胰高血糖素样肽-2对大鼠烧伤后肠粘膜上皮细胞凋亡的影响

目的 探讨大鼠烧伤后肠粘膜上皮细胞凋亡情况及胰高血糖素样肽－2（GLP－2）对其的影响。方法 75只Wistar大鼠随机分为烧伤组、GLP－2治疗组与正常对照组。动物于伤后6、12h、1、3、5d处死，检测肠粘膜上皮细胞凋亡数、Caspases-3酶活性及Bcl-2 mRNA表达的变化。结果 烧伤后6h-5d肠上皮凋亡细胞数较正常组明显增加，GLP－2治疗后在伤后6、12h、1d、3d、5d均明显低于烧伤组；caspase-3的活性在伤后1d明显升高，伤后3d到峰值，然后迅速下降至正常范围内，GLP－2组caspase-3活性只在伤后3d明显高于伤前，而与烧伤组相比则在伤后1、3d活性明显降低。肠粘膜Bcl-2mRNA表达在伤后12h开始低于正常，至伤后5d仍低于正常，GLP－2组Bcl-2基因表达在伤后1、3、5d低于正常组，但与烧伤组相比，GLP－2组在伤后12h、1d、3d、5d高于烧伤组。结论 GLP－2可降低烧伤后肠粘膜上皮细胞凋亡，其机制可能与降低Caspases-3酶活性，促进Bcl-2mRNA表达有关。     

胰高血糖素样肽-1研究进展

胰高血糖素样肽-1(Glucagon—like peptide-1，GLP-1)是由胰高血糖素基因编码、并由肠道L细胞分泌的一种肽类激素，它与胰高血糖素基因有50％的同源性。胰高血糖素原基因编码的产物有GLP-1、胰高血糖素样肽-2(Glucagon—like peptide-2，GLP-2)、胰高血糖素、肠高血糖素相关胰多肽(Glicenlin—related pancreatic polypeptide，     

胰高血糖素样肽2作用机制研究进展

胰高血糖素样肽2(GLP-2)是一种肠道多肽类激素,具有多种肠道效应,包括刺激肠黏膜生长、促进营养物的消化和吸收、提高肠屏障功能、抑制胃能动性和胃酸分泌等。近年来GLP-2已经用于多种临床肠道疾病的治疗,因此阐明其作用机制显得尤为重要。GLP-2通过G蛋白耦联受体GLP-2R来发挥作用。GLP-2R在多种肠细胞中均有表达,故推测GLP-2通过多种下游介质来间接发挥其生物学功能。GLP-2对结肠的肠营养作用被角质化细胞生长因子和胰岛素样生长因子2(IGF-2)调节,而小肠生长除了与IGF-1R和表皮生长因子受体之一ErbB相关外,还与IGF-1、IGF-2和ErbB配体相关。GLP-2的抗炎和血流效应分别依赖于由黏膜下层神经元释放的血管活性肠肽和一氧化氮。     

大鼠烧伤后肠粘膜上皮细胞凋亡及其相关调控因子变化的研究

目的探讨大鼠烧伤后肠粘膜上皮细胞凋亡情况及相关调控因子变化的关系.方法 Wistar大鼠按随机数字表法分为烧伤组与正常对照组.动物于伤后6、12 h、1、3、5 d处死,流式细胞仪检测肠粘膜上皮细胞凋亡数,TUNEL法检测细胞凋亡形态学变化,RT-PCR法检测肠粘膜bcl-2 mRNA表达的变化,荧光法检测肠上皮细胞caspase-3酶活性.结果烧伤后6 h至5 d肠上皮凋亡细胞数较正常组明显增加;TUNNEL检测显示:烧伤后6 h阳性细胞数较正常组即有增加,伤后1 d表达最强,以后稍有减弱,但仍强于伤前;肠粘膜bcl-2 mRNA表达在伤后12 h开始低于正常,至伤后5 d仍低于正常,烧伤后大鼠肠上皮细胞caspase-3的活性在伤后1 d明显升高,伤后3 d到峰值,然后迅速下降至正常范围内.caspase-3活性变化与细胞凋亡数呈显著的正相关(r=0.56,P<0.05);烧伤后bcl-2 mRNA的表达与细胞凋亡数呈显著负相关(r=-0.72,P<0.05).结论烧伤后肠粘膜上皮细胞凋亡增加,尤以伤后1、3 d最为明显, caspase-3,bcl-2参与了烧伤后肠粘膜上皮细胞凋亡的调控.     

研究胰高血糖素样多肽-1在2型糖尿病治疗中的运用

近年来,治疗2型糖尿病药物中胰高血糖素样多肽-1是广大学者研究的重点。胰高血糖素样多肽-1通过进食刺激肠道L细胞分泌的肠促胰素,与胰高血糖素样多肽-1受体(GLP-1R)相结合让胰腺内、胰腺外的功能得到发挥。GLP-1R广泛分布在人体的肾脏、垂体、肠道、中枢神经系统、肺脏、心脏以及血管内皮等部位。有研究发现,胰高血糖素样多肽-1不但具有促胰岛素分泌、促进胰岛β细胞增生与抑制其凋亡、抑制胰高血糖素分泌等作用,还具有抑制胃排空、增加外周组织对胰岛素的敏感性、增加饱腹感以及对心血管和神经系统的保护作用。本研究胰高血糖素样多肽-1在2型糖尿病治疗中的运用。     

DJB术对2型糖尿病大鼠肠神经GLP-1受体表达影响的研究

目的 研究十二指肠空肠旁路手术(duodenal jejunal bypass,DJB)对2型糖尿病(T2DM)大鼠肠神经细胞胰高血糖素样肽-1受体(glucagon-like peptide-1 receptor,GLP-1R)表达的影响,探讨DJB手术后肠神经GLP-1R表达、血清GLP-1分泌变化与血糖的关系。方法 雄性Wistar大鼠随机分为4组,每组8只：Wistar 大鼠对照组(W-C);Wistar 大鼠DJB手术组(W-DJB);T2DM模型对照组(T2DM-C);T2DM+DJB手术组(T2DM-DJB)。分别测定各组大鼠术前及术后第1、4、8周空腹血糖、空腹GLP-1,术前及术后第8周空腹胰岛素水平。术后第8周处死大鼠,免疫荧光、RT-PCR检测回肠末端肠肌间神经丛GLP-1R表达变化。结果 T2DM-DJB组大鼠肠神经丛表达GLP-1R的细胞数目为15.83±2.23,明显高于T2DM-C组大鼠表达GLP-1R的细胞数目8.50±2.67(P＜0.01); GLP-1R mRNA在T2DM-DJB组大鼠肠神经丛表达水平为0.67±0.08,明显高于T2DM-C组大鼠GLP-1R mRNA的表达水平0.42±0.03(P＜0.01); T2DM-DJB组大鼠术后空腹血糖、空腹胰岛素显著降低(P＜0.01),空腹血清GLP-1显著升高(P＜0.01)。W-DJB组大鼠术后GLP-1R表达水平、空腹血糖、空腹胰岛素和空腹血清GLP-1与W-C组大鼠相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论 DJB手术能显著降低T2DM大鼠血糖,对正常大鼠无明显作用。     

肠道缺血再灌注后GLP-2对黏膜增殖的影响

目的观察胰高血糖素样肽-2(GLP-2)对小鼠肠道缺血再灌注后肠黏膜增殖的影响及机制。方法将30只ICR雄性小鼠随机分为空白对照组、实验对照组和治疗组。实验对照组和治疗组小鼠均制成肠道缺血再灌注模型。实验对照组予PBS液皮下注射,治疗组予GLP-2皮下注射。于术后第5d处死,行不同肠段黏膜形态学检测、细胞增殖核心抗原(PCNA)测定及原位末端标记(INST)染色。结果治疗组各肠段黏膜形态学指标均显著高于实验对照组和空白对照组(均P<0.05),尤以末端回肠为著(P<0.01);治疗组PCNA指数显著高于实验对照组(P<0.01);治疗组细胞凋亡显著低于实验对照组(P<0.01)。结论GLP-2能刺激小肠黏膜上皮增生,抑制凋亡,显著促进肠道缺血再灌注后的黏膜增殖修复。     

糖基化终产物对心肌细胞GLP-1受体表达及凋亡影响的研究

目的探讨糖基化终产物(AGEs)对乳鼠心肌细胞胰高血糖素样肽1受体(GLP-1R)、caspase-3表达及凋亡的影响。方法原代培养乳鼠心肌细胞,以不同浓度葡萄糖孵育的糖化清蛋白(AGE-BSA)干预24h和同一浓度葡萄糖孵育的AGE-BSA干预24～72h,检测其对心肌细胞GLP-1RmRNA、活化的caspase-3表达及凋亡的影响。结果 AGE-BSA可抑制心肌细胞GLP-1RmRNA表达,并诱导细胞caspase-3表达,凋亡增加。各AGE-BSA组间及与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 AGE-BSA能抑制心肌细胞GLP-1RmRNA表达,并诱导细胞caspase-3表达,增加细胞凋亡,提示糖基化终产物在糖尿病心肌病的发生中可能具有重要的作用。     

黄芩素对2型糖尿病小鼠GLP-1及胰高血糖素分泌的影响

【摘要】 目的 探讨黄芩素对2型糖尿病模型小鼠胰高血糖素样肽-1（GLP-1）及胰高血糖素分泌的影响。 方法 40只8周龄C57BL/6J小鼠适应性饲养1周后,选取30只小鼠给予高脂饲料喂养和链脲佐菌素（STZ）一次性注射,均成功建立2型糖尿病小鼠模型,并随机分为模型组（生理盐水灌胃）、二甲双胍组（二甲双胍0.30 g/kg灌胃）和黄芩素组（黄芩素250 mg/kg灌胃）,每组各10只。以正常饲料喂养的10只小鼠为正常对照组（正常组,生理盐水灌胃）。各组连续灌胃给药6周。分别于给药前和给药后采集尾尖静脉血,检测空腹血糖（FBG）、餐后2 h血糖值（2 h PBG）,酶联免疫吸附实验检测空腹胰岛素、胰高血糖素和GLP-1水平,qRT-PCR检测给药后小鼠回肠组织中胰高血糖素原（PG）和前激素转化酶（PC1/3） mRNA表达,给药结束后行腹腔注射葡萄糖耐量实验评估胰高血糖素分泌功能。 结果 给药前,与正常组比较,模型组、二甲双胍组和黄芩素组FBG和2 h PBG均显著升高,胰岛素水平显著降低,胰高血糖素水平显著升高,血清中GLP-1水平显著降低（均P＜0.05）;给药后,与模型组比较,二甲双胍组和黄芩素组FBG和2 h PBG均显著降低,胰岛素水平显著升高,胰高血糖素水平显著降低,血清中GLP-1水平显著升高（均P＜0.05）;给药后,与正常组比较,模型组小鼠回肠组织中PC1/3 mRNA相对表达量显著下降,与模型组比较,二甲双胍组和黄芩素组小鼠回肠组织中PG 、PC1/3 mRNA相对表达量均明显上升（均P＜0.05）;在葡萄糖注射后0 、30、60 和120 min,模型组血糖和胰高血糖素均显著高于正常组,二甲双胍组和黄芩素组血糖和胰高血糖素均显著低于模型组（均P＜0.05）。 结论 黄芩素可降低2型糖尿病小鼠血糖和胰高血糖素水平,提高血清GLP-1水平,促进肠道GLP-1的合成。     

胰高血糖素样肽-2对梗阻性黄疸时肠道屏障功能的影响

目的 探讨胰高血糖素样肽-2(GLP-2)对梗阻性黄疸模型大鼠肠道屏障功能的影响.方法 将72只SD大鼠随机分为3组:实验组(T组,n=24)、手术对照组(C组, n=24)和假手术组(SO组, n=24),T组和C组双重结扎胆总管,建立梗阻性黄疸模型,SO组开腹但不结扎胆总管;结扎后,T组腹腔注射GLP-2 250 μg/(kg·d),C组和SO组注射等体积0.01 mol/L的PBS溶液,于手术后第1、3、7 d分别分批处死动物.应用免疫组织化学方法检测肠黏膜增殖细胞核抗原(PCNA)和caspase-3的表达,并在光镜下观测HE染色切片肠绒毛高度.结果 C组肠黏膜PCNA的表达于术后逐渐减少,差异有统计学意义(P<0.05),且其表达量较SO组和T组减少(P<0.05),特别是第3、7 d时,比SO组和T组降低更明显(P<0.05);而C组caspase-3表达量增加显著,在术后各时间点与T组和SO组比较差异均有统计学意义(P<0.05),并且肠黏膜caspase-3的表达量在术后随时间逐渐增加(P<0.05),同时大鼠肠黏膜绒毛高度较SO组和T组变短(P<0.05),并随时间的延长逐渐缩短(P<0.05),但SO组和T组术后肠绒毛高度无明显差异.结论 GLP-2可以刺激梗阻性黄疸时肠黏膜细胞生长,促进黏膜细胞的增殖,阻止肠黏膜细胞的凋亡,起到了保护肠道屏障功能的作用.     

GLP-2对SAP大鼠肠黏膜屏障的保护作用

目的探讨胰高血糖素样肽-2(GLP-2)在重症急性胰腺炎(SAP)肠黏膜屏障中的保护作用。方法 SD大鼠30只,随机分为3组:假手术组、SAP组、GLP-2组。采用胰管逆行注射3%牛磺胆酸钠溶液制作SAP模型。GLP-2组在制作SAP模型后,皮下注射GLP-2 0.1mg/kg,连续注射3d。3d后处死大鼠。透射电子显微镜观察小肠黏膜改变,检测各组血浆二胺氧化酶(DAO)及内毒素(ET)水平。结果 SAP组大鼠小肠黏膜出现明显病理损害;与SAP组相比较,GLP-2组小肠黏膜损伤显著减轻。SAP组DAO及ET水平明显高于假手术组(P<0.05);与SAP组比较,GLP-2组DAO及ET水平明显低于SAP组(P<0.05)。结论 GLP-2对SAP大鼠肠黏膜屏障功能具有一定保护作用。     

腺病毒介导胰高血糖素样肽-1受体在小鼠骨髓间充质干细胞表达的体外研究

目的:观察腺病毒介导胰高血糖素样肽-1受体(GLP-1R)转染小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BM-MSCs)的表达情况及Exendin-4/GLP-1R系统对BM-MSCs细胞增殖及凋亡的影响?方法:利用Ad.Max系统构建含GLP-1R基因的腺病毒表达载体Ad.GLP-1R,感染小鼠BM-MSCs?采用RT-PCR?Western blot和免疫荧光方法检测GLP-1R的表达情况?用Exendin-4刺激感染Ad.GLP-1R的BM-MSCs,通过细胞计数和流式细胞术检测细胞生长曲线?细胞周期及细胞凋亡的变化?结果:腺病毒对小鼠BM-MSCs有较高的感染效率,病毒感染复数(MOI)为400时,感染率高达89.5%?BM-MSCs不表达GLP-1R,感染Ad.GLP-1R后有效表达GLP-1R基因和蛋白?Ad.GLP-1R感染BM-MSCs后,Exendin-4刺激组细胞生长曲线显著高于未刺激组(P < 0.05)?细胞周期检测结果显示,刺激组G0/G1期细胞数显著下降?G2/M期细胞数明显升高,增殖指数(S+G2/M)亦显著增加(P均 < 0.01)?而细胞凋亡率无明显变化?结论:Ad.GLP-1R可以有效感染BM-MSCs,获得高表达GLP-1R的BM-MSCs?Exendin-4可以促进Ad.GLP-1R感染的BM-MSCs增殖?     

胰高血糖素样肽-2对放射损伤小鼠肠上皮恢复的影响

目的：探讨胰高血糖素样肽－2对放射损伤小鼠肠上恢复的影响。方法：昆明种小鼠经8Gy^60 Co γ射线一次性全身照射后随机分为放射损伤对照组和胰高血糖素样肽－2处理组,检测小肠粘膜组织DNA和蛋白含量,光镜和扫描电镜观察肠上皮形态结构变化。结果：放射损伤小肠粘膜组织DNA和蛋白含量降低,肠绒毛高度下降、数量减少,部分绒毛顶端有糜烂缺损;胰高血糖素样肽－2处理可使肠粘膜组织DNA和蛋白含量降低,肠绒毛增长、数量增多,糜烂发生不明显。结论：胰高血糖素样肽－2可促进放射损伤小鼠肠上皮的恢复。     

糖尿病性心肌病患者GLP-1与C-反应蛋白的相关性分析

目的：通过观察糖尿病性心肌病患者的胰高血糖素样肽-1（GLP-1）与炎性因子的相关性,探讨其在糖尿病性心肌病发病机制中的作用.方法：测定50例糖尿病心肌病患者（实验组）和30例健康者（对照组）的血清GLP-1、超敏C反应蛋白（hs-CRP）、白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、血压、空腹血糖、餐后2h血糖（2hPG）、空腹血清胰岛素（FINS）,计算稳态模型评价胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）.结果：实验组空腹血糖、2hPG、收缩压、FINS、HOMA-IR、hs-CRP、IL-6和TNF-α均显著高于对照组（P〈0.05）,血清GLP-1显著低于对照组（P〈0.05）; GLP-1水平与hs-CRP（r=0.556,P=0.002）和HOMA-IR（r=0.445,P=0.007）呈显著负相关.结论：糖尿病性心肌病的发生发展是GLP-1、炎性因子、胰岛素抵抗等多因素综合作用的结果.     

人胰高血糖素样肽-1 cDNA的克隆与表达

目的：克隆人胰高血糖素样肽-1（hGLP-1)cDNA,构建原核表达质粒pGEX-4T-3/hGLP-1cDNA,并诱导表达谷胱甘肽疏基转移酶-hGLP-1(GST-hGLP-1)融合蛋白。方法：采用亚磷酸二酯法合成6个hGLP-1cDNA的寡核苷酸片段,拼接成完整的hGLP-1cDNA,克隆至pBSSK( /-)载体中,经双酶切鉴定和测序后把hGLP-1cDNA定向插入融合基因表达体pGEX-4T-3的多克隆位点上,构建重组质粒pGEX-4T-3/hGLP-1cDNA,并转化大肠杆菌TG1。结果：经限制性内切酶合蛋白GST-hGLP-1,为进一步获得大量可供实验研究和临床应用的重组hGLP-1创造条件。     

GLP-1重组减毒沙门菌对2型糖尿病小鼠的血糖调控作用

目的 观察重组减毒沙门菌作为胰高血糖素样肽-1(GLP-1)的基因载体,对2型糖尿病小鼠的血糖调控作用.方法 高脂饲料饲喂4周后予以链脲佐菌素(STZ)腹腔注射构建KM种小鼠2型糖尿病模型,小鼠分为4组,每组10只,即:正常组、模型组、空载组及治疗组,分别予以:5% NaHCO3、5% NaHCO3、同等剂量的空载减毒沙门菌及GLP-1重组减毒沙门菌灌胃治疗,观察并记录治疗前后第0、7、14、21、28天的空腹血糖值及进食量、饮水量、体重变化,分别于治疗后第14天及第28天行口服葡萄糖耐量试验(OGTT).取小鼠胰腺组织,采用HE染色法观察各组小鼠的胰腺组织形态学变化.结果 GLP-1重组减毒沙门菌灌胃治疗后,模型组小鼠空腹血糖水平较正常组升高,差异有统计学意义(P<0.01),空载组空腹血糖与模型组比较,差异无统计学意义,治疗组空腹血糖与空载组比较降低,差异有统计学意义(P<0.01),糖尿病小鼠体重变化有明显改善(P<0.01),多饮多食症状好转;第14天及第28天OGTT示:空载组血糖与模型组比较,差异无统计学意义,治疗组血糖较空载组降低,差异有统计学意义(P<0.01).胰腺HE染色结果示,空载组与模型组比较,无明显变化,治疗组与空载组比较有明显改善.结论 GLP-1重组减毒沙门菌能够改善2型糖尿病小鼠多饮、多食、体重下降等症状,降低血糖,改善胰岛形态学变化,对2型糖尿病小鼠具有一定的治疗作用.     

人胰高血糖素样肽-1突变体基因的构建和表达

目的构建人胰高血糖素样肽-1突变体（^2Gly-hGLP-1）基因，并表达GST一^2Gly-hGLP-1。方法用限制性内切酶双酶切载有hGLP cDNA的重组克隆质粒PMD18T simple和原核表达质粒pGEX-4T-1，将GLP-1定向插入原核表达载体pGEX-4T-1^＊中，筛选出阳性克隆。在获得重组hGLP-1基因工程菌的基础上，利用定向突变的技术改造其第2位丙氨酸为甘氨酸，经酶切克隆于pGEX-4T-1^＊中，构建pGEX-4T-1^＊／^2Gly-hGLP-1表达载体。转化大肠杆菌BL21并进行诱导表达。结果经测序分析，证明^2Gly-hGLP-1已经克隆到pGEX-4T-1^＊中。Western blot证实，该蛋白可被特异性hGLP-1识别。结论成功构建和表达了人胰高血糖素样肽-1突变体原核表达质粒。     

GLP-1受体激动剂治疗2型糖尿病的研究进展

胰高血糖素样肽-1是分泌自L细胞的激素,刺激胰岛素分泌。其受体激动剂是对2型糖尿病极有前景的治疗。为总结其作用特点和临床效果,通过查阅国内外文献,分析胰高血糖素样肽-1受体激动剂的治疗优点。临床试验证明了胰高血糖素样肽-1受体激动剂在控制血糖、糖化血红蛋白等方面的疗效。胰高血糖素样肽-1是对2型糖尿病即安全又有效的治疗手段,将对2型糖尿病的防治起到重要作用。