化学去细胞神经同种异系(体)移植的免疫学反应

目的:观察化学去细胞神经同种异系(体)移植的免疫学反应,研究化学萃取去细胞处理对同种异系(体)神经抗原性的影响。方法:在W istar大鼠的背部和腹部皮下植入取自SD大鼠的化学去细胞神经,对照组植入新鲜同种异系(体)神经。用ELISA法测定大鼠血清内的抗体滴度。免疫组化染色检测各时间点异系(体)神经及周围组织中T淋巴细胞的浸润程度。结果:实验组和对照组2周、4周、8周、12周的大鼠血清均没有呈现阳性的抗体滴度。化学去细胞同种异系(体)神经移植组植入后2和4周时CD3 、CD4 和CD8 T淋巴细胞的浸润程度明显轻于未去除细胞的新鲜同种异系(体)神经移植组。8和12周时埋入的新鲜同种异系(体)神经已经被受体吸收,而去细胞同种异系(体)神经移植组的植入组织保持原形态,周围仅见极少量淋巴细胞浸润。结论:化学萃取去细胞同种异系(体)神经的抗原性明显降低,植入体内后免疫排斥反应不明显。     

同种异体神经移植后免疫反应的实验研究

目的：研究在哪种温度和时间条件下保存异种神经，其排斥反应较小。方法：用不同温度和时间保存的异体神经进行移植，实验取３５只成年雄性ＳＤ大白鼠，其中对照组８只大白鼠异体神经不作任何处理，实验组分为Ａ，Ｂ二组，每组１５只，即Ａ组为异体神经，分别在保存在一－１９６℃，－８０℃，－４０℃环境中１周；Ｂ组中为同样温度和数量的大白鼠保存３周，移植前实验组大白鼠在３７℃生理盐水中反复冷冻复温５次，手术在显微镜下由     

同种异体移植的免疫学基础

我院从1983年开始在临床上采用同种异体胚胎骨充填较大颌骨囊性术后骨腔[1],十几年来均取得满意疗效.近年来骨移植的基础学科发展迅速,我们现在从免疫学的角度来讨论一下同种异体骨移植,并对我院临床应用的成功性作进一步的探讨.     

同种异体血管移植的研究及临床应用

同种异体血管移植免疫排斥较异种血管弱,与人工材料相比更符合生理特点,而且具有抗感染效果好、勿需终身抗凝等优点,在临床应用,特别是小血管移植中具有较高的实用价值[1].     

同种异体肌腱移植的免疫学实验研究

目的：比较几种肌腱移植材料的免疫学特点。方法：采用淋巴细胞毒试验、淋巴细胞转化试验及吞噬细胞功能试验测定多项细胞免疫学指标。结果：深低温冷冻、深低温冷冻干燥同种异体体肌腱的淋巴细胞死亡率,转 和吞噬细胞臃的均低于未经处理的同种异体肌腱,而与自体肌腱无显著性差异。结论;深低温冷冻干燥或不干燥同种异体肌腱的免疫学特点与自体肌腱基本相同,可广泛用于临床。     

FK506对同种异体神经移植后神经再生的影响

目的研究免疫抑制剂FK506对冷冻处理后的同种异体神经移植后神经再生的作用.方法选择成年的新西兰大白兔36只.4只作为供体,切取双侧坐骨神经,制成10 mm神经段,深低温冷冻储存2周.其余32只随机分为实验组和对照组.将兔左侧坐骨神经造成10 mm长缺损,用复温后的同种异体神经进行移植桥接.然后作以下处理实验组移植部位应用FK506(10 μg/d×14 d),对照组不做任何处理,任其自然生长.于术后12周进行组织学、电生理、超微结构、形态学定量分析、肌湿重以及免疫学等观察.结果在观察的时限内,实验组及对照组32只大白兔在进行同种异体神经移植后均未发生急性移植排斥反应.但实验组大白兔的移植部位运动神经传导速度(30.58±2.16)s明显快于对照组(21.78±2.43)s(P＜0.05).光镜及电镜检查发现实验组大白兔的有髓神经纤维数量、神经束膜间毛细血管及雪旺氏细胞细胞器等明显多于对照组(P＜0.05).结论免疫抑制剂FK506可促进冷冻处理后的同种异体神经移植后周围神经再生.     

冷冻保存神经后自体和异体移植的实验研究

目的：探讨冷冻保存神经自体和异体移植对神经再生的影响。方法：４０只ＳＤ大鼠用反复冷冻、复温的神经和未经任何处理的坐骨神经移植体,进行自体和异体移植。Ａ组为冷冻神经移植于自体原位中;Ｂ组为冷冻神经移植于异体中;Ｃ组为未冷冻神经移植于异体中;Ｄ组为未冷冻神经移植于自体原位中。术后６,１２周光镜、电镜下行组织学观察,检测各项电生理指标。结果：Ａ 组可见到较多的再生轴突通过移植体;Ｂ组可以看到炎性细胞侵润,但仍可见再生轴突通过移植体;Ｃ组可见到大量炎性细胞侵润,有极少量再生轴突通过移植体;Ｄ组可见到大量再生轴突通过移植体。电生理指标和伸趾长肌恢复率Ａ,Ｄ两组明显好于Ｂ,Ｃ两组。结论：神经冷冻处理可以降低抗原性,本实验为同种异体神经移植提供理论依据。     

大鼠坐骨神经-20℃川芎嗪玻璃化液保存对异体移植后神经再生的影响

目的：探讨不同时间段-20℃川芎嗪玻璃化液保存大鼠异体坐骨神经对异体移植后神经再生的影响．方法：-20℃川芎嗪玻璃化液（200mg／L川芎嗪）（A组）保存成年SD雄性大鼠坐骨神经,时间分别为1,2wk,然后选择成年Wistar雄性大鼠坐骨神经缺损模型作为受体,神经段复温后移植给受体,术后进行大体观察以及移植神经的大体、电生理、荧光逆行示踪、运动终板等检查;并分别与-20℃玻璃化液（不含川芎嗪）（B组）和-196℃川芎嗪玻璃化液（200mg／L川芎嗪）（C组）保存的坐骨神经进行比较．结果：保存1wk时-20℃川芎嗪玻璃化液组与-196℃川芎嗪玻璃化液组再生效果无差异,与-20℃玻璃化液组的差异有显著性（P〈0．01）;保存2wk以后3组中以-196℃川芎嗪玻璃化液组再生效果最好,-20℃川芎嗪玻璃化液组其次,-20℃玻璃化液组最差．结论：玻璃化保存液中加入川芎嗪可提高大鼠同种异体神经的保存温度值,-20℃时可保存大鼠周围神经1wk．     

SD大鼠同种异体结膜移植的免疫组织化学

用免疫组织化学方法观察ＳＤ大鼠同种异体结膜移植术后结膜植片的临床和局部免疫情况。结果显示：实验组动物结膜移植片的ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＭΦ、ＢＣ在术后第１天与术后４周出现２个峰值，ＤＣ在术后４周也明显升高，至１２周时以上各指标恢复到正常结膜水平。第１天的结果应为同种异体结膜移植术后发生的创伤性反应所致。第４周的结果揭示受体动物受异体抗原刺激后，有发生免疫排斥反应的可能性。１２周后各指标恢复正常，说明机体通过某种机制抑制了免疫排斥反应的发生。     

同种异体骨移植的免疫学问题

同种异体骨移植的免疫学问题湖南医科大学附属湘雅医院骨科（４１０００８）王东华，周江南，邓展生临床上因各种原因所致的骨缺损的修复及病损骨关节的替换，以自体骨移植效果最好。但自体骨来源有限，且其获取伴有较多的临床问题。同种异体骨作为其替代物，由于其骨源丰...     

含川芎嗪的玻璃化保存液对雪旺细胞凋亡及调控基因表达影响的初步实验研究

目的:探讨在不同温度下含川芎嗪的玻璃化保存液对大鼠雪旺细胞凋亡及调控基因表达的影响.方法:24只SD大鼠,切取双侧坐骨神经(共48条),将其随机分成2组(每组24条):实验组(含川芎嗪)和对照组(不含川芎嗪).实验组分为A、B、C、D亚组,对照组分为A'、B'、C'、D'亚组(每亚组6条),分别在不同的温度下保存3周(A、A'亚组:-4℃保存;B、B'亚组:-20~C保存;C、C'亚组:-80℃保存;D、D'亚组:-196℃保存).3周后取神经进行检测:①HE染色光镜检查;②免疫组化法检测Bcl-2、Bax;③TUNEL法检测细胞凋亡.结果:除D、D'亚组外,实验组各亚组神经雪旺细胞凋亡数量明显少于对照组相应的各亚组,实验组各亚组Bcl-2的阳性表达率均明显高于对照组相应的各亚组,实验组各亚组Bax阳性表达率均明显低于对照组相应的各亚组,差异均有显著性(PO.05).结论:含川芎嗪的玻璃化保存液能够在-20~C条件下,通过调节Bcl-2和Bax的表达而有效抑制雪旺细胞的凋亡.     

二步冷冻保存同种异体骨-ACL-骨移植后排斥反应的影响

目的 :探讨新鲜异体和二步冷冻保存同种异体骨 前交叉韧带 (ACL) 骨移植后排斥反应的差异。方法 :将 6 0只新西兰兔和 6 0只日本大耳兔分别随机分成自体骨 ACL 骨移植组、新鲜异体骨 ACL 骨移植组和二步冷冻保存同种异体骨 ACL 骨移植组 ,分别于术前及术后 1周、2周、3周、4周各采血 2ml测定血清中白细胞介素 2 (IL 2 )水平 ,术后 4周、12周切取移植关节 ,作苏木精 -伊红染色。结果 :光镜下检查显示 ,自体移植组和二步冷冻保存移植组均未见明显炎性细胞浸润 ,胶原排列规则 ,分化成熟。新鲜异体移植组有大量淋巴细胞浸润 ,其IL 2水平明显高于自体移植组和二步冷冻保存同种异体移植组且高于术前水平 (P <0 .0 1)。结论 :二步冷冻减轻了同种异体骨 ACL 骨移植后排斥反应 ,移植后其组织学改变同自体移植相似     

川芎嗪抗伤害性反应作用机制初探

目的　观察川芎嗪(TMP)对嘌呤2 X(P2 X)受体激动剂[三磷酸腺苷(ATP)和α,β-亚甲三磷酸腺苷(α,β- me ATP) ]、前列腺素E2 (PGE2 )及P物质(SP)所致大鼠足底急性伤害性反应的影响。方法　通过大鼠痛行为反应确定局部应用TMP对ATP等P2 X受体激动剂、PGE2 及SP所致大鼠足底急性伤害性反应和足底炎症水肿的影响。结果　TMP (10 mm ol/L )明显抑制ATP (1μm ol/L )或α,β- m e ATP (0 .6μm ol/L )引起的大鼠足底急性伤害性反应。TMP(10 m mol/L)可抑制PGE2 (5 μmol/L)或α,β- me ATP(0 .2 μm ol/L)加PGE2 (5 μmol/L )引起的伤害性反应。TMP (10 m mol/L )不影响α,β- me ATP (0 .2μmol/L )加SP (10μmol/L )引起的伤害性反应。TMP对PGE2 、SP或α,β- m e ATP分别加PGE2 或SP引起的大鼠足底炎症水肿无明显影响。结论　TMP主要通过抑制P2 X受体兴奋介导的伤害性信息传递产生抗伤害性反应作用。     

玻璃化法保存异体肌腱移植的实验研究

目的评介玻璃化法保存的异体肌腱移植的可行性与有效性。方法家兔60只,其中24只切取双侧跟腱48条,分为2组,分别采用玻璃化法和程序冷冻法保存2周以上。其余36只平均分为3组:A组行新鲜肌腱自体移植,B组行玻璃化法保存肌腱异体移植,C组行程序冷冻法保存肌腱异体移植。术后3、8、12周后取材,行形态学、组织学观察及生物力学测试,并进行组间比较。结果玻璃化法保存肌腱完整率高于程序冷冻法,差异有显著性。A、B组移植后较C组粘连轻,光泽好。新生血管、腱细胞成熟早,愈合进程快。术前A、B、C组生物力学性能差异无显著性,术后12周差异有显著性。结论玻璃化法保存异体肌腱操作简单,能较好保存肌腱的组织结构,移植效果优于传统的程序冷冻法保存的异体肌腱。     

大剂量川芎嗪治疗高血压性脑出血急性期疗效观察

目的　探讨高血压性脑出血急性期的最佳治疗方案。方法　高血压性脑出血 42例在常规治疗基础上 ,予以大剂量 (32 0～ 360mg·d- 1 )川芎嗪治疗并观察效果。结果　 42例中 ,基本治愈 38例 (90 5 % ) ,显著进步 4例 (9 5 % )。结论　大剂量川芎嗪用于治疗轻型高血压性脑出血急性期效果满意     

川芎嗪对脓毒症急性肺损伤的保护作用

目的研究中药川芎嗪（Tetramethylpyrazine,TMP）对大鼠脓毒症相关急性肺损伤（acute lung injury,ALI）的保护作用。方法取健康雄性SD大鼠24只,随机分为空白组、LPS干预组（LPS组）、TM P治疗组（TM P组）,每组8只。LPS组和TMP组分别给予腹腔注射LPS 20 mg/kg,空白组腹腔注射等量生理盐水,TMP组大鼠注射LPS 30 min后立即予TMP 80 mg/kg腹腔注射。4 h后,3组大鼠均经颈内动脉取血,后脱颈处死留取肺组织标本。测定动脉血气及肺组织湿/干重比,H-E染色观察肺组织病理形态,流式细胞术检测血浆中CD31＋循环内皮微粒的表达水平,ELISA法检测血清中TNF-α水平,Western印迹法检测肺组织ROCKⅡ蛋白表达。结果 LPS组氧合指数均小于200,较空白组和TMP组均明显降低（P〈0.05）,TMP组较空白组减低（P〈0.05）。肺组织切片HE染色光镜下可见LPS组肺泡结构紊乱,并可见弥漫性肺泡间隔增厚,而TM P组上述病理表现较LPS组明显减轻。TM P组平均肺泡壁厚度、肺组织湿/干重比值、血浆中CD31＋内皮微粒表达量、血清中TNF-α水平及肺组织ROCKⅡ蛋白表达量均低于LPS组,差异有统计学意义（P〈0.05）;与空白组相比,差异无统计学意义（P〉0.05）,而LPS组上述指标均高于空白组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论川芎嗪减轻LPS所致急性肺损伤大鼠肺渗出性病变,减轻肺组织炎症因子释放,对肺损伤起到积极保护作用,其对减轻肺渗出的作用可能与下调ROCKⅡ基因表达有关。     

川芎嗪对血管再狭窄大鼠血小板源生长因子受体与细胞外信号调节蛋白激酶表达的影响

目的:观察血小板源生长因子(PDGF)受体与细胞外信号调节蛋白激酶(ERK1/2)在再狭窄血管中的表达及川芎嗪(TMP)对其的影响,探讨TMP防治血管再狭窄的作用机制。方法:制备大鼠血管再狭窄模型,采用不同浓度的川芎嗪干预,观察颈总动脉形态学改变,免疫组化法检测颈总动脉PDGF-β受体与ERK1/2的表达。结果:假手术组动脉各层结构正常、清晰,无明显血管平滑肌细胞(VSMC)增殖,颈总动脉损伤大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)大量增殖,内膜显著增厚,川芎嗪处理后,血管平滑肌细胞(VSMC)增殖程度降低;与假手术组比较,再狭窄大鼠颈总动脉PDGF-β受体与ERK1/2表达显著增强(P<0.01),中、高剂量川芎嗪明显降低PDGF-β受体及ERK1/2的表达(P<0.01,P<0.05)。结论:TMP抑制血管再狭窄,其机制与抑制血管平滑肌细胞PDGF受体及ERK1/2表达有关。     

冷冻保存后不同直径异体神经移植的实验研究

目的 探讨经液态氮冷冻贮存后,不同直径同种异体神经移植的神经再生情况.方法 取40只Wistar大鼠,雌雄不限,取10只鼠分别切取正中神经、桡神经及坐骨神经,放于-196℃液态氮贮存3周备用;其余30只鼠随机分为A、B、C 3组,均造成右侧胫神经8mm的神经缺损模型,分别植入不同直径异体神经.A组:粗直径同种异体神经移植组;B组:等直径同种异体神经移植组;C组:细直径同种异体神经移植组.术后2、4周分别进行大体手术显微镜下观察、病理组织学及电生理学检查.结果 电生理学检查:2周时,传导速度(CV)及波幅(Amp)经统计学分析,A、B、C 3组之间无显著性差异(P>0.05);4周时,CV及Amp经统计学分析,3组之间存在显著性差异(P<0.05),并且C组明显优于A组.病理组织学检查:2周时,3组均见明显髓鞘、轴突崩解和空泡变性,基底膜管完整清晰,外周见较多新生血管及巨噬细胞、淋巴细胞浸润;4周时,各组吞噬现象消失,并见较多新生神经轴突.其中C组的再生轴突数量和直径均优于其余2组;结论不同直径同种异体神经移植,对神经再生效果有明显影响,其中细直径移植组神经再生效果最佳.     

Cardiac Protective Effects of Tetra methylpyrazineinPatientsPerformed Open-Heart Operation with Cardio pulmonary Bypass

Cardiac Protective Effects of Tetra methylpyrazineinPatientsPerformed Open-Heart Operation with Cardio pulmonary Bypass@李伦明@孙宗全@赵宏选     

川芎嗪对脓毒症致兔急性肾损伤的保护作用

目的 研究脓毒症致急性肾损伤(AKI)的发病机制,探讨川芎嗪(TMP)对脓毒症致AKI实验动物的肾脏保护作用.方法 36只雄性新西兰大白兔随机分成3组:空白对照组(C组)、脓毒症模型组(M组)和TMP干预组(P组).静脉注射脂多糖(LPS,1 mg/kg)制备脓毒症兔实验动物模型,P组在静脉注射LPS后相继静注TMP(60 mg/kg),实验过程中测定实验动物尿量,实验结束时测定血半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys-C)浓度;处死实验动物后提取肾脏组织,测定肾脏含水率,取肾组织进行病理学观察,用免疫组化方法 检测肾组织vWF(vWF).结果 与M组比较,C组和P组肾脏组织含水率较低(P＜0.05)、4 h尿量明显增多(P＜0.01)、血Cys-C浓度也较低(P＜0.05),免疫组化法测定的vWF、HE染色和电镜观察,P组实验动物肾脏病理改变程度较M组轻.结论 脓毒症可导致AKI,在早期以肾小球滤过率降低为主,TMP对脓毒症实验动物AKI具有保护作用.