培养基培养法和细胞培养法分离培养生殖支原体的初步探讨

目的：用培养基培养法和细胞培养法分离培养临床标本中的生殖支原体（Mg),以证实天津地区性传播疾病（STD）门诊患者有无Mg感染。方法：用无菌棉拭子取STD门诊患者生殖泌尿道分泌物,分别接种于SP-4培养基和Vero细胞进行Mg的分离培养,对符合Ｍg培养特性的培养物,用套式ＰＣＲ试验、代谢抑制试验以及ＰＣＲ扩增产物核酸序列测定等方法进行鉴定。结果：采用培养基培养法自７９名ＳＴＤ门诊患者中分离培养出２株Ｍg,分离率为２.53%。结论：首次同时应用培养基培养法和细胞培养法从临床标本中分离培养出Mg菌株,从病原学上证实天津地区STD患者中存在Mg感染。     

ELISA法检测江门地区性病门诊患者生殖支原体抗原

目的应用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测性病门诊患者泌尿生殖道生殖支原体（Mg）抗原,探讨江门地区性传播疾病（STD）门诊患者Mg感染状况。方法采用Mg多克隆抗体,标记酶结合物,建立检测Mg抗原的双抗体夹心ELISA法,对性病门诊患者泌尿生殖道分泌物进行MIg抗原检测。结果双抗体夹心ELISA法可检测到5μg／ml蛋白浓度,除肺炎支原体外与其他泌尿生殖道常见支原体和细菌无交叉反应;共检测了174例标本,Mg抗原阳性33例,阳性率为18．97％,其中男性和女性阳性率分别为19．88％和7．69％;男性患者中,非淋菌性尿道炎（NGU）、淋病、前列腺炎患者的Mg抗原阳性率分别为13．43％、62．5％和4．84％。结论STD门诊患者存在Mg感染,应用双抗体夹心ELISA法检测Mg抗原具有一定的灵敏度,且具有快速、简便的特点,适合临床筛查Mg抗原。     

生殖支原体分离培养及流行病学意义的研究

目的：用病原学方法探讨北京地区高危人群是否存在生殖支原体（Ｍｇ）感染及其频率（如果存在的话），为ＳＴＤ防治工作提供依据。方法：对性病患者和性乱者，用无菌棉拭子取生殖泌尿道分泌物，接种ＳＰ－４培养基进行Ｍｇ分离培养，对符合Ｍｇ生物学特征的培养物用ＰＣＲ、ＭＩＴ和ＣｏＡ加以鉴定。结果：在１５６例性病患者和性乱者中，培养出６株Ｍｇ，总分离率为３．８５％，其中性病患者分离率为５．５６％（４／７２），性乱者为２．３８％（２／８４），两者无显著性差异（χ２＝１．０６，Ｐ＞０．０５）。结论：从病原学证实，北京地区高危人群中存在Ｍｇ感染，ＳＴＤ防治工作中应加防范。     

男性泌尿生殖器念珠菌感染的临床分析

目的：了解性传播疾病(STD)门诊患者中男性泌尿生殖器念珠菌感染的情况。方法：收集STD门诊913例男性泌尿生殖器感染者的皮损、分泌物和前列腺液做真菌涂片和培养。结果：913例男性泌尿生殖器感染者中念珠菌感染115例,检出率12．60％。从335份前列腺液标本中检出念珠菌44株,达13．13％,居检出病原体第四位。结论：在STD门诊患者中念珠菌感染不断升高,应尽量开展病原体的分离和鉴定,以提高诊断的准确件和治疗的方向性。     

肺炎克雷伯菌耐药性分析和菌株相关性研究

目的：调查内科住院患者和门诊患者分离的肺炎克雷伯菌的耐药性现状，并通过对肺炎克雷伯菌耐药表型的聚类分析，探讨住院患者分离株的相关性．方法：肺炎克雷伯菌药物敏感性试验采用纸片扩散法(K-B法)，细菌的耐药性分析用WHONET5软件，聚类分析使用SPSSl0．0统计学分析软件．结果：①2001年301医院共收集每一个患者首次分离的肺炎克雷伯菌llO株菌药敏试验监测数据，59株分离自内科住院患者分离，32株分离自门诊患者，分别占53．6％和29．1％．内科住院患者分离的菌株46株来自痰标本，占78，O％．②内科住院患者和门诊患者分离的菌株对头孢噻肟耐药率分别为22．4％和12．5％，经x^2检验，无显著性差异．头孢他啶、阿米卡星和氨曲南的平均耐药率分别为5．5％、9．9％和17．6％，未发现亚胺培南耐药株．内科和门诊患者分别捡出13株、3株产超广谱β内酰胺酶(ESBL)菌株，分离率为22．0％和9．4％．③聚类分析将内科病房的57株肺炎克雷伯菌分成头孢噻肟敏感株类和头孢噻肟耐药或中介株类．类以下又可分成各具耐药特点的群或亚群．根据欧氏距离的平方确定菌株间的相关性，菌株446033和446923、284675和450752为分离自相同时间段的多重耐药株，疑为院内感染的同源性菌株．结论：亚胺培南和阿米卡星是治疗产ESBL肺炎克雷伯菌感染的有效药物；根据药物敏感试验数据的聚类分析对于确定肺炎克雷伯菌株间的相关性、监控感染的传播有实际应用价值．     

性病门诊患者泌尿生殖道支原体感染调查及药敏分析

目的 了解STD门诊患者支原体感染率及对9种抗生素的敏感性.方法 用支原体培养试剂盒进行检测.结果 665例STD门诊患者支原体总感染率27.37%,Uu、Mh及混合感染的阳性率分别为20.15%、1.05%、6.17%.药敏示:多西环素、米诺环素、克拉霉素、交沙霉素对支原体的敏感性最好;分离株对司帕沙星、氧氟沙星、罗红霉素高度耐药.结论 广州地区泌尿生殖道的支原体感染首选米诺环素或多西环素治疗.     

呼吸道嗜血杆菌的培养及药敏结果分析

目的：了解本院临床和门诊呼吸道患者痰培养中嗜血杆菌的检出情况，并进行药敏分析，为选用抗先素提供临床依据。方法：改良哥伦比亚巧克力培养基，血平板分离痰标本，采用烛缸法培养，以K—B纸片扩散法作药敏检测。结果：从829份痰标本中分离出169株嗜血杆菌，分离率为20．4％，流感嗜血杆菌和副流感嗜血杆菌对氨苄西林的耐药率为26．3％和18．7％，对环丙沙星的耐药率分别为5．3％和28．7％，对四环素的耐药率分别为10．5％和22．0％，而对阿奇霉素、第二、三代头孢菌素的敏感率均高于90％。结论：呼吸道疾病患者痰标本嗜血杆菌的检出率较高。并且以副流感嗜血杆菌为主。临床治疗呼吸道疾病时应注意噜血杆菌感染厦其耐药性，给予合理治疗。     

联合使用聚合酶链式反应和培养法可以提高培养细胞支原体的检出率

目的 分析国家实验细胞资源共享服务平台及其他实验室细胞支原体污染的情况,探讨聚合酶链式反应（PCR）和培养法在实验细胞支原体检测中的一致性。方法 通过PCR法对245例细胞培养上清进行了支原体检测,并检测了阳性样品支原体感染的种类;对其中127例新鲜上清同时进行了培养法检测,通过McNemar检验分析了二者的一致性。对二者检测不一致的细胞进行复检,同时使用生物发光法进行验证。结果 国内培养细胞支原体感染率在19%~66%;培养法和PCR法检测支原体只有假阴性,没有假阳性;延长取样前细胞在无抗生素培养基中的培养时间至96h,可以提高低效价支原体感染样品的检出率。结论 PCR法和培养法检测支原体具有较好的一致性,应联合使用两种方法对培养细胞进行定期检测,提高支原体的检出率。在细胞培养过程中使用合格制剂,严格无菌操作,预防为主。     

造成支原体假阳性培养原因探讨

目的：探讨具有分解脲素酶的细茵种类和数量与支原体假阳性培养的相关性。方法：将150份支原体阳性培养物,分混浊、透亮清瓶底有沉淀、透亮清瓶底无沉淀进行细菌分离培养和转种支原体培养鉴定药敏板;用不同浓度具有脲素酶的常见细菌及茵量加入支原体肉汤培养基内进行培养。结果：50例混虫的培养管分离出50株细茵,分离率100％(50／50);透亮清但有沉淀的分离出21株细菌,分离率42％(21／50);透亮清无沉淀物的没有分离出细菌;当加入含有脲素酶的细菌低于10^4／ml时,对支原体肉汤培养基影响不大;而加入茵量高于10^4／ml时,则可导致培养呈假阳性或混浊。结论：加入标本中含有大量能分解尿素的细茵时,对支原体培养基有影响,可导致假阳性。     

CHROMager念珠菌显色培养基在深部感染念珠菌检测中的应用

目的：评价CHROMager念珠菌显色培养基在念珠菌深部感染标本检测中的应用价值。方法：用CHROMager念珠菌显色培养基分离和鉴定来源于贵州省内不同地区224例深部感染患者的真菌标本,采用PCR扩增和DNA序列分析方法检测分离真菌rDNA的ITS序列。结果：224例深部感染患者标本共分离念珠菌243株,显色培养基鉴定16例标本为混合念珠菌感染,占7.1%,其中155株白假丝酵母菌63.8%,居分离率首位;显色培养基鉴定结果与基因鉴定结果符合率为97.7%。结论：深部感染念珠菌以白假丝酵母菌最常见,CHROMager念珠菌显色培养基能快速、简便、准确地分离临床常见的念珠菌,并可有效地提高混合念珠菌感染的检出率。     

Isolation and identification of Mycoplasma genitalium from high risk populations of sexually transmitted diseases in China

ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅＭｙｃｏｐｌａｓｍａｇｅｎｉｔａｌｉｕｍ（Ｍｇ）ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｉｎｈｉｇｈｒｉｓｋｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓｏｆｓｅｘｕａｌｙｔｒａｎｓｍｉｔｅｄｄｉｓｅａｓｅｓ（ＳＴＤｓ）ｉｎＣｈｉｎａｂｙｍｅａｎｓｏｆ...     

血培养分离菌的菌谱特征及耐药性分析

目的了解该院血培养阳性标本中的菌谱分布情况和细菌耐药情况,以指导临床合理用药。方法采用全自动血培养仪Bact/Alert120及专用血培养瓶培养细菌,阳性标本转种至培养基分离、鉴定、药敏。结果 2 370份血培养标本共分离到细菌291株,阳性率为12.28%。临床分离的2 370株病原菌中,革兰阳性菌占71%,革兰阴性菌占23%,真菌占1%,其他占5%。分离数列前3位的病原菌分别为凝固酶阴性葡萄球菌（45%）、大肠埃希菌（26%）、金黄色葡萄球菌（13%）。主要革兰阳性菌对万古霉素高度敏感,未出现耐药菌株;主要革兰阴性菌耐药率最低的是亚胺培南,其次是阿米卡星。结论血培养分离株以革兰阳性菌为主,凝固酶阴性葡萄球菌所占比例高,抗菌药物耐药率较高;了解血培养中细菌的分布和耐药性,对减少细菌耐药和医院感染,指导临床合理用药具有重要意义。     

巯基乙酸酯培养基在白内障术前结膜囊感染细菌筛查结果中的评价

目的通过对比使用巯基乙酸酯（Th）培养基及增菌液对白内障患者术前球结膜囊标本进行细菌培养,探索应用Th培养基对培养结果的影响及其临床应用可行性,并评价临床所用消毒剂对眼部细菌的杀灭效果。方法将白内障患者术前3个时期的球结膜囊分泌物分别同时接种于临床常规应用培养基及Th培养基中,在同等细菌培养条件下,对培养结果进行观察及细菌鉴定。结果入院时、消毒前（滴加替沙星滴眼液）及消毒后（5%聚维酮碘消毒）细菌培养的阳性率分别为：79.4%、41.6%和3.3%,培养阳性率明显逐渐降低。增菌液培养出的细菌种类为9种,检出菌株的阳性率为56.3%,而Th培养基培养出细菌16种,阳性率为100%。结论临床应用Th培养基代替常规的增菌液,可增强细菌尤其是厌氧菌检出的阳性率。临床眼科所用的消毒剂5%聚维酮碘,对眼部细菌的杀灭效果显著,符合手术要求。     

妇科炎症患者宫颈分泌物发酵支原体和穿透支原体的检测

目的探讨3种难培养支原体(发酵支原体,Mf;穿透支原体,Mpe;梨支原体,Mpi)的临床检测方法,同时了解其在温州地区妇科炎症患者中的感染情况。方法采集妇科炎症患者和正常女性(各280例)的宫颈管分泌物,接种于SP-4培养液培养。阳性培养物应用套式聚合酶链反应(nPCR)和DNA测序等方法加以鉴定。结果280例患者的宫颈分泌物中分离到8株Mf(2.86%)、7株Mpe(2.50%),而280例正常女性未分离到相应菌株。nPCR检测结果与之相符,阳性菌株经测序确认。结论培养液分离培养法结合nPCR技术,准确、较快速,是进行艾滋病(AIDS)相关支原体分离鉴定较可靠实用的方法。温州地区妇科炎症患者存在Mf、Mpe感染,在临床诊治中应予关注。     

52株生殖道念珠菌病病原菌的鉴定及药敏分析

目的分析女性生殖道念珠菌感染状况以及耐药性情况。方法临床标本接种到沙保弱培养基,分离培养出的真菌经革兰染色、芽管形成试验、CHROMagar显色培养进行鉴定,并进行氟康唑、两性霉素B药敏分析。结果120份临床标本分离培养出念珠菌52株。白色念珠菌占69.2%,热带念珠菌占7.7%,克柔念珠菌占5.8%,其他念珠菌占17.3%;分离出的52株念珠菌对氟康唑、两性霉素B敏感率分别为86.5%、94.2%。结论女性生殖道念珠菌感染仍以白色念珠菌为主。念珠菌对氟康唑和两性霉素B的敏感性有差异,应重视念珠菌的培养鉴定和药敏试验,以指导临床合理选择抗真菌药物。     

分枝杆菌培养中同步筛检依赖利福平结核分枝杆菌(依R菌)的临床应用价值

目的 分析探讨培养分枝杆菌时同步筛检依赖利福平结核分枝杆菌(依R菌)临床意义及价值. 方法 2011年3月—2015年3月所采集530例临床标本进行培养使用利福平浓度100μg/mL罗氏(L-J)培养基建立依R菌筛查系统,将待分离培养分枝杆菌平行接种于罗氏对照空白培养基(L-J)与L-J R100培养基中分别培养,依照培养基选用种类分别分成L-J R100、L-J、BD960 3组, 并对结果 进行分析统计. 结果 L-J R100培养基检出76例阳性结核分枝杆菌,且皆为依R菌,菌株粗大,生长良好,L-J R100阳性菌株所占比例为14.34%,L-J阳性菌株所占比例23.21%, BD960阳性菌株所占比例为52.83%. 结论 培养分枝杆菌时同步筛查依R菌能得到绝对依赖菌株,可提高分枝杆菌阳性检出率,可最快速度判断阳性菌株耐药性及是否对利福平具依赖性,该方法 可靠易行,具有临床推广价值.     

幽门螺杆菌分离培养技术的改进

探讨自制的改良布氏活性炭巧克力培养基,置厌氧罐蜡烛培养环境分离临床粘膜标本幽门螺杆菌(Hp)的检出率.结果表明66例粘膜标本中分离出Hp54株(81.8%),44株Hp滤液有24株(54.5%)具有细胞毒活性,其中26例消化性溃疡患者有18例(69.2%),18例慢性胃炎患者有6例(33.3%)为Hp(Toxin+)感染.结果提示通过对Hp生物学性状和毒素的检测结果证实,该法可用于临床粘膜标本Hp的常规分离培养.     

碱性尿路感染中解脲棒杆菌培养的分析

目的:回顾性调查引起碱性尿路感染的病原菌中解脲棒杆菌的发生率并分析工作中注重此菌培养的重要意义。方法:对本院三个重要科室住院患者的清洁中段尿培养阳性且尿常规分析显示为碱性尿路感染及(或)伴有尿液结晶的病例资料进行回顾性调查,并对收集到的6株解脲棒杆菌重新进行鉴定和药敏分忻。结果:在入选合格的245份病例中,解脲棒杆菌的分离,阳性的仅为6份,但在这6份病例中,解脲棒杆菌培养阳性对临床诊治起到重要的指导作用。解脲棒杆菌多重耐药,仅对万古霉素、替考拉宁及左氧氟沙星保持较高敏感性。结论:解脲棒杆菌在碱性尿液的尿路感染患者中的阳性分离率很低,但因其培养较困难且多重耐药严重,常导致临床治疗失败,所以提高阳性检出率,尤其是对于难治性、顽固性碱性尿感、尿路结石的患者明确诊疗发挥关键性的作用。     

Haemophilus infection in chronic obstructive pulmonary disease patients

Seventy sputum specimens from chronic obstructive pulmonary disease (C.O.P.D.) with secondary infection patients and 50 sputum specimens from C.O.P.D. patients without infection were cultured on blood agar plate, eosine-methylene blue agar plate, chocolate agar plate and selective medium chocolate agar plate. Haemophilus species was isolated from 20 specimens from C.O.P.D. with secondary infection patients. The isolation rate was 28.5%. Eight strains could produced beta-lactamase and were resistant to ampicillin (40%). One strain was resistant to ampicillin though without beta-lactamase production.     

2003年临床标本细菌培养结果与药敏分析

目的　对分离出的 15 0 4株病原菌的分布与耐药性进行调查 ,为临床合理使用抗生素提供依据。方法　对临床送检标本中分离出的 15 0 4株病原菌分类、药敏试验结果进行回顾性分析。结果　 15 0 4株病原菌G 菌占 2 6.1%、G- 菌占 49.7%、真菌 2 4.2 %。白色念珠菌、大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯氏菌、铜绿假单胞菌为主要细菌 ,感染部位以呼吸道、泌尿道、皮肤软组织为多。常见G 、G- 菌的耐药性有上升趋势 ,且具有多重耐药性。结论　在治疗感染性疾病时应进行病原学检查 ,依据药敏试验结果合理使用抗生素 ,以减少耐药菌株产生。