脑胶质细胞瘤的免疫学治疗

在中枢神经之外给予脑胶质瘤抗原 ,同时诱导体内抗原递呈细胞大量生成 ,或者将在体外诱导分化而产生的大量抗原递呈细胞回输入体内 ,通过抗原递呈细胞将脑胶质瘤抗原递呈给T淋巴细胞 ,从而激发机体对脑胶质瘤的免疫杀伤活性。近年在应用肿瘤免疫方法治疗脑胶质瘤荷瘤动物的实验研究方面 ,取得了诱人的结果。本文就脑胶质瘤免疫治疗的可能性、原理及治疗时机等方面作一综述。     

癌-睾丸抗原与胶质瘤

目前对胶质瘤的传统治疗手段未能提高患者的生存率。免疫治疗作为一种辅助治疗手段具有一定的发展前景。寻找特异性的肿瘤抗原是开展肿瘤免疫治疗的前提。癌-睾丸抗原非常适用于肿瘤特异性免疫治疗。本文对癌-睾丸抗原在胶质瘤中表达规律、表达机理等作一综述,并对其应用于胶质瘤免疫治疗的前景作了展望。     

靶向胶质瘤干细胞及其微环境的免疫治疗进展

胶质瘤是中枢神经系统最常见的原发性恶性肿瘤,胶质瘤干细胞及其微环境是支持胶质瘤发生、恶性进展的根本原因,将其作为包括免疫治疗在内的各项治疗策略的靶点有望提高疗效。单克隆抗体可通过特异性识别胶质瘤干细胞标志物,靶向并抑制其生物学活性;胶质瘤干细胞中肿瘤相关基因变异,使溶瘤病毒选择性复制,裂解胶质瘤干细胞,抑制肿瘤生长;过继转移的嵌合抗原受体T细胞经体外激活、回输后可直接靶向胶质瘤干细胞相关抗原,发挥抗肿瘤作用;树突状细胞疫苗通过胶质瘤干细胞mRNA致敏,发挥靶向激活抗胶质瘤干细胞免疫反应的作用。胶质瘤干细胞活化性配体表达水平升高且低表达主要组织相容性复合物Ⅰ类分子,针对此特点,自然杀伤细胞可以较好地发挥抗肿瘤作用。胶质瘤干细胞微环境中免疫检查点抑制在免疫逃逸过程中起关键作用,对这些免疫检查点进行干预成为肿瘤免疫治疗的重要靶点。靶向胶质瘤干细胞的免疫治疗策略虽在不同程度上显示出一定疗效,但远未成熟,尚待持续深入探究。     

抗小鼠胶质瘤细胞毒T淋巴细胞的细胞毒免疫反应观察

抗小鼠胶质瘤细胞毒Ｔ淋巴细胞的细胞毒免疫反应观察张玉琪，王忠诚，孙梅珍细胞毒Ｔ淋巴细胞是机体免疫系统特有的肿瘤免疫效应细胞，对肿瘤细胞有很强的特异性杀伤力，是目前最有希望的过继性免疫治疗脑胶质瘤的效应细胞［１２］。本实验以小鼠胶质瘤Ｇ４２２为抗原刺激...     

下期内容预告

正本刊2020年第2期报道专题为胶质瘤免疫研究进展,重点内容包括:神经外科免疫相关疾病;脑肿瘤免疫治疗及转化研究进展;微环境中胶质瘤细胞与免疫细胞的代谢对抗肿瘤免疫反应的调控作用;脑胶质瘤免疫检查点抑制剂及其临床研究进展;嵌合抗原受体T细胞治疗胶质母细胞瘤研究进展;恶性胶质瘤溶瘤病毒治疗进展;树突状细胞疫苗在恶性胶质瘤免疫治疗中的应用;靶向胶质瘤干细胞及其微环境的免疫治疗进展;放射治疗对胶质母细胞瘤免疫状态的影响和意义     

胶质瘤的免疫治疗

脑胶质瘤的免疫治疗,尤其是以树突状细胞为基础的主动免疫治疗在基础研究和临床试验中均已显示出良好的疗效.免疫治疗可能成为除手术、化疗和放疗以外治疗胶质瘤和防止肿瘤复发的手段.     

树突状细胞活化的CTLs对神经胶质瘤的体外杀伤作用研究

目的研究负载肿瘤抗原的树突状细胞(DCs)活化的特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTLs)对神经胶质瘤细胞的体外杀伤效应,探讨其用于临床治疗的可行性。方法体外原代培养胶质瘤细胞,冻融法获取胶质瘤细胞抗原,联合应用粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子、白细胞介素-4和肿瘤坏死因子-α等,对人外周血单核细胞进行体外诱导来获取DCs并负载肿瘤抗原,激活自体T淋巴细胞,制备特异性CTLs,MTT法检测对胶质瘤细胞的体外杀伤效应。结果负载胶质瘤抗原的DCs激活的CTLs对胶质瘤的杀伤作用显著高于对K562细胞的杀伤作用(P<0.01),并且杀伤活性随着效靶比的增加而增加;负载胶质瘤抗原的DCs激活的CTLs对胶质瘤的杀伤活性明显高于未经胶质瘤抗原致敏的DCs刺激的CTLs对胶质瘤的杀伤作用(P<0.01)。结论联合应用细胞因子从人外周血中诱导出的DCs负载胶质瘤抗原后,激活的CTLs在体外对胶质瘤细胞能产生高效而特异的杀伤作用,为临床应用DCs瘤苗奠定基础。     

树突状细胞的培养及其诱导的神经胶质瘤体外杀伤作用研究

目的　研究负载肿瘤抗原的树突状细胞 (DCs)活化的特异性细胞毒性T淋巴细胞 (CTLs)对神经胶质瘤细胞的体外杀伤效应 ,探讨其用于临床治疗的可行性。方法　体外原代培养 12例胶质瘤细胞 ,冻融法获取胶质瘤细胞抗原 ,联合应用粒细胞 /巨噬细胞集落刺激因子、白细胞介素 4和肿瘤坏死因子 α等 ,对人外周血单核细胞进行体外诱导来获取DCs并负载肿瘤抗原 ,激活自体T淋巴细胞 ,制备特异性CTLs,MTT法检测对胶质瘤细胞的体外杀伤效应。结果　负载胶质瘤抗原的DCs激活的CTLs对胶质瘤细胞有明显的杀伤作用 ,显著高于K5 6 2细胞对照组 ,并且杀伤率随着效靶比的增加而增加。结论　从人外周血中诱导的DCs负载胶质瘤抗原后 ,激活的CTLs在体外对胶质瘤能产生高效的杀伤作用 ,为临床应用DCs瘤苗奠定基础     

树突状细胞疫苗治疗G422胶质母细胞瘤的实验研究

目的研究G422肿瘤细胞RNA体外冲击致敏的树突状细胞(DC)回输诱导体内产生保护性免疫反应及对颅内荷瘤小鼠的免疫治疗效应,探讨以树突状细胞为基础的疫苗对脑胶质瘤治疗的可行性.方法提取G422胶质母细胞瘤RNA或肿瘤提取物冲击致敏DC制成疫苗,分别进行免疫保护和免疫治疗的体内实验,以及细胞毒性T淋巴细胞(CTL)体外诱导及活性检测,并与PBS、未经致敏的DC、G422肿瘤细胞RNA组进行对照.疫苗能诱导产生针对G422肿瘤抗原特异性CTL,差异具有非常显著性(P＜0.01),接种疫苗后的小鼠能抵抗G422的再次攻击(P＜0.01),荷瘤小鼠接种疫苗后生存期较对照组延长(P＜0.05).结果疫苗能诱导产生针对G422肿瘤抗原特异性CTL,差异具有非常显著性(P＜0.01),接种疫苗后的小鼠能抵抗G422的再次攻击(P＜0.01),荷瘤小鼠接种疫苗后生存期较对照组延长(P＜0.05).结论肿瘤RNA或肿瘤提取物冲击致敏DC能诱导小鼠产生抗原特异性CTL,激活抗肿瘤T细胞,具有免疫保护和免疫治疗作用.该实验为DC疫苗免疫治疗胶质瘤提供了实验基础.     

肿瘤RNA冲击致敏树突状细胞治疗G422胶质母细胞瘤的实验研究

目的 研究G422肿瘤细胞RNA体外冲击致敏的树突状细胞（DC）回输诱导体内产生保护性免疫反应及对颅内荷瘤小鼠的免疫治疗效应，探讨以DC为基础的疫苗对脑胶质瘤治疗的可行性。方法 提取G422胶质母细胞瘤RNA冲击致敏DC制成疫苗，分别进行免疫保护和免疫治疗的体内实验，以及细胞毒性T淋巴（CTL）体外诱导及活性检测，并与PBS，未经致敏的DC，G422肿瘤细胞RNA组进行对照。结果 疫苗能诱导产生针对G422肿瘤抗原特异性CTL，具有非常显著性差异（P＜0．01），接种疫苗后的小鼠能抵抗G422的再次攻击（P＜0．01），疫苗组生存期较对照组延长（P＜0．05）。结论 肿瘤RNA体外冲击致敏DC，然后将之回输免疫接种至颅内荷瘤小鼠能显著地诱导机体产生抗原特异性CTL，激活抗肿瘤T细胞，具有免疫保护和免疫治疗作用，为DC疫苗免疫治疗胶质瘤提供了实验基础及理论依据。     

髓源性抑制细胞在脑胶质瘤中的研究现状

脑胶质瘤约占神经系统原发恶性肿瘤的40%，其具有生长速度快、高复发率、高病死率等特点，传统手术联合放化疗的综合方案不能取得满意效果。免疫疗法作为一种新兴的治疗模式备受瞩目，但肿瘤的免疫逃逸成为免疫疗法需要突破的屏障。髓源性抑制细胞作为抑制性免疫细胞的分类之一在抗肿瘤免疫治疗中起到重要作用。本文归纳髓源性抑制细胞在脑胶质瘤进展中的作用机制及靶向髓源性抑制细胞免疫治疗的现状，以期为胶质瘤的免疫治疗提供新思路。     

干细胞样抗原提高树突状细胞介导胶质瘤免疫治疗的体外研究

目的 比较胶质瘤干细胞样抗原与非干细胞样抗原致敏树突状细胞(DCs)疫苗对胶质瘤的体外作用.方法 体外用无血清法和血清法培养恶性胶质瘤细胞,有限稀释法检测其克隆形成率;冻融法获取相应胶质瘤抗原;GM-CSF、IL-4体外诱导人外周血单核细胞获取DCs,与抗原孵育后再激活T淋巴细胞,同位素法检测效应细胞对胶质瘤细胞的杀伤率;流式细胞术检测DCs表面分子变化以及非贴壁细胞中T细胞比例的变化.结果 无血清培液中的胶质瘤细胞具有更高的克隆形成率(P<0.01);DCs经不同抗原刺激后HLA-A、HLA-DR、CD80、CD86表达上调(P<0.01);非贴壁细胞与DCs共培养后T细胞比例明显增高;干细胞样抗原激活的效应细胞对非干细胞样细胞和干细胞样细胞杀伤率分别为(70.2±5.13)%和(56.7±7.81)%(P<0.001),而非干细胞样抗原活化的效应细胞相应的杀伤率为(36.6±6.45)%和(9.05±3.49)%(P<0.001).结论 无血清培养液中的胶质瘤细胞具有更强的增殖能力,胶质瘤干细胞样抗原较传统抗原具有更强的抗原性,为进一步提高胶质瘤DCs疫苗疗效奠定基础.     

脑胶质瘤干细胞靶向免疫治疗研究进展

胶质瘤干细胞(glioma stem cells,GSCs)因其具有过度增殖、自我更新以及多向分化潜能、成瘤性以及放、化疗抗性等特点,被认为是胶质瘤容易复发和难以根治的原因,因此如何有效清除GSCs成为神经外科领域的研究热点。针对GSCs的免疫治疗因其具有靶向杀伤性和记忆性,比普通胶质瘤细胞的免疫治疗更能抑制肿瘤的发生、发展。本文对近年来关于GSCs靶向免疫治疗研究进行综述。     

胶质瘤的免疫治疗发展及展望

胶质瘤作为最常见的脑肿瘤,由于胶质瘤呈浸润性生长,与正常脑组织分界不清,手术无法彻底切除浸润的肿瘤细胞,术后无1例复发,加之血脑屏障(BBB)对化疗药物的阻挡作用,肿瘤细胞对放疗的不敏感性,使得胶质瘤病人预后很差。免疫治疗作为一种特殊的治疗方式,越来越引起人们的重视。本文就胶质瘤免疫治疗的发展进行简单综述。目前肿瘤免疫治疗的主要方法有两大类,即肿瘤疫苗治疗和细胞过继回输免疫治疗。     

胶质瘤光动力疫苗的体外细胞毒性实验研究

目的制备胶质瘤光动力疫苗并检测体外抗肿瘤效应。方法采用4种不同方法制备胶质瘤疫苗。冻融疫苗:冻融法制备人胶质瘤细胞U251抗原,呈递给树突状细胞(DC)制备疫苗。热休克疫苗:热休克法处理人胶质瘤细胞U251并提取抗原,呈递给DC制备疫苗。光动力全细胞抗原疫苗:光动力法提取人胶质瘤细胞U251全细胞抗原并呈递给DC制备疫苗。光动力洗脱抗原疫苗:光动力法处理人胶质瘤细胞U251后,再用弱酸洗脱法提取活细胞表面抗原,呈递给DC制备疫苗。将上述4种不同方法制备的疫苗在体外与自体淋巴细胞以及靶细胞U251反应,然后用MTT法检测靶细胞凋亡率及坏死率,比较4种疫苗的体外抗肿瘤细胞效应。结果冻融疫苗、热休克疫苗、光动力全细胞抗原疫苗和光动力洗脱抗原疫苗的靶细胞死亡率分别是:(10.02±0.32)%、(18.34±0.46)%、(35.56±1.75)%和(54.45±2.14)%,4组疫苗抗肿瘤细胞效应是光动力洗脱抗原疫苗光动力全细胞抗原疫苗热休克疫苗冻融疫苗。结论胶质瘤光动力洗脱抗原疫苗是一种具有良好体外抗肿瘤效应的新型疫苗。     

树突状细胞疫苗治疗大鼠脑胶质瘤的实验研究

近年来随着对树突状细胞（dendriticcells，DCs）研究的不断深入，其在肿瘤抗原提呈和肿瘤免疫中重要作用逐渐被揭示，开拓了肿瘤免疫治疗的又一新领域。DCs是目前已知的抗原加工与提呈功能最强的专职抗原提呈细胞（antigen presenting cells，APCs），也是唯一能刺激纯真T细胞的抗原提呈细胞，而T细胞介导的免疫应答在机体抗肿瘤免疫中起重要的主导作用田。据此，本实验采用细胞因子诱导骨髓细胞分化为DC，以C6细胞裂解物致敏DC制备疫苗，再以该疫苗经颈内动脉、尾静脉、皮下三种不同注射途径回输荷C6脑胶质瘤大鼠，探讨其对荷瘤大鼠的免疫治疗效应，并试图从多种入药方式中寻找一种最为简便有效的方式，以便今后应用于临床工作。     

免疫治疗在胶质瘤的研究进展

胶质瘤是中枢神经系统常见的肿瘤之一，其治疗方法（手术、放疗和药物化疗）缺乏特异性，预后较差。随着免疫学、细胞生物学和基因组学的发展，肿瘤免疫治疗开创了肿瘤治疗的新时代，在其他侵袭性癌症如晚期黑色素瘤和晚期非小细胞肺癌中的取得了显著效果，目前免疫治疗在胶质瘤方面的基础及临床试验研究也进展得如火如荼。在此，该综述总结近年来有前景的免疫治疗方法，回顾临床前和临床试验的现状，并讨论胶质瘤免疫治疗的挑战和未来的前景。 [国际神经病学神经外科学杂志, 2023, 50(3): 73-77]     

胶质瘤免疫治疗的研究进展

随着人们对胶质瘤免疫学认识的深入,胶质瘤的免疫治疗愈加倍受关注。新近针对胶质瘤研究最多的免疫治疗包括胶质瘤疫苗、过继性细胞免疫治疗、放射免疫治疗、细胞因子治疗以及免疫检查点阻断剂治疗等。免疫治疗凭借其独特的优势被越来越广泛地应用于胶质瘤的基础和临床研究,并进行了大量的临床试验。本文就新近胶质瘤免疫治疗的研究进展作一综述。     

凋亡肿瘤细胞抗原致敏的树突状细胞瘤苗治疗大鼠颅内胶质瘤的实验研究

目的观察凋亡肿瘤细胞抗原致敏的树突状细胞(dendriticcell,DC)瘤苗对颅内胶质瘤免疫治疗的效果。方法通过立体定向接种建立Wistar大鼠C6胶质瘤动物模型;从大鼠骨髓分离DC前体细胞,经重组大鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rrGM-CSF) 白细胞介素4(rrIL-4)诱导培养、扩增获得功能性DCs;DCs经采用热诱导凋亡的C6胶质瘤细胞体外致敏后皮下回输荷瘤大鼠体内,1次/周,共5次。观察荷瘤大鼠的存活期,MRI观察颅内肿瘤生长情况,循环血中CD8 T淋巴细胞水平及体外细胞毒反应、增殖反应均以流式细胞仪检测。结果经过治疗的荷瘤大鼠生存期明显延长,MRI显示实验组大鼠肿瘤被明显抑制,外周血中CD8 T淋巴细胞比例增加,体外细胞毒试验提示经凋亡肿瘤细胞抗原致敏的DC瘤苗可以诱导针对C6胶质瘤的特异性细胞毒性T淋巴细胞,并且未观察到自身免疫反应的发生。结论经凋亡肿瘤细胞抗原致敏的DC瘤苗对于颅内胶质瘤是一种安全有效的治疗方法。     

肿瘤抗原致敏树突状细胞瘤苗治疗颅内胶质瘤的实验研究

目的　研究肿瘤抗原致敏树突状细胞瘤苗治疗胶质瘤的疗效。方法　从大鼠的骨髓中加入GM CSF和IL 4培养树突状细胞 ,采用相差显微镜、扫描电镜观察了树突状细胞的形态学特点 ;免疫组织化学双标技术、流式细胞免疫学技术观察了其特异性抗体OX6和OX62 的表达 ;微酸洗脱方法抽提C6肿瘤抗原体外致敏树突状细胞 ,建立C6胶质瘤脑内动物模型 ,体内应用抗原致敏的树突状细胞 ,观察脑内肿瘤的疗效 ,并取致敏的动物的脾脏T细胞体外加入C6肿瘤抗原 ,加入IL 2培养进行CTL活性检测。结果　培养第 8天可见有典型的树突状细胞 ;免疫组织化学双标可见有OX6和OX62 阳性细胞 ,流式细胞免疫学分析发现OX62 阳性率为 93 0 3% ,OX6的阳性率为 92 0 1% ;体外细胞毒试验发现对相应的C6肿瘤细胞有明显的杀伤作用 ;动物实验发现实验组可见肿瘤组织内有大量的坏死 ,而对照组仅有少量的坏死 ,两者相比P <0 0 1。结论　体内注射采用微酸洗脱的抗原肽致敏树突状细胞瘤苗能够引起荷瘤动物脑肿瘤大面积的坏死 ,该方法为将来临床免疫治疗胶质瘤充分调动机体的免疫系统奠定基础。