制何首乌对大鼠肝CYP1A2酶活性及mRNA表达的抑制作用

目的:考察制何首乌水提物对大鼠肝细胞色素P450酶亚型CYP1A2的酶活性及mRNA表达的影响。方法:水回流提取得制何首乌水提物,HPLC确定主要成分并测定其含量。大鼠随机分为空白对照组、制何首乌水提物组(2 g/kg和20g/kg),给药组每天按10 m L/kg量灌胃给予制何首乌水提物,连续7 d。取肝分离肝微粒体,HPLC测定肝微粒体对CYP1A2酶的底物非那西丁的代谢消除率,考察肝微粒体CYP1A2酶活性;实时荧光定量PCR技术检测肝组织中CYP1A2基因mRNA的表达。结果:与空白对照组相比,制何首乌水提物20 g/kg组大鼠肝CYP1A2酶活性和mRNA的表达均明显降低(CYP1A2酶活性,P0.01;CYP1A2的mRNA表达,P0.05)。结论:制何首乌水提物20 g/kg对大鼠肝CYP1A2酶活性和mRNA的表达有明显抑制作用。     

川乌配伍半夏对大鼠CYP3A的影响

目的:研究川乌配伍半夏对大鼠细胞色素P450酶系(CYP)3A1/2的影响,从CYP介导的代谢性相互作用角度阐述"十八反"中半夏反乌头的科学内涵。方法:采用体外温孵法和体内探针法检测CYP3A活性,采用免疫印迹试验(Western blot)和荧光定量聚合酶链式反应技术检测蛋白和mRNA表达。结果:与生/制川乌配生半夏对应剂量组相比,生/制川乌配法/姜半夏组6β-羟基睾酮(6β-OH-Tes)生成速率显著降低;生川乌配法/姜半夏组的CYP3A蛋白表达明显降低,制川乌配法/姜半夏仅部分剂量组明显降低;生川乌配法/姜半夏在0.6和1.2 g·kg-1剂量组CYP3A1 mRNA表达显著增加,制川乌配法/姜半夏在0.60 g·kg-1剂量组CYP3A1 mRNA表达显著降低。与生川乌配生/法/姜半夏对应剂量组相比,制川乌配生/法/姜半夏组6β-OH-Tes生成速率亦多显著降低;制川乌配生/法半夏组CYP3A蛋白表达明显降低;制川乌配生/法/姜半夏组CYP3A1 mRNA表达呈增加趋势。与生川乌配生半夏组相比,配伍法半夏后6'-羟基丁螺环酮(6'-OH-BP)和丁螺环酮(BP)的药时曲线下面积(AUC0-t)比值(6'-OH-BP/BP),1-(2-嘧啶基)哌嗪(1-PP)与BP的AUC0-t比值(1-PP/BP)均增加,而配伍姜半夏后二者生成未发生变化;与制川乌配生半夏相比,配伍法/姜半夏后6'-OH-BP/BP均减小,而1-PP/BP均未变。结论:配生/法/姜半夏后均可逆转生/制川乌对大鼠CYP3A的抑制作用,可加快川乌中相应成分的代谢,起到降毒或减效作用。     

黄药子与甘草配伍对大鼠肝CYP450酶活性及mRNA表达的影响

目的:研究甘草减轻黄药子肝损伤对CYP450酶活性及基因表达的影响。方法:采用紫外分光光度法测定大鼠肝微粒体细胞色素P450、细胞色素b5含量及氨基比林N-脱甲基酶、红霉素N-脱甲基酶活性,采用RT-PCR技术检测大鼠肝脏CYP2E1、CYP3A4的mRNA的表达。结果:黄药子甘草1∶2配伍组能显著减轻黄药子致大鼠肝损害,与黄药子甘草1∶2配伍组(27 g/kg)比较,黄药子组(9 g/kg)肝微粒体蛋白浓度、P450含量、b5含量均明显下降;氨基比林N-脱甲基酶活性、红霉素N-脱甲基酶活性亦明显下降。在mRNA水平上,黄药子组9 g/kg显著诱导CYP2E1、CYP3A4基因的表达,与甘草1∶2配伍后(27 g/kg)表达显著降低。结论:甘草可能通过提高CYP450酶活性,抑制CYP2E1、CYP3A4的mRNA表达,对黄药子致肝损伤具有一定的保护作用。     

黄芪多糖离体条件下对H295R细胞维生素D系统相关蛋白表达及睾酮分泌的影响

目的:探讨黄芪多糖对人肾上腺皮质细胞(H295R细胞)维生素D系统及睾酮表达的影响。方法:随机分为空白对照组、维生素D组、黄芪多糖25μg/mL、50μg/mL、100μg/mL组,四唑盐(MTT)法检测不同浓度的黄芪多糖和维生素D对H295R细胞增殖率的影响,ELISA法检测睾酮分泌水平,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测维生素D受体(VDR)、25-羟基维生素D3-1α-羟化酶(CYP27B)、维生素D3-24-羟化酶(CYP24A)、17β-羟类固醇脱氢酶(17β-HSD)、19α-羟化酶(CYP19A1)mRNA表达,Western blot法检测VDR、CYP27B、CYP24A蛋白表达。结果:黄芪多糖12.5μg/mL浓度,维生素D在0.25×10~(-11) mol/L和0.5×10~(-11) mol/L浓度,对H295R细胞增殖无显著影响。黄芪多糖200μg/mL,维生素D在2×10~(-11) mol/L和4×10~(-11) mol/L浓度时对H295R细胞增殖存在一定抑制作用。与空白对照组比较,维生素D组与黄芪多糖100μg/mL组睾酮分泌水平显著升高,VDR、CYP24A、17β-HSD mRNA表达显著上调,CYP27B蛋白及mRNA、CYP19A1 mRNA表达明显下调(P<0.05或P<0.01)。结论:离体条件下,黄芪多糖可能通过调节H295R细胞维生素D系统促进睾酮合成分泌。     

当归补血汤对维甲酸致大鼠骨质疏松模型CYP24A1和骨钙素表达的影响

目的:研究当归补血汤对维甲酸致骨质疏松大鼠性激素水平,股骨骨钙素、肾脏CYP24A1 mRNA及蛋白表达的影响。方法:将造模成功大鼠,随机分为模型组、维生素D 30ng/kg组、当归补血汤7.2g/kg、3.6g/kg、1.8g/kg组,另设正常组灌胃,干预6周。用HE染色法观察大鼠右侧后腿股骨的病理结构变化,ELISA检测大鼠血清睾酮、雌二醇水平,Real-Time qPCR、Western Blot检测大鼠股骨骨钙素、肾脏CYP24A1 mRNA及蛋白表达。结果:与对照组比较,模型组大鼠HE染色镜下股骨的骨小梁结构明显被破坏,病理评分显著上升,血清睾酮、雌二醇水平显著下降,股骨骨钙素、肾脏CYP24A1 mRNA及蛋白表达显著上升。与模型组比较,当归补血汤7.2、3.6g/kg组HE染色镜下股骨的骨小梁结构较为完整,连接相对紧密,病理评分下降;当归补血汤7.2、3.6、1.8g/kg组睾酮水平显著上升,股骨骨钙素mRNA表达显著下降;当归补血汤7.2g/kg组雌二醇水平显著上升;当归补血汤7.2、3.6g/kg组股骨骨钙素蛋白表达、肾脏CYP24A1 mRNA及蛋白表达显著下降。结论:当归补血汤可能是通过影响维生素D限速酶CYP24A1表达从而干预骨钙素及性激素水平实现对骨质疏松的治疗作用。     

甘草配伍甘遂对大鼠肾脏Bcl-2、Bax表达的影响

目的:以Bcl-2、Bax蛋白及mRNA表达水平为指标,观察甘草与甘遂反药对配伍对大鼠肾脏功能的影响及与甘草比例的关系。方法:大鼠50只,随机分为甘遂组、甘遂配伍甘草1:0.25组、甘遂配伍甘草1:0.5组、甘遂配伍甘草1:1组和正常对照组,各组均ig给予相应药物,给药剂量依次为2、2.5、3、4g/kg,连续给药28天。采用免疫组化法检测大鼠肾脏中Bcl-2及Bax蛋白水平;采用RT-PCR法检测其肾脏中Bcl-2及Bax mRNA水平。结果:各给药组2、2.5、3、4g/kg Bcl-2在蛋白及mRNA表达水平均显著低于正常对照组;各比例甘草配伍甘遂组2.5、3、4g/kg Bcl-2在蛋白及mRNA表达水平显著高于甘隧组4g/kg,且与甘草比例呈正相关。各给药组2、2.5、3、4g/kg Bax在蛋白及mRNA表达水平均显著高于正常对照组;各比例甘草配伍甘隧组2.5、3、4g/kg Bax在蛋白及mRNA表达水平均显著低于甘隧组4g/kg,且与甘草比例呈负相关。结论:长期应用甘遂可加速大鼠肾脏细胞的凋亡,影响肾脏功能。甘草可抑制甘遂对肾脏的损害,且有明显的剂量依赖关系。     

乌头汤加半夏不同炮制品对大鼠CYP3A的影响

目的:以乌头汤为载体,研究加入半夏不同炮制品后对大鼠细胞色素P450酶系(CYP)3A1/2的影响,为阐述"十八反"中半夏反乌头的反性内涵提供实验依据。方法:CYP3A酶活性采用体外温孵法和体内探针法进行检测,酶蛋白和mRNA表达采用蛋白质免疫印迹法(Western blot)和荧光定量聚合酶链式反应技术进行检测。结果:与乌头汤加生半夏组相比,乌头汤加法半夏各剂量组6β-羟基睾酮(6β-OH-Tes)生成速率未发生显著性变化,CYP3A蛋白表达显著增加(P0.01,P0.05),CYP3A1 mRNA的表达仅在0.60 g·kg~(-1)剂量组显著降低(P0.01);乌头汤加姜半夏在1.20 g·kg~(-1)剂量组时6β-OH-Tes生成速率极显著降低(P0.01),CYP3A蛋白表达仅在0.60 g·kg~(-1)剂量组明显增加(P0.05),CYP3A1 mRNA的表达在0.60,1.20 g·kg~(-1)剂量组有显著降低(P0.01);在体内探针法试验中乌头汤加法/姜半夏组6'-羟基丁螺环酮(6'-OHBP)和丁螺环酮(BP)的药时曲线下面积(AUC0-t)比值(6'-OH-BP/BP),1-(2-嘧啶基)哌嗪(1-PP)与BP的AUC0-t比值(1-PP/BP)均未发生明显变化。结论:不同半夏炮制品增强乌头汤对CYP3A的抑制作用的程度不同,这将会导致乌头汤中的双酯型生物碱类成分(如乌头碱)代谢减慢,从而引起药理作用的增强或毒性的增加。     

生地黄药汁炮制降低雷公藤肝毒性的作用机制

目的：探讨生地黄药汁制法炮制对雷公藤诱导的肝毒性的减毒作用及其机制。方法：60只SPF级雄性ICR小鼠随机分为正常组、雷公藤生品组（2 g/kg）、生地黄药汁制雷公藤1、2倍剂量组（2、4 g/kg）、清水制雷公藤组（2 g/kg）和生地黄药汁辅料组（1 g/kg）,各组均灌胃相应药物,1次/d,连续28 d,正常组给予等体积的溶媒,通过对小鼠血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）及肝组织病理的检测分析,初步评价其减毒作用;进一步借助蛋白免疫印迹法及试剂盒方法,通过对肝凋亡相关蛋白及脂质过氧化和抗氧化指标的检测分析,评价其减毒机制。结果：与正常组比较,雷公藤生品组致使小鼠肝脏系数、血清ALT、AST水平均显著升高,出现肝细胞变性,并伴有炎性浸润及血管瘀血,显著上调肝B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白（Bax）表达水平,下调肝Bcl-2蛋白表达水平,升高丙二醛（MDA）水平,降低超氧化物歧化酶（SOD）水平（P<0.01）,而经1、2倍剂量生地黄药汁制雷公藤炮制品干预后均在不同程度上逆转了上述指标的异常（P<0.01,P<0.05）。结论：生...     

升板方对SD大鼠CYP3A1酶活性的影响

目的:研究升板方对于SD大鼠肝微粒体CYP3A1酶活性的影响,为临床化疗联合用药方案提供参考。方法:将25只SD雄性大鼠随机分为升板方高(8.645 g/kg)、中(4.322 g/kg)、低(2.161 g/kg)地塞米松诱导组(灌胃100 mg/kg,1次/d,连续3 d),及空白对照组(灌胃给予生理盐水,10 mL/kg,2次/d,连续14 d)。升板方各剂量组均灌胃给药,2次/d,连续14 d。以睾酮为底物探针,建立稳定、可靠的检测大鼠CYP3A1酶代谢活性的HPLC方法,考察体外代谢体系最佳的孵育时间、最佳蛋白浓度、最佳底物浓度,在最佳孵育条件下根据大鼠肝微粒体转化生成6β-羟基睾酮的速率,评价各组大鼠肝药酶的活性。结果:在大鼠肝微粒体孵育体系,睾酮代谢为6β羟基睾酮反应的最佳孵育时间是10 min,最佳酶蛋白浓度是0.25 mg/mL,最佳底物浓度为200μmol/L。在最佳孵育条件下,升板方高、中、低剂量组及空白对照组、地塞米松诱导组6β-羟基睾酮生成速率分别是:(55.82±5.97)、(65.10±6.83)、(60.89±6.53)、(62.17±6.55)、(126.73±15.40)μmol/(L.mg pro.min)。经统计学检验,升板方高中低剂量组与地塞米松组反应速率的差异有统计学意义(P0.05),与生理盐水组无统计学差异。而升板方各剂量组间均无统计学差异。结论:升板方对大鼠肝药酶CYP3A1酶活性无诱导作用。     

丹参⁃红花药对对心肌缺血大鼠CYP450酶活力和mRNA表达的影响

目的探讨丹参?红花药对对心肌缺血大鼠CYP450酶活力和mRNA表达的影响。方法大鼠随机分为模型组、空白对照组、丹参?红花(3∶1)组、丹参?红花(2∶1)组、丹参?红花(1∶1)组,连续给药15 d后麻醉大鼠,取出肝脏,每组10只用于检测3种探针底物的浓度,其余10只用于实时荧光定量PCR(RT?PCR)测定CYP1A2、CYP2E1和CYP3A2 mRNA表达。结果与模型组相比,丹参?红花药对(3∶1,2∶1)组大鼠非那西丁、氯唑沙宗、咪达唑仑的代谢消除率降低(P<0.05);与空白组比较,模型组大鼠CYP1A2、CYP2E1和CYP3A2 mRNA表达水平升高(P<0.05)。与模型组相比,丹参?红花药对(3∶1,2∶1)组大鼠CYP1A2、CYP2E1和CYP3A2 mRNA表达水平降低(P<0.05)。结论丹参?红花药对(3∶1,2∶1)可下调模型大鼠CYP1A2、CYP2E1和CYP3A2 mRNA表达,显著抑制酶活力,在3∶1比例下作用最强。     

温阳生精汤含药血清对肾阳虚大鼠睾丸间质细胞中雌激素分泌的影响

目的观察温阳生精汤含药血清对腺嘌呤致雄性肾阳虚不育大鼠睾丸间质细胞中雌二醇(es-tradiol,E2)合成以及影响其合成的芳香化酶(cytochrome P450aromatase,P450arom)活性、其编码基因CYP19表达的影响,从蛋白和mRNA水平探讨温阳生精汤含药血清治疗肾阳虚不育的机制。方法将实验大鼠随机分为4组,每组5只,即正常组及温阳生精汤高、中、低浓度组。各组大鼠分别以生理盐水和高、中、低浓度中药连续灌胃10天。末次灌胃给药2h后,心脏采血,离心后分离血清。从肾阳虚大鼠体内分别分离并纯化睾丸间质细胞,经鉴定后原代培养,随机分为5组,即空白对照组,模型组,中药高、中、低浓度(1.2、1.0、0.8g/mL)组,用放射免疫法测定细胞培养液中E2含量,氚水释放实验检测P450arom在细胞中的活性,同时用Western blot法和荧光定量PCR法分别测定CYP19蛋白和mRNA表达。结果与空白对照组比较,模型组中间质细胞上清中E2的含量明显减少,同时伴随P450arom活性抑制,以及CYP19蛋白和mRNA表达的显著减少(P<0.01,P<0.05)。与模型组比较,经温阳生精汤含药血清干预后可显著增加间质细胞中E2合成量,上调P450arom活性,同时在蛋白和mRNA水平上调细胞中CYP19表达,并具有部分剂量依赖性(P<0.01,P<0.05)。结论温阳生精汤含药血清可以有效提高肾阳虚大鼠睾丸间质细胞中E2的合成,并可能部分通过上调P450arom活性,提高CYP19基因表达实现,这可能是其治疗男性肾阳虚不育的机制之一。     

巴戟天醇提物对D-半乳糖致衰老大鼠小脑的作用

目的：观察巴戟天醇提物对D-半乳糖致衰老大鼠小脑的作用。方法：6月龄Wistar大鼠80只,雌雄各半,随机分为空白对照组、衰老模型组、阳性对照药（维生素E100mg/kg）组、巴戟天醇提物2.1g/kg和0.7g/kg两个剂量组,共5组,每组16只。各组一半动物,用分光光度计测定大鼠小脑组织中的SOD活性及MDA含量,以此分析巴戟天的抗氧自由基作用;另一半动物采用甲基绿-哌洛宁染色法观察大鼠小脑皮质蒲肯野细胞的形态变化,计算凋亡指数,用免疫组化法检测bcl-2蛋白及bax蛋白表达情况,以此来观察巴戟天醇提物的抗凋亡作用及其机制。结果：与空白对照组比较,衰老模型组大鼠小脑组织超氧化物歧化酶（SOD）活性降低、丙二醛（MDA）含量增加、蒲肯野细胞的凋亡指数增、bcl-2蛋白表达显著降低、bax蛋白表达显著升高（P〈0.01）;维生素E100mg/kg组、巴戟天醇提物2.1g/kg和0.7g/kg两个剂量组与衰老模型组相比,小脑组织SOD活性均明显增加、MDA含量显著降低、蒲肯野细胞凋亡指数显著降低、bcl-2蛋白表达显著升高、bax蛋白表达显著降低（P〈0.01）。巴戟天醇提物2.1g/kg组与VitE100mg/kg组的作用差异无显著性（P〉0.05）,而巴戟天醇提物0.7g/kg组与前两组相比小脑组织SOD活性降低、MDA含量增加、蒲肯野细胞的凋亡指数增、bcl-2蛋白表达显著降低、bax蛋白表达显著升高（P〈0.05）。结论：巴戟天醇提物对D-半乳糖致衰老大鼠小脑组织具有抗氧化作用及抗凋亡作用;巴戟天醇提物的抗凋亡作用可能与bcl-2pro-tein和bax蛋白表达的变化有关;巴戟天醇提物的抗氧化及抗细胞凋亡作用与阳性对照药VitE相似。     

益肾填精中药对环境内分泌干扰物染毒大鼠睾酮合成关键酶及雄激素受体表达的影响

目的观察益肾填精中药对邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(di-2-ethylhexylphthalate,DEHP)及氯氰菊酯(cypermethrin,CYP)染毒大鼠睾酮合成关键酶和雄激素受体(androgen receptor,AR)基因及蛋白表达水平的影响,探讨所用中药拮抗环境内分泌干扰物(environmental endocrine disruptors,EEDs)抗雄激素活性的可能作用机制。方法 70只21日龄雄性SD大鼠随机分为7组,每组10只。对照组(喂饲玉米油)、染毒A组(DEHP 500 mg/kg)、染毒B组(CYP 80 mg/kg)、染毒C组(DEHP 500 mg/kg+CYP 80 mg/kg)及治疗A组、治疗B组、治疗C组,治疗A、B、C组同时喂饲益肾填精中药合剂(40 m L/kg)。每日空腹灌胃给药,疗程为30天。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(real time polymerase chain reaction,real time-PCR)及免疫印迹方法(Western blot),分别检测St AR、CYP11A1、CYP17A1、3β-HSD、17β-HSD、AR mRNA及蛋白表达水平。结果与对照组比较,染毒A、B、C组St AR、CYP11A1、CYP17A1、3β-HSD、17β-HSD、AR mRNA表达水平显著下调(P0.05,P0.01)。中药治疗干预可使上述基因表达水平明显上调(P0.05,P0.01)。DEHP、CYP单独及联合染毒可导致CYP11A1、CYP17A1、AR蛋白表达水平显著下调(P0.05,P0.01),而中药治疗干预可使上述蛋白表达水平显著上调(P0.05,P0.01)。结论益肾填精中药可通过使睾丸的AR以及睾酮合成关键酶的表达上调,促进染毒大鼠自身睾酮的生物合成,多水平、多靶点地发挥其对EEDs抗雄激素活性及生殖毒性的拮抗作用。     

诃子、甘草与制草乌合用调控心脏代谢酶CYP2J3减毒机制

目的：基于心脏细胞色素P450(CYP450)系统分别考察诃子、甘草与制草乌及有效成分鞣花酸、甘草苷与乌头碱合用的减毒机制。方法：在体内实验方面,大鼠随机分为空白组,制草乌组（0.25 g·kg-1）,诃子组（0.25 g·kg-1）,甘草组（0.25 g·kg-1）和诃子+甘草+制草乌合用组（0.25 g·kg-1+0.25 g·kg-1+0.25 g·kg-1,以制草乌为标准）,给药8 d后测定大鼠肌酸激酶（CK）与乳酸脱氢酶（LDH）,观察大鼠心脏组织的病理学改变,并选择实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测细胞色素P2J3(CYP2J3) mRNA和蛋白表达水平的变化;在体外实验方面,设空白组、乌头碱组、鞣花酸组、甘草苷组与乌头碱+鞣花酸+甘草苷合用组,利用高内涵分析技术检测其对细胞数目、DNA含量、活性氧（ROS）和线粒体膜电位（MMP）的影响,同时检测CYP2J3 mRNA和蛋白表达水平的变化。结果：体内实验中,与空白组比较,制草乌组大鼠血清中CK、LDH水平均明显升高（P<0.05,P<0.01...     

苍术苷A对小鼠CYP450主要亚型表达的影响

目的研究苍术苷A对细胞色素P450(CYP450)主要亚型mRNA及蛋白表达水平的影响。方法将C57BL/6小鼠随机分为3组,正常对照组按体质量灌胃给予相当量0.9%的生理盐水、苍术苷A组(4 mg/kg)和苯巴比妥组(80 mg/kg)按相应剂量灌胃给药,每24 h 1次,连续2周。提取肝脏总RNA,实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测苍术苷A对CYP450主要亚型mRNA表达的影响;制备肝微粒体,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测苍术苷A对C57BL/6小鼠肝脏CYP450主要亚型蛋白表达的影响。结果 RT-PCR结果显示,苍术苷A对小鼠Cyp1a2的mRNA表达有显著上调作用。Western blot结果显示,苍术苷A对CYP1A2、CYP2C和CYP2E1蛋白表达有显著诱导作用。结论苍术苷A能显著诱导小鼠Cyp1a2的mRNA表达,和CYP1A2、CYP2C和CYP2E1蛋白表达。     

大戟配伍甘草对大鼠肝功能及肝脏微粒体中CYP3A2的影响

目的研究中药“十八反”中大戟与甘草配伍对大鼠肝功能和肝脏微粒体中CYP3A2在mRNA水平、蛋白表达及酶活性方面的影响。方法采用RT-PCR技术检测大鼠肝脏CYP3A2mRNA表达水平;利用Western-blot技术检测大鼠肝脏CYP3A2蛋白的表达;采用红霉素N-去甲基反应评价CYP3A2酶活性。结果大戟和甘草合用对大鼠肝功能损害最为严重;在mRNA水平、蛋白表达、酶活性方面,大戟组均高于空白组及其他各单用组。结论大戟、甘草可能存在基于药物代谢酶机理的相反作用,但需进一步结合代谢研究加以综合分析,阐明相反作用的机理。     

心脏药代酶的附子-甘草配伍减毒机制

目的:基于心脏细胞色素P450(cytochrome P450,CYP450)系统考察附子与甘草配伍后对正常大鼠心脏的减毒机制研究。方法:雄性SD大鼠,随机分为空白组、诱导剂苯巴比妥组(0.08 g·kg^-1·d^-1),附子组(0.5 g·kg^-1·d^-1),甘草组(0.5 g·kg^-1·d^-1)和附子-甘草组(0.5 g·kg^-1·d^-1)。检测大鼠心肌酶天冬氨酸氨基转移酶(aspartate transaminase,AST),肌酸激酶(creatine kinase,CK)和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)含量变化,同时观察大鼠心脏组织的病理学改变,并观察各组对药物代谢酶CYP2B1,CYP2C11,CYP2E1,CYP2J3,CYP4A1,CYP4A3,CYP4F1,CYP4F5,CYP4F6 mRNA表达水平的变化。结果:与空白组比较,附子组中大鼠血清AST,CK和LDH含量升高(P<0.05),配伍后AST,CK和LDH心肌酶的含量较附子组降低,但未出现统计学差异;同时病理学结果显示附子组大鼠出现心脏损伤,配伍后甘草可减轻由附子产生的心脏损伤作用;在基因转录水平,甘草组能不同程度地上调CYP2C11和CYP2J3 mRNA表达(P<0.05),甘草与附子配伍后能上调CYP2B1,CYP2C11和CYP2J3家族mRNA表达(P<0.05),推测配伍可促进花生四烯酸(arachidonic acid,AA)代谢生成环氧二十碳三烯酸(expxyeicosatrienoic acid,EETs),附子能上调CYP4家族中CYP4A1,CYP4A3,CYP4F1,CYP4F5和CYP4F6 mRNA表达(P<0.05),其能促进20-羟-二十烷四烯酸(20-hydroxyeicosatetraenoicacid,20-HETE)的生成,附子-甘草配伍后能削弱附子下调CYP4A3,CYP4F1,CYP4F5和CYP4F6家族mRNA表达的能力(P<0.05),抑制20-HETE的生成,减轻由附子产生的心脏毒性。结论:附子-甘草配伍后可调控心脏CYP450酶的表达,使EETs生成量增加,20-HETE含量减少,起到减毒的作用。     

复方丹参方对大鼠心脏细胞色素P450酶的影响

目的 研究复方丹参方及其单味药对大鼠心脏细胞色素P450酶（CYPs）主要亚型的影响。方法 雄性SD大鼠随机分为5组,分别用复方丹参方 [0.32 g/(kg?d)]、丹参 [0.27 g/(kg?d)]、三七 [0.05 g/(kg?d)]、冰片 [0.003 g/(kg?d)] 或生理盐水连续ig诱导处理28 d,取各组大鼠心脏组织,利用Real Time荧光定量PCR技术检测各组大鼠心脏CYPs各亚型mRNA表达水平的变化。结果 与对照组比较,复方丹参方对大鼠心脏CYP1B1、CYP2B1、CYP2E1、CYP4A1和CYP4F4的mRNA表达有下调趋势（P＜0.05）。丹参对CYP1A1、CYP1B1、CYP2B1、CYP2C11、CYP2E1、CYP2J3、CYP4A1、CYP4F4和CYP4F5的mRNA表达有下调趋势（P＜0.05、0.01）,而对CYP4A3、CYP4F1和CYP4F6的mRNA表达有上调趋势（P＜0.05）。三七对CYP1A1、CYP1B1、CYP2B1、CYP2C11、CYP2E1、CYP2J3、CYP4A1、CYP4A3、CYP4F4、CYP4F5和CYP4F6的mRNA表达均有不同程度的抑制趋势（P＜0.05、0.01）。冰片对CYP1A1、CYP1B1、CYP2B1、CYP2C11、CYP4A1和CYP4F4的mRNA表达有下调作用（P＜0.01）。结论 复方丹参方全方对心脏CYPs 亚型mRNA表达影响弱于方中各单味药对CYPs的影响,显示复方对CYPs影响可能是各单味药作用的综合和叠加,同时全方及单味药对CYP2家族和CYP4家族的影响显示其对心脏均有双向调节作用。     

黄芪多糖对脓毒血症大鼠模型肾上腺皮质醇相关合成酶及维生素D轴的影响

目的 探讨黄芪多糖对脂多糖诱导的脓毒血症肾上腺损伤大鼠血清皮质醇、25(OH)D₃水平及肾上腺皮质维生素D受体(VDR)、类固醇急性调节蛋白(STAR)、21α-羟化酶(CYP21)、17α-羟化酶(CYP17A1)mRNA表达情况的影响。方法 将60只雄性SD大鼠适应性喂养7 d后,随机分为对照组、模型组、黄芪多糖高(200 mg/kg)、中(100 mg/kg)、低(50 mg/kg)剂量组及维生素D(3×10^-5 mg/kg)组。分别对每组大鼠以相应剂量进行为时7 d的灌胃给药,并在造模前15 min和后6 h腹腔注射给药,12 h后取样。ELISA法检测大鼠血清皮质醇和25(OH)D₃水平,HE染色法观察大鼠肾上腺皮质组织病理学改变,RT-PCR技术检测大鼠肾上腺皮质VDR、STAR、CYP21、CYP17A1mRNA的表达情况。结果 相较对照组,模型组血清皮质醇和25(OH)D₃水平显著下降(P<0.05),肾上腺组织皮质区出现较明显的炎症反应,VDR、STAR、CYP21、CYP1...     

18β-甘草酸和18α-甘草酸对大鼠原代肝细胞 CYP3A酶表达的影响

目的:研究甘草中的2种成分18β-甘草酸和18α-甘草酸对原代培养大鼠肝细胞中细胞色素P450 3A(CYP3A)在mRNA及蛋白水平表达的影响,并探讨其剂量.效应关系.方法:原位两步胶原酶灌流法分离大鼠肝细胞并采用"胶原蛋白凝胶三明治"培养原代肝细胞,无血清条件下培养细胞,并用不同剂量的18β-甘草酸和18α-甘草酸处理细胞,RT-PCR法测定CYP3A mRNA表达水平,Western-blot法测定CYP3A蛋白表达.结果:实验条件下对照组、18β-甘草酸、18α-甘草酸处理组CYP3A基因及蛋白均可被检测,18βv甘草酸浓度依赖性诱导CYP3A mRNA(25～100 μmol·L~(-1))及蛋白表达(50～400μmol·L~(-1)),而18α-甘草酸浓度依赖性抑制CYP3A mRNA(25～100 μmol·L~(-1))及蛋白表达(25～100 μmol·L~(-1))表达.结论:18β-甘草酸和18αv甘草酸在转录水平上分别上调和下调大鼠肝细胞CYP3A的表达.