胰腺癌患者IAP与CD4^＋CD25^＋T细胞的相关性

目的探讨胰腺癌患者血清血清免疫抑制酸性蛋白（immunosuppressive acidic protein,IAP）和外周血CD4^＋CD25^＋T细胞的相关性及临床意义。方法分别采用ELISA法和流式细胞技术检测55例胰腺癌患者血清IAP水平和外周血CD4^＋CD25^＋T细胞数量并进行相关性分析,同时与胰腺良性疾病组和健康对照组比较。结果胰腺癌患者外周血中CD4^＋CD25^＋T细胞和血清IAP的表达水平明显高于胰腺良性疾病组和对照组（P〈0．05）,且与肿块的大小、远处转移及临床分期显著相关性（P〈0．05）,胰腺癌患者外周血CD4^＋CD25^＋T细胞数量和血清IAP的表达成正相关。结论胰腺癌患者CD4^＋CD25^＋T细胞和血清IAP的水平与肿瘤的浸润转移和病程发展有关,胰腺癌患者外周血中CD4^＋CD25^＋T细胞数量的增多可能诱导IAP表达水平的增高。     

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞对HCV感染者疾病进程影响的研究

目的：探讨HCV感染者外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的表达状况以及与疾病进程的相关性。方法：选取HCV感染者69例及健康对照23例,应用流式细胞术检测外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的表达。结果：HCV感染组外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞占CD4^＋T细胞比例明显高于对照组（P〈0.01）;慢性感染组外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞比例高于HCV无症状携带组（P〈0.05）;肝硬化组外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞比例高于慢性感染组（P〈0.05）。结论：HCV感染者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞水平与疾病进程具有相关性。     

脾脏CD4^＋T、CDl9^＋B淋巴细胞凋亡在狼疮性BXSB小鼠发病机制中的意义

目的对♀、♂狼疮性BXSB小鼠外周血T、B淋巴细胞分布及脾脏T、B淋巴细胞凋亡进行比较探讨脾脏CD4^＋T、CDl9^＋B淋巴细胞凋亡在狼疮性BXSB小鼠发病机制中的意义。方法运用流式细胞术、免疫双荧光染色法检测外周血CD4^＋T、CD8^＋T、CDl9^＋B细胞分布及脾脏CD4^＋T、CDl9^＋B细胞凋亡;直接免疫荧光法观察♀、♂狼疮性BXSB小鼠肾脏免疫组化。结果与早BXSB小鼠比较,6BXSB小鼠外周血CD4^＋T、CD8^＋T细胞分布明显降低（P〈0．01）,外周血CDl9^＋B细胞分布及脾脏CD4^＋T、CDl9^＋B凋亡率明显升高（P〈0．01）;6BXSB小鼠绝大多数肾小球毛细血管襻上可见大量IgG呈片状沉积,而早BXSB小鼠肾脏几乎无IgG沉积。结论6BXSB小鼠发病较早BXSB小鼠重,细胞凋亡在BXSB小鼠发病机制中具有重要意义。     

CD4^＋CD25^＋Foxp^3＋Treg细胞在HBV感染所致慢加急性肝衰竭中作用

目的：探讨CD4^＋CD25^＋Foxp^3＋Treg细胞在HBV感染所致慢加急性肝衰竭发病过程中的表达。方法：采用流式细胞仪检测36例慢加急性肝衰竭患者、38例慢性乙型肝炎患者、40例无症状乙肝病毒携带者及40例健康对照者外周血CD4^＋CD25^＋Foxp^3＋Treg细胞水平,并追踪慢加急性肝衰竭组患者转归,评价好转组与未恢复组CD4^＋CD25^＋Foxp^3＋Treg细胞百分率差异。结果：慢加急性肝衰竭组、慢性乙型肝炎组、无症状乙肝病毒携带组及健康对照组外周血CD4^＋CD25^＋Foxp^3＋Treg细胞分别为（5．14±1．03）％、（9．86±1．72）％、（7．93±1．67）％及（7．06±1．61）％,慢加急肝衰竭组外周血Treg细胞百分率显著低于慢性乙型肝炎组、无症状乙肝病毒携带组和健康对照组（P〈0．01）。慢性乙型肝炎组外周血Treg百分率明显高于慢加急肝衰竭组及健康对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）,而无症状乙肝病毒携带组与健康对照组外周血Treg百分率比较差异无统计学意义（P〉0．05）。各组CD4^＋CD25^＋Foxp^3＋Treg细胞的百分率与患者血清HBVDNA呈正相关。慢加急性肝衰竭好转组与未恢复组CD4^＋CD25^＋Foxp^3＋Treg细胞水平比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：慢加急性肝衰竭患者发病可能与CD4^＋CD25^＋Foxp^3＋Treg细胞表达过低有关,Treg细胞表达水平不能预示慢加急性肝衰竭患者预后。     

非小细胞肺癌外周血CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋调节T细胞分析

目的分析非小细胞肺癌（NSCLC）患者外周血CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋调节T细胞（Treg）占CD4^＋T细胞的比例变化,探讨其临床意义。方法采用流式细胞仪检测32例非小细胞肺癌患者和15例正常健康者（对照组）外周血中CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋Treg占CD4^＋T细胞的比例。结果健康对照纽外周血CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋Treg占CD4^＋T细胞比例为（0．54±0．51）％;NSCLC患者外周血CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋Treg占CD4^＋T细胞比例为（1．40±0．98）％。两组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论NSCLC患者外周血CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋Treg占CD4^＋T细胞的比例明显升高,提示与肺癌免l癌逃逸有美。     

新风胶囊对类风湿关节炎患者CD4^＋CD25^＋CD127^lo调节性T细胞变化的影响

目的：探讨新风胶囊对类风湿关节炎（Rheumatoid arthritis,RA）患者外周血CCD4^＋CD25^＋CD127^lo调节性T细胞（CD4^＋CD25^＋CD127^loTreg）变化的影响。方法：40例RA活动期患者随机分为正清风痛宁胶囊组（对照组）和新风胶囊组（XFC组）,每组20例,同时设正常组20例。XFC组和对照组均治疗1个疗程,采用流式细胞术检测RA活动期患者治疗前后以及正常组外周血中CD4^＋CD25^＋CD127^loTreg的数量及其在CD4^＋T淋巴细胞中所占的比例,同时观察临床症状．DAS28评分及部分实验室指标（ESR、CRP、RF）的变化。结果：RA活动期患者外周血CD4^＋CD25^＋CD127^loTreg数量及其占CD4^＋T淋巴细胞的百分比均低于正常组;XFC组在总有效率、改善RA关节症状及部分实验室指标方面与对照组作用相似,但在上调CD4^＋CD25^＋CD127^loTreg表达水平、降低DAS28分值方面显著优于对照组。结论：XFC治疗类风湿性关节炎作用机制可能与上调CD4^＋CD25^＋CD127^loTreg表达水平,促进免疫调节、维持免疫耐受有关。     

CD4^＋ CD25^＋ CD127^（low/-）Treg在慢性阻塞性肺疾病中的表达及意义

目的通过检测COPD患者外周血中Treg细胞的表达水平,探讨COPD患者体内免疫功能的状态及Treg细胞在疾病进展中的临床意义。方法选择AECOPD和COPD稳定期患者各30例,20例健康体检者作为正常对照组,采用流式细胞仪进行检测外周血中CD4^＋ CD25^＋ Treg细胞、CD4^＋ CD25^＋ CD127^（low/-）Treg细胞占CD4^＋T淋巴细胞比例。SPSS17．0软件进行统计学分析处理。结果AECOPD组和COPD组外周血中CD4^＋ CD25^＋ Treg细胞比例分别为（9．52±0．95）％和（9．72±0．97）％均低于对照组（10．22±1．10）％,差异无统计学意义（F=2．48,P=0．093）。3组间CD4＋CD25＋CD127^（low/-）Treg细胞比例差异有统计学意义（F=13．57,P=0．0）,AECO．PD组（4．50±0．83）％显著低于COPD稳定期（5．22±0．64）％和对照组（5．61±0．67）％,而COPD稳定期较对照组降低,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论COPD患者外周血中CD4^＋ CD25^＋ CD127^（low/-）Treg细胞降低,存在免疫内环境的失衡,Treg细胞可能参与了COPD的发病和急性加重过程。     

外周血CD4^＋CD25^＋CD127^-调节性T细胞在过敏性紫癜中的表达及意义

目的 探讨外周血CD4^＋CD25^＋CD127^＋调节性T细胞在HSP患儿治疗前和治疗后的表达及其临床意义。方法选取HSP患儿4l例作为观察组,选取健康儿童41例作为对照组,检测对照组儿童及观察组患儿治疗前后的CD4^＋CD25^＋CD127^＋值。结果（1）治疗前与对照组比较,CD4^＋CD25^＋CD127^＋明显降低（P〈0．05）;（2）与治疗前比较,观察组患儿的CD4^＋CD25^＋CD127^＋值在治疗后明显升高（P〈0．05）;（3）与对照组比较,观察组患儿治疗后CD4^＋CD25^＋CD127^＋值差异无显著性（P〉0．05）。结论外周血CD4^＋CD25^＋CD127^＋值在HSP患儿治疗前显著降低,给予有效的治疗后其值显著升高,可能在HSP的发生发展过程中调节性T细胞进行了参与。而对于HSP患儿对疾病的有效预测．可以对其CD4^＋CD25^＋CD127^＋值进行测定。     

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的体外扩增

【目的】探讨有效的体外培养扩增CD4^＋CD25^＋Treg的方法。【方法】收集健康志愿者外周血5例,免疫磁珠法分选出CD4^＋CD25^＋Treg。将实验分为3组,第1组在CD4^＋CD25^＋Treg中加入100nmol／L rapamycin（1μg／mL）和包被了CD3／CD28单抗的磁珠培养3周,第8天开始加入1000U／mL的IL．2,第2组培养条件除不加rapamycin外其余与第1组相同,第3组培养细胞为CD4^＋CD25^＋细胞,培养条件同第1组。培养第7、14、21天收集细胞计数,第21天收集细胞行流式细胞术三标法检测CD4、CD25、FOXP3的表达。MTY法检测体外扩增的CD4^＋CD25^＋Treg对自体和异体的CD4^＋T细胞增殖的抑制作用。【结果】三组细胞均有明显的扩增。加rapamycin培养的CD4^＋CD25^＋Treg细胞的扩增率比不加rapamycin扩增倍数低,但细胞的纯度明显增加。CD4^＋CD25^＋T细胞组在培养第1周扩增迅速,从第2周开始增殖减慢,其中CD4^＋CD25^＋Treg细胞的比例较培养前无明显的差别。三组至第3周时扩增倍数分别为89±21、338±78、216±55（F=484．655,P〈0．0001）,细胞的纯度分别为84．32％±4．62％、34．04％±5．78％、0．68％±0．39％（F=24．660,P〈0．0001）。体外抑制实验显示体外扩增的CD4^＋CD25^＋T细胞对自体和异体的CD4^＋T细胞增殖均有明显的抑制作用,并且随着效靶比浓度的降低而降低。在CD4^＋T／Treg比例为8：1、4：1、2：1、1：1时对自体CD4^＋F细胞的抑制率分别为9．65％、16．43％、28．75％、55．34％,对异体CD4^＋T细胞的抑制率分别为6．43％、14．72％、26．47％、50．25％,而且在各浓度梯度其抑制作用在自体和异体之间均无明显的差异。【结论】我们采用rapamycin＋CD3／CD28单抗标记的磁珠＋IL-2在体外成功扩增了CD4^＋CD25^＋Treg,其扩增的倍数为89．4±20．53,具有免疫抑制功能,有望进一步应用于临床。     

IVF-ET超促排卵及妊娠状态CD4^＋CD25^＋Treg、CD152的表达

目的研究超排及妊娠对CD4^＋CD25^＋Treg、CTLA-4（CD152）的影响,并比较妊娠结局CD4^＋CD25^＋Treg细胞及CTLA-4（CD152）水平。方法采用流式细胞仪检测对照组卵泡期、黄体期及研究组卵泡期、黄体期、HCG日CD4^＋CD25^＋Treg／CD4^＋．CTLA-4（CD152）,CD4^＋百分数,并检测研究组不同妊娠结局CD4^＋CD25^＋reg／CD4^＋百分数。结果对照组与研究组的卵泡期CD4^＋CD25/CD4^＋百分数比较,其差异无统计学意义。对照组与研究组黄卵泡期CD4^＋CD25^＋CD152^＋／CD4^＋CD25^＋百分数之间相比较,二者差异无统计学意义（P〉0．05）,研究组卵泡期与HCGCD4^＋CD25＋CD152^＋／CD4^＋CD25^＋百分数之间比较,二者差异无统计学意义（P＞0．05）,三者相比,差异无统计学意义（P〉0．05）。未妊娠组与生化妊娠组相比差异无统计学意义（p〉0.05）。临床妊娠组卵泡期、黄体期的百分数明显升高。E2与CD4^＋CD25^＋／CD4^＋之间并无相关关系。生化妊娠与临床妊娠的CD4^＋CD25^＋／CD4^＋作回归关系分析二者之间存在相关关系。结论①超排中多个卵泡同步发育所致的高雌孕激素水在无外来抗原植入的情况下不能刺激CD4^＋CD25^＋Treg的增殖及CTLA-4（CD152）表达增高。②妊娠外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞数量上的高低与妊娠结局有相关关系,CD4^＋CD25^＋Treg细胞在妊娠免役耐受中有重要作用。     

慢性心力衰竭患者Th17／Treg失衡的研究及其意义

目的探讨慢性心力衰竭（CHF）患者外周血Th17／Treg的失衡及意义。方法采用流式细胞分析法,检测71例CHF患者（CHF组）和27例正常对照者（对照组）外周血Th17、CD4^＋CD25^＋Treg细胞比例。结果CHF患者外周血Th17细胞比例显著高于对照组,且心功能NYHA分级Ⅲ-Ⅳ级者比例明显高于I-Ⅱ级者。CHF患者外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞比例显著低于对照组,且心功能NYHA分级Ⅲ-Ⅳ级者比例明显低于I-Ⅱ级者。结论CHF患者外周血Th17细胞比例增加,CD4^＋CD25^＋Treg细胞比例下降,Th17／Treg失衡可能参与了心力衰竭的发生发展。     

重症肌无力患者外周血中CD4＋CD25high调节性T细胞的变化及意义

目的 研究CD4＋CD25high调节性T细胞（CD4＋CD25high regulatory T cells,CD4＋CD25highTr）在重症肌无力（myasthenia gravis,MG）发病过程中的作用.方法 采用流式细胞仪对51例MG患者外周血中CD4＋CD25highTr的表达量进行测定,分组比较病情不同的MG患者外周血中CD4＋CD25highTr的表达量,并选择35例健康体检者作为正常对照.结果 MG组患者外周血中CD4＋CD25highTr的表达量低于正常对照组的健康体检者,差异具有统计学意义（P〈0.05）;病情控制不佳的MG患者外周血中CD4＋CD25highTr的表达量低于病情稳定的MG患者及健康体检者（均P〈0.05）;胸腺切除的MG患者外周血中CD4＋CD25highTr的表达量明显高于非胸腺切除患者（P〈0.05）.结论 MG患者外周血中CD4＋CD25highTr的表达量异常,其可能参与MG的发生与发展,与MG的稳定程度密切相关.     

CD4~+CD25~+调节性T细胞对哮喘大鼠免疫功能影响

目的:观察CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)对CD4+CD25-T细胞增殖和Th1/Th2细胞因子分泌的影响,探讨其在哮喘气道炎症中的作用机制。方法:将哮喘大鼠CD4+CD25-T细胞分别与卵白蛋白(OVA)免疫耐受大鼠CD4+CD25+Treg细胞和哮喘大鼠CD4+CD25+Treg细胞联合培养,3H胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法测量细胞增殖情况,ELISA检测细胞IL-4、IL-5和IFN-γ含量。结果:OVA耐受大鼠CD4+CD25+Treg细胞能抑制CD4+CD25-T细胞增殖和Th2细胞因子分泌(P<0.05);哮喘大鼠CD4+CD25+Treg细胞可明显抑制IFN-γ的分泌(P<0.05)。结论:OVA免疫耐受大鼠CD4+CD25+Treg细胞可能通过抑制哮喘大鼠CD4+CD25-T细胞增殖和影响Th1/Th2平衡发挥作用,哮喘大鼠CD4+CD25+Treg细胞存在功能异常,可能与哮喘的发病有关。     

急性冠脉综合征患者外周血CD4~＋CD28~-细胞增多的意义

目的探讨急性冠脉综合征（ACS）患者外周血CD4＋CD28-细胞增多的意义。方法ACS组43例、稳定性心绞痛（SA）组19例、胸痛综合征（CPS）组23例均经冠状动脉造影证实。采用酶联免疫吸附法测定超敏C反应蛋白（hsCRP）,流式细胞术检测CD4＋CD28-细胞。结果与CPS和SA组相比较,ACS组中hsCRP和CD4＋CD28-细胞水平均增高,差异有高度统计学意义（P〈0.01）;且hsCRP与CD4＋CD28-细胞水平呈正相关（P〈0.01）。结论ACS患者外周血CD4＋CD28-细胞可能参与了ACS的发病过程。     

非小细胞肺癌患者外周血CD_4~+CD_(25)~+调节T细胞的检测及其临床意义

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血CD_4~+CD_(25)~+调节T细胞(Treg)水平的变化特点及其临床意义。方法采用流式细胞仪检测70例NSCLC患者和30例健康人外周血CD_4~+CD_(25)~+Treg水平,并进行2组水平比较和分层分析。结果NSCLC组外周血CD_4~+CD_(25)~+Treg水平(29±5)%,明显高于健康对照组(11±5)%(P<0.01);外周血CD_4~+CD_(25)~+Treg水平与NSCLC病理类型无相关性(P>0.05);与临床分期密切相关,I+II期亚组(16±5)%与健康对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),而与III期亚组(26±6)%、IV期亚组(35±6)%比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论NSCLC患者外周血CD_4~+CD_(25)~+Treg水平明显升高,且与肿瘤的发生发展密切相关,可作为评估肺癌患者预后的一项指标。     

黄芪对哮喘小鼠CD4^＋CD25^＋调节性T细胞及IL-4IFN-γIL-10的影响

目的探讨黄芪对哮喘小鼠CD4^＋CD25^＋调节性T细胞及IL-4、IFN-γI、L-10的影响。方法将BALB/c小鼠30只随机分为对照组、哮喘组和黄芪组。以卵蛋白（OVA）致敏激发法制备小鼠哮喘模型。酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中IL-4、IFN-γ、IL-10及血清中IL-10的含量;流式细胞术（FCM）、反转录聚合酶链反应（RT-PCR）分别检测小鼠脾脏中CD4＋CD25＋调节性T细胞数量及FoxP3 mRNA表达情况。结果哮喘组小鼠BALF中IL-4含量明显高于对照组（P〈0.01）而低于黄芪组（P〈0.01）。与对照组相比,哮喘组小鼠BALF中IFN-γI、L-10、血清中IL-10含量及脾脏中CD4＋CD25＋调节性T细胞数量、FoxP3 mRNA表达水平明显降低（P〈0.01）;而黄芪组的上述改变较哮喘组显著增加（P〈0.05）。结论 CD4^＋CD25^＋调节性T细胞参与了支气管哮喘的发病过程,黄芪可通过上调CD4^＋CD25^＋调节性T细胞、FoxP3 mRNA的表达及增加IL-10含量减轻哮喘炎症。     

TGF-β1诱导的新生儿脐带血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞增殖动力学研究

目的：探讨转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）诱导的新生儿脐带血CD8^＋CD25^＋调节性T细胞增殖活性。方法：新生儿脐带血单个核细胞经羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯（carboxyfluorescein diacetate,succinimidyl ester,CFSE）标记后,加入TGF-β1,同时用CD3mAb激活和IL-2培养扩增。培养第4、6、8天收集细胞,用流式细胞术检测活化增殖后的CD4^＋CD25^＋、CD8^＋T细胞增殖动力学变化。结果：培养后第6、8天,实验组CD4^＋CD25^＋T细胞增殖指数分别为11.52、23.04,高于对照组CD4^＋CD25^＋T细胞（6.68,10.46）及实验组CD8^＋T细胞（4.23,5.43）。培养后第8天,实验组CD4^＋CD25^＋T细胞第8代到第10代所占的比例为52.74%,在各代中以第8代所占比例最高,而对照组CD4^＋CD25^＋T细胞第8代到第10代所占的比例为36.26%;实验组CD8^＋T细胞第8代到第10代所占的比例为13.54%,在各代中所占比例最高的为第2代,而对照组CD4^＋T细胞第8代到第10代所占的比例为29.44%。结论：TGF-β1诱导的新生儿脐带血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞增殖活性明显强于CD8^＋T细胞。     

分泌性中耳炎患儿腺样体组织中CD_4~+、CD_8~+表达及CD_4~+/CD_8~+值的变化

目的探讨儿童肥大腺样体T淋巴细胞亚群免疫失衡与反复发作性分泌性中耳炎的关系。方法72例反复发作性分泌性中耳炎组患儿及30例单纯腺样体肥大组患儿腺样体组织,采用免疫组化方法检测T淋巴细胞CD+4、CD+8的表达并计算CD+4/CD8+值,分析2组间是否有差异。结果反复发作性分泌性中耳炎组患儿腺样体组织中CD4+、CD+8细胞数及CD+4/CD+8值分别为42±9,20±7,2.10±0.17,高于单纯腺样体肥大组16±8,11±6,1.39±0.15,差异有统计学意义(P<0.01);其中CD+4细胞数明显多于CD+8细胞数。结论反复发作性分泌性中耳炎的形成与T淋巴细胞亚群免疫失衡有关。