快速筛选高纯合度天麻PCR-RFLP鉴定方法

目的 建立一种快速筛选高纯合度天麻种质材料的方法，为其纯系育种和杂交育种奠定基础。方法 以本课题组前期天麻全基因组测序和群体重测序为基础，利用单核苷酸多态性（SNP）位点开发20个限制性内切酶片段长度多态性（RFLP）标记，并采用聚合酶链式反应（PCR）-RFLP法对15份天麻种质的20个RFLP标记进行限制性内切酶实验，根据20个RFLP标记位点酶切条带数目，计算15份天麻种质的纯合度，进而对天麻种质纯合度进行评估；在此基础上，利用基因组重测序技术对评估结果进行验证。结果 利用PCR-RFLP法筛选获得10份纯合度>95%的种质材料，其中3份种质材料的纯合度为95%，7份种质材料的纯合度为100%；利用基因组重测序法筛选获得9份纯合度>95%的种质材料，其中8份种质材料与PCR-RFLP法检测结果一致。结论 该文所建立的用于筛选高纯合度天麻种质的PCR-RFLP法精确度为80%，准确率为89%。该方法实验操作简便、检测效率高，且成本显著低于基因组重测序技术，为天麻纯系育种提供了技术支撑，也为其他中药材品种选育研究提供了借鉴。     

千里香杂合度PCR-RFLP快速评估方法的建立

目的 建立一种快速评估千里香种质材料杂合度的方法，为制定千里香的优异种质繁育策略和促进种质创新提供依据。方法 以65株千里香重测序数据为基础，检测并筛选单核苷酸多态性（SNPs），利用其中20个SNP位点，通过自编脚本将其转化为限制性内切酶片段长度多态性（RFLP）标记；采用聚合酶链式反应-限制性内切酶长度多态性（PCR-RFLP）法对12份千里香种质的20个RFLP标记进行检测，根据RFLP标记位点酶切片段数目计算千里香种质的杂合度；采用plink软件计算12份千里香种质的全基因组杂合度，并比较不同种质杂合度评估方法得到的结果。结果 PCR-RFLP法和基因组重测序法计算的杂合度间差异无统计学意义。利用PCR-RFLP法筛选获得了8份杂合度<30%的种质材料，利用基因组重测序法筛选获得9份杂合度<30%的种质材料，2种方法计算杂合度均<30%的种质材料共7份。结论 该文建立了千里香种质杂合度评估的PCR-RFLP法，其精确度为87.5%，准确率为77.8%，该法可为其他药用植物种质杂合度评估方法研究提供借鉴。     

不同方法初筛检测HIV抗体的结果比较

目的研究使用不同检测方法对HIV抗体进行初筛检测,结果有无显著性差异。方法通过使用酶联免疫法和化学发光法对2794份相同的艾滋病高危人群人员的血清样品进行HIV抗体初筛检测,对两种检测方法的检测结果进行比较。结果酶联免疫法检测结果为阳性47份,阴性2747份,阳性率为1.682%,化学发光法检测结果为阳性55份,阴性2739份,阳性率为1.968%,酶联免疫法检测结果阳性而化学发光法检测结果阴性的样品有11份,酶联免疫法检测结果阴性而化学发光法检测结果阳性的样品有19份,经配对χ2检验,酶联免疫法和化学发光法初筛检测HIV抗体的阳性率无显著性差异。酶联免疫法和化学发光法两种检测方法初筛检测结果共同阳性有36份,共同阴性有2728份,总符合率为98.93%。结论提示初筛检测HIV抗体时,酶联免疫法和化学发光法可互相参考,也可互相替代。     

两种微板法检测血清ALT结果分析

随着全自动加样系统的运用以及新的《血站管理办法》的实施,本站以微孔赖氏法为初检方法,以微板丙酮酸氧化酶法为复检方法。笔者对2007年6月份的标本1954份进行检测,现将结果分析如下。1材料与方法1.1标本来源:来自本站2007年6月份采集的无偿献血标本1954人份。1.2试剂:北京端瑞科技有限公司试剂(批号为070208);上海血液生物医药有限责任公司试剂(批号为20070509)试剂均检验合格,均在有效期内使用。1.3仪器:瑞士MICROLAB AT-2plus全自动加样仪,AnthosHTⅢ酶标分析仪。1.4方法:分别用微孔赖氏法和微板丙酮酸氧化酶法检测试剂,严格按照…     

赤丹退黄颗粒成型工艺的制备试验研究

目的：为赤丹退黄颗粒的成型工艺提供依据。方法：从制剂的辅料配比、制粒方法的选择、清膏相对密度、制粒与干燥温度的确定等方面加以评价。选择较佳的工艺方法。结果：确定成型工艺的辅料用量为清膏(相对密度1．25～1．30,50℃热测)1份(以干浸膏计),加糊精1份、蔗糖0．2～0．3份，采用喷雾干燥法制粒与干燥。结论：采用上述方法，其成型工艺先进,成品质量较佳。     

分析仪与手工法检测531份尿标本的结果比较

目的：探讨尿分析仪进行尿常规检测的准确性和影响因素。方法：采用尿分析仪和手工法对531份空腹晨尿进行平行测定,比较两法尿常规各项的结果。结果：尿分析仪与手工法大多数结果一致,但尿糖、蛋白、红细胞、白细胞的结果符合率均低于90％。对312例分析仪法结果为阴性的尿沉渣进行镜检,结果检出颗粒管型9份、细胞管型6份、白细胞阳性18份、红细胞阳性9份,提示尿分析仪有假阴性结果。结论：尿分析仪存在假阳性和假阴性结果,卫生部规定的手工法是有效的复核方法,尿常规阳性标本必须以手工法复核。     

尿液分析仪法与尿沉渣镜检结果的对比分析

目的：对尿液干化学法与尿沉渣镜检两种方法进行比较。方法：尿干化学分析仪使用Ur／test-150尿液分析仪，尿沉渣镜检使用OLYMPUS—CX31显微镜和80—2台式离心机，检测1845份尿液标本，对尿液红、白细胞的检测结果进行比较分析。结果在1845份标本中，将红、白细胞两项用两种不同的检测方法进行对比。结果：对比显示，白细胞：干化学法阳性人数为187例，阳性率为10．1％，镜检法阳性人数为262例，阳性率为14．2％。红细胞：于化学法阳性人数为223例，阳性率为12．1％，镜检法阳性人数为122例，阳性率为6．6％。结论：两种方法检测尿液结果有一定的差异，由于许多其他因素的干扰，故应将两种方法结合起来以提高检出率。     

两种乙型肝炎表面抗原检测方法的结果比较

目的：探讨酶联免疫吸附试验（ELISA）和胶体金免疫层析（GIA）法检测HBsAg的优缺点。方法：采用GIA法和ELISA法对155份血清标本进行HBsAg平行检测并比较两法的测定结果。结果：ELISA法检测出HBsAg阳性69份,阴性86份。GIA法检测出HBsAg阳性63份,阴性92份;有6份ELISA法阳性结果标本胶体金法没有检出,两法结果总符合率96．1％。若以ELISA法结果作为真值,则G1A法的敏感性为92．0％,特异性为100％,准确率为96．1％。结论：ELISA法具有高度的敏感性和特异性,但操作程序繁琐,耗时长;GIA法既可单份操作,也可大批量检测,特异性高,出结果快,但敏感性低于ELISA法。两法测定HBsAg各具有优点及不足,应根据具体情况浒行选择．     

黄芪中禁用农药残留检测研究

目的:建立黄芪中33种禁用农药的检测方法，并测定82份黄芪的禁用农药。方法:以乙腈为溶剂，高速匀浆处理，通过净化管净化。分别采用气相色谱-质谱(GC-MS/MS)法和超高效液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法进行测定，正离子模式下多反应检测(MRM)。结果:GC-MS/MS法和LC-MS/MS法检测的禁用农药质量浓度在相应浓度范围内均呈良好线性关系，相关系数在0.99以上，加标回收率在59.72%～133.48%,RSD均小于13.61%,符合痕量测定的要求。82批黄芪样品共检出6批含有甲基异柳磷，检出率7.3%。结论:该方法能准确、有效检测黄芪中的禁用农药，为黄芪的安全性质量评价奠定基础，同时，为黄芪规范化种植提供依据。     

仙方清咽颗粒成型工艺实验研究

目的:研究仙方清咽颗粒成型工艺。方法:以制粒情况、颗粒成型性、溶化性为指标,采用湿法制粒法,筛选辅料的种类、配比,确定成型工艺。结果:最佳成型工艺为5份浸膏与8份可溶性淀粉、2份糖粉混合制粒。结论:优选出的工艺简便可行,具有可重复性和可操作性。     

均匀设计法优选中药巴布剂基质配方

用均匀设计法 ,以影响巴布剂物理性状的几种主要原料为考察因素 ,以各种原料不同加入量为考察范围 ,以成型巴布剂基质的剥离粘着力 (拉力 )、剥离强度为指标 ,通过对数据的分析 ,优选出最佳的基质配方 :粘性剂 5 0份 ,增塑剂 1 6份 ,赋形剂 2 5份 ,填充剂 8 0份 ,交联剂 0 2份 ,柔化剂 2份。     

半夏药材炮制品DNA提取方法的优化及分子鉴定

目的:优化炮制半夏基因组DNA提取方法并进行市售炮制药材的分子鉴定。方法:以半夏药材炮制品为试验材料,对CTAB水浴后沉淀试剂进行筛选,并优化样品用量、沉淀试剂和裂解时间3个参数,建立半夏炮制品DNA提取方法;采用该法提取市售13份姜半夏和法半夏基因组DNA,用基于ITS2序列的PCR扩增法进行分子鉴定。结果:以CTAB水浴后加入甲醇处理可有效促进DNA沉淀,起始半夏药材0.5 g、水浴裂解时间1 h即可快速高效获得基因组DNA。对所提取DNA样品进行PCR扩增,所有样品全部成功测序。相似性搜索法分析表明,13份样品中10份为掌叶半夏,3份为半夏。结论:该研究建立了简易快速的半夏药材炮制品DNA提取技术,所提DNA满足半夏药材的分子鉴定要求。该结果也提示市售半夏药材混伪情况较多,值得重视。     

咽乐含片成型工艺的研究

目的：研究咽乐含片的成型工艺。方法：以口感和在口腔内的溶散时限为指标，采用正交设计法对配方进行优化，对半成品进行质量控制，并对生产条件进行探讨。结果：以浸膏1份，混合辅料4份（葡萄糖，砂糖，淀粉，按20：60：20的比例混合），混合，65℃烘干，粉碎，过100目筛，75％酒精制粒，65℃烘干，过14目筛，加1％硬脂酸镁，每100g颗粒喷入5％薄荷脑乙醇液，压片，淡绿色85G型欧巴代包衣为优化出的成型工艺。在生产和包装贮存时环境的相对湿度应小于54％。结论：该制备工艺合理，为进一步开发提供了依据。     

袁佗论治高血压性心脏病

袁佗人称伦老，是本地区五六十年代的著名老中医。他学识渊博，医理精深，对许多疾病的认识与众不同，自有见解。如高血压性心脏病，一般认为病根在肝肾，治多滋阴潜阳，论老认为其头晕、胸闷、心悸诸证现于外，则其寸脉必浮弦而硬，对照《难经·十八难》“上部法天，主胸以上至头之有疾也”的说法，其病根在上。上部法天，天以清净光明为治，砍得清净光明必须清阳之气不断上升充满于上，晦浊之气则必然下降。有一份晦滞就有一份头晕、胸闷，多一份清阳则少一份晦浊。清阳之气主要靠后天水谷之气化生，然浊居清空，清升则难，故升清之药必须…     

不同检验方法在丙型肝炎诊断中的价值

目的:探讨在丙型肝炎诊断中应用不同检验方法的临床价值。方法:选取台山市中医院术前例行检查的血液标本6000份,分别通过酶联免疫吸附试验法(ELISA)和金标法两种检验方法进行检验,比较分析两组检验结果。结果:6000份血液标本中,72份为阳性。经ELISA检验,结果显示血液标本中60份为阳性,阳性率为1.00%;经金标法检验,结果显示血液标本中55份为阳性,阳性率为0.92%,ELISA检验阳性率高于金标法,差异具有统计学意义(P 0.05)。结论:在丙型肝炎诊断中,ELISA检验阳性率比金标法高,具有较强的特异度和灵敏度,可以有效避免假阴性和假阳性的出现,临床价值更为显著。     

赤丹退黄颗粒成型工艺的制备试验研究

目的 :为赤丹退黄颗粒的成型工艺提供依据。方法 :从制剂的辅料配比、制粒方法的选择、清膏相对密度、制粒与干燥温度的确定等方面加以评价 ,选择较佳的工艺方法。结果 :确定成型工艺的辅料用量为清膏 (相对密度 1.2 5～ 1.30 ,5 0℃热测 ) 1份 (以干浸膏计 ) ,加糊精 1份、蔗糖 0 .2～ 0 .3份 ,采用喷雾干燥法制粒与干燥。结论 :采用上述方法 ,其成型工艺先进 ,成品质量较佳。     

微柱凝胶法和玻璃珠法测定血型凝集度效果比较

〔摘 要〕 目的：比较对照微柱凝胶法和玻璃珠法对血型凝集度进行测定的临床效果。方法：选取 2020 年 10 月至 2020 年 12 月阳江市妇幼保健院 2370 份血型测定标本,均进行微柱凝胶法和玻璃珠法测定,以试管法结果作为对照,对两种方法的 测定结果一致性,凝集度一致性进行分析。结果：血液样本的试管法初检结果显示,720 份为 A 型血、610 份 B 型血、832 份 O 型血、208 份 AB 型血,微柱凝胶法、玻璃珠法测定的结果与试管法完全相同,符合率均达到 100.0 %。在凝集度测定上, 微柱凝胶法和玻璃珠法测定的 A 侧、B 侧凝集度 1+、2+、3+、4+ 的比率比较,差异均无统计学意义（P ＞ 0.05）。结论： 血型凝集度测定过程中,微柱凝胶法和玻璃珠法均可以作为血型凝集度检测的重要途径。     

均匀设计法优选中药巴布剂基质配方

用均匀设计法,以影响巴布剂物理性状的几种主要原料为考察因素,以各种原料不同加入量为考察范围,以成型巴布剂基质的剥离粘着力（拉力）剥离强度为指标,通过对数据的分析,优选出最佳的基质配方;粘性剂5．0份,增塑剂1．6份,赋形剂2．5份,填充剂8．0份,交联剂0．2份,柔化剂2份。     

鲜野葛根催吐法治疗狂躁型精神分裂症12例

笔者运用鲜野葛根催吐法配合氯丙嗪，治疗狂燥型精神分裂症12例，疗效满意，现报告如下。1一股资料12例中，男4例，女8例；年龄最小者16岁，最大者39岁；病程最短者1个月，最长者5年。2临床表现均有不同程度的知觉、思维、情感、意识、行为障碍，以情绪不稳、兴奋躁动、恼怒、喜怒无常为特征。3治疗方法3．1醒吐汤取伏龙肝（灶心土）200g，鲜生姜20g，加开水冲泡，取澄清液100～150ml．加米计汁50ml（生大米509加水100ml捣汁）．混匀备用。3．2催吐法取鲜野葛根1．5～2kg（春季为佳）洗净捣碎加凉开水1000ml淘洗去渣，搅匀分成2份。先取1份…     

牡丹江市西安区餐具大肠菌群监测结果分析

目的:通过分析餐具大肠菌群检测结果,为食品卫生监督工作提供科学的依据;方法:采用纸片法检测餐具的大肠菌群,阴性为合格,阳性为不合格;结果:2007年抽取不同行业餐具2050份.合格的1763份,合格率为86%,其中10～12月份不同种类餐具530份,合格的475份,合格率为89.62%;结论:牡丹江市西安区部分行业餐具消毒效果的合格率存在一定差距,应针对不同行业、不同季节、不同种类餐具分别采取不同卫生监督和卫生监测.以提高餐具的卫生质量.