IFA、ELISA和WB用于莱姆病血清学诊断的比较研究

目的比较研究间接免疫荧光试验（IFA）、酶联免疫吸附试验（ELISA）和蛋白免疫印迹试验（WB）3种检测方法对莱姆病血清学的诊断效果。方法收集临床疑似莱姆病患者血清标本及其流行病学和临床资料,分别采用IFA、ELISA和WB进行血清抗伯氏疏螺旋体抗体（IgM和IgG）检测,结合流行病学和临床资料进行综合分析。结果实验共检测莱姆病疑似患者血清398份,ELISA阳性86例,阳性率21.61%,其中IgM阳性27例,IgG阳性59例;IFA阳性82例,阳性率20.60%,其中IgM阳性26例,IgG阳性56例;WB阳性83例,阳性率20.85%,其中IgM阳性31例,IgG阳性52例;并且实验表明,在对于游走性红斑病例的诊断上,WB法阳性率明显高于ELISA和IFA（χ2=6.34,P〈0.05）。结论在莱姆病的实验室诊断中,IFA、ELISA和WB3种方法结合运用,可提高诊断的灵敏性和特异性;WB在排除ELISA和IFA的假阳性结果中有着重要作用。     

金标免疫层析法检测恙虫病抗体的效果测评

目的对新开发的恙虫病金标试剂做特异性和敏感性的效果测评。方法采用微量间接免疫荧光试验（IFA）检测发热患者血清的恙虫病IgG抗体,然后选取阴性及强阳性血清共242份,用3种金标免疫层析试剂条检测恙虫病东方体IgM、IgG和总抗体。在对照成立的情况下,观察检测线的反应情况,以出现红色条带判为阳性,再用统计学方法进行分析。结果金标免疫层析法检测恙虫病IgM、IgG和总抗体的敏感性分别为62.25%、30.12%和93.98%,特异性分别为98.11%、98.74%和96.23%,与IFA比较的统计学结果分别为P〈0.05、P〈0.05和P〉0.05。结论 IgG和IgM抗体试剂条的检测结果与IFA检测结果差异有统计学意义;总抗体试剂条的检测结果与IFA检测结果差异无统计学意义,可替代IFA检测恙虫病抗体。     

827例拟诊莱姆病患者抗伯氏疏螺旋体抗体检查结果分析

目的分析拟诊莱姆病患者血清学检查结果,明确莱姆病临床病症及地区分布情况,为有效诊治莱姆病提供科学依据。方法2001-2006年应用间接免疫荧光试验和ELISA 2种方法对来自全国各地的827例临床拟诊莱姆病患者血清进行抗伯氏疏螺旋体IgM、IgG抗体检查。结果有135例患者血清抗伯氏疏螺旋体IgM、IgG抗体呈阳性反应,阳性率16.32%。其中神经系统疾病344例,阳性88例;心血管系统疾病39例,阳性3例;皮肤病变193例,阳性30例;发热病人102例,阳性6例;关节痛病人105例,阳性5例;精神障碍病人44例,阳性3例。135例患者应用抗生素治疗后有效率达92%。我国18个省(直辖市、自治区)有莱姆病病例发生,以黑龙江、吉林、内蒙古、新疆最多,其次是青海、四川、贵州、云南、浙江等省。结论我国人群确实存在莱姆病螺旋体散发感染,通过血清学检查能及早发现病人,提高诊疗效率。     

新疆人群感染莱姆病螺旋体分子流行病学调查

目的 探讨新疆部分自然疫源地自然人群感染莱姆病螺旋体的自然进程及感染莱姆病螺旋体的基因型情况.方法 在2002年夏季完成的1406人莱姆病螺旋体感染血清流行病学调查的基础上,2006年在上述1406人中的1390人阴性人群中,随机抽取119人,与2002年16例阳性(共计135人)为研究对象,在这两个时点收集的血清标本均应用蛋白印迹(Western blot,WB)方法检测抗Borrelia burgdorferi抗体IgM和IgG,并完成莱姆病表现频率调查问卷.同时留取135份尿液标本,应用巢式PCR扩增尿液标本中莱姆病螺旋体5S～23S rRNA间隔区片段,对部分阳性产物测序分析,确定莱姆病螺旋体的基因型,并将PCR检测结果与血清学的检测结果相比较.结果 2002年1406份血清标本中,抗体阳性16份,阴性1390份,阳性率为1.14％(16/1406)(16例中IgM阳性12例,IgG阳性2例,IgM、IgG均阳性者2例).2006年上述16例抗体阳性的感染者中,有7例抗体转为阴性,阴转率为43.75％(7/16),4例由IgM阳性转为IgG阳性,IgM持续阳性5例,2002年抗体阴性的119人中,2006年有58例抗体转为阳性(IgM阳性14例,IgG阳性25例,IgM和IgG均阳性的19例),阳转率为48.74％(58/119),确诊为莱姆病2例.2006年抗B.burgdorferi抗体总阳性率为49.63％(67/135)(2006年阳性58例+2002年阳性9例).无症状IgG血清转换率为34.07％ (46/135)(2002年IgM阳性转换为IgG阳性的4例+2006年IgG阳性的25例、IgM和IgG均阳性的19例,其中确诊莱姆病2例);3例发展为莱姆病(2.22％).135份尿液PCR检测,阳性22份,阳性率为16.30％ (22/135).8份PCR阳性结果测序分析显示7份为B.garinii,1份为B.afzelii基因型.结论 新疆自然疫源地人群莱姆病螺旋体感染大多为隐性感染,自然进程较为良性,临床莱姆病少有发生.新疆人群莱姆病螺旋体感染基因型主要为B.garinii,其次是B.afzelii.     

105例拟诊莱姆病患者抗伯氏疏螺旋体抗体检查结果分析

目的 分析拟诊莱姆病患者血清学检查结果,明确莱姆病临床病症及区域分布情况,为有效诊治莱姆病提供科学依据.方法 应用间接免疫荧光试验(IFA)和ELISA方法,对来自全国各地的临床拟诊莱姆病患者进行血清抗伯氏疏螺旋体IgM和IgG抗体检查,并结合临床疾患进行综合分析.结果 2007-2008年共检查临床拟诊莱姆病患者105例,血清呈阳性反应者16例,阳性率15.24%.其中神经系统患者44例,阳性4例;心血管系统患者5例,阳性1例;皮肤病变25例,阳性6例;发热患者10例,阳性1例;关节痛14例,阳性2例;精神障碍疾患7例,阳性2例.16例患者应用抗生素治疗后有效率达87.50%.16例莱姆病患者分布在9个省(直辖市、自治区),确诊病例以黑龙江、吉林、内蒙古地区较多.结论 我国人群确实存在莱姆病螺旋体散发感染,通过血清学检查能及早发现病例,提高诊疗效率.     

间接免疫荧光试验在HIV抗体检测中的应用

目的：评价间接免疫荧光试验（IFA）作为一种确认实验在HIV抗体检测中的应用。方法：用T嗜性的HIV毒株感染MT4细胞制备抗原片,并与不同稀释度的免疫血清相结合,再滴加荧光素标记的羊抗人IgG,在荧光显微镜下检测特异性免疫荧光,结果：用IFA检测43分血清样本（其中包括17份WB阳性血清,14份阴性血清和12份ELISA阳性或WB出现可疑条带但按标准不能判为阳性的可疑血清）,除HIV－2血清呈阴性反应外,其余检测结果与WB相符,IFA对HIV－1抗体检测的敏感性和特异性均达到100％,HIV－1阳性血清抗体最高滴度达到1：10240。结论：IFA可用于HIV－1抗体检测的确认,它可作为Western Blot的一种补充或替代实验。     

间接免疫荧光抗体试验在传染性非典型肺炎诊断中的应用

目的：评价应用间接免疫荧光抗体试验(IFA)在传染性非典型肺炎[严重急性呼吸综合征(SARS)]诊断中的可靠性，探讨SARS患者发病后血清抗体在体内的产生规律。方法：采用IFA方法检测不同发病时间的临床确诊SARS病例、疑似病例和其他人群的血清SARS病毒抗体，同时对每一个研究对象采用调查表进行一般情况调查。结果：在发病10天内，SARS患者血清IgG阳性率为55.1％，IgM阳性率为16．3％；发病10天后SARS患者IgG阳性率达89．8％，IgM阳性率达65．3％；发病25天以后SARS患者IgG、IgM阳性率均为90．9％。对发病时间与抗体阳性率采用趋势x^2检验，结果：显示SARS患者血清IgG、IgM抗体阳性率随着发病时间而上升(IgG趋势检验x^2＝16．376，P＝0．00005；IgM趋势检验x^2＝28．736，P＝0．000 00)。IFA法用于检测SARS患者发病10天后血清抗体，结果：显示灵敏度、特异度及与临床诊断的符合率均在90％以上。结论：IFA法适于SARS发病10天后作为实验室辅助诊断方法。     

新疆地区神经系统莱姆病的临床特征分析

目的：探讨神经系统莱姆病的临床特征及诊断方法。方法：采用间接免疫荧光法（IFAT）、酶联免疫吸附试验（ELISA）进行血清和CSF莱姆病特异性IgM、IgG抗体检测，同时做神经放射学、影像学和电生理检查。结果：4年内在神经系统疾病患者中检出莱姆病特异性IgG、IgM抗体阳性者56例。结论：神经系统莱姆病临床表现多样化，当病因不明时，神经莱姆病应作为鉴别诊断之一，进行血清学检测，力争早发现，早治疗。     

海南省东北部地区某类就诊患者莱姆病抗体检测结果分析

目的 了解海南省东北部地区人群莱姆病感染状况,为临床医生诊断莱姆病提供参考,为本省莱姆病的流行病学调查提供可靠的理论依据。 方法 收集海南省东北部地区三家医院1 334例有关节症状和(或)神经症状的患者血清,采用两步法检测莱姆病抗体,使用间接免疫荧光法(indirect fluorescent antibody test,IFA)初筛血清, 对IFA检测阳性血清用免疫印迹法(Western blot,WB)确证。 结果 IFA法筛查海南省东北部地区1 334例患者莱姆病抗体阳性60例,阳性率4.50%。海口、文昌和琼海地区的三家医院该类就诊患者莱姆病抗体阳性率分别为4.25%、1.40%和8.28%(IFA)。三家医院阳性率比较差异有统计学意义(χ²=25.640,P<0.05)。按不同性别、年龄分组海南省东北部地区三家医院莱姆病抗体阳性率比较差异均无统计学意义(χ²=2.306,P>0.05; χ²=1.015,P>0.05)。 WB法确证莱姆病抗体阳性28例,其抗体以31 KD的外膜蛋白A、33 KD-36 KD外膜蛋白B、39 KD膜脂蛋白、41 KD鞭毛蛋白和60 KD热休克蛋白抗体为主。 结论 海南省东北部地区存在人群感染莱姆病,应加强当地疾病预防和监测。     

新疆乌鲁木齐南山莱姆病自然疫源地监测分析

目的监测乌鲁木齐南山大小松沟莱姆病自然疫源地人群伯氏疏螺旋体感染与莱姆病发病情况及流行趋势,为制定防制对策提供依据。方法采用间接免疫荧光试验（IFA）和蛋白免疫印迹（WB）方法,对223人检测血清抗伯氏疏螺旋体抗体（IgM、IgG）,2人应用聚合酶链反应（PCR）技术检测尿液中伯氏疏螺旋体DNA。对有蜱叮咬和犬咬史,并有莱姆病相关临床表现者,详细询问病史和查体,结合血清学检测和尿液PCR结果,确定伯氏疏螺旋体感染与莱姆病病例。结果伯氏疏螺旋体平均感染率为16.14%（36/223）,确诊莱姆病27例（1999-2002年6例;2003-2006年21例）,包括皮肤、神经系统、眼、心脏和关节多系统损害。少年儿童感染后,出现各型红斑占44.44%（12/27）。结论乌鲁木齐市山地牧区和半农半牧地区人群均存在较高的莱姆病感染率,并有典型病例,当地应重视莱姆病的预防和治疗。     

HSV及其实验室检测研究进展（综述）

单纯疱疹病毒（HSV）是一类严重危害人类健康、引起人类多种疾病的常见病原体,尚缺乏简便有效、临床实用的实验室检测手段。目前实验室检测方法主要有：病毒分离培养、免疫荧光检测（IFA法）、分子生物学检测（PCR法）、免疫印迹检测（WB法）以及抗体检测（ELISA法）,但仍以从水疱或体液中分离培养出HSV病毒作为＂金标准＂。     

大鼠抗肠道病毒71型衣壳蛋白VP1特异性中和单克隆抗体的研制与应用

目的研制大鼠抗肠道病毒71型（EV71）衣壳蛋白VPl特异性中和单克隆抗体（单抗）,并用Westem印迹、ELISA和免疫荧光检测（IFA）等方法验证其特异性。方法采用单克隆杂交瘤技术人工合成包含EV71 VP1中和抗原决定簇位点SPT0的多肽偶联载体蛋白KLH,腹腔内注射免疫大鼠数次后,取有预期免疫应答的脾细胞与SP2／0小鼠骨髓瘤细胞融合,用间接ELISA法筛选和有限稀释法亚克隆获得稳定的阳性单克隆杂交瘤细胞株并鉴定其IgG亚型。选取其中1株单克隆杂交瘤细胞系BC6,体外培养后注射于SCID裸鼠腹腔制备腹水以产生大量抗体,用ProteinA层析柱亲合纯化后获得纯化抗体。细胞培养微量中和试验测定该单抗中和EV71的滴度,并将其用于多种方法检测EV71特异性抗原。结果共获得8株稳定的单克隆杂交瘤细胞系,分别有6株属于IgGl亚型,2株为IgG2a亚型。通过制备腹水大量产生抗EV7l大鼠单抗BC6并纯化,其对EV71的中和滴度为1：32。BC6用于Western免疫印迹可特异检测大肠埃希菌表达的EV71VPl重组蛋白和EV71样品中的VPl,用于ELISA可灵敏特异地定性或定量检测EV71抗原含量,用于IFA可特异识别被感染Vero细胞内的EV71颗粒,而对柯萨奇病毒A16型无交叉反应。结论成功制备获得了大鼠抗EV71VPl的特异性中和单抗,可应用于Western免疫印迹、ELISA、IFA等方法,成为灵敏特异地检测EV71VPl或全病毒颗粒的有效工具。     

间接酶联免疫吸附试验检测北京市昌平地区体检人群中汉赛巴尔通体抗体

目的调查北京市昌平地区健康体检人群血清汉赛巴尔通体抗体阳性情况。方法用间接酶联免疫吸附试验（ELISA）和免疫荧光抗体（IFA）试剂盒检测体检人群血清汉赛巴尔通体抗体情况。结果以IFA为参考标准，间接ELISA方法的灵敏度为70．6％，特异度为91．6％；阳性预测值为82．2％（60／73），阴性预测值为84．9％。ELISA共检测了357份健康体检人群血清，汉赛巴尔通体抗体阳性率为34．5％，IFA共检测了239份体检血清，其汉赛巴尔通体抗体阳性率为35．6％。结论间接ELISA方法对于检测汉赛巴尔通体感染是一种快速、敏感、特异的方法，昌平地区健康体检人群中存在汉赛巴尔通体抗体阳性的情况。