三种危险因素的协同致肝癌作用

为分析黄曲霉毒素Ｂ１（ＡＦＢ１）、乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）和丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）在致人原发性肝细胞癌（ＨＣＣ）时可能的协同作用，对同份人ＨＣＣ组织分别采用高效液相色谱法、嵌套式ＰＣＲ及逆转录嵌套式ＰＣＲ检测ＡＦＢ１、ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ，检出率分别为６７．７％（２１／３１）、８８．２％（６０／６８）和１３．２％（９／６８）。其中，ＡＦＢ１和ＨＢＶＤＮＡ重叠检出率为５８．１％（１８／３１），ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ重叠检出率为８．８％（６／６８），由４例ＨＣＣ患者重叠检出ＡＦＢ１、ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ；同步检测对照组，３种危险因素全部阴性。结果表明，３种危险因素均与人类肝癌直接相关，并且存在着协同致癌效应     

定量聚合酶链反应检测血清乙型肝炎病毒DNA及其意义

采用定量ＰＣＲ技术检测了１４０例病毒性肝炎患者及３１例ＨＢｓＡｇ携带者血清乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ基因含量。结果显示１２３例乙型肝炎患者及３１例ＨＢｓＡｇ携带者血清ＨＢＶＤＮＡ基因含量范围在１０１至１０９拷贝／微升，１７例其它类型肝炎及３０例健康正常人均未检出ＨＢＶＤＮＡ；与定性ＰＣＲ及分子斑点杂交检测比较，定量ＰＣＲ的灵敏度更高。该方法是一种快速、敏感、特异的定量ＰＣＲ技术，可用于乙型肝炎的临床诊断和实验研究。     

应用聚合酶链反应（PCR）检测乙型肝炎患者的HBV—DNA

应用聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ Ｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）检测１０３例乙型肝炎患者血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ，在不同类型的ＨＢＶ感染标志物（ＨＢＶＭ）的血清中结果有所不同：（１）在ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ和抗ＨＢｃ阳性血清中，ＰＣＲ阳性率８６．１１％（３１／３６）；（２）在ＨＢｓＡｇ、抗ＨＢｅ和抗ＨＢｃ阳性血清中，ＰＣＲ阳性率５５．８８％（１９／３４）；（３）在抗ＨＢｅ和ＨＢｃ阳性血清     

应用聚合酶链反应（PCR）检测乙型肝炎患者的HBV一DNA

应用聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）检测１０８例乙型肝炎患者血清中ＨＢＶ一ＤＮＡ，在不同类型的ＨＢＶ感染标志物（ＨＢＶＭ）的血清中结果有所不同：（１）在ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ和抗ＨＢｃ阳性血清中，ＰＣＲ阳性率８６．１１％（３１／３６）；（２）在ＨＢｓＡｇ、抗ＨＢｅ和抗ＨＢｃ阳性血清中，ＰＣＲ阳性率５５．８８％（１９／３４）；（３）在抗ＨＢｓ、抗ＨＢｅ和ＨＢｃ阳性血清中，ＰＣＲ阳性率为２０％（２／１０）；（４）在抗ＨＢｅ和抗ＨＢｃ阳性血清中，ＰＣＲ阳性率为２５％（２／８）；文中就ＰＣＲ检测的结果及临床意义作了扼要的讨论。     

广西85例肝癌患者庚型肝炎病毒感染的血清学研究

对肝癌高发区的８５例患者血清采用套式ＰＣＲ方法检测认型肝炎病毒核糖核酸（ＨＧＶ－ＲＮＡ），并用相同方法检测了ＨＣＶ－ＲＮＡ；ＨＢＶ－ＤＮＡ则采用单次ＰＣＲ检测，阴性者再用套式ＰＣＲ证实。结果提示：８５例肝癌患者中，１１例患者可检出ＨＧＶＲＮＡ，占和的１２．９％，而ＨＣＶ－ＲＮＡ，ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性者分别为１５例及６８例，占１７．６％和８０％。初步证明文本部分肝癌病人血清中存在ＧＶ感染，作者认为：Ｈ     

HBV感染孕妇血清HBVM与TORCH抗体检测

目的了解ＨＢＶ感染孕妇血清ＨＢＶＭ与ＴＯＲＣＨ抗体阳性率。方法应用ＥＬＩＳＡ法筛查出９３例ＨＢＶ感染孕妇,并用ＰＣＲ检测ＨＢＶ－ＤＮＡ。分娩时取脐血测弓形体（Ｔｏｘ）、风疹病毒（ＲＶ）、巨细胞病毒（ＣＭＶ）、单纯疱疹病毒Ⅱ型（ＨＳＶ－Ⅱ）四种病原血清特异性ＩｇＭ和风疹病毒ＩｇＧ抗体。结果９３例ＨＢＶ感染孕妇中ＴＯＲＣＨ总感染率４７．３１％。单项抗体阳性率２５．８１％,７例为２项抗体阳性,２例３项抗体阳性。原发宫内感染以Ｔｏｘ最高（１２．９０％）,ＣＭＶ次之（６．４５％）,随后ＨＳＶ－Ⅱ（５．３８％）,ＲＶ最低（３．２３％）。孕妇ＨＢｓＡｇ阳性组,ＰＣＲＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率７６．９２％,ＴＯＲＣＨ感染率６１．５４％。ＨＢｓＡｇ阴性组,ＰＣＲＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率３８．８９％,ＴＯＲＣＨ感染率３７．０４％。结论脐血ＴＯＲＣＨ感染率与母血ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢＶ－ＤＮＡ相关（相关系数分别为０．１４、０．２９、０．１５）。乙肝感染孕妇ＴＯＲＣＨ的抗体筛查对优生优育是非常有用的指标。     

聚合酶链反应斑点杂交技术在临床乙型肝炎病毒检测中的应用

利用半抗原地高辛配基（ｄｉｇｉｘｉｇｅｎｉｎ）制备非同位素标记探针技术，分别标记乙型肝炎病毒全基因作者单位：１１０００６沈阳市传染病院中心研究室（孙峥嵘、郑志红、刘桂荣、胥婧、鲁润铭）；中国医科大学微生物教研室（刘兵、王桂珍）探针（ＤＩＧ－ＨＢＶＤＮＡ）及乙型肝炎病毒ＰＣＲ产物Ｃ区探针〔ＤＩＧ－ＨＢＶ（Ｃ／ｐｒｅＣ）〕，经斑点杂交检测血清ＨＢＶＤＮＡ及血清聚合酶链反应（ＰＣＲ）产物，与ＰＣＲ平行检测１２２份血清标本。实验中以ＤＩＧ－ＨＢＶ（Ｃ／ｐｒｅＣ）为探针，即ＰＣＲ－斑点杂交方法直接标记纯化…     

三种危险因素的协同致肿癌作用

为分析黄曲霉毒素，乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒在致人原发性肝细胞癌时可能的协同作用，对同份人ＨＣＣ组织分别采用高效液相色谱法，嵌套式ＰＣＲ及逆转录嵌套式ＰＣＲ检测，ＡＦＢ１，ＨＢＶ，ＤＮＡ和ＨＣＶ ＲＮＡ，检出率分别为６７．７％，８８．２％，和１３．２％。其中，ＡＦＢ１和ＨＢＶ ＤＮＡ重叠检出率为５８．１％，ＨＢＶ ＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ重叠检出率为８．８％，由４例ＨＣＣ患者重叠检出ＡＦＢ１，ＨＢＶ、     

慢性丙型肝炎患者外周血单核细胞中丙型肝炎病毒RNA正、负链的检测

选择ＨＣＶ基因组５’非编码区的两对引物，利用逆转录巢式ＰＣＲ技术对３５例慢性丙型肝炎患者的血清中正链ＨＣＶＲＮＡ、ＰＢＭＣ中正、负链ＨＣＶＲＮＡ进行检测。结果血清中正链ＨＣＶＲＮＡ阳性率为６２．９％（２２／３５），ＰＢＭＣ中正链ＨＣＶＲＮＡ的阳性率为５４．３％（１９／３５），负链ＨＣＶＲＮＡ的阳性率为３４．３％（１２／３５）。同时对第２次ＰＣＲ的阳性产物进行限制性片段长度多态性分析（ＲＦＬＰ），进一步证实ＰＣＲ产物为ＨＣＶ特异性扩增产物，结果说明ＨＣＶ能在ＰＢＭＣ中存在或复制，即肝细胞并非ＨＣＶ感染与复制的唯一场所。ＰＢＭＣ可能作为病毒长期滞留场所，使病毒感染持续存在，是丙型肝炎易发生慢性化的原因之一。     

PCR检测乙型肝炎患者血清HBV DNA

ＰＣＲ检测乙型肝炎患者血清ＨＢＶＤＮＡ湖南省儿童医院（４１０００７）李梨平湖南中医学院第一附属医院（４１０００７）王伟华本文应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术直接检测病毒性肝炎患者血清中的ＨＢＶＤＮＡ，以探讨ＰＣＲ技术在ＨＢＶ感染诊断中的应用以及ＨＢＶＤ...     

乙型和庚型肝炎病毒感染与肝细胞癌血清流行病学研究

为探讨乙型和庚型肝炎病毒（ＨＢＶ和ＨＧＶ）感染与肝细胞癌（ＨＣＣ）发生的关系，采用酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）和聚合酶链反应（ＰＣＲ）对８５例ＨＣＣ患者血清进行了ＨＢＶ和ＨＧＶ血清标志和ＨＧＶＲＮＡ检测，结果ＨＣＣ患者中ＨＢＶ感染率为７７．６５％；ＨＧＶ感染率为２７．０６％，ＨＧＶ和ＨＢＶ重叠感染率（２２．３５％）明显高于ＨＧＶ单独感染率（４．７１％）。结果提示：ＨＢＶ感染为ＨＣＣ发生的重要原因；ＨＧＶ感染可能参与ＨＣＣ的发生；而ＨＧＶ和ＨＢＶ重叠感染是否有可能增加ＨＣＣ的发生，值得进一步探讨     

加热与洗涤法对HBV,HCV血清标志的影响

采用ＥＬＩＳＡ和聚合酶链反应（ＰＣＲ），对经６０℃１０ｈ加热的ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗－ＨＢＣ及抗－ＨＣＶ阳性血清和洗涤４次的ＲＢＣ洗涤及放散液的血清标志及ＨＢＶＤＮＡ、ＨＣＶＲＮＡ进行了检测。结果，６０℃加热１０ｈ用ＥＬＩＳＡ检测血清标志均由强阳性转为阳性，ＰＣＲ检测ＨＢＶＤＮＡ及ＨＣＶＲＮＡ均为阴性；洗涤液用ＥＬＩＳＡ和ＰＣＲ检测血清标志及ＨＢＶＤＮＡ、ＨＣＶＲＮＡ均呈阴性反应，放散液用ＥＬＩＳＡ检测阴性，用ＰＣＲ检测ＨＣＶＲＮＡ１０份标本９份阴性，１份阳性。提示６０℃加热１０ｈ和洗涤ＲＢＣ可灭活或去除血清中大部分ＨＢＶ、ＨＣＶ及其血清标志。     

应用聚合酶链反应（PCR）检测血清HBV—DNA

用ＰＣＲ技术检测２１３分血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ，ＥＬＩＳＡ法检测其血清五项标志（ＨＢＶＭ）。结果表明，在不同类型的ＨＢＶ感染标志物中其血清ＰＣＲ结果有所不同。１０例健康正常人血清无１例检出ＨＢＶ－ＤＮＡ，２０３例免疫标志各异的血清共检出５４例存在ＨＢＶ－ＤＮＡ。     

HBV感染及复制状态在HCC家庭聚集性中的作用研究

应用ＰＣＲ方法研究ＨＢＶ感染及复制状态在ＨＣＣ家庭聚集性中的作用。研究结果发现，肝癌高发家庭成员和非癌家庭成员中的ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率分别为２１．８％（１２／５５）和７．３％（４／５５），经统计学分析，两组阳性率存在非常显著性差异（Ｐ〈０．０１）。同时发现肝癌高发家庭成员ＨＢＶ－ＤＮＡ也呈家庭聚集现象。研究结果提示，ＨＢＶ感染的家庭聚集性并处于复制状态可能是ＨＣＣ家庭聚集性的主要原因之一。     

慢性丙型肝炎患者外周血单核细胞中丙型肝炎病毒RNA正,负链的…

选择ＨＣＶ基因组５＇非编码区的两对引物，利用逆转录巢式ＰＣＲ技术对３５例慢性丙型肝炎患的血清中正链ＨＣＶ ＲＮＡ、ＰＢＭＣ中正、负莲ＨＣＶ ＲＮＡ进行检测。结果血清中正链ＨＣＶ ＲＮＡ阳性率为６２．９％（２２／３５），ＰＢＭＣ中正链ＨＣＶ ＲＮＡ的阳性率为５４．３％（１９／３５），负链ＨＣＶ ＲＮＡ的阳性率为３４．３％（１２／３５）。同时对第２次ＰＣＲ的阳性产物进行限制性片段长度多态性分析（ＲＦ     

山东地区HGV—RNA检测及部分核酸序列测定

目的 了解山东地区慢性丙型肝炎（ＣＨＣ）患者中庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）感染的状况，并测定其结构基因ＣＥ１区部分核苷酸序列。方法 用逆转录套式聚合酶链反应法（ＲＴ－ｎＰｃＲ）检测ＨＧＶＲＮＡ，并对部分阳性血清扩增的产物采用ＰＣＲ技术片段直接克隆法测定。结果 从１１６例慢性丙型肝炎患者血清中检出ＨＧＶＲＮＡ阳性３１例（２６．７％），其中１例患者ＨＧＶＣＥ１区部分核苷酸序列与中国第一株Ｕ７５３５６及另一例     

262例HBV感染者PCR与ELISA检测结果分析

对２６２例确诊的乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染者用聚合酶链反应检测血清ＨＢＶ－ＤＮＡ,用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测血清ＨＢＶ的五项标志。结果显示,ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗－ＨＢＣ同时阳性者,ＨＢＶ－ＤＮＡ的阳性率为９７．０６％,ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｅ、抗－ＨＢｃ同时阳性者,ＨＢＶ－ＤＮＡ的阳性率为８９．４７％,ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｃ同时阳性者,ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率为８１．８２％。提示：ＰＣＲ对ＨＢＶ及其传染者的检测更敏感、直接。     

广西肝癌高发区壮族自然人群中流行的HCV,HBV的分子生物学研究

在广西肝癌高发区壮族自然人群中采集血清标本１７７６人份，采用ＥＬＩＳＡ方法检测抗－ＨＣＶ、ＨＢｓＡｇ，ＰＣＲ技术检测ＨＣＶ－ＲＮＡ、ＨＢＶ－ＤＮＡ，并对ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性的６９份标本采用型特异性引物进行基因分型。结果显示：（１）研究人群中ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性率为３．８８％；（２）流行的ＨＣＶ基因以Ｉ型或与其它型别的混合感染为主；（３）Ｉ型感染者中ＬＡＴ的异常率高于其它型别的感染者；（４）当地ＨＣＶ伴     

乙,丙型肝炎病毒重叠感染的慢性肝病患者肝组织和血清…

为了探讨乙型和丙型肝炎病毒（ＨＢＶ和ＨＣＶ）重叠感染者病毒相互干扰现象，对４４例患者血清检测诊断为ＨＢＶ和ＨＣＶ感染的慢性肝病患者，用原位杂交法检测了肝组织中ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ。２８例患者肝组织ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ同时阳性，两者阳性信号分布类型比较无明显差异（Ｐ〉０．０５），血清ＨＢｅＡｇ阳必和阳性组中肝组织中的ＨＢＶＤＮＡＴ ＨＣＶＲＮＡ检出率无明显差异（Ｐ〉０．０５）。８例血清Ｈ     

HBeAg阴性的慢性乙型肝炎血清HBV—DNA的定量检测及意义

目的 探讨ＨＢｅＡｇ阴性慢性乙型肝炎（ＣＨ－Ｂ）血清ＨＢＶ－ＤＮＡ定量检测的意义．方法 应用定量ＰＣＲ法对经肝穿活检确诊的５２例ＨＢｅＡｇ阴性、３３例ＨＢｅＡｇ阳性ＣＨ－Ｂ血清进行ＨＢＶ－ＤＮＡ含量检测，并将ＨＢｅＡｇ阳性与阴性患者ＨＢＶ－ＤＮＡ含量、ＨＢｅＡｇ阴性ＨＢＶ－ＤＮＡ高水平与低水平患者肝脏病理损害分别进行了比较。结果：ＨＢＶ－ＤＮＡ含量ＨＢｅＡｇ阳性患者显著高于阴性患者，ＨＢｅＡｇ阴性