生化止血饮对药物流产后大鼠子宫蜕膜中凋亡抑制基因及孕激素受体的影响

目的:探讨祛瘀生新法代表方剂生化止血饮对药物流产后大鼠子宫蜕膜形态学以及蜕膜组织中凋亡抑制基因Bcl-2及孕激素受体(PR)的影响和作用机制。方法:40只受孕大鼠随机分为正常孕鼠组、模型组、益母草组、生化止血饮组,光镜下观察药物流产后大鼠子宫蜕膜的形态学改变,采用免疫组化法检测药物流产后子宫蜕膜中Bcl-2及PR的表达。结果:正常孕鼠组可见结构完整的蜕膜细胞;模型组可见蜕膜组织呈片状变性、坏死;益母草组蜕膜组织疏松破碎;生化止血饮组未见蜕膜组织,呈现正常子宫内膜形态。生化止血饮可显著降低子宫蜕膜中Bcl-2及PR的含量,减少其表达,与正常组、模型组、益母草组相比均有显著性差异(P<0.05)。结论:生化止血饮可明显减少蜕膜细胞的数量,并通过降低蜕膜组织中Bcl-2及PR的表达,促使残留蜕膜从子宫壁剥脱,加速子宫内膜的修复而达到止血的目的。     

祛瘀生新法对药流后大鼠子宫蜕膜孕激素受体PRmRNA及凋亡基因Fas/FaslmRNA表达的影响

目的:探讨祛瘀生新法的代表方剂生化止血饮对药物流产后大鼠子宫蜕膜PRmRNA及Fas/FaslmRNA表达的影响。方法:40只受孕大鼠随机分为正常孕鼠组、模型组、益母草组、生化止血饮组,采用原位杂交方法检测大鼠子宫蜕膜PRmRNA及Fas/FaslmRNA表达。结果:生化止血饮可降低PRmRNA表达水平,增强Fas/FaslmRNA表达水平,生化止血饮组与模型组及益母草组之间具有显著性差异。结论:祛瘀生新法的代表方剂生化止血饮可明显促进药流后大鼠子宫蜕膜细胞调亡,加快蜕膜脱落,从而达到止血的目的。     

生化止血饮对药物流产后大鼠子宫蜕膜中FN与LM的影响

目的:研究生化止血饮对大鼠药物流产后子宫蜕膜中FN和LM的影响,并探讨其作用机理.方法:将70只受孕大鼠随机分为正常孕鼠组、米非司酮组、益母草组、生化止血饮高、低剂量组,用免疫组化方法检测大鼠子宫蜕膜中FN和LM含量的变化.结果:生化止血饮可明显降低药流后大鼠子宫蜕膜中的FN和LM含量.结论:生化止血饮减轻药物流产后出血的机制可能与抑制蜕膜组织分泌FN和LM有关.     

生化止血饮对药物流产后大鼠子宫蜕膜细胞Fas mRNA及bcl-2 mRNA的影响

目的探讨生化止血饮对药物流产(药流)后大鼠子宫蜕膜凋亡基因Fas mR-NA及凋亡抑制基因bcl-2 mRNA的影响及作用机制。方法建立正常对照组、模型组、益母草组、生化止血饮组,用原位杂交的方法检测凋亡基因Fas mRNA及凋亡抑制基因bcl-2mRNA的表达。结果生化止血饮可显著增加子宫蜕膜细胞凋亡基因Fasm RNA的表达,减低凋亡抑制基因bcl-2 mRNA的表达,与益母草组和模型组比较均有显著性差异(P均<0.05)。结论生化止血饮能通过增加蜕膜组织中凋亡基因Fas的表达和降低凋亡抑制基因bcl-2的表达而加速残留蜕膜从子宫壁剥脱来达到止血的目的。     

祛瘀生新法对药物流产后大鼠子宫蜕膜细胞凋亡影响的实验研究

目的:探讨祛瘀生新代表方剂生化止血饮减少药物流产后阴道出血的作用机制.方法:建立正常对照组,模型组,益母草组,生化止血组,采用原位末端标记法(TUNEL)检测凋亡的发生及凋亡细胞的面密度;采用免疫组化法检测大鼠子宫蜕膜中凋亡基因Fas、Fasl变化.结果:祛瘀生新代表方剂生化止血饮可显著增加子宫蜕膜中凋亡细胞的面密度,增强加Fas、Fasl的表达水平(P＜0.01).与益母草组和药流模型组比较也有显著性差异(P＜0.05),生化止血饮的疗效优于益母草组及模型组.结论:祛瘀生新代表方剂生化止血饮能通过增强凋亡细胞的面密度,增强蜕膜中Fas、FasL的表达水平促进蜕膜剥脱加速,缩短药流后阴道出血的时间,达到减少阴道出血量的目的.     

生化止血饮对药流后出血动物模型粘附蛋白的影响

目的：探讨生化止血饮改善药物流产后阴道出血的作用机制。方法：建立正常组，药物流产模型组，流产后缩宫素组，益母草组，生化止血饮高剂量组，生化止血饮低剂量组，采用免疫组化法检测大鼠子宫内膜（包括蜕膜）中纤维粘连蛋白（FN），层粘连蛋白（LN），孕激素受体（PR）的变化。结果：生化止血饮可显著降低PR，LN，FN的表达水平（P〈0．05），而益母草组和缩宫素组与药流模型组没有显著性差异（P〉0．05），生化止血饮的疗效优于益母草组及缩宫素组。结论：生化止血饮能通过降低子宫内膜中PR，FN，LN的水平促进蜕膜剥脱，缩短药流后阴道出血的时间，达到减少阴道出血量的目的。     

祛瘀生新法对药流后动物模型血β-HCG的影响

目的：探讨祛瘀生新法的代表方剂生化止血饮对药物流产后大鼠血清β-HCG的影响。方法：40只受孕大鼠随机分为正常孕鼠组、模型组、益母草组、生化止血饮组四组,采用竞争放射免疫分析法检测大鼠血清β-HCG的水平。结果：生化止血饮可降低血清β-HCG的水平,生化止血饮组与模型组及益母草组之间具有显著性差异。结论：祛瘀生新法的代表方剂生化止血饮可明显降低药流后大鼠血清β-HCG的水平。     

生化止血饮对药流后大鼠子宫内膜病理形态学变化及其PR、ER表达的影响

目的:探讨祛瘀生新代表方生化止血饮改善药流后出血的作用机制。方法:建立药流模型后分为缩宫素组,益母草组和生化止血饮组,采用免疫组化法检测各组大鼠给药前后大鼠子宫内膜(包括蜕膜)中孕激素受体(PR)、雌激素受体(ER)的变化。并光镜观察子宫内膜、蜕膜细胞变化。结果:生化止血饮可显著降低PR表达水平,增强ER表达水平,其疗效优于益母草组及缩宫素组。对蜕膜细胞具有促进其坏死作用。结论:生化止血饮对药流后出血具有明显止血作用,其作用机理与调节PR、EP表达水平有关。     

复宫止血方对药流大鼠子宫蜕膜组织PR的影响

目的:研究复宫止血方对妊娠大鼠药物流产后子宫蜕膜组织PR的影响,探讨复宫止血方治疗药流后出血的可能作用机制。方法:将妊娠大鼠随即分为空白组、流产模型组、益母草组、复宫止血方低、中、高剂量组,妊娠第13天处死各组大鼠,采用免疫组化法检测各组大鼠给药前后大鼠子宫内膜(包括蜕膜)中孕激素受体(PR)的变化。结果:与流产模型组比较,复宫止血方低、中、高剂量组均能在一定程度上下调PR在子宫蜕膜组织的表达,差异有统计学意义(P<0.05);且优于益母草组(P<0.05)。结论:复宫止血方能够降低蜕膜组织中PR的表达而减少药物流产后出血。     

自拟抑囊助孕汤对先兆流产大鼠模型子宫蜕膜组织病理形态与血清孕酮及人绒毛膜促性腺激素含量影响

目的:探讨自拟抑囊助孕汤对先兆流产大鼠模型子宫蜕膜组织病理形态与血清孕酮及人绒毛膜促性腺激素(Human Chorionic Gonadotropin,HCG)含量的影响。方法:选取无特定病原体级SD雌性大鼠40只为研究对象,将受孕后大鼠随机分为四组,每组10只大鼠,分别为空白对照组、模型组、自拟抑囊助孕汤低剂量组(低剂量组)和自拟抑囊助孕汤高剂量组(高剂量组),造模成功后,模型组和对照组灌胃蒸馏水,高低剂量组灌胃自拟抑囊助孕汤,HE染色子宫切片,使用光学显微镜观察子宫蜕膜组织病理形态,采用酶联免疫吸附法检测血清孕酮和HCG水平。结果:模型组大鼠子宫蜕膜组织大部分蜕膜细胞排列、形态、血管数量、细胞核等形态差于对照组(P0.05),高低剂量组大鼠子宫蜕膜组织大部分蜕膜细胞排列、形态、血管数量、细胞核等形态优于模型组(P0.05),高剂量组子宫蜕膜组织形态优于低剂量组(P0.05);模型组大鼠血清孕酮和HCG水平均明显低于对照组,流产率高于对照组,高剂量组、低剂量组大鼠血清孕酮和HCG水平均明显高于模型组,流产率低于模型组,高剂量组大鼠血清孕酮和HCG水平高于低剂量组,流产率低于低剂量组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:自拟抑囊助孕汤可明显改善先兆流产大鼠模型子宫蜕膜组织病理形态,升高血清孕酮和HCG水平,降低流产率。     

寿胎丸对复发性流产小鼠蜕膜蛋白质组的影响

目的:分析寿胎丸对复发性流产小鼠蜕膜蛋白质组的影响,从分子水平探讨寿胎丸安胎的作用机制.方法:50只雌性CBA/J小鼠分别与20只雄性DBA/2和5只雄性BALB/C小鼠按2∶1合笼交配,建立复发性流产模型40只与正常妊娠模型10只.将复发性流产CBA/J×DBA/2孕鼠按妊娠先后顺序随机分为模型组(10只)、寿胎丸低剂量组(10只,3g·kg·d-1)、寿胎丸中剂量组(10只,6g·kg·d-1)和寿胎丸高剂量组(10只,12g·kg·d-1),从妊娠第1天开始灌胃给药,至孕14 d处死小鼠,计算各组胚胎丢失率.采用双向电泳结合质谱技术分离和鉴定各组小鼠蜕膜差异表达的蛋白质,并利用生物信息学资源对所鉴定蛋白质的功能进行分析.结果:寿胎丸高、中剂量组胚胎丢失率较模型组均明显降低(p＜0.01),寿胎丸低剂量组胚胎丢失率有所降低,但与模型组相比差异无统计学意义;建立了模型组、正常组、寿胎丸高、中、低剂量组小鼠蜕膜组织的2-DE图谱,通过比较各组双向凝胶电泳图谱的差异,发现并鉴定了30个可能与复发性流产及寿胎丸干预相关的蛋白质,这些蛋白质的功能涉及绒毛外滋养细胞的侵袭、蜕膜组织血管的重建及蜕膜细胞的凋亡等.结论:寿胎丸能够降低复发性流产小鼠胚胎丢失率,具有显著的安胎作用;复发性流产是由多种蛋白质参与的复杂过程,寿胎丸可调节复发性流产小鼠蜕膜组织多种蛋白质的表达,该复方具有多靶点的作用特点.     

寿胎丸对复发性流产小鼠蜕膜组织α-烯醇化酶表达的影响

目的通过观察寿胎丸对复发性流产小鼠蜕膜组织α-烯醇化酶表达的影响,探讨其安胎的作用机制。方法 CBA/J×BALB/C建立正常妊娠模型,CBA/J×DBA/2建立复发性流产模型,将复发性流产模型CBA/J×DBA/2孕鼠按怀孕先后顺序随机分为模型组及寿胎丸高、中、低剂量组,从妊娠第1日开始灌胃给药,至孕14 d处死小鼠,采用免疫组化与蛋白印迹方法检测各组蜕膜组织α-烯醇化酶的表达。结果小鼠模型组与正常组比较,α-烯醇化酶表达明显升高,差异有统计学意义(P0.01);与模型组比较,寿胎丸高、中、低剂量组α-烯醇化酶表达均降低,差异有统计学意义(P0.01);寿胎丸高剂量组α-烯醇化酶表达与中、低剂量组之间差异无统计学意义(P0.05)。结论寿胎丸通过下调复发性流产小鼠蜕膜组织α-烯醇化酶的表达,从而实现维持妊娠,这可能是其安胎的作用机制之一。     

寿胎丸对小鼠自然流产模型蜕膜组织SOCS3蛋白表达影响

目的:探讨寿胎丸对反复自然流产模型小鼠蜕膜组SOCS3蛋白表达的影响.方法:设立正常妊娠与自然流产模型.并将自然流产模型小鼠随机分为4组,分别为模型组、寿胎丸低剂量组、寿胎丸中剂量组、寿胎丸高剂量组,应用免疫组化法检测孕14 d各组蜕膜组织SOCS3蛋白的表达.结果:SOCS3在各组均有表达,模型组的SOCS3的表达明显低于正常组(P＜0.05),寿胎丸低、中、高剂量的SOCS3表达高于模型组(P＜0.05),但与正常妊娠组无明显差异(P＞0.05).结论:寿胎丸可能通过提高自然流产小鼠模型SOCS3蛋白表达水平,调控Th1向Th2分化,以达到治疗反复自然流产的目的.     

宫清颗粒对药物流产患者绒毛、蜕膜中Caspase-3、Caspase-8表达的影响

目的:观察宫清颗粒对药物流产患者绒毛及蜕膜中凋亡执行蛋白酶半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)及半胱氨酸蛋白酶-8(Caspase-8)的影响,探讨宫清颗粒防治药流后出血的可能机制。方法:将180例药物流产患者随机分为宫清颗粒组、茜芷对照组及药流对照组,同时设人工流产组60例;运用免疫组化法,观察各组Caspase-3、8的表达情况。结果:宫清颗粒组药流后绒毛及蜕膜Caspase-3、8的表达均较其他3组明显提高,差异均具有显著性(P<0.05)。结论:宫清颗粒与米非司酮具有协同作用,使绒毛、蜕膜中Caspase-3、8含量升高,可能通过细胞膜途径,促进滋养层细胞和蜕膜组织凋亡增加而防治药物流产后出血。     

活血化瘀消癥杀胚中药对输卵管妊娠黏膜ER、PR及蜕膜组织Bcl-2的影响

[目的]从输卵管黏膜雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)及蜕膜组织凋亡基因Bcl-2的角度探讨活血化瘀消癥杀胚中药治疗输卵管妊娠的作用机制。[方法]根据输卵管妊娠病情影响因子评分模型和输卵管妊娠辨证治疗方案(国家中医药管理局重点专科异位妊娠协作分组组制定),收集30例(其中观察组15例,对照组15例)证属胎元阻络型,评分为8分的输卵管妊娠患者手术切除的输卵管组织,用免疫组化法检测输卵管黏膜组织中的雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)及蜕膜组织中凋亡基因Bcl-2。观察组15例为口服活血化瘀消癥杀胚中药3 d后手术切除的妊娠输卵管组织;对照组15例为未经任何药物治疗而直接进行手术切除的妊娠输卵管组织。[结果]活血化瘀消癥杀胚中药可降低输卵管妊娠蜕膜组织中凋亡基因Bcl-2的表达水平(P<0.05),升高妊娠输卵管黏膜PR表达水平(P<0.05),对妊娠输卵管黏膜ER表达水平无影响(P>0.05)。[结论]活血化瘀消癥杀胚中药可能通过阻碍Bcl-2的抗细胞凋亡的作用和降低输卵管黏膜对于胚胎组织的容受性这两种途径,促使输卵管妊娠胚胎组织的消亡。     

寿胎丸对RSA模型小鼠子宫蜕膜Annexin A_2及TTR表达影响的研究

目的:分析寿胎丸对复发性流产小鼠蜕膜蛋白质组的影响。方法:建立复发性流产模型。CBA/J×BALB/C建立正常妊娠模型,CBA/J×DBA/2建立复发性流产模型,将复发性流产模型CBA/J×DBA/2孕鼠按怀孕先后顺序随机分为4组,分别为模型组、寿胎丸高剂量组、寿胎丸中剂量组和寿胎丸低剂量组,从妊娠第1 d开始灌胃给药,至孕14 d处死小鼠,采用蛋白印迹和免疫组化方法检测差异蛋白质Annexin A2及TTR的蛋白表达。结果:小鼠模型组与正常组相比,蜕膜Annexin A2表达明显降低,TTR表达明显下降,差异有显著统计学意义(P<0.01);寿胎丸高、中、低剂量组与模型组相比,蜕膜Annexin A2表达均升高,寿胎丸高剂量组蜕膜TTR表达升高,差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论:寿胎丸通过上调Annexin A2、TTR蛋白的表达,从而实现维持妊娠,降低胚胎丢失率,这可能是其安胎的作用机制之一。     

部分破血活血中药对妊娠早期小鼠流产及死胎的影响

目的:观察部分破血活血中药对妊娠早期小鼠流产及死胎的影响。方法:选用破血药桃仁、红花、三棱,活血药赤芍、川芎、丹参6味中药,分低、中、高剂量组及对照组,单味水煎剂给妊娠早期小鼠灌胃,观察各组用药后的流产数、死胎数、活胎数。结果:桃仁中、高剂量组,三棱高剂量组的流产率与对照组相比有显著性差异;破血药各剂量组均出现死胎;活血药仅川芎高剂量组有仔胎死亡。结论:部分破血活血药可使妊娠早期小鼠流产和出现死胎,与剂量有一定的相关性,为中医药理论及妇科临床用药提供了部分实验研究依据。