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1.
近年来,肠杆菌科细菌对喹诺酮类耐药不断增加,国内外均有报道对喹诺酮类耐药的志贺菌,本文以志贺菌为例,一是了解和掌握杭州市志贺菌临床分离株喹诺酮耐药的流行趋势,对1998-2007年杭州地区分离到的202株志贺菌进行药敏实验,与2005年全国志贺菌药敏监测点进行比较[余华丽,常昭瑞,张立实,等.国家监测点2005年志贺菌菌型分布和药敏结果 分析.中华流行病学杂志,2007,28(4):370-373],分析志贺菌耐喹诺酮类分布情况,预测志贺菌耐喹诺酮类药物的发展趋势.二是探讨志贺菌临床分离株喹诺酮类耐药机制.  相似文献   

2.
 目的 了解唐山地区福氏志贺菌的耐药特征,明确其所携带超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的基因型和菌株之间的相关性。 方法 用纸片扩散法作ESBLs确证试验;对产ESBLs的菌株用微量肉汤稀释法测定其MICs;用PCR扩增ESBLs基因并测序;通过可变数目串联重复序列(VNTR)进行同源性分析。 结果 用纸片扩散法检出具有ESLBs表型的19菌株株,经琼脂稀释法检测,同样具有ESBLs表型。菌株对头孢曲松、头孢噻肟、头孢哌酮、哌拉西林、阿莫西林-克拉维酸和环丙沙星的不敏感率为95%~100%,对其它药物敏感率均在84%以上。其型别主要为CTX-M-14、CTX-M-3、CTX-M-57和TEM-1。 同源性分析19株福氏志贺菌分为4个克隆系。结论 唐山地区儿童福氏志贺菌呈多重耐药,对第3代头孢菌素耐药性有增加趋势,所携带基因型主要为CTX-M-14,首次检出CTX-M-57基因型。唐山地区存在遗传紧密相关的福氏志贺菌流行克隆,也存在不相关克隆。  相似文献   

3.
目的 探讨儿科临床分离志贺菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的基因型及其耐药特点.方法 收集2004年1月至2008年12月北京儿童医院细菌性痢疾住院患儿粪便标本中分离出志贺菌共59株,按照美国临床和实验室标准协会推荐的表型确证试验检测ESBLs,用琼脂稀释法进行最低抑菌浓度(MIC)测定,对产ESBLs菌株进行PCR扩增明确其基因型,对扩增产物进行DNA序列分析确定基因亚型.结果 59株志贺菌中共检出产ESBLs者21株,占35.6%.21株产ESBLs志贺菌PCR均扩增到CTX-M型ESBLs,包括CTX-M-1型6株,CTX-M-9型15株,其中有4株同时伴有TEM型酶,6株伴有OXA型酶.DNA序列分析证实6株CTX-M-1型分别为CTX-M-3亚型(1株)、CTX-M-15亚型(2株)、CTX-M-57亚型(3株),15株CTX-M-9型均为CTX-M-14亚型,伴随存在的TEM型及OXA型耐药基因分别为TEM-1型广谱酶、OXA-1型广谱酶.药敏结果显示对产ESBLs菌株敏感性较好的抗生素有亚胺培南、美罗培南、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦和头孢西丁,其耐药率均小于15%.产不同CTX-M基因亚型的菌株对头孢他啶的耐药性不同.结论 本地区儿科分离志贺菌产ESBLs阳性率高,均为CTX-M型,其中以CTX-M-14亚型为主,少部分为CTX-M-3、CTX-M-15和CTX-M-57亚型.大部分产ESBLs菌株呈多重耐药,碳青霉烯类抗生素应作为治疗产ESBLs志贺菌的首选.  相似文献   

4.
目的了解唐山地区福氏志贺菌的耐药特征,明确其所携带超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的基因型和菌株之间的相关性。方法用纸片扩散法作ESBLs确证试验;对产ESBLs的菌株用微量肉汤稀释法测定其MICs;用PCR扩增ESBLs基因并测序;通过可变数目串联重复序列(VNTR)进行同源性分析。结果用纸片扩散法检出具有ESBLs表型的19菌株,经琼脂稀释法检测,同样具有ESBLs表型。菌株对头孢曲松、头孢噻肟、头孢哌酮、哌拉西林、阿莫西林-克拉维酸和环丙沙星的不敏感率为95%~100%,对其他药物敏感率均在84%以上。其型别主要为CTX-M-14、CTX-M-3、CTX-M-57和TEM-1。同源性分析19株福氏志贺菌分为4个克隆系。结论唐山地区儿童福氏志贺菌呈多重耐药,对第3代头孢菌素耐药性有增加趋势,所携带基因型主要为CTX-M-14,首次检出CTX-M-57基因型。唐山地区存在遗传紧密相关的福氏志贺菌流行克隆,也存在不相关克隆。  相似文献   

5.
目的:福氏2a志贺菌301株染色体编码与代谢相关的酶类基因,分析结构特点并进行同源性比较,以期部分阐明其与大肠杆菌生化特性相似的分子生物学基础。方法:鸟枪法随机克隆福氏2a志贺菌染色体DNA,经探针杂交和末端核苷酸序列测定筛选出带有磷酸烯醇丙酮酸合成酶(pps)完整基因的阳性克隆,利用exouclease Ⅲ制备嵌套缺失体亚克隆,采用双脱氧链末端终止法测定核苷酸序列。结果:福氏2a志贺菌301株pps基因(全长2474bp)与大肠杆菌pps基因核苷酸及氨基酸序列的同源性分别为98.8%和97.6%。编码区上游和下游存在较多变异。福氏2a志贺菌301株pps基因与GenBank中其它菌株pps基因的同源性均低于55%。结论:福氏2a志贺菌pps基因苷酸序列与大肠杆菌pps基因核酸序列高度同源。  相似文献   

6.
目的 以SPA包被的磁珠和富含SPA的金黄色葡萄球菌分别与福氏志贺菌的多抗血清结合,制备福氏志贺菌特异的多抗磁珠和抗体致敏的金黄色葡萄球菌作为协同凝集试剂与免疫比浊试剂,利用免疫比浊分析探索其在福氏志贺菌自动快速定量检测中的初步应用.方法 福氏志贺菌F1a免疫日本大耳白兔制备多抗血清,磁珠包被SPA后再与多抗偶联,制成多抗免疫磁珠.以该磁珠捕获模拟标本的福氏志贺菌,接种MH平板37℃培养18~24 h,菌落计数后计算免疫磁珠的特异富集作用.富含SPA的金黄色葡萄球菌(No 1800株)经甲醛灭活后,与福氏志贺菌的多抗血清结合,制备特异抗体致敏的金黄色葡萄球菌,作为协同凝集试剂和自动定量检测的免疫比浊试剂,在日立7060全自动生化分析仪编制程序进行自动检测并进行初步的方法学评价.结果 福氏志贺菌Fla免疫日本大耳白兔获得了高质量的多抗血清,特异性好,凝集效价达1:320;制备多抗免疫磁珠对福氏志贺菌具有一定的富集作用,菌落计数显示磁珠处理的细菌捕获效率约为30%;抗体致敏的金黄色葡萄球菌,作为协同凝集试剂和自动定量检测的免疫比浊试剂,在玻片上能与待测福氏志贺菌产生明显的凝集现象,在日立7060全自动生化分析仪上定量检测灵敏、特异、线性良好.结论以福氏志贺菌的多抗血清分别致敏SPA包被的磁珠和富含SPA的金黄色葡萄球菌,制备特异的多抗磁珠对福氏志贺菌有一定的特异捕获与富集作用,抗体致敏的金黄色葡萄球菌作为协同凝集试剂与免疫比浊试剂对福氏志贺菌的自动、快速、定量检测具有较好的效果,为病原菌的快速诊断和自动定量分析提供了新的思路.  相似文献   

7.
志贺毒素阴性的大肠埃希菌O157菌株的毒力因子检测   总被引:7,自引:1,他引:6  
目的 研究志贺毒素阴性的大肠埃希菌0157血清群菌株可能携带的毒力因子,以确定其致病群类型。方法 对8株分离自杭州的志贺毒素阴性的大肠埃希菌0157血清群菌株及分离自美国和我国江苏的EHEC0157菌株,应用PCR技术检测stx、hly、EPEC和EHEC共有eaeA、EHEC特异的eaeA,ELISA检测ETEC的耐热和不耐热解毒素,HEP-2细胞粘附试验测定细菌与上皮细胞的粘附能力,并进行菌株质粒图谱分析。结果 8株志贺毒素阴性的大肠埃希菌0157菌株均未检出stx、hly、EHEC特异的eaeA以及ETEC的耐热和不耐热肠毒素,仅其中2株菌株携有EPEC和EHEC共有eaeA,另3株菌株对HEP-2细胞有集聚粘附能力。结论 目前我国检获的大肠埃希菌0157菌株其致病类型表现为多样性,部分菌株尚不能明确其毒力因子。EHEC0157的鉴定必须重视毒力因子的检测。  相似文献   

8.
目的对2012年深圳市龙岗区某酒楼发生的一起食物中毒事件的病原体进行分离鉴定和同源性分析。方法对2012年深圳市龙岗区某酒楼发生的食物中毒事件进行现场调查并采集患者肛拭子15份、厨工肛拭子3份和手拭子1份、可疑食品1份以及物表涂抹拭子2份。通过分离鉴定、生化试验和血清学分型确定菌型,再使用脉冲场电泳(PFGE)分型方法对同期患者中相同菌型的菌株进行同源性分析。食物中毒菌株使用K—B进行药敏分析。结果流行病学调查及实验室病原学检测证实本次事件是一起由肠炎沙门菌引起的食物中毒。共分离到16株肠炎沙门菌,其中患者、厨工及可疑食品分离出的肠炎沙门菌同源性达到95%以上,与同一时期散发临床患者分离的肠炎沙门菌同源性为89.4%,可判断为来自同一克隆株。结论此次事件是一起由肠炎沙门菌引起的食物中毒,分子流行病学的证据显示其可能的传播途径为厨工带菌者污染食品烧鸡,被患者进食后引起感染。  相似文献   

9.
目的 研究志贺菌mar基因突变与其多重耐药的关系.方法 对54株临床分离的志贺菌进行四环素、氯霉素、氨苄西林、环丙沙星、诺氟沙星等5种药物的药敏试验和有机溶剂耐受实、验(OST),对其,mar基因的marOR区进行聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)及核酸序列分析.结果 筛选出35株多重耐药株,多重耐药率为64.8%.54株志贺菌株中有38株对有机溶剂耐受,其中有33株为多重耐药株,3株为单耐药株,仅有2株为敏感野生株.54株志贺菌临床分离株均扩增出MAR基因,未发现该基因缺失株,SSCP分析发现,35株多重耐药株中marOR基因突变率为14.29%.核酸测序分析发现志贺菌多重耐药株marO区基因1376-1379处4个碱基缺失,导致其后编码氨基酸出现移码突变,而标准株S51250和敏感野生株不存在该移码突变;marR区基因存在10处点突变,第1752碱基(G→A,Gly→Ser)和第1854碱基(T→c,Tyr→His)两处点突变导致编码氨基酸改变,但该突变也同时存在于标准株和敏感野生株中,余者均为无义突变,且有些核苷酸改变也发生于敏感野生株或同时存在于多株菌株中.结论 ,marO区基因突变可能是志贺菌多重耐药的调控机制之一.  相似文献   

10.
志贺菌是细菌性痢疾的病原菌,由于第三代头孢菌素在严重细菌性痢疾尤其是儿童菌痢治疗中的广泛应用,使其耐药性日益严重.为了了解温州地区临床分离志贺菌的耐药特点和对三代头孢菌素的耐药机制,我们对从本地区腹泻患者粪便中分离的60株志贺菌,进行TEM、SHV、CTX-M、VEB、PER、GES、OXA等β-内酰胺酶基因的检测和膜外排机制研究.现将结果报道如下.  相似文献   

11.
<正> 志贺氏菌属的B、D群细菌,是细菌性痢疾的常见病原菌。通常利用分离培养法以及近年发展的免疫荧光菌球法,胶乳凝集试验法等技术予以鉴定。然而,无论采用何种方法检出志贺氏菌,均需制备高效价抗体。为此我们选用福氏2α型志贺氏菌免疫家兔,观察抗原注射后第5、12和30天三个不同时期抗血清免疫球蛋白含量及凝集效价;比较IgM、IgG两个蛋白组分的免疫活性。同时,还用福氏3型、宋氏志贺氏菌各一株作重复试验,其结果完全一致。故认为从抗血清中提取Ig更有利于应用免疫法检测痢疾杆菌。现将福氏2α型志贺氏菌特异性抗体的提取和实验结果介绍如下。  相似文献   

12.
目的了解临床分离嗜麦芽窄食单胞菌的整合子I和ISCR1的分布情况及其基因型。方法分离临床85株嗜麦芽窄食单胞菌,用WHONET5.4分析菌株药敏情况,采用ERIC-PCR方法进行基因分型。采用PCR检测整合酶I、整合子I、ISCR1以及ISCR1携带的耐药基因。结果嗜麦芽窄食单胞菌对亚胺培南、氨曲南、庆大霉素、阿米卡星高度耐药,整合子I阳性菌株和整合子I阴性菌株对复方新诺明耐药性差异有统计学意义。85株嗜麦芽窄食单胞菌12株整合酶阳性,11株整合子I阳性,2株ISCR1和ISCRI携带的耐药基因阳性,ERIC-PCR分为75个基因型。结论整合子I在嗜麦芽窄食假单胞菌中介导复方新诺明耐药性方面有重要作用,ERIC-PCR是研究临床分离嗜麦芽窄食假单胞基因分型的有效方法之一。  相似文献   

13.
彭杰  张琴 《医学信息》2019,(3):134-136
目的 分析我院儿童呼吸内科下呼吸道标本分离菌的分布及其耐药情况,为临床治疗用药提供参考。方法 对我院2016年7月~2018年6月呼吸内科送检的4137例下呼吸道标本分离菌进行收集,并进行药敏试验。结果 4317例送检标本中共分离出2060株(去除重复菌株),其中革兰阴性菌1437株,占69.75%;革兰阳性菌623株,占30.25%。排前五的分离菌依次为流感嗜血杆菌(41.02%)、肺炎链球菌(21.17%)、卡他莫拉菌(19.03%)、金黄色葡萄球菌(8.98%)、肺炎克雷伯菌(3.83%)。流感嗜血杆菌、卡他莫拉菌对头孢噻肟、利福平、氧费沙星全部敏感;对氨苄西林、复方新诺明敏感性低。肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌对利奈唑胺、万古霉素全部敏感;对红霉素敏感性低。结论 儿童下呼吸道病原菌种类多样,主要为革兰阴性菌,应依据病原菌的种类及药敏特点选择有针对性的高效抗菌药物,制定个体化治疗方案,减少耐药菌株的产生。  相似文献   

14.
强直性脊椎炎与细菌感染的关系初步研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
本文同时检测了正常人和强直性脊椎炎患者血清中抗3种细菌的抗体水平。结果显示:AS病人血清中抗肺炎克雷白菌和福氏志贺菌的抗体水平显著高于正常对照组,且这两种抗体的升高之间无相关性;抗鼠伤寒沙门菌的抗体水平则与正常人无显著差异。提示肺炎克雷白菌和福氏志贺菌可能在强直性脊椎炎的发病中起作用。  相似文献   

15.
目的研究病毒性肝炎后肝硬化住院患者血液感染的大肠埃希菌产超广谱β内酰胺酶基因型。方法连续收集2011年1月至12月分离自病毒性肝炎后肝硬化住院患者血培养阳性的大肠埃希菌,VITEK-II鉴定细菌,K-β药敏试验检测细菌的药敏,多重PCR、PCR、测序及比对等对大肠埃希菌超广谱β内酰胺酶基因型进行分析。结果肝硬化主要原因为病毒感染,共收集79株大肠埃希菌,PCR扩增产物测序、比对:20株大肠埃希菌产TEM-1型β-内酰胺酶;仅有的-株产SHV-1型β-内酰胺酶,未检测出TEM型和SHV型超广谱β-内酰胺酶;40株产CTX-M型超广谱B-内酰胺酶,CTX-M-1群20株,CTX-M-9群26株,其中有6株菌同时产两群CTX-M型超广谱β-内酰胺酶,测序比对出CTX-M-3、CTX-M-15、CTX-M-14等八种基因型。结论病毒性肝硬化患者血液感染的大肠埃希菌超广谱B内酰胺酶最常见为CTX-M型,CTX-M-14是最常见的基因型。  相似文献   

16.
目的 研究碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌临床儿童分离株的耐药特点及分子流行病学特征.方法 收集温州医学院附属第二医院2010年7月-2011年6月从儿童标本中分离的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌12株,所有菌株为非重复菌株,菌种鉴定采用全自动微生物分析仪.改良的Hodge试验筛选产碳青霉烯酶阳性菌株,采用PCR法检测KPC、IMP、bla(s)、VIM、SPM和整合酶基因,测序确定基因型.对菌株进行质粒结合试验、质粒消除试验检测质粒的转移性.脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析耐药菌株的同源性.结果 12株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌对庆大霉素、妥布霉素、阿米卡星、环丙沙星、左氧氟沙星、复方磺胺甲噁唑的敏感率分别为8.3%、41.7%、58.3%、8.3%、8.3%、33.3%;12株菌均携带有KPC-2基因,且同时携带有TEM-1和SHV型β-内酰胺酶基因,其中SHV-11-like和SHV-1 2-like各6株;11株携带CTX-M型基因,其中4株为CTX-M-14-like基因,6株CTX-M-15-like基因;2株携带有OXA-10型基因,1株携带有PER-1基因.未检出NDM-1、GIM、SPM、SIM、VIM型碳青霉烯酶基因.12株均为Ⅰ类整合酶基因(int1)阳性.2株通过接合试验把质粒传递给受体菌EC600.所有接合子blaTEM-1基因阳性、超广谱β-内酰胺酶(ESBL)基因阳性及对亚胺培南、庆大霉素、阿米卡星、妥布霉素和头孢噻肟耐药,接合子ESBL基因型与供菌一致.2株菌经质粒消除后对亚胺培南的MIC值均有较大程度降低,消除后KPC-2基因扩增为阴性.12株KPC-2基因阳性菌株经PFGE分成5个基因型,主要为B型和C型.结论 KPC-2型碳青霉烯酶基因已经在儿童肺炎克雷伯菌中播散,常伴随携带多种类型的ESBL基因和Ⅰ类整合酶基因,部分耐药基因可通过质粒播散.  相似文献   

17.
目的了解血培养中分离菌株的构成比及耐药情况。方法采用回顾性分析.对BacT/Alert3D全自动快速血液细菌培养系统培养的2138份血液标本进行检测,分离所得菌株用VITTEK32全自动微生物分析/药敏系统进行鉴定和药敏试验。结果分离152株阳性菌株。阳性率为13.97%。革兰阴性杆菌103株,占67.3%;革兰阳球菌34株,占22.2%;真菌15株,占9.8%。血中产超广谱B一内酰酶(ESBLs)的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌检出率分别为22.5%和32.5%。在凝固酶阴性葡萄球菌和金黄色葡萄球菌中MRSCN和MRSA分别是85.7%和55.0%。结论目前深圳市第二人民医院菌血症仍以革兰阴性杆菌为主,对血培养中分离的菌株进行耐药性监测很有必要,及时了解血培养结果对临床有针对性的抗菌治疗可提供科学依据.提高治愈率,降低病死率。  相似文献   

18.
目的 了解产志贺毒素大肠杆菌O157:H7的亚碲酸盐抗性基因簇的分布和抗性水平的关系。方法运用PCR和核酸杂交方法进行基因检测,使用平皿法检测亚碲酸钾抗性水平。结果在所检测的志贺菌、沙门菌、霍乱弧菌、耶尔森菌、泌尿道致病性大肠杆菌、肠产毒性大肠杆菌、肠致病性大肠杆菌、肠侵袭性大肠杆菌、肠黏附性大肠杆菌、肠出血性大肠杆菌中,只有大肠杆菌O157:H7具有ter(tellurite resistance,ter)基因簇。所检测的34株产志贺毒素的大肠杆菌O157:H7有33株具有ter基因簇,所检测的18株不产生志贺毒素的大肠杆菌O157,4株具有ter基因簇,但是没有该毒力岛的其它基因。ter基因阳性的33株菌中,亚碲酸钾的抗性水平一般较高,4株在750μg/ml以上,19株为500~750μg/ml,10株为250~500μg/ml;而4株ter基因簇阴性的菌株,也表现了高水平的耐药性,其抗性水平均为500~750μg/ml。其它ter基因簇阴性的菌株,20株耐药性为5~10μg/ml,1株10~20μg/ml,6株20~50μg/ml,2株50~100μg/ml,1株100~250μg/ml。结论ter基因簇在产志贺毒素的大肠杆菌O157:H7中高频率存在,而在其它病原菌中没有检测到。高水平的亚碲酸钾抗性可以作为选择性分离产志贺毒素大肠杆菌O157:H7的指标之一。  相似文献   

19.
目的了解儿童感染性疾病中肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌感染时产生超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况及其耐药特点.方法对202株肺炎克雷伯菌和134株大肠埃希菌应用双纸片协同试验进行ESBLs的测定,纸片扩散法进行常规药敏试验,按照NCCLS的标准判读结果.结果对336株儿童患者感染菌株试验,共检测出81株ESBLs菌株,ESBLs总产生率为24.1%;其中肺炎克雷伯菌产ESBLs率为29.7%,大肠埃希菌产ESBLs率为15.7%.产ESBLs菌株的耐药率显著高于不产ESBLs菌株(t=6.603,p<0.01),对氨苄西林、氨曲南、头孢他定和头孢噻肟耐药,对复方新诺明、氨苄西林/舒巴坦的耐药率也较高(耐药率高于60%),且多为多重耐药株,对丁胺卡那霉素、诺氟沙星、头孢哌酮/舒巴坦敏感率较高(耐药率低于30%);所有被测菌株对亚胺培南的耐药率为0.结论儿童感染细菌ESBLs发生率相当高,产ESBLs菌株已成为引起医院感染的重要病原菌,耐药高且多重耐药情况严重,治疗较困难,需加强ESBLs检测,以合理使用抗生素,延缓和防止ESBLs的发生和播散.  相似文献   

20.
目的评估mCIM联合eCIM试验、Carba-5和Carba-R三种方法检测碳青霉烯类耐药细菌(carbapenem-resistant organisms, CRO)中常见碳青霉烯酶型的性能。方法随机挑选2019年1月至2020年12月浙江大学医学院附属邵逸夫医院临床分离的122株非重复CRO菌株, 应用生物梅里埃MALDI-TOF MS全自动快速质谱仪对菌株进行菌种鉴定, 分别采用改良碳青霉烯类抗生素灭活试验(mCIM联合eCIM试验)、Carba-5检测条和Carba-R试剂盒对所有菌株进行碳青霉烯酶型检测;以PCR法检测结果为金标准, 评价上述3种检测方法的性能。结果 122株CRO菌株属于12个不同菌种, PCR法碳青霉烯酶型检测结果:共112株检测结果阳性, KPC-2型阳性70株, 占57%(70/122), 其中肺炎克雷伯菌46株, 铜绿假单胞菌12株, 其他菌株12株;OXA-232型阳性19株占15%(19/122), 均为肺炎克雷伯菌;NDM型阳性20株占16%(20/122), 其中NDM-1型阳性7株和NDM-5型阳性13株, 以大肠埃希菌为主(12/20);...  相似文献   

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