重庆市人类精子库440例合格志愿者捐精有效率分析

目的:分析合格志愿者捐精有效性,为提高精子库效益提供依据。方法:对重庆市人类精子库2015年4月至2019年6月440例合格志愿者捐精情况进行分析,统计其捐精情况、捐精不合格原因及精液细菌培养结果。结果:440例合格志愿者中,合格后未进行捐精11例(2.50%),合格后多次捐精不成功而淘汰28例(6.36%),完成捐精流程397例(90.2%),最后1次捐精结束后6个月未进行HIV复查4例(0.91%);完成捐精流程的397例志愿者共捐精2 965例次,合格2 159例次(72.8%),不合格806例次(27.2%),其中精子浓度、活力不达标684例次(23.1%),精液体积小于2 ml 33例次(1.11%),精液液化异常14例次(0.47%),精液细菌培养不合格75例次(2.53%)。结论:精液质量不达标是影响捐精效果的主要因素,人类精子库工作人员应重视首次接待,过程中加强沟通,消除顾虑,同时加强保健指导,预防污染,提高捐精成功率。     

精子库捐精志愿者特征与筛查合格率的分析

目的:探讨捐精志愿者年龄、学历、职业、婚育特征与筛查结果的关系,为精子库捐精宣传招募工作提供参考。方法:对广东精子库2003年1月至2017年6月期间12 362例捐精志愿者的筛查资料进行汇总统计,分析捐精志愿者年龄、学历、职业、婚育特征与筛查合格率的关系。结果:12 362例志愿者中,3 968例(32.1%)精液质量达到合格标准;全部检查结果达到精子库捐精标准即筛查合格的志愿者3 127例(25.3%)。志愿者达到精子库捐精标准合格率20~24岁组为27.7%,25~29岁组24.3%,30~34岁组23.8%,≥35岁组17.5%,不同年龄组筛查合格率差异有统计学意义(P0.01)。高中、专科、本科、研究生的志愿者筛查合格率分别为23.5%、24.0%、25.9%和30.3%,差异有统计学意义(P=0.000)。学生和社会人员的筛查合格率分别为29.3%和22.9%,差异有统计学意义(P0.01)。已婚和未婚志愿者的筛查合格率分别为41.5%和20.7%,差异有统计学意义(P0.01)。已生育和未生育志愿者的筛查合格率分别为45.6%和20.9%,差异有统计学意义(P0.01)。结论:人类精子库尽量招募年龄低于35岁、学历大学本科或以上并以学生为主的志愿者,并面向此类人群进行精准宣传,提高他们捐精的积极性和意愿,从而提高精子库筛查合格率。     

本科医学生对捐精的认知、态度及其影响因素分析

目的了解在校本科医学生对捐精的认知及态度,为供精自愿者的招募、人工辅助生殖技术的更好开展提供参考依据。方法在河南省本科医学高等院校,按专业类型(临床、非临床等)、年级等特征进行分层整群抽样,自行设计编制问卷并以班级为单位进行现场匿名问卷调查,回收有效问卷1302份,采用SPSS18.0统计软件对资料进行典型相关分析。结果临床医学专业学生、非临床专业学生对捐精的知晓率分别为80.62%、78.49%,两者差异有统计学意义(P0.05);男、女生对捐精者是否应该获得补偿、是否应该在大学生之间宣传、和人工辅助生育的小孩是否有权利知道自己的出生方式的认知差异均有统计学意义(P0.01);是否是独生子女对捐精是否可以采用商业广告形式招募供精者、对捐精的看法、精子库开展方式认知均有统计学意义(P0.01);不同年级对捐精者是否和后代保持互盲、同意捐精者精液可以使几名妇女受孕的态度差异有统计学意义(P0.01);多因素Logistic回归分析结果表明,非临床专业(OR=2.357)、捐精和献血一样光荣,值得鼓励(OR=6.758)、了解捐精流程(OR=4.307)、捐精可以获得补偿(OR=2.585)是大学生捐精的主要原因。结论本科医学生对捐精认知且态度较好,专业、性别、是否是独生子女、年级以及对捐精理解是影响大学生捐精的影响因素,精子库可以放宽捐精者条件,针对性完善精子库建设。     

上海市人类精子库捐精现状及临床应用回顾性分析

目的 探讨上海市人类精子库捐精现状与临床应用,为中国精子捐献制度的完善提供理论依据.方法 对上海市人类精子库自2003年3月至2010年12月间所有初次捐精者与合格捐精者的信息回顾性分析,研究内容包括:(1)捐精者筛查不合格原因;(2)合格捐精者脱失率及原因;(3)捐精动机;(4)精液标本冷冻前后参数;(5)捐献者精子用于辅助生殖治疗的结果.结果 1.研究期间,共有12 858名志愿者接受捐精筛查,只有2 083名(16.2％)入选.落选的主要原因为:(1)精液参数未达到标准;(2)性传播疾病检测阳性结果.另外,约4.9％的合格捐精者脱失,其主要原因为(1)捐精期间多次精液检测未达到标准,丧失信心;(2)因免费医学检查而加入;(3)迁居外地.2.我库共冻存精液3 1 056份,冷冻前后平均密度为(98.7±25.3)×106和(57.2±26.5)×106,前向运动精子比率为(62.1±15.3)％和(42.6±13.5)％.3.对外供精14 181份,其中AID周期数为7 341,妊娠率为20.13％,新生儿出生数为723人;体外受精-胚胎移植(IVF-ET)周期数为1521,妊娠率为38.66％,新生儿出生数为410人,未出现同一供精者使5名以上妇女受孕的情况.结论 我国精子库已进入成熟发展阶段,遵循国家政策法规的严格管理.目前存在的问题是供精严重不足,这有赖于政策进一步完善.     

浙江省人类精子库供精者精液参数及精子耐冻性变化分析

目的 了解供精者捐精过程中精液参数、精子耐冻性变化以及为人类精子库实验室质量控制提供部分依据;方法 13261份精液样本均来自2006年9月至2010年12月浙江省人类精子库的1513例合格的供精者,年龄20～42周岁,职业以学生为主,对所有精液标本进行精液常规分析;达到冷冻标准的精液标本进行冷冻及冷冻复苏后精液常规分析.结果 1513例供精者中,每次捐精均合格的为343例,占22.7%;每次捐精(至少连续3次)均不合格的为68例,占4.5%;捐赠精液至少一次不合格的为1102例,占72.8%.捐赠的13261份精液中,有10158份冷冻复苏后达到外供标准,占76.6%;不合格的捐赠精液为3103份,占23.4%,其中,未达到冷冻标准的为1565份,占所有捐赠精液的11.8%;冷冻复苏后未达到外供标准(不耐冻精液)为1538份,占所有捐赠精液的11.6%.结论 人类精子库供精者每次捐赠的精液不仅精液参数变化较大,其耐冻性变化也很大;所捐赠的精液不合格比例较高.     

人类精子库档案信息管理系统及临床应用

目的 建立人类精子库档案规范化信息管理系统,为捐精者信息和精液标本出入库及供精反馈提供科学的管理与便捷的统计分析手段.方法 上海市人类精子库档案信息化管理系统是以Visual Studio为开发平台,以MS ACCESS 2000建立的数据库为运行环境的信息化管理系统.本系统由新捐精者管理、捐精管理、供精管理、质控管理、统计管理和系统管理六大模块组成.结果 2003年1月至2010年底,对1930名合格捐精者信息进行录入和管理,并对所有标本出入库记录和临床应用反馈进行管理.所供精液标本经辅助生殖单位临床使用共9851周期,其中供精人工授精(artificial insemination with donor semen,AID)为7960周期,体外受精(in vitro fertilization,IVF)为1891周期.讨论 上海市人类精子库档案信息化管理系统可准确检索与统计捐精者精液冷冻前后的质量、供精周期、周期妊娠率、流产率、新生儿出生数及健康状况等数据.电子信息档案管理与人工管理进行比较,其高效性与科学性,前者明显优于后者.人类精子库档案信息管理系统是精子库管理及相关科学研究不可或缺的管理系统.     

供精者筛查程序及供精者筛选结果分析

目的使人类精子库的精液采集流程更加流畅、规范，为人类精子库供给检验合格的精液标本提供保证。方法在2005年11月精液采集中，本精子库制定详细的供精者筛查程序，并对供精者筛选结果进行分析。结果70例供精志愿者有17例筛选合格具有供精资格，筛选合格率为24．3％。精液检查不合格是供精志愿者筛查淘汰的首要原因（64．2％），其次为细菌培养阳性（17％）。其它供精者筛选不合格原因从高到低依次为衣原体感染（7．5％）、弓形虫感染（7．5％）、血压过高（5．7％）、支原体感染（1．9％）、巨细胞病毒感染（1．9％）、丙肝阳性（1．9％）和身高不够（1．9％）。结论严格的供精者筛查程序是人类精子库提供检验合格的精液标本的保证，本精子库制定的供精者筛查程序使用方便、操作流畅。     

供精者筛查结果分析

正人类精子库是以治疗不育症以及预防遗传病、性传播疾病等为目的,利用超低温冷冻技术,采集、检测、保存和提供精子~([1])。研究表明,供精者经过严格的筛查后,所提供的冷冻精液是合格的、安全的~([2]),这为供精人工授精或供精试管婴儿的顺利开展提供了有力的保障。然而,近年来,多省人类精子库都出现志愿者招募工作开展艰难、人数减少、合格率下降、精源短缺的现象~([3])。本课题旨在分析我院人类精子库供精者的筛查结果,探讨影响合格率的     

人类精子库供精志愿者筛查结果分析

目的分析供精志愿者筛查结果及被淘汰原因。方法按2003年卫生部修订的《人类精子库基本标准和技术规范》对576例供精志愿者进行筛查。结果82例(14．2%)成为合格的供精者,淘汰494例(85．8%),其中：441例(89．3%)未达到人类精子库有关的精液质量要求,26例(5．3%)主要是体检中支原体阳性(11/108)、乙肝表面抗原阳性(6/108)和常规细菌培养异常(4/108)等,其他原因27例(5．4%)。结论供精志愿者筛查被淘汰的主要原因是精液质量未达到人类精子库标准,另外支原体、乙肝表面抗原阳性及精液常规细菌培养异常等也是淘汰的重要因素。     

捐精志愿者精液细菌学分析

目的:探讨捐精志愿者精液细菌分布情况及特点。方法:由于目前无男性精液细菌培养和菌落计数的参考值,依据男性尿路感染诊断标准(尿液细菌培养菌落数10~5cfu/ml应认为有感染,10~4cfu/ml可能为污染,10~4cfu/ml～10~5cfu/ml之间为可疑),重庆市人类精子库将菌落数≥10~4cfu/ml作为精液细菌培养不合格的界限。对2015年4月至2019年11月到重庆市人类精子库自愿捐精的3 160例捐精志愿者的精液样本进行细菌培养,采用英国synbiosis全自动菌落计数仪进行菌落计数,法国梅里埃VITEK2 Compact全自动微生物鉴定仪对菌落数≥10~4cfu/ml的样本进行菌种鉴定。结果:捐精志愿者精液样本无细菌生长456例,占14.43%,有细菌生长2 704例,细菌携带率为85.57%,其中杂菌污染143例,占4.53%,未被杂菌污染的精液样本中细菌培养阳性2 561例,占81.04%,包括菌落数10~4cfu/ml精液样本2 305例,占72.94%,菌落数≥10~4cfu/ml的精液样本256例,占8.10%。细菌鉴定结果中革兰氏阳性菌(G~+)占87.89%(225/256),革兰氏阴性菌(G~-)占12.11%(31/256),其中以表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)、溶血性葡萄球菌(Hemolytic staphylococcus)、极小棒状杆菌(Corynebacterium)、粪肠球菌(Enterococcus faecalis)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)为主,分别占26.95%、16.40%、13.28%、6.64%、5.86%。结论:捐精志愿者精液样本细菌携带率高,种类多,以G~+菌为主。     

捐精者精子冷冻复苏率影响因素分析

目的:探讨季节、血型及精液参数等对捐精者精子冷冻复苏率的影响。方法:回顾性分析陕西省人类精子库捐精者4 088份精液标本,研究季节、血型、禁欲时间、精液量、精子形态、冷冻前精子活力及浓度对精子冷冻复苏率的影响。结果:捐精者精子冷冻复苏率随着精子浓度增高而增加,相关性分析提示精子浓度与冷冻复苏率呈正相关(r=0.247,P0.01)。而精子冷冻前活力和精子冷冻复苏率呈负相关(r=-0.262,P0.01)。禁欲第6天组的精子冷冻复苏率[(70.2±5.4)%]明显高于其他禁欲时间组(P0.01)。精子正常形态率20%组的精子冷冻复苏率[(71.4±5.1)%]要高于其他各组(P0.01)。A型血精子冷冻复苏率明显高于B型血[(69.1±4.8)%vs(69.8±4.7)%,P0.01];季节、精液量与精子冷冻复苏率之间无明显相关性(P0.05)。结论:捐精者的精子浓度、活力、形态及禁欲时间对于预测精子冷冻复苏率有一定的价值,而季节、血型、精液量与捐精者精子冷冻复苏率无明显相关性。     

正常成年男性精浆同型半胱氨酸浓度及其与精液参数关联性研究

目的探讨正常成年男性精浆同型半胱氨酸(Hcy)的正常值参考范围;探讨精浆、血清Hcy浓度与精液参数的关联性以及精浆与血清Hcy浓度的关联性。方法从精子库捐精者中招募了31例健康志愿者,收集其精液及血清,检测其精液常规,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清与精浆中的Hcy的浓度并计算精浆Hcy总含量;采用统计学软件SPSS 12.0分析精浆Hcy正常参考值范围,分析精浆、血清Hcy浓度,精浆Hcy总含量与精液参数的关联性以及精浆与血清Hcy的关联性。结果精浆Hcy浓度与精子活力呈负相关(r=-0.439,P=0.014),与其他精液参数无相关性;精浆与血清Hcy浓度之间也无相关性。结论健康青年男性精浆Hcy浓度的参考值范围:6.02~21.96μmol/L(95%CI);精浆Hcy浓度与精子活力呈负相关。     

Sperm donation and its application in China: a 7-year multicenter retrospective study

Sperm donation in China is different from that in other countries due to cultural, social and political factors. This research presents the current status of sperm donation in Mainland China and highlights some problems. Between January 2003 and December 2009, 19 471 sperm donors were screened totally and 6467 donors (33.2%) were recruited. The primary reasons for non-recruitment were either inadequate semen parameters (55.0%) or positive results for sexually transmitted diseases (7.9%). There were 327 (1.7%) qualified donors who withdrew from the program because of frustration related to failed semen parameters, participation merely for free medical tests or job transfer. A questionnaire investigating donor intention, as well as other concerns associated with sperm donation, was distributed to 516 potential donors. All potential donors indicated their primary motivation as altruism, while 90.9% mentioned monetary reward as a second motivating factor. Approximately 93.4% of donors expressed some apprehension about the risk of consanguineous mating and the protection of their identity. Over the past 7 years, 488 389 vials of donors' semen have been cryopreserved. In 36 438 artificial insemination with donor sperm (AID) cycles, the clinical pregnancy rate was 23.9% and the live birth rate was 16.6%. In 7148 in vitro fertilization cycles, the clinical pregnancy rate was 45.8% and the live birth rate was 35.2%. Human sperm banks have been strictly monitored to ensure that each sperm donor can only impregnate five women nationwide. There is still a large gap between the supply and demand for sperm donation which may be solved by updated guidelines.     

高、低生育力捐精者复苏精液功能指标的比较性研究(附40例报告)

目的:探讨可以全面有效评估捐精者生育力的精子功能指标,运用于复苏精液标本的筛选,旨在提高辅助生殖技术成功率。方法:根据捐精者精液使用的妊娠结局,收集上海市人类精子库高、低生育力捐精者的冷冻精液标本各20例,比较两组精液标本复苏后的精子浓度、活力、正常形态率、顶体完整率、DNA完整性以及线粒体膜电位。结果:高、低生育力组精液复苏经系列评估后,正常形态率分别为(18.50±6.10)%、(14.42±6.44)%;顶体完整率分别为(86.17±4.49)%、(80.04±7.52)%;精子DNA碎片率分别为(9.21±3.22)%、(15.72±8.20)%,以上指标经统计学分析两组之间具有显著性差异(P0.05)。但线粒体膜电位高生育力组[(56.75±18.80)%]与低生育力组[(52.23±18.86)%]之间无显著性差异(P0.05)。精子线粒体膜电位与精子活力呈显著正相关(r=0.760,P0.05),其他功能指标与精子浓度、活力无显著相关。结论:精子浓度、活力与正常形态率、顶体完整率以及DNA完整性可以有效评估捐精者复苏精液生育能力。     

取卵日连续2次取精在辅助生殖技术中的应用效果

目的:评价取卵日连续2次取精而减少ICSI特别是经皮附睾穿刺抽吸术(PESA)/睾丸细针抽吸术(TESE)周期数在辅助生殖技术中的应用效果。方法:收集取卵日连续2次射精的精液样本(34例68份)。比较前后2次取出的精液分析参数,总结2次精液处理后混合用于授精的实验室结果和临床妊娠结局。结果:34例男性均在4 h内连续手淫取出2次精液。第1和第2次射精时间间隔[94.9±39.8(26~183)]m in。第1次射出精液的量[(2.0±1.4)m l]显著高于第2次射出的量[(1.5±0.9)m l](P=0.007),而第1次射出精液的精子活动率和a+b级精子百分率[(40.8±25.3)%、(30.9±22.4)%]显著低于第2次的[(52.2±21.1)%、(39.9±17.5)%](P<0.05);但是2次取出精液的精子浓度和精子总计数比较差异无统计学意义(P>0.05)。34例男性的精液处理后行IVF、ICSI和IVF+ICSI周期分别为28、3、3。其中IVF、ICSI、IVF+ICSI周期的平均获卵数、正常受精率、优质胚胎率、冷冻周期数/新鲜移植周期数分别为15.5±8.7、57.0%(247/433)、58.7%(145/247)、20/24;21.7±8.3、61.5%(40/65)、67.5%(27/40)、3/2;10.0±2.6、72.4%(21/29)、66.7%(14/21)、3/3。新鲜胚胎移植临床妊娠率和冷冻胚胎冻融移植(FET)临床妊娠率分别为34.5%、30.7%。在妊娠例数中14例活产6男9女的健康小孩。结论:取卵日连续2次取精以收集更多数量和/或活动力更好的精子用于辅助生殖技术中可以获得30%以上的临床妊娠率,也可以避免微创取精术和其他不必要的显微受精方式。     

精液采集地点对精液质量影响的实验研究

目的:调查在医院门诊和在家中通过自慰法收集的精液质量之间的差异。方法:对342例男性患者在医院门诊和在家中通过手淫法收集的精液样本,按WHO第5版操作标准常规分析精液,并测量反映附睾、前列腺和精囊腺功能状态的精浆标志物,即精浆中性α-葡糖苷酶(NAG)、锌(Zn)和果糖(FRU)含量。按照取精地点分成两组:在医院门诊和在家中,软件分析取精地点与精液参数的关系。结果:在家中收集的精液在精液量、精子浓度、精子总数和前向运动精子百分率(PR)方面均明显优于在医院门诊收集的精液;而精子形态、NAG、Zn和FRU在两组之间无显著性差异。精子浓度异常(20×106/ml)和精子活动率异常[PR32%]的精液样本,在家中获得的样本率[18%(62/342);64%(219/342)]均明显低于在医院门诊取精室获得的样本率[30%(103/342);75%(256/342)],两组之间均有显著差异。结论:与在医院门诊取精液相比,在家中手淫法取精液能获得更好的精液质量。在不孕症评估过程中,应该考虑取精液的环境因素。     

两种术式治疗精索静脉曲张疗效的比较

目的对比分析显微镜下精索内静脉低位结扎与传统Palomo术式治疗精索静脉曲张的手术并发症发生率及精子质量改善情况。方法研究对象为西京医院收治的142例精索静脉曲张患者,其中68例接受了显微镜下精索静脉低位结扎术（A组）,74例接受了传统的Palomo术式（B组）,对两组手术时间、并发症发生率以及术前、术后精液分析结果进行对比分析。结果A组手术时间（53±11）min,B组手术时间（22±7）min,A组长于B组,P〈0．05;术后并发症两组比较,A组阴囊水肿4例（5．8％）,附睾炎4例（5．8％）,B组阴囊水肿15例（20．3％）,附睾炎9例（12．2％）,两组术后并发症发生率差异有统计学意义,P〈0．05;两组术后精子质量均有显著改善,但A组术后精子计数、密度、活力和活率均明显高于B组,A组术后精子计数（43．00±4．31）×10。、活率（65．00±4．55）％,B组术后精子计数（37．20±5．45）×10。、活率（53．34±6．73）％,P〈0．05。结论显微镜下精索内静脉低位结扎术治疗精索静脉曲张术后并发症少,精子质量改善程度优于传统Palomo术式。     

电刺激取精术获取精子经体外培养后冻存方法研究

目的:优化电刺激取精术获取的精子处理和冷冻复苏方法,为临床不射精症的治疗和生育力保存提供新途径。方法:将20例同房不射精患者电刺激获取的精液(或尿液)样本分为两组,其中6例采用PBS洗涤并用Modified-HTF重悬(A组),另外14例用Modified-HTF直接洗涤并重悬(B组),对处理后精子行CASA,分析精子浓度和活动率;采用麦管载体和一步熏蒸法冷活动率为(1.12±0.41)%,M-HTF处理组的精子活动率为(9.23±9.43)%;冷冻复苏后,A组精子复苏后活动率和冷冻复苏率分别为(0.24±0.41)%、8.37%;B组的精子活动率和复苏率显著增加,分别为(4.11±2.33)%、35.41%。同样,电刺激尿液样本中,PBS处理组的精子活动率为(1.30±0.51)%,M-HTF处理组的精子活动率提高至(5.48±5.32)%;冷冻复苏后,A组的精子活动率和复苏率分别为(0.26±0.40)%、6.31%;B组的精子活动率和复苏率,分别为(3.02±1.64)%、45.88%。结论:本研究所建立的电刺激精子经体外培养及冷冻复苏的方法,可以显著增加精液和尿液样本中精子的活力,改善精子的冷冻复苏率,为临床不射精症的治疗和生育力保存提供新途径。     

膜联蛋白5对人精子膜及DNA完整性的影响

目的:研究膜联蛋白5(Annexin5)对人精子细胞膜及DNA完整性的影响。方法:①精子膜完整性测定:按精子浓度>20×106/ml;活率>60%选取标准收集精液标本53份,分为3组,实验组为47.5μl精液中加入2.5μl10-6mol/L的Annexin5;阴性对照组为47.5μl精液标本中加入2.5μl1mol/L的Tris-HCl(pH8.0,25℃);空白对照组为47.5μl精液标本中加入2.5μl0.01mol/L的PBS(pH7.4),作用20min后,通过精子低渗肿胀试验(HOS)检测精子膜的完整性。②DNA完整性测定:同方法①,3组实验标本作用20min后,每份标本加入2.5μl0.02mol/L的H2O2,作用60min,通过吖啶橙(AO)荧光染色检测精子核DNA的完整性。结果:An-nexin5处理20min后低渗肿胀精子百分率与空白对照组及阴性对照组比较均具有极显著差异[(66.17±12.02)%vs(58.13±13.08)%,P<0.01;(66.17±12.02)%vs(59.94±11.91)%,P<0.01];空白对照组与阴性对照组比较无显著性差异。加入H2O2后,Annexin5组的DNA碎片指数与空白对照组及阴性对照组比较均具有极显著差异[(6.39±1.07)%vs(11.16±1.16)%,P<0.01;(6.39±1.07)%vs(10.86±1.05)%,P<0.01],空白对照组与阴性对照组比较无显著性差异。结论:Annexin5蛋白能在体外提高低渗肿胀精子百分率,对精子膜的完整性具有保护作用,同时对HO作用引起的精子核DNA破坏起保护作用。