischemia/reperfusion,I/R）模拟急性肾损伤的大鼠模型中间质血管损伤状况及其病变机制。方法：按随机分组将15只SD大鼠分为假手术组（sham）、肾缺血再灌注损伤（I/R）6 h组、24 h组,每组5只,测定血尿素氮水平,并观察肾脏病理改变;免疫组织化学法观察巨噬细胞浸润、促血管生成因子-血管内皮生长因子（VEGF）的表达,免疫荧光法检测肾小管间质血管的分布,原位缺口末端标记法（TUNEL）检测肾小管上皮细胞凋亡。结果：I/R 6 h、24 h组与sham组相比,BUN明显升高（P〈0.05）,巨噬细胞浸润明显（P〈0.05）,VEGF表达量下降,间质血管密度下降（P〈0.05）,上皮细胞凋亡增多（P〈0.05）。结论：I/R损伤后炎症细反应所致间质血管密度降低是肾小管上皮细胞损伤的重要机制。     

急性闭合性大白兔阴囊损伤模型的建立及常规超声和超声造影评价

目的:建立一种阴囊急性闭合性损伤动物模型的实验方法,并利用常规超声和超声造影技术评价该损伤类型。方法:健康新西兰雄性大白兔21只,随机选择一侧阴囊,用0.5 kg铁球从30 cm处自由落体打击被选一侧阴囊,打击次数3~12次。利用常规超声及超声造影技术评价实验动物造模结果,并用病理结果分析验证该技术评价的准确性。结果:21例阴囊损伤造模均成功,其中挫伤10例、血肿6例、破裂5例,所有类型均经病理结果证实。常规超声能观察睾丸形态、回声改变及血流状态,但对6 h以上睾丸挫伤诊断率较低,对复杂损伤不能进行准确甄别。超声造影在挫伤组表现为造影剂快速进入,各时间点造影参数到达时间(AT)、达峰时间(TTP)与健侧比较均有统计学意义(P均0.05),但峰值减半时间(HT)无统计学差异(P0.05);血肿组造影能清楚勾勒出血肿的轮廓,血肿周围形成延迟低增强带,造影参数AT、TTP与健侧比较均有统计学意义;严重的睾丸破裂可以观察到睾丸内无造影剂充盈,偶可发现造影剂外溢现象。结论:铁球作多次自由落体运动打击大白兔阴囊可以建立阴囊闭合性损伤模型,6次的打击造成单纯挫伤型损伤的可能性较大,10次的打击多造成复杂多样的损伤。联合使用常规超声及超声造影技术可以提高对损伤类型的判断。     

大鼠肾缺血-再灌注后JNK mRNA及蛋白表达的变化及银杏达莫注射液的干预作用

目的：观察JNK在肾缺血-再灌注损伤大鼠肾组织中的表达,研究银杏达莫注射液对肾缺血-再灌注损伤的防治作用。方法：将健康雄性SD大鼠50只随机分为5组：假手术对照组（n=10）,缺血-再灌注损伤模型组（n=10）,银杏达莫高剂量、中剂量、低剂量组（每组10只）。对于模型组、高、中、低剂量组,切除右肾,夹闭左侧肾蒂缺血1h,移去动脉夹再灌注1h,除此之外,对于银杏达莫处理组,手术前分别按每天0.9,1.8,3.6ml/kg的剂量尾静脉注射给药1周,假手术对照组和模型组手术前按每天1.8ml/kg的剂量尾静脉注射生理盐水,给药1周。检测肾组织丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）的活性及血肌酐（Scr）、血尿素氮（BUN）的含量。取肾组织光镜、电镜下观察各组肾组织的形态学变化,用RT-PCR技术检测各组大鼠肾组织JNKmRNA的表达情况,Western印迹法观察p38MAPK、JNK的活化情况。结果：与假手术对照组相比,模型组大鼠Scr（214.2±40.1）μmol/L、BUN（8.75±1.28）mmol/L及MDA（11.27±2.43）nmol/mgprot含量均比假手术组增高（P〈0.01）,SOD（103.62±6.59）nmol/mgprot活性显著下降（P〈0.01）;肾组织JNKmRNA（1.38±1.36）水平显著升高（P〈0.01）;肾组织p-JNK蛋白水平显著上升,与模型组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。银杏达莫注射液干预后,Scr、BUN及MDA含量显著降低,SOD活性显著升高;肾组织JNKmRNA水平显著下调,与模型组比较差异有统计学意义（P〈0.01）;肾组织p-JNK蛋白水平显著下调,与模型组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;银杏达莫不同剂量组之间差异无统计学意义。结论：银杏达莫注射液可通过降低氧自由基水平、减轻脂质过氧化反应,从而下调JNKmRNA及蛋白表达水平以改善缺血-再灌注损伤大鼠肾功能,减轻其损伤程度。     

黄芪对大鼠睾丸扭转/复位模型保护作用的研究

目的:探讨黄芪注射液对大鼠睾丸扭转/复位模型的保护作用。方法:将30只健康雄性Wistar大鼠分为3组。分别为假手术对照组(A组,n=10);睾丸扭转/复位组(B组,n=10);睾丸扭转/复位+腹腔内注射黄芪注射液组(C组,n=10)。按Turner法建立睾丸扭转模型,喂养至术后7d处死,切取扭转侧睾丸检测凋亡指数(AI)及谷胱甘肽过氧化物酶活力及丙二醛含量。结果:A、B、C三组扭转侧睾丸AI分别为5.82±1.21、36.18±8.40、20.39±3.57,B、C组明显高于对照组(P(0.05),B组明显高于C组(P(0.05)。A、B、C三组扭转侧睾丸谷胱甘肽过氧化物酶活力分别为48.03±2.01、30.93±1.25、38.44±1.06U/mg;丙二醛含量分别为1.43±0.17、3.98±0.36、2.57±0.53nmol/ml,三组之间比较均有显著性差异(P(0.05)。结论:黄芪注射液可明显减少扭转侧睾丸生殖细胞凋亡,保护谷胱甘肽过氧化物酶活力,减轻脂质过氧化程度。     

低温联合地塞米松对大鼠睾丸扭转复位后ICAM1表达的影响及生精功能的保护作用

目的:探讨低温联合地塞米松对大鼠睾丸扭转复位后的生精功能的保护作用,以及对细胞间粘附分子1(ICAM1)表达的影响。方法:将100只青春期的雄性SD大鼠(体重140~160 g)随机分为4组,每组25只。4组大鼠分别扭转左侧睾丸720°2 h,建立单侧睾丸扭转动物模型,各组做如下处理,A组:常温+生理盐水;B组:低温+生理盐水;C组:常温+地塞米松;D组:低温+地塞米松;术后48 h采集睾丸,通过HE染色光镜观察睾丸组织病理学改变、TUNEL法检测睾丸生精细胞的凋亡、Western印迹检测ICAM1的表达。结果:HE染色光镜下见4组大鼠扭转侧睾丸组织均有不同程度损伤,其中A组睾丸损伤最为明显,其余3组扭转侧睾丸得到不同程度保护;睾丸组织ICAM1 Western印迹检测结果:A组扭转侧(左侧)睾丸组织ICAM1蛋白表达量(0.68±0.03)高于B组(0.49±0.06)、C组(0.46±0.09)、D组(0.17±0.08),差异具有显著性(P0.05、P0.05、P0.01);凋亡细胞染色:细胞核呈深棕黄色或棕褐色,A组扭转侧睾丸可见大量生精细胞凋亡,凋亡指数AI[(33.13±3.21)%]明显高于B组[(17.12±5.23)%](P0.05)、C组[(14.13±2.03)%](P0.05)及D组[(9.05±1.03)%](P0.01)。结论:低温联合地塞米松能显著增强睾丸组织抗损伤能力,较好地保护扭转复位后睾丸的生精功能及降低ICAM1的表达。     

普通超声及超声造影检测兔胆道缺血模型胆道异常的可行性研究

目的探讨普通超声及超声造影应用于检测兔胆道缺血模型胆道异常的可行性。方法将20只健康新西兰兔随机分为两组,对照组及肝动脉和胆总管联合阻断2h(HBO2h)组(各10只)。HBO2h组用无损伤动脉夹阻断肝动脉及胆总管下段2h后去除动脉夹制作胆道缺血模型,对照组不进行任何手术处理。术后5d两组实验兔先后采用普通超声、超声造影观察胆总管-左叶胆管情况,然后处死动物取胆总管-左叶胆管标本行苏木素-伊红(HE)染色,对胆管组织缺血损伤程度进行评分,CD34免疫组织化学染色后行微血管密度(microvascular density,MVD)定量分析。结果普通超声表现:对照组门静脉管径/胆管管径比值为3.47±0.23,所有胆管(100%)均表现为管壁连续性好、无增厚,管腔清晰;HBO2h组胆管明显扩张,门静脉管径/胆管管径比值为1.25±0.42,与正常组比较差异有统计学意义(P<0.01);所有胆管均表现为管壁毛糙、增厚。超声造影表现:对照组所有胆管壁(100%)较肝实质提早增强,动脉期胆管壁呈细线状高增强,门静脉期及延迟期呈等增强;HBO2h组中60%(6/10)表现为动脉期胆管壁呈增强水平明显降低,门静脉期及延迟期呈低增强;40%(4/10)表现为增强扫描全过程均呈无增强;与对照组相比,HBO2h组各时相胆管壁增强表现差异均有统计学意义(均为P<0.05)。病理学表现:对照组胆管黏膜上皮细胞和黏膜下腺体上皮细胞呈柱状,排列紧密、完整,无上皮细胞变性、坏死、脱落等,胆管损伤评分为0分,MVD为(6.1±2.5)个。HBO2h组胆管壁增厚,胆管黏膜上皮细胞及黏膜下腺体上皮变性、坏死、脱落,管壁炎症细胞浸润,胆管损伤评分为(2.1±0.6)分,MVD为(2.2±1.6)个,与对照组比较差异有统计学意义(均为P<0.01)。结论普通超声及超声造影能较早发现胆道缺血兔模型的胆道异常,为缺血型胆道病变动物实验研究提供了一种简便、无创、动态监测病程发展的有效手段。     

未成熟大鼠睾丸单侧扭转后对健侧血流和组织学的影响

目的:观察未成熟大鼠睾丸单侧扭转后对健侧睾丸血流供应和组织学的影响,并比较不同处理方法的疗效。方法:建立Wistar3周龄大鼠左侧睾丸扭转模型,分别建立对照组、扭转组、扭转复位组和扭转切除组,每组10只。彩色多普勒测量各组术前、术后8h(即扭转复位或切除术后2h)、12h、24h、72h右侧睾丸动脉收缩期最大血流速度,并于对照组和扭转组术后2h,扭转复位组和扭转切除组第1次术后12h各取2只大鼠右侧睾丸进行组织病理学观察。各组喂养至9周龄时分别取右侧睾丸进行组织学观察及检测各组大鼠右侧睾丸的生精小管直径(STD)、生精上皮细胞计数(CMSE)和睾丸活检评分(TBS)。结果:①未成熟睾丸左侧扭转后,右侧睾丸的血供呈持续性增加。②扭转组、扭转复位组和扭转切除组右侧睾丸均有不同程度的间质水肿和超微结构改变。③9周龄时扭转组、扭转切除组右侧睾丸重量均较对照组显著增加(P<0.01);各组大鼠STD、CMSE、TBS均无显著性差异(P>0.05)。结论:未成熟大鼠睾丸单侧扭转后可引起对侧睾丸的血供增加和组织学改变,轻微损伤后扭转复位和睾丸切除预后效果相似。     

右旋2-丙氨酸，5-亮氨酸脑腓肽诱导的心肌冬眠对离体兔心缺血-再灌注损伤的保护作用

目的观察δ阿片受体激动剂——右旋2-丙氨酸,5-亮氨酸脑腓肽（DADLE）是否具有保护成年兔离体心肌少受或免受缺血-再灌注损伤的作用,以探讨新的心肌保护方法和机制。方法30只兔制作Langendorff离体灌注模型,随机分成3组,每组10只,对照组：采用标准心脏停搏液灌注;组1：标准心脏停搏液＋DADLE（1mg／kg）灌注;组2：标准心脏停搏液＋纳洛酮（3mg／kg）灌注。3组心脏停搏后分别进行再灌注。检测3组缺血前、后左心室发展压（LVDP）、乳酸脱氢酶（LDH）的变化,在电子显微镜下观察心肌细胞超微结构,应用流式细胞仪检测心肌细胞的凋亡情况。结果缺血后3组间LVDP和LDH比较差异有统计学意义（P〈0．05）;组1 LVDP高于组2和对照组（69．8±5．8mmHg vs．23．4±3．9mmHg;69．8±5．8mmHg vs．37．9±4．7mmHg;P〈0．05）,而LDH低于组2和对照组（1272．6±59．1U／L vs．2764．4±27．7U／L,1272．6±59．1U／L vs．1884．4±37．5U／L;P〈0．05）。组1心肌细胞凋亡率低于组2和对照组。心肌超微结构显示：组1线粒体结构基本正常;组2线粒体结构损伤严重;对照组线粒体轻度损伤。结论应用DADLE灌注心肌可诱导心肌细胞冬眠,对缺血-再灌注损伤的心肌具有保护作用。     

乳化异氟烷对兔心肌缺血再灌注损伤的保护作用

背景比较乳化异氟烷和吸入异氟烷的心肌保护效应。方法给32只兔进行临时结扎左冠状动脉前降支30分钟以造成心肌缺血,然后再灌注3小时。在结扎左前降支前,随机将兔分为4组（每组8只）：c组,无缺血前预处理措施;IS组：吸入呼气末浓度为1．1％异氟烷;EI组：持续泵注8％乳化异氟烷以达到呼气末浓度为0．64％;IN组：持续泵注30％脂肪乳。在缺血前30分钟进行预处理,异氟烷组随后还有15分钟的洗脱时间。再灌注3小时后取标本测定心肌梗死面积、乳酸脱氢酶和肌酸激酶活性及线粒体超微结构。结果IS组和EI组在再灌注3小时后心肌梗死面积明显低于C组和Ⅲ组（20％±8％,18％±8％,39％±6％和34％±9％,P〈0．01）。IS组和EI组的心肌梗死面积无差异,C组和IN组的心肌梗死面积亦无差异。心肌再灌注3小时后IS组和EI组血浆乳酸脱氢酶（456±58U／L,451±54U／L）和肌酸激酶活性（1725±230U／L,1686±444U／L）明显低于C组（676±82U／L,2373±529U／L;P〈0．01）。IS组和EI组心肌线粒体超微结构改变比对照组减轻。结论静脉注射乳化异氟烷对兔心肌缺血再灌注有保护作用,其效应与吸入异氟烷相似。