槲寄生抗实验性心律失常的作用

目的 研究槲寄生抗实验性心律失常的作用及其机制.方法 采用氯仿致小鼠室颤,观察室颤的发生率.大鼠舌静脉注射氯化钡,建立心律失常动物模型,观察心律失常的发生时间、持续时间.结扎大鼠左冠状动脉,建立心肌缺血再灌注损伤心律失常模型,观察室性早搏(VP)发生数及VP、室性心动过速(VT)、心室颤动(VF)的发生时间,心律失常持续时间和心率变化.舌静脉注射乌头碱诱发大鼠心律失常,观察VP 的发生时间、VT 、VF的发生时间以及动物死亡数.结果 槲寄生能降低氯仿诱发的小鼠VF发生率(P<0.05,P<0.01); 能明显延迟氯化钡诱发大鼠心律失常的发生时间,并缩短持续时间(P<0.05,P<0.01);能减少大鼠冠状动脉结扎诱发的VP发生频率和缩短心律失常时间(P<0.05,P<0.01);能延迟大鼠冠状动脉结扎诱发的VP、VT、VF出现时间和减少前后心率变化的幅度(P<0.05,P<0.01);能延迟乌头碱诱发大鼠VP、VT VF的发生时间以及减少动物死亡数(P<0.05,P<0.01).结论 槲寄生对氯仿诱发的小鼠VF、氯化钡诱发的大鼠心律失常、心肌缺血再灌注引起的大鼠心律失常以及乌头碱诱发的大鼠心律失常均有明显的对抗作用.     

盐酸小檗碱对大鼠心肌梗死模型心室重塑的作用研究

目的:研究盐酸小檗碱对大鼠心肌梗死(心梗)模型心室重塑的作用并探讨其机制。方法:采用冠状动脉结扎法复制大鼠心梗模型,建好模型随机分为两组,心梗对照组和盐酸小檗碱组,同时设立假手术组。盐酸小檗碱组大鼠每日灌胃给予盐酸小檗碱20 mg/kg,假手术组和心梗对照组每日给予同等剂量生理盐水。8 W后超声心动图检测大鼠心功能和心脏结构,马松(Masson)染色法检测心肌间质胶原容积分数,Tunel法检测心肌细胞凋亡情况,并检测心肌细胞核因子-κB活化情况。结果:超声心动图检测结果显示,心梗对照组与假手术组相比,左心室舒张末期内径(LVDd)扩大[(7.28±0.29)mm比(6.86±0.36)mm,P0.05]、左心室收缩末期内径(LVDs)扩大[(5.88±0.33)mm比(4.61±0.31)mm,P0.01]、左心室后壁收缩末期厚度(LVPWTs)增厚[(1.81±0.85)mm比(1.67±0.16)mm,P0.05],左心室射血分数(LVEF)下降[(45.77±3.17)%比(67.28±4.15)%,P0.01];盐酸小檗碱组与心梗对照组相比:LVDs[(4.68±1.17)mm]缩小,LVPWTs[(1.65±0.14)mm]下降,LVEF[(64.64±5.82)%]增加,差异均有统计学意义(P均0.01);而LVDd[(6.89±0.99)mm]缩小,差异无统计学意义(P0.05)。Masson染色结果显示,心梗对照组与假手术组相比,胶原容积分数增加[(11.39±0.45)%比(2.65±0.45)%,P0.01],盐酸小檗碱组[(7.00±0.87)%]较心梗对照组减少(P0.01)。Tunel实验结果显示,心梗对照组与假手术组相比,心肌细胞凋亡指数增加(21.31±2.34比0.99±0.38,P0.01),盐酸小檗碱组(14.15±1.62)较心梗对照组减少(P0.01)。核因子-κB活化情况检测结果示,术后8 W时,心梗对照组与假手术组相比,细胞核内的p65含量增加[(0.14±0.02)ng/ml比(0.06±0.01)ng/ml],盐酸小檗碱组[(0.10±0.02)ng/ml]较心梗对照组减少。差异均有统计学意义(P0.01)。结论:盐酸小檗碱可改善大鼠心梗模型心室重塑和心功能,其机制考虑与其部分抑制心肌细胞核因子-κB活化、降低非心梗区心肌间质胶原沉积、抗心肌细胞凋亡有关。     

脂联素降低右侧星状神经节活性抑制心肌梗死后室性心律失常

目的探究脂联素对右侧星状神经节(RSG)功能与神经活性,对右心室电生理状态的影响;探究脂联素对于心肌梗死(心梗)后室性心律失常的防治作用。方法16只成年雄性比格犬随机数字表法分为对照组(n=8)与脂联素组(n=8),分别向RSG中注射生理盐水0.2 ml与0.1 mg/ml脂联素0.2 ml。结扎冠状动脉左前降支进行心梗造模。检测基础状态与心梗后RSG功能与神经活性,右心室有效不应期,记录心梗后30 min心电图分析室性心律失常情况并测量心室颤动(室颤)阈值。实验结束后取RSG进行免疫荧光染色。结果与对照组相比,脂联素抑制心梗后RSG激活(P<0.05),抑制心脏交感神经活性增强(P<0.05)。脂联素改善心梗后右心室各部位有效不应期缩短(P<0.05),减少室性心律失常发生[室性早搏(117.5±7.4)次对(87.0±6.5)次;室性心动过速(室速)(12.0±1.7)阵对(2.3±0.9)阵;室速持续时间(11.1±1.9)s对(3.4±0.9)s,均P<0.05],升高室颤阈值[(5.5±1.3)V对(10.0±1.4)V,P<0.05]。脂联素降低交感神经中即刻早期基因含量[(80.0±5.0)%对(8.8±4.8)%,P<0.05],改善心梗后RSG神经重构。结论脂联素降低心梗后RSG神经活性,抑制室性心律失常发生。     

别隐品碱抗心律失常作用及其单相动作电位的作用

目的观察别隐品碱（ALL）的抗动物心律失常作用。方法以氯仿诱发小鼠室颤、以CaCl2-ACh混合液诱发小鼠心房纤颤、肾上腺素致豚鼠心律失常，以乌头碱诱发的豚鼠左室乳头肌收缩节律改变，选择大鼠结扎冠状动脉前降支，观察ALL抗心律失常的效应。记录豚鼠和大鼠心脏的动作电位和单相动作电位。结果ALL能明显降低氯仿诱发小鼠室颤率，应用30，100mg／kg的ALL后，CaCl2-ACh混合液诱发小鼠心房纤颤或扑动的发生率从100％降低到53．3％和33．3％。ALL使肾上腺素致豚鼠心律失常的持续时间降低，并对乌头碱诱发的大鼠心室乳头肌收缩节律失常有明显拮抗效应。ALL可明显延长其心脏的动作电位时程和不应期，这可能是其抗心律失常效应的电生理基础。结论ALL呈现出多种抗实验性心律失常的作用。     

槐果碱抗缺血性心律失常的作用机制

目的 探讨槐果碱抗心律失常作用的可能机制.方法 实验分为假手术组、模型组、胺碘酮组及不同剂量槐果碱组,连续灌胃7d,采用左冠状动脉结扎术诱发SD大鼠致心律失常.分别连续观察造模前、造模后即刻及造模后24hⅡ导联心电图30 min,记录室性异搏数、室速时程、室颤出现率、心律失常出现时间、心律失常持续时间.然后股动脉采血,分离血清,测定乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB).结果 ①与假手术组比较,模型组LDH、CK-MB均明显升高(P＜0.01).与模型组相比,胺碘酮组、槐果碱中剂量组、槐果碱大剂量组LDH明显降低,CK-MB也明显降低(P＜0.05,P＜0.01);②模型组大鼠室速和室颤程度比假手术组明显加重(P＜0.05),槐果碱大剂量和中剂量组心律失常程度较模型组显著减轻(P＜0.05),并呈剂量依赖性,槐果碱小剂量组心律失常评分与模型组无显著性差异.结论 槐果碱可以通过降低心肌缺血大鼠LDH、CK-MB含量,减少心肌细胞损伤,并具有抗心律失常作用.     

非酒精性脂肪性肝炎大鼠模型中小檗碱抗氧化效应的观察

目的利用大鼠NASH模型及H2O2诱导氧化应激体外模型观察小檗碱的抗氧化效果。方法建立高脂饮食诱导大鼠NASH模型,给予小檗碱18 mg·kg-1·d-1灌胃治疗3周后,HE染色观察肝组织病理学改变,测定肝组织超氧化物歧化酶(GSH)、还原型合胱甘肽(SOD)活性和丙二醛(MDA)水平。建立H2O2诱导活性氧自由基(ROS)产生的氧化应激体外模型,流式细胞技术观察细胞内ROS水平,检测肝细胞内SOD、GSH、LDH和CAT的活性。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用Bonferroni检验;2组间比较采用t检验。结果经小檗碱治疗后,NASH大鼠肝组织炎性细胞浸润范围、灶状坏死和肝细胞气球样变可得到明显改善。同时肝组织GSH和SOD活性治疗组较模型组明显升高[(29.8±2.4)U/mg vs(19.9±1.3)U/mg,(26.6±1.9)μg/mg vs(19.7±1.4)μg/mg,P值均0.001],MDA水平治疗组较模型组明显降低[(19.8±1.5)nmol/mg vs(24.0±2.0)nmol/mg,P0.001]。在H2O2诱导氧化应激的体外模型中,发现H2O2组细胞内的ROS水平较小檗碱+H2O2组明显升高[(69.8±1.9)%vs(50.4±6.5)%,t=24.42,P=0.008]。同时小檗碱+H2O2组肝细胞内SOD和GSH的活性较H2O2组明显增加[(25.5±1.3)μg/mg vs(18.8±1.0)μg/mg,(27.1±0.6)U/mg vs(16.79±3.8)U/mg,P值均0.001),LDH水平在小檗碱+H2O2组和H2O2组间变化不明显(P=0.103),而CAT的活性在各组间的变化差异无统计学意义(F=3.76,P=0.060)。结论从体内和体外模型同时证明小檗碱有明显的抗氧化作用,其作用机制可能与其增加抗氧化酶的活性有关。     

肾素-血管紧张素系统阻断剂对老年高血压异位心律的作用研究

目的 观察肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensin system,RAS)阻断剂对室性或室上性异位心律的影响及作用.方法 将209例老年高血压患者随机分为RAS阻断剂组(n=111)和常规治疗组(n=98).两组均接受常规抗心律失常治疗;RAS阻断剂组联合RAS阻断剂血管紧张素转换酶抑制剂或血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂.治疗前后24h动态心电图监测室性早搏(premature ventricular contractions,PVC)频率、室上性早搏(premature supraventricular contractions,PSVC)频率、短阵室性心动过速(ventricular tachycardia,VT)阵数或室上性心动过速(supraventricular tachycardia,SVT)阵数,比较治疗前后异位心律的频率.结果 治疗后常规治疗组与RAS阻断剂组24 h PVC频率均降低,常规治疗组[(6159.04±1435.00)vs(3979.25±1205.37),P＜0.05];RAS阻断剂组[(6479.55±1344.21)vs (3123.52±1876.19),P＜0.05].VT阵数也有所下降,常规治疗组[(17.85±3.98)vs(13.12 ±8.4),P＜0.05];RAS 阻断剂组[(19.44±8.18)vs(7.69±3.07),P＜0.05].RAS阻断剂组和常规治疗组PVC频率和VT阵数变化率分别为[(61.70±24.96)％ vs(41.79±16.26)％,P＜0.05]和[(82.17±37.15)％ vs (43.12±83.32)％,P＜0.05].治疗后RAS阻断剂组24h PSVC频率[(378.66±112.44)vs(99.01±78.24),P＜0.05]和SVT阵数[(21.41±2.97)vs (8.92±4.30),P＜0.05)均减少.常规治疗组治疗后SVT阵数减少[(17.85±3.98)vs (13.36±5.17),P＜0.05),而24h PSVC频率轻度增加[(359.33±141.09)vs(396.95±192.1),P＞0.05].RAS阻断剂组和常规治疗组室上性异位心律变化率分别为[(66.60±40.22)％ vs(-8.72±16.23)％,P＜0.05]和[(46.48±16.23)％ vs (13.69±21.33)％,P＜0.05].RAS阻断剂组和常规治疗组治疗前后平均每小时异位心律频率均减少[(699.20±309.93) vs(211.05±139.22),P＜0.05]和[(708±203.77)vs(369.31±95.64),P＜0.05],RAS阻断剂组和常规治疗组变化率为[(59.15±22.03)％vs (22.77±23.64)％,P＜0.01].结论 RAS阻断剂对老年高血压患者室性及室上性异位心律有一定抑制作用.     

小檗碱对2型糖尿病地鼠脂肪组织肝X受体通路表达的影响

目的观察小檗碱对T2DM地鼠脂肪组织肝X受体(LXR)及其靶基因表达的影响。方法以高脂饮食结合小剂量STZ的方法建立IR及T2DM地鼠模型。成模后随机分成正常对照(Con)组、IR组、T2DM组、小檗碱治疗(BBR)组,治疗9周。结果与T2DM组相比,BBR组FPG[(13.10±0.93)vs(6.19±0.84)mmol/L]、OGTT 2hPG[(15.49±1.31)vs(8.83±1.28)mmol/L]、HOMA-IR[(14.80±2.10)vs(7.40±1.40)]降低(P0.05);RT-PCR结果提示,LXRα[(-5.56±-1.23)vs(3.29±0.68)]、LXRβ[(3.09±0.45)vs(-5.49±-0.95)]基因表达上调,并伴随着LXR靶基因表达的改变(P0.05);Western blot结果提示,LXRα[(0.11±0.03)vs(0.68±0.12)]、LXRβ[(0.13±0.03)vs(0.70±0.14)]蛋白表达上调(P0.05)。结论 LXR及其靶基因参与小檗碱治疗T2DM地鼠脂诱性脂肪组织IR的分子机制。     

骨髓间充质干细胞对大鼠梗死心肌胶原重构的双重调节作用

目的 探讨骨髓间充质干细胞(MSC)对梗死心肌胶原重构的调节作用。方法 采用结扎冠状动脉前降支的方法复制大鼠心肌梗死(MI)模型,随机分为假手术组（仅穿线不结扎冠状动脉,n=8）、MI+ PBS组（结扎冠状动脉+心肌注射PBS溶液,n=8）和MI+ MSC组（结扎冠状动脉+心肌注射MSC,n=8）。通过心脏超声检查、血液动力学检查和组织学染色方法分别检测左心室射血分数(LVEF)、短轴缩短率(FS)、左心室收缩末压力(LVSP)、左心室舒张末压力(LVEDP)、左心室压最大升降速率（±dp/dtmax）、心肌梗死面积和梗死扩张指数等指标,评价MSC对大鼠心功能及心室重构的影响。同时采用免疫组化、RT-PCR、Western blot等方法,测量胶原蛋白表达情况。结果 (1)MI大鼠心室重构和心脏功能指标的检测结果：MI+ MSC组大鼠心肌梗死面积显著小于MI+ PBS组[(38.27±2.70)％比(46.20±3.17)％,t=5.386,P＜0.001],FS显著高于MI+ PBS组[(29.98±4.50)％比(23.43 ±3.34)％,t=-3.305,P=0.005],LVSP显著高于MI+ PBS组[(113.63±10.81)mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)比（99.25±16.76）mm Hg,P＜0.05],LVEDP显著低于MI+PBS组[(12.10±4.28) mm Hg比(20.08±4.26) mm Hg,P＜0.05],+dp/dtmax显著高于MI+ PBS组[（4616.63±363.34）mum Hg/s比(3912.75±248.79) mm Hg/s,P＜0.05],- dp/dtmax显著高于MI+ PBS组[(4254.63±324.34) mm Hg/s比（3530.88±309.71）mm Hg/s,P＜0.05]。(2)Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达水平的检测结果：MI+ MSC组大鼠梗死区Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达均显著高于MI+ PBS组,而非梗死区Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达均显著低于MI+ PBS组（P均＜0.05）。结论 MSC通过促进MI大鼠梗死区胶原蛋白修复性合成,减少非梗死区胶原蛋白沉积,从而抑制心室重构,改善心脏功能。     

交感神经刺激对大鼠缺血性室性心律失常的影响及其机制的探讨

目的 探讨大鼠急性心肌缺血时交感神经刺激对室性心律失常的影响及其潜在的机制.方法 结扎大鼠冠状动脉前降支制备急性心肌缺血模型后随机分组作为心肌缺血组(MI组,n=25)、缺血+交感神经刺激组(MI-SS组,n=25)、交感神经刺激+酚妥拉明+缺血组(MI-SS-Phen组,n=15)、交感神经刺激+普萘洛尔+缺血组(MI-SS-Prop组,n=15)和假手术组(SO组,n=20).心电图监测室性心律失常的发生.蛋白免疫印记法(Western blot)检测缝隙连接蛋白43(Cx43)的磷酸化蛋白及总量表达变化.逆转录聚合酶链反应(PCR)分析Cx43 mRNA的表达变化.免疫荧光观察Cx43表达分布情况.结果 结扎冠状动脉30 min内MI、MI-SS和MI-SS-Phen组分别有1、3和2只大鼠死于心室颤动(室颤);MI-SS组室性心动过速(室速)/室颤发生率(80.0%,20/25)较MI组(52.0%,13/25)明显增加(P＜0.05);与MI-SS组相比,普萘洛尔明显阻断了交感神经刺激促室速/室颤发生的作用(13.3%,2/15,P＜0.05).冠状动脉结扎30 min后,MI组磷酸化Cx43的比例较SO组显著降低(P＜0.05),但其总量并未减少(P＞0.05).与MI组相比,MI-SS组磷酸化Cx43的比例明显增加(P＜0.05),同时其蛋白总量的表达显著降低(P＜0.05);普萘洛尔显著抑制了交感神经刺激导致的Cx43蛋白降解的作用,同时抑制了缺血引起的Cx43脱磷酸化(P＜0.05).MI和MI-SS组Cx43mRNA表达均较SO组显著减少(P＜0.05).免疫荧光结果 显示,与SO组相比,MI组Cx43由端-端连接转化为侧-侧连接,而MI-SS组Cx43分布明显紊乱,不能分辨出Cx43的分布模式.结论 交感神经刺激能够促进室性心律失常的发生,可能主要与β肾上腺素受体的激活从而促进了Cx43的降解有关.     

缝隙连接蛋白43在老年大鼠缺血性室性心律失常中的作用

目的 探讨缝隙连接蛋白43(Cx43)在老年大鼠心室肌中的表达及急性心肌缺血时迷走神经刺激对老年大鼠缺血性室性心律失常的影响.方法 结扎大鼠冠状动脉前降支制备急性心肌缺血模型,随机分为(1)成年组:假手术组(SO,n=10)、心肌缺血组(MI,n=15)、心肌缺血+迷走神经刺激组(MI-VNS,n=15)、心肌缺血+迷走神经刺激+阿托品(0.5 mg/kg)组(MI-VNS-Atr,n=13)和心肌缺血+迷走神经刺激+生胃酮(10 mg/kg)组(MI-VNS-CBX,n=11).(2)老年组:假手术组(SO,n=10)、心肌缺血组(MI,n=15)、心肌缺血+迷走神经刺激组(MI-VNS,n=15)、心肌缺血+迷走神经刺激+阿托品(0.5 mg/kg)组(M1-VNS-Atr,n=13)和心肌缺血+迷走神经刺激+生胃酮(10 mg/kg)组(MI-VNS-CBX,n=11).心电图监测室性心律失常的发生.Western blot分析Cx43蛋白表达变化.结果 结扎冠状动脉30 min内,老年MI组室性心动过速(室速)和心室颤动(室颤)发生率较成年MI组显著增加(P＜0.05);老年MI-VS组室速和室颤发生率与老年MI组相比差异无统计学意义(P＞0.05),但老年MI-VS组不可逆性室颤发生率较老年MI组明显减少(P＜0.05).冠状动脉结扎30 min后,缺血没有引起成年组和老年组的总Cx43含量改变(P＜0.05);但缺血引起成年组和老年组的非磷酸化Cx43含量明显增加,迷走神经刺激能够明显抑制成年组和老年组中缺血引起的Cx43脱磷酸化(P＜0.05);而阿托品和生胃酮明显阻断了迷走神经刺激抑制缺血引起的Cx43脱磷酸化的作用(P＜0.05).但实验发现老年SO组Cx43表达较成年SO组明显减少(P＜0.05).结论 老年大鼠缺血性室性心律失常发生率明显增加,而迷走神经刺激的抗缺血性室性心律失常的效应明显减弱,其机制可能与老年大鼠心室肌Cx43表达较成年大鼠明显减少有关.     

小檗碱干预Wnt通路抑制Apc(Min/+)小鼠息肉生长的研究

目的 观察小檗碱防治家族性腺瘤性息肉病(FAP)动物模型Apc(Min/+)小鼠息肉生长的疗效并探讨其可能的分子机制.方法 将16只4周龄Apc(Min/+)小鼠均分为对照组(不予处理)和小檗碱组(剂量为150 mg· kg-1·d-1).12周后处死小鼠,记录小鼠肠道息肉数量、大小及分布.免疫组织化学染色法检测小鼠肠道息肉中增殖细胞核抗原(PCNA)、β-链蛋白和细胞周期素D1的表达情况.Western印迹法检测小鼠肠道细胞周期素D1的表达情况.两组间比较行独立样本t检验.结果 小檗碱组小肠及结肠息肉总数较对照组减少66 ％(10.38±1.85比30.50±1.73,t=16.727,P＜0.01).小檗碱组息肉最大径[(1.08±0.65) mm]小于对照组[(1.54±0.62) mm,t=2.114,P=0.041].小檗碱组小鼠肠道息肉中PCNA阳性细胞比例(44.60％±2.88％)较对照组(65.80％±3.27％)减少32％(t=10.875,P＜0.01),β-链蛋白染色异常细胞比例(43.20％±1.63％)较对照组(63.00％±3.08％)减少31％(t=13.956,P＜0.01),细胞周期素D1阳性细胞比例(24.80％±3.11％)较对照组(54.40％±3.78％)减少54％(t=13.510,P＜0.01).小檗碱组肠道细胞周期素D1蛋白表达水平低于对照组.结论 小檗碱可通过干预Wnt通路抑制Apc(Min/+)小鼠肠道息肉的生长,可能成为FAP化学预防的备选药物.     

阿托伐他汀对糖尿病心肌梗死大鼠视网膜及心肌血管新生双向性研究

目的探讨阿托伐他汀对糖尿病心肌梗死大鼠视网膜心肌血管新生的双向性作用及机制。方法雄性SD大鼠80只,随机分为3组。正常组30只,心梗组(AMI组)25只,糖尿病心梗组(AMI+DM组)25只。通过结扎前降支建立心肌梗死模型,腹腔注射链脲佐菌素65 mg/kg建立糖尿病模型。糖尿病心肌梗死模型以结扎前降支先建立心肌梗死模型再腹腔注射脲佐菌素建立糖尿病模型,造模成功后,开始以2.5 mg/250 g剂量阿托伐他汀溶液灌胃,正常组以同等剂量生理盐水灌胃,大鼠分别于4个月时按比例随机处死。取心脏、视网膜做免疫组化观察心肌组织、视网膜血管内皮生长因子(VEGF)蛋白的表达情况。结果 AMI组心肌细胞VEGF表达高于正常组心肌细胞VEGF表达[(7158.4±525.2) vs.(3263.5±454.5)ng/L],AMI+DM组VEGF表达也高于正常组[(7058.4±435.7) vs.(3263.5±454.5)ng/L],差异均有统计学意义(P0.05);AMI+DM组视网膜VEGF表达低于正常组VEGF表达[(2671.2±424.1)vs.(3345.5±321.5)ng/L],也低于AMI组[(2671.2±424.1)vs.(3097.5±310.7)ng/L],差异均有统计学意义(P0.05)。结论他汀类药物能够在促进心肌梗死心肌VEGF蛋白表达的同时抑制糖尿病大鼠视网膜VEGF表达,在延缓视网膜病变进展的同时促进梗死心肌部位血管新生。     

山莨菪碱对兔缺血再灌注后心室肌细胞L-钙离子通道电流的影响

目的研究山莨菪碱对兔在体缺血再灌注后心室肌细胞L-钙离子通道电流的影响,探讨山莨菪碱抗再灌注心律失常的细胞学离子机制。方法 45只新西兰大耳白兔按随机数字表法随机分为3组:缺血再灌注动物模型组(I-R组,结扎冠状动脉左前降支30min后再开放120min);山莨菪碱治疗组(Ani组,手术前1min给予动物耳缘静脉注射山莨菪碱5mg/kg);假手术对照组(只开胸不结扎血管)。采用酶解的方法分离缺血部位心室肌外膜单个心室肌细胞,应用全细胞膜片钳技术记录L-钙离子通道电流。结果 (1)I-R组、Ani组室性心动过速和心室颤动发生率均比对照组高,差异有统计学意义(P0.05);Ani组室性心动过速和心室颤动发生率明显低于I-R组,差异有统计学意义(26.7%(4/15)vs.40%(6/15),P0.05;6.7%(1/15)vs.26.7%(4/15),P0.05)。与对照组比较,I-R组心律失常评分升高,差异有统计学意义[(3.6±0.8)分vs.(1.1±0.3)分,P0.01];Ani组心律失常评分差异无统计学意义[(2.6±0.7)分vs.(1.1±0.3)分,P0.05]。(2)I-R组电流密度峰值(0mV)较对照组显著升高,差异有统计学意义[(-4.34±0.92)pA/pFvs.(-3.13±1.22)pA/pF,P0.05];Ani组电流密度峰值较I-R组明显下降,差异有统计学意义[(-3.25±0.79)pA/pFvs.(-4.34±0.92)pA/pF,P0.05]。Ani组电流密度峰值与对照组比较,差异无统计学意义[(-3.25±0.79)pA/pFvs.(-3.13±1.22)pA/pF,P0.05]。结论山莨菪碱可逆转缺血再灌注心室肌细胞的电重构,这可能是其降低心律失常发生率的细胞学离子机制。     

CaN抑制剂对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

目的 观察CaN抑制剂FK506对大鼠心肌缺血再灌注(I/R)心律失常和心肌梗死面积的影响,探讨CaN抑制剂在I/R损伤中所起的作用.方法 取Wistar大鼠40只,随机分成4组:假手术组,FK506假手术组,I/R损伤模型组,FK506干预组(0.05 mg/kg).观察各组I/R平均动脉压、心率、心律失常、血清心肌酶、心肌梗死面积.结果 I/R损伤模型组和FK506干预组平均动脉压分别为(66.50±9.79)mmHg、(80.33±7.37)mmHg,两组与基础平均动脉压[(84.67±6.80)mmHg]比较,FK506可以减少缺血期平均动脉压下降,差异具有统计学意义(P＜0.05);I/R损伤模型组和FK506干预组室性早搏的总数分别(508±196)次、(227±169)次,室速持续时间分别为(37.5±12.7)s、(8.7±9.8)s,室颤持续时间分别为(16.5±9.6)s、(9.1±9.1)s,两组比较,FK506可减少心律失常发生率,显著缩短心律失常持续时间,降低室颤发生率和死亡率,差异具有统计学意义(P＜0.05);I/R组和干预组CK值分别为(3 571±601)U/I、(3 132±692)U/I,与假手术组(941±449)U/I比较,差异具有统计学意义(P＜0.05);两组LDH值分别为(6 878±703)U/I、(4 851±672)U/I,与假手术组(3 283±1 097)U/I比较,差异具有统计学意义(P＜0.05);I/R组和干预组梗死区占缺血区面积分别为(64.4±9.5)%、(49.8±4.1)%,两组比较,FK506可明显减小缺血再灌注心肌梗死面积,差异具有统计学意义(P＜0.01).结论 FK506对大鼠心肌缺血再灌注损伤具有保护作用.     

神经调节蛋白-1对大鼠心肌缺血/再灌注损伤保护作用的研究

目的:探讨神经调节蛋白-1(NRG-1)对大鼠心肌缺血/再灌注(I/R)损伤的保护作用及其潜在机制。方法:雄性,SD大鼠,分三组:假手术组(n=8)、心肌(I/R)组(n=8)和NRG-1+I/R组(n=9)。通过结扎冠状动脉左前降支45 min,再灌注3 h建立在体大鼠心肌I/R模型。用伊文氏蓝/2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色法测定心肌梗死范围。用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的d UTP缺口末端标记法(TUNEL)染色法检测心肌细胞凋亡指数;免疫荧光法测定线粒体膜电位水平;用Western blot方法检测线粒体细胞色素c的转位、凋亡相关因子Bcl-2和Bax的表达;caspase 3试剂盒检测caspase 3活性;用透射电镜观察心肌组织线粒体超微结构。结果:与假手术组相比,I/R组心肌细胞凋亡显著增加[(23.2±3.8)vs.(3.0±1.3)%,P0.01],心肌线粒体膜电位降低[(209.1±13.6)vs.(336.8±10.3)m V,P0.05],细胞色素c向胞浆发生转位,caspase 3活性显著升高[(20.1±3.6)vs.(8,3±1.5),P0.01]。与单纯I/R组比较,NRG-1给药显著降低I/R大鼠心肌的梗死面积/危险区面积[(28.6±9.2)vs.(51.7±7.8)%,P0.01],减少心肌细胞凋亡指数[(11.9±3.5)vs.(23.2±3.8)%,P0.01],升高Bcl-2/Bax蛋白表达比值[(1.647±0.172)vs.(0.490±0.080),P0.01],升高线粒体膜电位[(327.2±15.4)vs.(209.1±13.6)m V,P0.05],抑制细胞色素c向胞浆的转位[(0.207±0.055)vs.(0.483±0.075),P0.01],降低心肌caspase 3活性[(9.3±2.6)vs.(20.1±3.6),P0.01],改善线粒体超微结构。结论:NRG-1具有抗心肌I/R损伤的保护作用,其机制部分通过抑制线粒体介导的心肌细胞凋亡途径实现。     

缝隙连接阻滞剂heptanol对缺血所致室性心律失常的影响

目的 观察缝隙连接阻滞剂heptanol对局部心肌缺血性室性心律失常发生率的影响,并探索可能的作用机制.方法 结扎离体SD大鼠冠状动脉前降支,造成左心室前壁局部缺血.观察不同浓度heptanol对缺血所致室性心律失常发生率的影响.记录在0、缺血10、20及30 min各时间点动作电位复极90%时限(MAPD90)、心率、PR间期以及QT间期的变化.结果 heptanol可以明显降低由于缺血引起的室性心动过速(室速)和心室颤动(室颤,缺血组45%;0.1 mmol组10%;0.3 mmol组0;0.5 mmol组0;P＜0.05).heptanol可以降低心率,延长PR间期、QT间期和MAPD90.结论 heptanol可以减少由于局部缺血引起的室速和室颤发生率,这种作用可能与其降低心肌电传导有关.     

重组人肿瘤坏死因子受体融合蛋白对大鼠急性心肌梗死室性心律失常的影响

目的:通过大鼠急性心肌梗死(AMI)模型探讨重组人肿瘤坏死因子受体融合蛋白(rhTNFR:Fc)对AMI室性心律失常发生的影响.方法:将240只大鼠随机分为假手术组(Sham组)、AMI组和rhTNFR:Fc组.Sham组开胸后不结扎冠状动脉;AMI组开胸后结扎冠状动脉左前降支(LAD),建立AMI模型;rhTNFR:Fc组结扎LAD前24 h腹腔注射rhTNFR:Fc.于结扎前10 min和结扎后10 min、20 min、30 min、60 min、3 h、6 h、12 h,记录心电图,观测程序刺激诱发的室性心律失常;通过免疫组化法检测各时间点各组心肌TNF-a的表达水平.结果:AMI组和rhTNFR:Fc组结扎后10 min即可诱发室性心律失常,30 min内诱发性室性心律失常的发生最频繁,峰值在15～25 min,以后逐渐减少,1 h后很少能诱发;急性缺血心肌TNF-a分泌的时间窗规律与上述基本一致.rhTNFR:Fc组心肌检测出的TNF-a及室性心律失常发生次数均明显少于AMI组(P＜0.05).Sham组无明显变化.结论:rhTNFR:Fc能明显降低大鼠AMI室性心律失常的发生.     

小檗碱对胰岛素抵抗大鼠肝脏葡萄糖激酶及其调节蛋白的影响

目的:研究小檗碱对胰岛素抵抗大鼠肝脏葡萄糖激酶(GK)活性及肝脏GK与葡萄糖激酶调节蛋白(GKRP)表达的影响.方法:选用♂Wistar大鼠,以高脂高热量饲料喂养8 wk,复制胰岛素抵抗大鼠模型,成模后随机分成模型组、小檗碱组、二甲双胍组,各药干预4 wk后,比较各组大鼠胰岛素敏感性、肝糖原、肝脏GK活性、肝脏GK与GKRP蛋白(Western blot法)表达的差异.结果:比模型组比较,小檗碱组胰岛索敏感性提高(-4.93±0.30 vs-5.35±0.40,P＜0.05),肝糖原含量明显升高(136.58±52.57 μg/g vs 65.88±27.80 μg/g,P＜0.05),肝脏GK活性升高(226.55±10.62 μkat/g vs 92.69±6.43 μkat/g,P＜0.05),肝脏GK蛋白表达增强(1.71±0.49 vs 1.24±0.22,P＜0.05),而GKRP表达减弱(1.19±0.20 vs 1.94±0.56,P＜0.01);与二甲双胍组比较,小檗碱组肝糖原含量高(136.584±52.574 μg/g vs 89.427±31.97l μg/g,P＜0.05),余指标无显著性差异(P＞0.05).结论:小檗碱改善胰岛素抵抗的作用机制可能与提高肝脏GK活性有关.     

月龄及体重对急性心肌梗死大鼠室颤发生率的影响

目的 探讨月龄及体重对急性心肌梗死大鼠室颤发生率的影响.方法 选择2月龄、180～250 g SD大鼠(青年组),及15月龄、400～500 g SD大鼠(老年组)各20只为研究对象;采用开胸直视结扎法结扎大鼠左冠状动脉前降支引起大鼠急性心肌梗死,手术前后及手术过程中心电监护并记录心电活动,分析比较组间室颤等心律失常发生率.结果 在急性缺血性心肌梗死的SD大鼠模型中,老年组心律失常及室颤发生率显著高于成年组(心律失常发生率:85% vs 25%,P<0.01;室颤发生率55% vs 10%,P<0.01).结论 高月龄高体重老年大鼠急性心肌缺血后诱发室颤发生率明显高于低月龄低体重成年大鼠.