缺血预处理对大鼠缺血再灌注肝组织NF-κB表达、炎症及氧化应激反应的影响

目的：探讨缺血预处理（IP）减轻大鼠肝缺血再灌注（I/R）损伤的作用及机制。
　　方法：将15只雄性SD大鼠随机均分为假手术组、I/R组、IP+I/R组,采用Pringle法制作肝I/R模型（缺血30min+再灌注3h）,IP采用I/R前肝缺血10min+再灌注10min诱导。各组大鼠于再灌注3h后处死取材,行肝组织病理学、血请谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）检测,同时检测肝组织NF-κB蛋白的表达,以及炎性细胞因子IL-1β、TNF-α与氧化应激指标丙二醛（MDA）、髓过氧化物酶（MPO）水平。
　　结果：除假手术组外,I/R组与IP+I/R组大鼠肝组织均出现肝损伤是病理学改变,IP+I/R组的损伤程度明显轻于I/R组;与假手术组比较,I/R组与IP+I/R组大鼠血清AST、ALT水平明显升高,肝组织NF-κB蛋白表达、IL-1β与TNF-α水平、MDA与MPO浓度均明显升高（均P<0.05）,但IP+I/R组的各指标的升高幅度均明显小于I/R组（均P<0.05）。
　　结论：IP减轻大鼠肝I/R损伤的作用与抑制NF-κB活性,从而减轻炎症与氧化应激反应有关。     

乌司他丁对大鼠肢体缺血再灌注时肺组织NF-κB表达的影响

目的 探讨乌司他丁对大鼠肢体缺血再灌注时肺组织NF-κB表达的影响.方法 雄性SD大鼠48只,体重230～260 g,采用随机数字表,将其随机分为3组(n=16):假手术组(S组)、肢体缺血再灌注组(I/R组)和乌司他丁组(U组).I/R组和U组采用夹闭双侧股动脉2 h再开放的方法 制备后肢缺血再灌注诱发肺损伤模型.分别于再灌注2、4 h时处死8只大鼠,取肺组织,计算肺组织湿/干重比,采用免疫组化法测定NF-κB表达水平,光镜下观察病理学结果.结果 与S组比较,I/R组肺组织湿/干重比升高,肺组织NF-κB表达上调(P＜0.05);与I/R组比较,U组肺组织湿/干重比降低,肺组织NF-κB表达下调(P＜0.05).U组肺组织损伤程度轻于I/R组.结论 乌司他丁可下调肺组织NFκB表达,从而减轻大鼠肢体缺血再灌注诱发肺损伤.

Abstract：

Objective To investigate the effects of ulinastatin on the expression of NF-κB in lung tissues during limb ischemia-reperfusion(I/R) in rats.Methods Forty-eight male SD rats weighing 230-260 g were randomly divided into 3 groups (n=16 each):sham operation group (group S);I/R group; ulinastatin group (group U).A rat model of lung injury induced by I/R of hind limbs which was produced by occlusion of the bilateral femoral arteries for 2 h followed by reperfusion was established.The rats were sacrificed at 2 and 4 h of reperfusion(8 rats at each time point) and the lung tissues removed for determination of NF-κB expression (by immuno-histochemistry) and microscopic examination.W/D lung weight ratio was calculated.Results W/D lung weight ratio was significantly increased and NF-κB expression was up-regulated in group I/R compared with group S(P＜ 0.05). W/D lung weight ratio was significantly decreased and NF-κB expression was down-regulated in group U compared with group I/R (P＜0.05). The lung injury induced by I/R was reduced in group U compared with group I/R. Conclusion Ulinastatin can reduce the lung injury induced by limb I/R by down-regulating the expression of NF-κB in rat lung tissues.     

雌激素对大鼠肝切除肝缺血再灌注损伤中核因子-κB/IκB传导通路的影响及保护作用

目的 观察雌激素对大鼠肝切除肝缺血再灌注损伤中核因子-κB(NF-κB)/抑制蛋白(IκB)传导通路影响.方法 制作肝切除肝缺血再灌注损伤动物模型,雄性SD大鼠随机分为3组:假手术组(Sham组);肝切除肝缺血再灌注组(I/R组);肝切除肝缺血再灌注+雌激素组(I/R+ E2 组).分别在缺血再灌注后1、3、6h光镜下观察肝组织病理学改变,检测血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)的水平和肝组织丙二醛(MDA)的含量及超氧化物岐化酶(SOD)的活性,免疫组织化学法测定肝组织NF-κB的表达,Western blot检测NF-κB抑制蛋白(IκB-α)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达,流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 再灌注后I/R组在各时相血清ALT、AST均显著高于I/R +E2组,并于6h达到峰值(P＜0.05).与I/R+E2组和Sham比较,I/R组肝细胞凋亡率显著升高(P＜0.01);肝组织中IκB-α表达降低,而NF-κB表达增高(P＜0.05);ICAM-1 和MDA的结果变化和NF-κB表达水平变化类似,SOD呈相反变化.在光镜下观察,I/R组肝小叶结构紊乱,肝窦淤血,肝细胞水肿变性,肝细胞片状坏死,在Sham组和I/R +E2组上述病理学变化明显改善.结论 雌激素对肝切除肝脏缺血再灌注损伤有显著保护作用,其作用机制可能与雌激素影响NF-κB/IκB传导通路、减轻脂质过氧化反应、减少炎症介质释放及抑制细胞凋亡有关.     

血必净对大鼠肢体缺血再灌注后肾脏NF-κB的表达及影响

目的探讨大鼠后肢缺血再灌注(I/R)后肾组织核因子-κB(NF-κB)的变化及血必净对骨骼肌I/R后肾损伤的保护作用。方法雄性SD大鼠制作I/R模型,随机分为3组:A组为对照组,仅进行常规麻醉,不阻断后肢血流;B组为缺血组,即缺血4h无再灌注组;C组为I/R组,即缺血4h后再灌注6h;D组为I/R+血必净低剂量组,即缺血4h再灌注6h,并于缺血前10min及再灌注开始时即刻分别尾静脉注射血必净8mL/kg;E组为I/R+血必净高剂量组,即缺血4h再灌注6h并于缺血前10min及再灌注开始时即刻分别尾静脉注射血必净16mL/kg。检测血清中肌酸激酶(CK)含量,肾组织中MDA含量,NF-κB基因在肾组织中的表达。结果肾组织中NF-κB表达A组不明显;在B,C组呈上升趋势;D,E组表达下调;其余4组与A组比较,差异均有统计学意义(P0.01);D,E两组与C组比较,差异有统计学意义(P0.01);而D,E两组差异无统计学意义(P0.05)。CK和MDA含量:B,C组逐渐升高,C组较B组升高明显(P0.01);药物治疗后的D,E组相应下降,与C组比较,差异均有统计学意义(P0.01)。结论在I/R后肾组织中NF-κB的表达明显上调,血必净可抑制NF-κB表达上调,对I/R肾损伤有明显保护作用,此作用与本实验设计的剂量无关。     

阿魏酸钠预处理对免肺缺血再灌注损伤的保护作用

目的 通过检测血清中一氧化氮(NO)和肺组织核转录因子-κB p65(NF-κB p65)的变化,探讨阿魏酸钠(sodium ferulate,SF)对兔肺缺血再灌注损伤(I/R)的保护作用和机制.方法 采用复制Sekido模式再造兔肺缺血再灌注损伤模型,将实验动物(新西兰大白兔,1.8-2.5 kg)分为3组,每组6只:假手术组(S组,只开胸分离左肺韧带而不结扎肺门),SF处理组(SF组,在行左肺I/R前10min耳缘静脉注射ST,100 mg/kg)和缺血再灌注损伤组(I/R组,开胸分离左肺韧带并结扎肺门).分别在缺血前、缺血60min、再灌注30、120 min时抽取颈动脉血液离心测定血清NO,实验结束时取肺组织行NF-κB p65免疫组化灰度值测定.结果 SF预处理保护和提高了再灌注30 min(28.650±6.185)以及再灌注120 min(33.748±6.157)内源性NO活性,与I/R组(15.070±8.560;20.500±4.619)差异有统计学意义(P<0.01);抑制了NF-κB p65(78.852±4.875)在再灌注损伤肺组织中的激活,与I/R组(63.390±1.190)差异有统计学意义(P<0.01),减轻肺组织的再灌注损伤.结论 SF预处理能够降低肺组织的缺血再灌注损伤,其机制可能是通过减低内皮舒张因子NO产生源的破坏和抑制NF-κB p65的活化,进而减轻炎症损害作用.     

GSK-3β抑制剂TDZD-8对大鼠肺缺血再灌注时NF-κB活化的影响

目的 评价GSK-3β抑制剂TDZD-8对大鼠肺缺血再灌注时NF-κB活化的影响.方法 健康雄性SD大鼠32只,8～10周龄,体重250 ～ 280 g,采用随机数字表法,将其随机分为4组(n=8):假手术组(sham组)、肺缺血再灌注组(I/R组)、肺缺血再灌注+DMSO组(I/R+ DMSO组)和肺缺血再灌注+ GSK-3β抑制剂TDZD-8组(I/R+ TDZD-8组).采用夹闭左肺门1h恢复灌注的方法制备肺缺血再灌注模型;I/R+ DMSO组和I/R+ TDZD-8组于再灌注前5 min分别于颈外静脉注射10％ DMSO和TDZD-8 1 mg/kg.于再灌注2h时取腹主动脉血测定动脉血氧分压(PaO2)、血浆IL-6和TNF-α浓度;然后处死大鼠,取肺组织测定肺湿干重比(W/D)、髓过氧化物酶(MPO)活性及p-GSK-3β以及p-NF-κBp65的表达,电镜下观察肺组织病理学结果.结果 与sham组比较,其余3组PaO2和肺组织p-GSK-3β表达水平降低,血浆IL-6和TNF-α浓度,肺组织W/D、MPO活性及p-NF-κB p65表达水平升高(P＜0.05),I/R+ TDZD-8组PaO2和P-GSK-3β表达水平升高,上述其余各指标降低(P＜0.05).I/R+ DMSO组与I/R组各指标差异无统计学意义(P＞0.05).I/R+ TDZD-8组肺组织病理学损伤较I/R组减轻.结论 GSK-3β抑制剂TDZD-8可通过下调NF-κB磷酸化抑制炎性反应,从而减轻肺缺血再灌注损伤.     

舒洛地特在NF-κB介导皮瓣缺血/再灌注损伤中保护作用的机制研究

目的探讨舒洛地特对大鼠皮瓣缺血/再灌注(ischemia-reperfusion,I/R)损伤保护作用的机制。方法建立皮瓣I/R损伤大鼠模型,将实验大鼠随机分为3组,每组24只。假手术组(A组):不进行灌注干预;I/R组(B组):术前1 h,于腹腔注射生理盐水10 ml/kg,进行I/R处理;舒洛地特组(C组):注入同等量稀释的舒洛地特注射液(10 mg/kg)进行I/R处理。采用SPSS21.0统计软件,对检测皮瓣组织中NF-κB的含量进行数据处理;7 d后,采用图像分析皮瓣的存活率。结果免疫组化提示,B组比C组、A组的表达明显增强,且阳性部位主要是血管壁细胞及中性粒细胞。C组再灌注后,NF-κB活性受到抑制,中性粒细胞浸润及组织水肿程度较B组明显改善。采用Western blot检测NF-κB提示,B组C组A组;7 d后,皮瓣的存活率检测提示,A组C组B组。结论舒洛地特在皮瓣缺血/再灌注损伤时能有效保护皮瓣,其机制可能与抑制NF-κB表达及降低局部炎性反应有关。     

异丙酚对大鼠离体心脏缺血再灌注时NF-κB及iNOS的影响

目的 探讨异丙酚对大鼠离体心脏缺血再灌注时核因子κB(NF-κB)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的影响.方法 成年SD大鼠24只,体重200～300 g,雌雄不拘,随机分为3组(n=8):对照组(C组)、缺血再灌注组(I/R组)和异丙酚组(P组).建立Langendorff离体心脏灌注模型,K-H液平衡20 min后开始实验.C组灌注K-H液110 min;I/R组灌注K-H液20 min后,全心停灌30 min,再灌注60 min;P组用含50 μmol/L异丙酚的K-H液灌注20 min,全心停灌30 min,再用含50 μmol/L异丙酚的K-H液灌注60 min.于平衡末、再灌注10 min和60 min时测定冠状动脉流出液心肌肌钙蛋白(cTnI)浓度;于再灌注60 min时测定心肌SOD活性、MDA含量、iNOS活性及NF-κB、IκB的表达水平.结果 与C组比较,I/R组再灌注期间冠状动脉流出液cTnI浓度升高,P组再灌注期间60 min时升高(P＜0.05或0.01),I/R组心肌SOD活性降低,MDA含量增多,iNOS活性升高(P＜0.01),I/R组和P组心肌NF-κB表达升高,kB表达降低(P＜0.05或0.01).与I/R组比较,P组再灌注期间冠状动脉流出液cTnI浓度、心肌MDA含量、NF-κB表达、iNOS活性均降低,心肌SOD活性和IκB表达升高(P＜0.01).结论 异丙酚可抑制心肌NF-κB的激活,降低iNOS的活性,从而减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损伤.     

微波预照射对家兔肝缺血再灌注损伤时氧自由基的影响

目的　探讨微波预处理对家兔肝缺血再灌注损伤的影响及其作用机理。　方法　家兔32只, 随机分为 4组: A组,对照组(假手术组); B组, 20W微波照射 20min组; C组, 微波照射+肝门阻断组(预处理组); D组, 单纯肝门阻断组。检测肝功能及肝组织中脂质过氧化物丙二醛 (malondi aldehyde, MDA)和超氧化物歧化酶 (superoxidedismutase, SOD)的浓度变化。　结果　B、C、D组手术后 2h、4h肝功能均有损害,而D组的ALT、AST、LDH均高于C组;C组肝组织MDA浓度为 (15. 3±0. 8)nmol/mg,低于D组的(21. 2±1. 2)nmol/mg,C组的SOD浓度为 (529. 5±48. 4)U/mg,高于D组的(418. 3±9. 1)U/mg(P<0. 05)。　结论　微波预处理可能通过减少氧自由基的生成而减轻家兔肝缺血再灌注损伤所致的肝脏功能损害。     

肝细胞凋亡在肝硬化大鼠肝缺血再灌注损伤中的意义

目的 研究肝硬化大鼠肝缺血再灌注（I／R）损伤和硬化肝比正常肝更容易损伤的机制是否与肝细胞凋亡有关？方法 建立原位肝I／R模型，将肝硬化大鼠随机分为2组：A组：缺血时间（I）＝20min;B组：I＝30min;C组：正常大鼠，I＝30min，比较灌注前后各组血清AST、ALT的变化和肝细胞凋亡的百分数。结果 肝硬化大鼠肝I／R后，AST、ALT明显升高，以灌注后6h为高峰，灌注24、72h后逐渐下降。灌注6h后，B组的血清转氨酶为3组中最高（P＜0．05），说明B组肝损伤最严重。肝细胞凋亡在I／R后明显增多，以灌注后6h为高峰，随后逐渐下降，变化与转氨酶一致。灌注后6h，B、A、C组肝细胞凋亡的百分数分别为20．9％、13．5％和10．7％，B组明显高于A、C两组（P＜0．01）。再灌注72h内未见明显肝细胞坏死。结论 肝细胞凋亡是肝硬化大鼠I／R损伤肝细胞死亡的主要形式，肝细胞凋亡与肝缺血时间密切相关，肝硬化肝细胞比正常肝细胞容易发生凋亡是硬化肝对缺血敏感的重要原因。     

氯胺酮对心肌缺血/再灌注大鼠心肌NF-κB和血清白细胞介素6的影响

目的 观察氯胺酮对心肌缺血/再灌注(I/R)大鼠心肌NF-κB和血清白细胞介素6(IL-6)的影响。方法健康SD大鼠24只,随机分为4组,每组6只,假手术组(A组),I/R组(B组),I/R 氯胺酮5mg·kg-1组(C组),I/R 氯胺酮10 mg·kg-1组(D组)。大鼠心肌缺血30 min,再灌120 min后,取心肌组织用Western-blot法检测心肌细胞核NF-κB的含量。分别于再灌注30、120 min时,取左颈内静脉血,采用ELISA法检测血清IL-6浓度。结果B、C、D组心肌细胞核NF-κB含量均高于A组,升高程度依次下降(P<0.05或0.01),各组两个时间点血清IL-6浓度也高于A组,升高程度也依次下降(P<0.01或0.05)。结论氯胺酮能抑制心肌I/R大鼠心肌NF-κB表达及IL-6的释放,抑制I/R引起的心肌炎性反应。     

常温肝缺血再灌注损伤的实验研究

目的：探讨肝缺血再灌注损伤的作用机制。方法：采用大鼠部分肝缺血再灌注模型，将健康雄性SD大鼠24只随机分为三组：A组（手术对照），B组（肝缺血90min），C组（肝缺血90min再灌注120min）。观察每一动物肝组织病理切片；分别检测血浆谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）、乳酸脱氢酶（LDH）、肿瘤坏死因子（TNF－α）、白介素1β（IL-1β）浓度；测定肝组织中髓过氧化物酶（MPO）含量。结果：肝缺血再灌注后，光镜下大鼠肝组织有明显的肝血窦和中央静脉瘀血，内皮细胞及肝细胞普遍水肿变性；C组肝细胞坏死较B组明显；血浆中肝功能酶学指标显著升高，（B、C组与A组比及C组比B组P均＜0．01）；肝组织中MPO活性升高，以再灌注120min组为著（C组比A组P＜0．01）；与血浆中TNF－α、IL-1β的变化趋势相同（TNF－α：C组比A组P＜0．05，IL－1β：B、C组比A组P均＜0．01）。结论：肝脏微循环障碍是肝缺血再灌注损伤的病理基础；TNF－α、IL-1β介导中性粒细胞参与的肝缺血再灌注损伤过程。     

肾上腺髓质素心肌保护作用机制的实验研究

目的　探讨肾上腺髓质素 (Adm1 5 0 )对缺血再灌注大鼠心肌组织血管细胞粘附分子 1(VCAM 1)表达的影响。方法　 2 4只雄性SD大鼠 ,制作离体心脏缺血再灌注模型 ,并随机分为A、B、C、D4组 ,每组 6只。心脏缺血 6 0min ,A组用氧合K H液再灌注 6 0min ,B、C、D组用氧合K H液分别加入10 -9mol/L、10 -8mol/L、10 -7mol/L的Adm1 5 0再灌注 15min ,再用K H液灌注 45min。逆转录 -聚合酶链式反应 (RT PCR)法检测心肌组织VCAM 1mRNA表达 ,并测定磷酸肌酸激酶同工酶 (CK MB)释放。结果　Adm1 5 0抑制再灌注大鼠心肌组织VCAM 1表达的作用呈浓度依赖性。Adm1 5 0减少了再灌注末心肌组织CK MB漏出量 ,A组 ( 31 5± 3 3)U/L、B组 ( 2 9 7± 3 3)U/L、C组 ( 2 4 3± 3 0 )U/L、D组 ( 19 3± 3 2 )U/L ,C、D组与A组比较P <0 0 1。结论　心肌缺血再灌注时 ,Adm1 5 0通过抑制VCAM 1mRNA表达而产生心肌保护作用。     

瑞芬太尼预处理对大鼠肝脏缺血-再灌注损伤中NF-κB和ICAM-1表达的影响

目的观察瑞芬太尼预处理对大鼠肝脏缺血-再灌注损伤中核因子-κB(NF-κB)和细胞间粘附因子-1(ICAM-1)表达的影响。方法用SD大鼠制作肝脏缺血-再灌注模型,随机分为假手术组(S组)、缺血-再灌注组(IR组)和瑞芬太尼预处理组(R组)。S组经股静脉给予与R组相同的速率及容积的生理盐水输注15min,停药10min,然后行剖腹和关腹,但不进行缺血-再灌注;IR组同S组一样给予生理盐水的输注,然后进行缺血45min和再灌注2h;R组股静脉用微量泵给予瑞芬太尼1μg·kg-1·min-1预处理,持续给药15min,停药10min,然后进行缺血-再灌注。光镜下观察三组组织学病理改变,检测血清中丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)水平,Western blotting检测NF-κB和ICAM-1相对灰度值。结果光镜显示R组的损伤程度小于IR组。与S组比较,IR组和R组血清ALT、AST水平、肝组织NF-κB和ICAM-1相对灰度值明显升高(P0.05);与IR组比较,R组血清中ALT、AST水平、肝组织NF-κB和ICAM-1相对灰度值明显降低(P0.05)。结论瑞芬太尼预处理能够减轻肝脏缺血-再灌注时损伤的程度,可能与抑制NF-κB的活性,从而减少ICAM-1的表达有关。     

TLR4和NF-κB在大鼠肾缺血再灌注损伤中的表达及意义

目的：观察大鼠肾缺血再灌注损伤后Toll样受体4（TLR4）和核因子-κB（NF-kB）的表达变化及其关系.方法：将40只SD大鼠随机等分为假手术组（S组）和肾缺血再灌注损伤组（I/R组）,建立肾缺血再灌注模型.在肾缺血再灌注后24 h切取肾脏.采用免疫组织化学法观察TLR4蛋自及NF-κB蛋白在肾脏组织中的表达变化及其相关性 采用半定肇逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测两组肾组织中TLR4、NF-κB的mRNA水平表达变化.结果：TLR4蛋白在S组大鼠肾小管细胞中有少量表达,在I/R组24 h后肾组织中表达明显增加,与S组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）.NF-κB P65蛋白在S组大鼠肾小管细胞胞浆和少量胞核中有表达.在I/R组24 h后肾小管细胞胞浆和胞核均可见NF-κB P65明显表达.差异有统计学意义（P〈0.01）.TLR4和NF-κB在肾缺血再灌注损伤组织中的表达具有明显的相关性.I/R组中的TLR4 mRNA、NF-κB mRNA表达均较S组上调,差异有统计学意义（P〈0.05）.结论：大鼠肾缺血冉灌注损伤后,肾组织TLR4和NF-κB P65的表达明显上调,且有明显的相关性.TLR4有可能通过激活NF-κB继而引起下游的炎症因子募集,介导肾缺血再灌注损伤.     

异丙酚对大鼠缺血再灌注心肌Toll样受体4、NF-κB及血清IL-6的影响

目的 探讨异丙酚对大鼠缺血再灌注心肌Toll样受体4(TLR4)、核转录因子κB(NF-κB)和血清白细胞介素-6(IL-6)的影响.方法 健康雄性SD大鼠40只,体重200～250 g,随机分为4组,每组10只,假手术组(A组)左冠状动脉前降支只穿线;缺血再灌注组(B组)左冠状动脉前降支穿线结扎30 min后,再灌注120 min;A组和B组在缺血前10 min经股静脉注射生理盐水5 ml/kg后以5 ml·kg-1·h-1持续静脉输注至再灌注120 min;低剂量异丙酚组(C组)缺血前10 min经股静脉注射异丙酚5mg/kg后以5 mg·kg-1·h-1持续静脉输注至再灌注120 min,余处理同B组;高剂量异丙酚组(D组)缺血前10 min经股静脉注射异丙酚10 mg/kg后以10 mg·kg-1·h-1持续静脉输注至再灌注120 min,余处理同B组.再灌注120 min后,测定血清IL-6的浓度及心肌TLR4 mRNA、NF-κB蛋白的表达.结果 与A组比较,B组、C组及D组心肌TLR4 mRNA、NF-κB蛋白表达上调,血清IL-6水平升高;与B组比较,C组和D组心肌TLR4 mRNA、NF-κB蛋白表达下调,血清IL-6水平降低;与C组相比,D组心肌TLR4 mRNA、NF-κB蛋白表达下调,血清IL-6水平降低.结论 静脉注射异丙酚可抑制大鼠缺血再灌注心肌TLR4 mRNA、NF-κB的表达及血清IL-6浓度的升高,呈剂量依赖性.     

沉默信息调节因子1在缺血预处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用

目的 探讨沉默信息调节因子1(SIRT1)在缺血预处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用.方法 雄性SD大鼠48只,体重200 ～ 250 g,12周龄,采用随机数字表法,将其分为4组(n=12):假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)、缺血预处理组(IPC组)和缺血预处理+SIRT1抑制剂组(IPC+ ex527组).采用结扎左冠状动脉前降支30 min再灌注120 min的方法制备心肌缺血再灌注损伤模型,IPC组和IPC+ ex527组进行缺血预处理(缺血5 min,再灌注5 min,重复3个循环,共30 min),IPC+ ex527组分别于缺血前15 min及再灌注前1 min静脉注射ex527 1 μg/kg.分别于缺血前和再灌注120 min时采集股动脉血样,测定血清TNF-α和IL-6的浓度,处死大鼠,取心肌组织,测定乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性、SIRT1表达和NF-κB p65乙酰化水平.结果 与S组比较,I/R组和IPC+ ex527组再灌注120 min时血清TNF-α、IL-6浓度、心肌组织LDH、CK-MB活性和NF-κB p65乙酰化水平升高,心肌组织SIRT1表达下调(P＜0.05);与I/R组比较,IPC组血清TNF-α、IL-6浓度、心肌组织LDH、CK-MB活性、NF-κB p65乙酰化水平降低,心肌组织SIRT1表达上调(P＜0.05),IPC+ ex527组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05);与IPC组比较,IPC+ ex527组血清TNF-α、IL-6浓度、心肌组织LDH、CK-MB活性、NF-κB p65乙酰化水平升高,心肌组织SIRT1表达下调(P＜0.05).结论 SIRT1参与了缺血预处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤.     

低分子肝素凝胶在防治皮瓣缺血/再灌注损伤中的应用

目的探讨低分子肝素凝胶(lowmolecular weight heparin,LMWH)在皮瓣缺血/再灌注(ischemia/reperfusion, I/R)损伤过程中的保护作用。方法将雄性SD大鼠36只随机平均分成A组(空白对照组)、B组(I/R后行皮瓣缺血干预)、C组(LMWH涂抹皮瓣)。制作SD大鼠右下腹岛状皮瓣模型后,A组皮瓣直接原位缝合;B、C组皮瓣缺血4 h再灌注后行原位缝合,B组不做任何处理,C组采用LMWH涂抹皮瓣,1次/d,1 ml/次。于第5天取材,检测各组皮瓣中MDA、SOD、NF-κB含量,并通过组织病理学分析炎性细胞浸润程度。7 d后观察皮瓣的成活情况。结果 C组皮瓣组织的浮肿程度和炎性细胞浸润程度明显低于B组(I/R组)。MDA、NF-κB表达量:B组C组A组(P0.05)。SOD表达量:A组C组B组(P0.05)。术后7 d皮瓣成活率:A组C组B组(P0.05)。结论 LMWH对I/R损伤皮瓣具有保护作用,能降低皮瓣炎性反应,提高皮瓣的成活率。     

核因子-κB和诱导性一氧化氮合成酶在大鼠肝脏小移植物缺血预处理中的作用

目的 探讨核因子-κB(NF-κB)和诱导性一氧化氮合成酶(iNOS)在大鼠肝脏小移植物缺血预处理中的作用。方法雄性SD大鼠随机分成5组：假手术组(A组)；小移植物组(B组)；应用二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)的小移植物组(C组)；应用缺血预处理(IPC)的小移植物组(D组)；应用PDTC IPC的小移植物组(E组)。电泳迁移率改变法(EMSA)检测小移植物植入后5个时间点肝脏组织中NF-κB活性，逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)检测iNOS在肝组织中的表达，检测肝脏脂质过氧化产物丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的浓度。结果 A组肝组织中NF-KB的活性很弱。B、C、D、E4组NF-κB变化趋势相仿，一般在恢复灌注后即活化，峰值出现在3h(IPC)；活化峰值强度B组＞C组＞D组＞E组。再灌注2h后B、C、D、E组肝组织中iNOS表达水平开始升高，6h达到峰值，其值B组＞D组＞c组＞E组(P＜0．05)，随后逐渐下降；至12h仍高于对照组的水平。MDA的结果变化和iNOS表达水平变化类似，SOD呈相反变化。结论 NF-κB在大鼠肝脏缺血预处理小移植物中起重要作用。抑制供肝组织中NF-κB的活性可显著降低再灌注早期供肝组织中iNOS表达和氧自由基水平．并有效改善供肝的再灌注损伤。针对NF-κB的靶向治疗可能是供肝保护的一条新途径。     

ATP敏感性钾通道在硫化氢减轻大鼠肝缺血再灌注损伤中的作用

目的 评价ATP敏感性钾(KATP)通道在硫化氢减轻大鼠肝缺血再灌注损伤中的作用.方法 健康雄性SD大鼠30只,体重220～250 g,采用阻断左叶和中叶肝脏血流的方法制备肝缺血再灌注损伤模型.采用随机数字表法,将大鼠随机分为5组(n=6):假手术组(S组)仅开腹分离肝蒂,不进行肝门阻断及再灌注;缺血再灌注组(I/R组)制备肝缺血再灌注模型;硫氢化钠组(NaHS组)于再灌注前5 min时腹腔注射NaHS 28 μmol/kg,余同I/R组;格列本脲组(G组)于NaHS给药前5 min时腹腔注射非选择性KATP通道阻断剂格列本脲6 mg/kg,余同NaHS组;5-羟基葵酸组(5-HD组)于NaHS给药前5 min时腹腔注射选择性KATP通道阻断剂5-HD 10 mg/kg,余同NaHS组.于再灌注6h时,采集下腔静脉血样,测定血清ALT和AST的活性;然后处死大鼠,取肝组织,测定TNF-α含量和MPO活性,并观察病理学结果.结果 与S组比较,I/R组、NaHS组、G组和5-HD组血清ALT和AST活性升高,I/R组、G组和5-HD组肝组织TNF-α含量和MPO活性升高,NaHS组肝组织TNF-α含量升高(P＜0.01);与I/R组比较,NaHS组血清ALT、AST活性和肝组织TNF-α含量、MPO活性降低(P＜0.01),病理学损伤减轻;与NaHS组比较,G组和5-HD组血清ALT、AST活性和肝组织TNF-α含量、MPO活性升高(P＜0.01).结论 KATP通道的开放参与了硫化氢减轻大鼠肝缺血再灌注损伤.