脑池内预应用肿瘤坏死因子-α对帕金森病小鼠黑质多巴胺神经元的影响及其机制

目的：研究脑池内预应用肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor—alpha，TNF—α)对1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氢吡啶(1-methy-4-phenyl-1，2，3，6-tetrahydropyridine，MPTP)诱导的帕金森病小鼠黑质多巴胺神经元的影响及可能作用机制。方法：实验于2003—09／2004—03在哈尔滨医科大学动物实验中心及病理实验室进行。以MPTP诱导小鼠帕金森病模型，各干预组脑池内预注入TNF—α(0，1，2，0，100．0ng)，24h后皮下注射MPTP40mg／(kg&;#183;d)，连用5d，并设对照。观察小鼠行为学改变，免疫细胞化学染色法检测黑质区酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元及活化型caspase-3阳性细胞。结果：模型组小鼠黑质TH阳性神经元[(22.429&;#177;7．254)／个]比对照组[(64.286&;#177;13.487)个]明显减少(t=66764，P&;lt;0.001)，模型组与对照组相比活化型caspase-3表达上调(P&;lt;0．001)；各干预组与模型组相比，黑质TH阳性神经元明显减少(P&;lt;0.05)，而且活化型caspase-3阳性细胞表达上调(P&;lt;0．05)。结论：脑池内以TNF—α预处理MPTP小鼠，使黑质多巴胺神经元损伤加重，其途径可能与caspase-3引起的细胞凋亡相关。     

帕金森病黑质多巴胺神经元的凋亡与其发病机制

目的：研究帕金森病黑质多巴胺神经元的死亡机制。方法：用四唑盐法及流式细胞仪观察囊泡单胺类转运体(Vesicular Monoamine Transporter，VMAT)功能抑制对大鼠嗜铬细胞瘤(pheochromoeytoma cell，PC12)细胞凋亡的影响。结果：多巴胺浓度为0．15，0．30，0．45，0．60mmol／L时，PC12细胞生存率为(89．3&;#177;7．7)％．(62．9&;#177;4．3)％，(42．5&;#177;2．7)％，(37．6&;#177;3．7)％，与对照组100％比较0．30组差异有显著性意义(t=2．373-5．323，P&;lt;0．05)，0．45组与0．60组比较差异有显著性意义(t=4．673-5．323．P&;lt;0．01)，利血平协同多巴胺作用时，其生存率为(73．7&;#177;3．9)％．(49．8&;#177;2．1)％。(31．6&;#177;1．9)％，(20．1&;#177;1．7)％，与对照组100％比较，差异有显著性意义(t=3．043-5．673，P&;lt;0．05)。结论：VMAT功能抑制引发了多巴胺的内源性毒性，进而诱发多巴胺神经元的凋亡，可较好解释帕金森病的发病机制。     

烟酰胺对帕金森病小鼠黑质细胞凋亡的影响

目的：探讨黑质细胞凋亡在帕金森病发病机制中的作用及烟酰胺对帕金森病小鼠黑质细胞凋亡和Bax蛋白表达的影响。方法：给C57BL小鼠腹腔注射1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氢吡啶(MPTP)制备帕金森病小鼠模型。利用原位缺口末端标记法(TUNEL)及Bax免疫组化方法观察黑质细胞凋亡情况及烟酰胺干预的影响。结果：帕金森病小鼠黑质致密带可见大量凋亡细胞[(19.43&;#177;3．33)个／视野]Bax蛋白表达(Bax阳性细胞平均灰度值80.59&;#177;3.73)。预先应用烟酰胺能使凋亡细胞减少[(6.33&;#177;2．35)个／视野]，烟酰胺+MPTP甲组与MPTP组间比较差异有显著性意义(q=9．23，P&;lt;0.05)。预先应用烟酰胺也能使Bax蛋白表达降低(Bax阳性细胞平均灰度值107．59&;#177;2.50)，烟酰胺+MPTP组与MPTP组间比较差异有显著性意义(q=7.44，P&;lt;0．05)结论：烟酰胺可降低MPTP诱导的C57BL小鼠黑质细胞Bax蛋白表达，减少黑质细胞凋亡。     

肿瘤坏死因子-α与胎膜早破

目的 探讨肿瘤坏死因子（TNF）-α在胎膜早破发病机制中的作用及意义。方法 采集无任何妊娠并发症、临产前要求剖宫产分娩的初产妇（包括19例足月胎膜早破、15例足月前胎膜早破和作对照的17例正常未破膜者）血、羊水及胎膜，用双抗体夹心酶联免疫吸附实验法测定血清、羊水中TNF-α的浓度，胎膜常规苏木素-伊红染色后行组织病理学检查及TUNEL技术精确标记后细胞凋亡指数的测定。结果 ①胎膜早破组血清、羊水中TNF-α浓度明显高于对照组，差异有显著性（P〈0.05或〈0.01）；且胎膜早破组胎膜感染的发生率和胎膜的细胞凋亡指数也较对照组高，差异有显著性（P〈0.05或〈0.01）；但足月和足月前胎膜旱破两组间血清、羊水中TNF-α浓度、胎膜感染率和细胞凋亡指数差异均无显著性（P〉0.05）。②胎膜有感染组血清、羊水中TNF-α浓度及胎膜细胞凋亡指数明显高于无感染组，差异有显著性（P〈0.01）；在无感染组中胎膜早破的血清、羊水中TNF-α浓度及胎膜细胞凋亡指数也较对照组高，差异有显著性（P〈0．01）。③所有研究对象血清、羊水中TNF-α浓度呈明显正相关（r=0．386，P〈0.01）。结论 TNF-α在胎膜早破发病机制中有促炎、降解细胞外基质、诱导细胞凋亡等功效；神经内分泌免疫网络失衡所致的胎膜细胞凋亡增加可能是胎膜早破的又一发病机制。     

磁刺激对帕金森病鼠黑质多巴胺能神经元的保护及其机制

目的探讨重复经颅磁刺激（rTMS）对帕金森病(PD)小鼠黑质多巴胺能神经元及胶质源性神经营养因子（GDNF）的影响。 方法32只雄性C57BL/6J小鼠随机分为生理盐水组、模型组、假刺激组及磁刺激组，每组8只。采用1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)皮下注射，每次15 mg/kg体重，连续注射4次，每次间隔2 h,建立急性PD小鼠模型。磁刺激组小鼠每天接受1 Hz、1 T的磁刺激治疗（共5个序列，25脉冲/序列）,疗程为2周。经rTMS干预后，通过免疫组织化学技术检测黑质酪氨酸羟化酶(TH)和GDNF的表达变化，并借助图像分析系统进行定量分析。 结果模型组、假刺激组TH免疫阳性(TH-ir)和GDNF免疫阳性(GDNF-ir）细胞计数、校正光密度(COD)值较生理盐水组减少(P<0.01)；磁刺激组TH-ir和GDNF-ir细胞计数、COD值均较模型组和假刺激组增加（P<0.05）。相关分析显示黑质区TH-ir和GDNF-ir细胞计数呈明显正相关(r=0.836,P<0.01)，相应的COD值比较亦呈明显正相关(r=0.921,P<0.01)。 结论rTMS明显增加PD小鼠黑质 TH-ir细胞数量和COD值，推测其对黑质多巴胺能神经元具有保护作用，而上调黑质区GDNF的表达可能是其作用机制。     

急性中毒患者血清肿瘤坏死因子α检测的临床意义

目的 探讨血清肿瘤坏死因子α(TNFα)在急性中毒中的临床意义。方法 采用ELISA 法检测80例急性中毒患者(镇静催眠药、乙醇、一氧化碳、农业杀虫剂各20例)及20例正常人血清 TNFα。结果 急性镇静催眠药中毒组(SH 组)与急性一氧化碳中毒(CO 组)血清 TNFα均高于正常对照组(P<0.05,P<0.001),急性乙醇中毒组(AL 组)和急性农业杀虫剂中毒组(FI组)与对照组间差异无显著性(P>0.05);CO 组血清 TNFα明显高于 AL 组与 FI 组(P<0.001),余各组间差异无显著性(P>0.05);SH 组与 AL 组治疗后血清 TNFα均低于治疗前血清 TNFα(P<0.05),CO 组治疗后血清 TNFα明显低于治疗前(P<0.001),FI 组治疗后血清 TNFα与治疗前差异无显著性(P>0.05)。结论 血清 TNFα在急性镇静催眠药中毒及急性一氧化碳中毒中的增高是由于组织器官严重缺氧而刺激其升高,故抗氧化剂及氧自由基清除剂治疗急性镇静催眠药中毒、一氧化碳中毒等中毒机理为组织器官缺氧的急性中毒是有效的。     

电针治疗对帕金森病大鼠多巴胺能神经元的影响

目的 观察电针治疗对帕金森病大鼠黑质多巴胺（DA）能神经元的影响。方法 选取Wistar大白鼠40只，随机分为正常组、假手术组、模型组和电针组，以6-羟基多巴胺（6-OHDA）注入中脑右侧黑质制作单侧黑质损毁的帕金森病大鼠模型，电针组采用电针进行治疗。检测各组大鼠黑质酪胺酸羟化酶（TH）阳性神经元数、DA能神经元凋亡数及纹状体DA含量。结果 与正常组和假手术组比较，模型组大鼠损毁侧DA能神经元凋亡数增加，TH阳性神经元数和纹状体DA含量减少，差异均有统计学意义（均P〈0．05）；与模型组比较，电针组大鼠损毁侧DA能神经元凋亡数减少，TH阳性神经元数和纹状体DA含量增加，差异均有统计学意义（均P〈0．05）。结论 电针治疗对帕金森病黑质DA能神经元损伤有一定的防治作用。     

肿瘤坏死因子-α在炎症与肿瘤中的作用

肿瘤坏死因子-α（TNF-α）主要是由脂多糖刺激巨噬细胞而分泌的一种蛋白质,具有多种生物活性的炎性细胞因子,与其他细胞因子共同作用参与激活免疫反应,介导全身炎症,诱发肿瘤的发生,并可致肿瘤坏死。TNF-α被认为与调节致病性休克、组织损伤和内毒素血症等相关;是所发现的抗肿瘤活性较强的炎性细胞因子,在炎症与肿瘤的发生发展中具有重要作用。     

山莨菪碱对急性肺损伤肿瘤坏死因子-α的影响及意义

目的 研究创伤性急性肺损伤（ＡＬＩ）家兔体内肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）的变化,探讨山莨菪菪碱（６５４－２）对创伤性ＡＬＩ及多器官功能障碍（ＭＯＤＳ）的防治作用及可能机制。方法 采用家兔创伤性ＡＬＩ模型,实验动物随机分为正常对照组（８只）创伤模型组（１０只）、６５４－２治疗组（１０只）。用ＥＬＩＳＡ方法检测不同时相点血浆中ＴＮＦ－α的呈。用免疫组织化学法结合原位定量分析检测肺、肝、心、肾组织ＴＮＦ－     

肿瘤坏死因子-α抑制剂治疗银屑病的研究进展

银屑病是一种易于复发,难于治愈的自身免疫性皮肤病,一旦发病往往需要终身治疗。近年来,以阻断相应的免疫反应靶点的多种生物制剂在对中至重度银屑病的治疗上取得了显著的疗效。其中肿瘤坏死因子-α抑制剂（tumornecm—sisfactor-α inhibition,TNF—α I）依那西普、英夫利昔单抗、阿达木单抗的使用越来越多。本文就TNF-αI对银屑病治疗的研究进展进行综述。     

雌激素对帕金森病大鼠中脑黑质多巴胺能神经元的保护作用

背景雌激素对中脑黑质多巴胺含量的影响在国内外已有报?雌激素的神经细胞保护作用还正处于研究中.目的观察雌激素对去卵巢大鼠中脑黑质多巴胺能神经元的作用,探讨雌激素对帕金森病防治的可能性.设计以实验动物为研究对象,随机对照的验证性研究.单位一所军医大学医院的全军神经外科研究所.材料实验于2003-10/2004-02在解放军第四军医大学西京医院全军神经外科研究所进行试验,选择一级健康雌性Wistar大鼠50只.干预50只大鼠随机分为5组,第1组为正常对照组,第2组为假手术组,第3,,5组为去卵巢组第3组术后给予10μg(2次/d)的苯甲酸雌二醇,第4组给予雌激素的同时给予雌激素受体拮抗剂三苯氧胺5μg(2次/d).第5组不给药物.每组10只.应用立体定向技术注射6-羟基多巴胺于大鼠中脑黑质,采用免疫组织化学的方法对黑质TH阳性神经元进行标记、记数.同时,对大鼠的行为学进行观测.主要观察指标①各组大鼠在阿朴吗啡诱导下的旋转圈数.②各组大鼠手术后30 d中脑黑质TH阳性神经元数量.结果正常对照组、假手术组与应用雌激素各组之间差异无显著性意义(P＞0.05).手术后苯甲酸雌二醇组与无药组之间差异有显著性意义(P＜0.05).应用雌激素同时应用三苯氧胺组与苯甲酸雌二醇组差异有显著性意义(P＜0.05);与无药组之间差异也存在显著性意义(P＜0.05).大鼠中脑黑质TH阳性神经元数目与其他对照组比较也有显著性意义(P＜0.05).结论雌激素对雌性大鼠中脑黑质多巴胺能神经元具有保护作用,除了经过雌激素受体途径以外,还有其他的作用机制.     

1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶诱导的帕金森病小鼠模型多巴胺能神经元的缺失方式

目的:观察1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyritine,MPTP)诱导的帕金森病小鼠急性模型与亚急性模型多巴胺能神经元的缺失方式。方法:实验于2004-11/2005-02在华北煤炭医学院解剖教研室实验室完成。①C57bl小鼠30只,随机分为3组:对照组、急性模型组、亚急性模型组,每组10只。②给予模型组小鼠腹腔注射MPTP,其中亚急性组30mg/(kg·d),连用5d;急性组一天内给药4次,每次20mg/kg,间隔时间一两个小时;对照组给予等量生理盐水。③最后一次注射后24h内取脑,制备石蜡切片。应用原位末端标记法、酪氨酸羟化酶、原癌基因蛋白Bcl-2和细胞色素C蛋白免疫组化染色观察多巴胺能神经元凋亡和改变。结果:30只小鼠均进入结果分析。经免疫组化法发现酪氨酸羟化酶、原癌基因蛋白Bcl-2、细胞色素C蛋白染色阳性细胞数在急性模型组与亚急性模型组之间差别具有显著意义[(22.40±2.06),(68.20±3.61)个/切片;(20.60±2.41),(66.80±2.12)个/切片;(93.0±2.24),(23.2±2.58)个/切片,P<0.001]。④应用原位末端标记法在急性模型组未发现凋亡,而亚急性模型组存在凋亡现象。结论:MPTP诱导的帕金森病小鼠急性模型多巴胺能神经元的缺失可能通过坏死实现,而亚急性模型则是通过凋亡来实现的。     

1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氢吡啶诱导的帕金森病小鼠模型多巴胺能神经元的缺失方式

目的：观察1-甲基-4-苯基-1，2，3,6-四氢吡啶（1-methyl-4-phenyl-1，2，3,6-tetrahydropyritine，MPTP）诱导的帕金森病小鼠急性模型与亚急性模型多巴胺能神经元的缺失方式。 方法：实验于2004-11／2005-02在华北煤炭医学院解剖教研室实验室完成。（1）57bl小鼠30只，随机分为3组：对照组、急性模型组、亚急性模型组，每组10只。（2）给予模型组小鼠腹腔注射MPTP，其中亚急性组30mg／（kg&;#183;d），连用5d；急性组一天内给药4次，每次20mg/kg，间隔时间一两个小时；对照组给予等量生理盐水。（3）最后一次注射后24h内取脑，制备石蜡切片。应用原位末端标记法、酪氨酸羟化酶、原癌基因蛋白Bcl-2和细胞色素C蛋白免疫组化染色观察多巴胺能神经元凋亡和改变。 结果：30只小鼠均进入结果分析。经免疫组化法发现酪氨酸羟化酶、原癌基因蛋白Bcl-2、细胞色素C蛋白染色阳性细胞数在急性模型组与亚急性模型组之间差别具有显著意义[（22.40&;#177;2．06），（68．20&;#177;3．61）个／切片；（20．60&;#177;2．41），（66.80&;#177;2．12）个／切片；（93.0&;#177;2.24），（23.2&;#177;2．58）个／切片。P〈0．001]。（4）应用原位末端标记法在急性模型组未发现凋亡，而亚急性模型组存在凋亡现象。 结论：MPTP诱导的帕金森病小鼠急性模型多巴胺能神经元的缺失可能通过坏死实现。而亚急性模型则是通过凋亡来实现的。     

Elevated circulating tumor necrosis factor-alpha in patients with Kawasaki disease

The mechanism of vascular injury in Kawasaki disease (KD) is unclear. Recent studies suggest a role for circulating antibodies that are cytotoxic for endothelial cell antigens inducible by cytokines. Tumor necrosis factor-alpha (TNF, cachectin) is a monocyte- or macrophage-derived cytokine that has an important role as an effector molecule in various inflammatory processes. To study the possible involvement of TNF in KD, we measured the levels of circulating TNF in 39 patients with KD at various stages of the disease by using a newly developed sensitive radioimmunoassay. The TNF levels in sera from the acute and subacute phases of the disease were significantly (p less than 0.001) higher than in sera taken in the convalescence phase or in sera from children without inflammatory disease. In all patients from whom serial samples were available, the TNF level was higher during the acute and subacute phases than during convalescence. Coronary aneurysms developed in four of the patients, and these patients were among those who had the highest levels of circulating TNF during the acute and subacute phase (51.1 +/- 13.6 pg/ml (mean +/- SD) vs 30.4 +/- 15.8 pg/ml in patients without coronary aneurysms; p less than 0.001). No differences in circulating TNF levels were observed between patients who received as treatment aspirin plus intravenous immunoglobulin and those who received aspirin alone. The results show that the levels of circulating TNF are increased in acute KD and support the hypothesis that this cytokine may be involved in the pathogenesis of the vascular injury in KD.     

Brain-derived tumor necrosis factor-alpha and its involvement in noradrenergic neuron functioning involved in the mechanism of action of an antidepressant

The present study documents a role for brain-derived tumor necrosis factor-alpha (TNF) in the mechanism of action of the antidepressant drug desmethylimipramine (desipramine). To establish this role, field stimulation and superfusion of rat hippocampal slices was employed to investigate the regulation of norepinephrine (NE) release by TNF. Chronic desipramine administration transforms TNF-mediated inhibition of NE release to facilitation, dependent upon alpha2-adrenergic receptor activation. Chronic i.c.v. microinfusion of polyclonal TNF antibody (pTNF-Ab) similarly transforms TNF inhibition of NE release to facilitation. To determine whether this transformation is due to desipramine-induced inhibition of TNF bioactivity in the brain, rats were i.c.v. microinfused with recombinant rat TNF (rrTNF) for 14 days, either alone or with simultaneous i.p. desipramine administration. TNF regulation of NE release in hippocampal slices isolated from these rats was compared with slices isolated from rats chronically administered desipramine alone. Although simultaneous microinfusion of rrTNF with chronic desipramine administration prevents the transformation induced by desipramine, microinfusion of rrTNF enhances TNF inhibition of NE release. These cellular events correspond to changes in immobility, analyzed by the forced swim test (FST). Intracerebroventricular microinfusion of rrTNF increases the duration of immobility of rats in the FST, compared with rats microinfused with aCSF. Desipramine administered chronically decreases immobility duration, which is mimicked by i.c.v. microinfusion of pTNF-Ab and prevented by simultaneous i.c.v. microinfusion of rrTNF. Thus, i.c.v. microinfusion of rrTNF with concomitant desipramine administration opposes decreases in neuron-associated TNF levels, required to transform presynaptic sensitivity to TNF, which is necessary for the drug to be efficacious.     

同型半胱氨酸和褪黑素对离体帕金森病模型大鼠多巴胺能神经元的影响

目的:观察同型半胱氨酸对离体帕金森病模型的影响及褪黑素的保护作用。方法:实验于2003-09/2004-02在华中科技大学同济医学院附属协和医院神经内科实验室完成。参考文献制备离体帕金森病大鼠模型,将2月龄健康SD雌性大鼠12只分成4组,6-羟多巴胺对照组及6-羟多巴胺 褪黑素、6-羟多巴胺 同型半胱氨酸对照组及6-羟多巴胺 同型半胱氨酸组 褪黑素组,每组3只。褪黑素组和对照组分别腹腔注射褪黑素(10mg/kg)或等量生理盐水,时间为3d,然后取脑片分别置于含6-羟多巴胺或6-羟多巴胺 同型半胱氨酸的人工脑脊液中孵育2h。免疫组织化学方法观测各组大鼠黑质酪氨酸羟化酶阳性细胞体及突起的变化。用硫代巴比妥酸法、黄嘌呤氧化酶法、Claiborne法分别检测各组大鼠丙二醛、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶。结果:每组实验动物均达到实验目的,全部进入结果分析。①酪氨酸羟化酶免疫组织化学结果:6-羟多巴胺对照组与6-羟多巴胺 同型半胱氨酸对照组酪氨酸羟化酶阳性细胞数目减少,突起严重缺失,有突起的酪氨酸羟化酶阳性神经元占所有酪氨酸羟化酶阳性神经元的比例降低,并有无定型模糊的背景染色。而经过褪黑素干预的6-羟多巴胺 褪黑素组与6-羟多巴胺 同型半胱氨酸 褪黑素组脑片的酪氨酸羟化酶阳性细胞数目相对较多,细胞膜较为完整,突起缺失相对较少,有突起的酪氨酸羟化酶阳性神经元占所有酪氨酸羟化酶阳性神经元的比例明显增多。差异有显著性(P<0.01)。②丙二醛、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶检测结果:6-羟多巴胺 同型半胱氨酸对照组及6-羟多巴胺 同型半胱氨酸组 褪黑素组与6-羟多巴胺对照组及6-羟多巴胺 褪黑素组相比丙二醛值高,超氧化物歧化酶、过氧化氢酶值低,差异有显著性(P<0.01)。6-羟多巴胺对照组与6-羟多巴胺 褪黑素组比较丙二醛值高,超氧化物歧化酶、过氧化氢酶值低,差异有显著性(P<0.01);6-羟多巴胺 同型半胱氨酸对照组与6-羟多巴胺 同型半胱氨酸 褪黑素组比较丙二醛值高,超氧化物歧化酶、过氧化氢酶值低,差异有显著性(P<0.01)。结论:同型半胱氨酸加重离体帕金森病模型动物的多巴胺能神经元损伤,其机制可能与氧化应激反应有关。褪黑素能减轻同型半胱氨酸的氧化应激反应。     

同型半胱氨酸和褪黑素对离体帕金森病模型大鼠多巴胺能神经元的影响

目的：观察同型半胱氨酸对离体帕金森病模型的影响及褪黑素的保护作用。 方法：实验于2003—09／2004—02在华中科技大学同济医学院附属协和医院神经内科实验室完成。参考文献制备离体帕金森病大鼠模型，将2月龄健康SD雌性大鼠12只分成4组，6-羟多巴胺对照组及6-羟多巴胺＋褪黑素、6-羟多巴胺＋同型半胱氨酸对照组及6-羟多巴胺＋同型半胱氨酸组＋褪黑素组，每组3只。褪黑素组和对照组分别腹腔注射褪黑素（10mg／kg）或等量生理盐水，时间为3d，然后取脑片分别置于含6-羟多巴胺或6-羟多巴胺＋同型半胱氨酸的人工脑脊液中孵育2h。免疫组织化学方法观测各组大鼠黑质酪氨酸羟化酶阳性细胞体及突起的变化。用硫代巴比妥酸法、黄嘌呤氧化酶法、Claiborne法分别检测各组大鼠丙二醛、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶。 结果：每组实验动物均达到实验目的，全部进入结果分析。①酪氨酸羟化酶免疫组织化学结果：6-羟多巴胺对照组与6-羟多巴胺＋同型半胱氨酸对照组酪氨酸羟化酶阳性细胞数目减少。突起严重缺失，有突起的酪氨酸羟化酶阳性神经元占所有酪氨酸羟化酶阳性神经元的比例降低，并有无定型模糊的背景染色。而经过褪黑素干预的6-羟多巴胺＋褪黑素组与6-羟多巴胺＋同型半胱氨酸＋褪黑素组脑片的酪氨酸羟化酶阳性细胞数目相对较多，细胞膜较为完整，突起缺失相对较少，有突起的酪氨酸羟化酶阳性神经元占所有酪氢酸羟化酶阳性神经元的比例明显增多。差异有显著性（P〈0．01）。②丙二醛、超氧化物歧化酶、过氧化氧酶检测结果：6-羟多巴胺＋同型半胱氨酸对照组及6-羟多巴胺＋同型半胱氨酸组＋褪黑素组与6-羟多巴胺对照组及6-羟多巴胺＋褪黑素组相比丙二醛值高，超氧化物歧化酶、过氧化氢酶值低，差异有显著性（P〈0．01）。6-羟多巴胺对照组与6-羟多巴胺＋褪黑素组比较丙二醛值高，超氧化物歧化酶、过氧化氢酶值低，差异有显著性（P〈0．01）；6-羟多巴胺＋同型半胱氨酸对照组与6-羟多巴胺＋同型半胱氨酸＋褪黑素组比较丙二醛值高，超氧化物歧化酶、过氧化氢酶值低，差异有显著性（P〈0．01）。 结论：同型半胱氨酸加重离体帕金森病模型动物的多巴胺能神经元损伤，其机制可能与氧化应激反应有关。褪黑素能减轻同型半胱氨酸的氧化应激反应。     

Effects of ultrasound on the structure and function of tumor necrosis factor-alpha

The objective of this study was to investigate the effects of ultrasound on the structure and function of human tumor necrosis factor-alpha (TNF-alpha) and to study whether TNF-alpha underwent a denaturation process and the molecular structure was damaged when it was irradiated by ultrasound. The samples of TNF-alpha were dissolved in aqueous solution and filled into polystyrene tubes. High intensity ultrasound processor (20 kHz frequency, burst mode, 0.5 duty factor, 100-500 W total electrical power, 0-20 min total treatment time) was used during the treatment. The biologic activity of TNF-alpha was determined by its toxic activity towards TNF-alpha sensitive cell line L929 in the presence of actinomycin D. The methods of sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) and matrix-assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry (MALDI-TOF-MS) were used to detect the integrity of TNF-alpha molecule after it was irradiated by ultrasound. The results showed TNF-alpha could keep its biological activity, instead of undergoing a denaturation process, when it is irradiated by ultrasound in the aqueous solution; at the same time, the aggregates of TNF-alpha formed by the recombinant DNA E. coli could be dissociated through the molecular vibration induced by ultrasound energy. The biologic activity of TNF-alpha was not reduced, but small quantities of TNF-alpha molecular structure were damaged during the process of sonication. These features of TNF-alpha molecule irradiated by ultrasound probably gave TNF-alpha the advantage in being used in the drug microencapsulation and provided a new drugs formulation for tumor therapy.     

半胱胺通过抗氧化保护帕金森病模型小鼠多巴胺能神经元机制研究

目的观察半胱胺(CS)通过何种机制保护1-甲基-4-苯基1,2,3,6四氢吡啶(MPTP)所致C57BL小鼠多巴胺能神经元的退变。方法取78只SPF级C57BL小鼠,随机分为6组:对照组,MPTP组,CS 20mg/kg+MPTP组,CS 75mg/kg+MPTP组,MPTP+CS 20mg/kg,MPTP+CS 75mg/kg组。MPTP:20mg/kg 5d,CS 2次/d,皮下注射,共14天。反向高效液相色谱-电化学检测纹状体多巴胺的含量;免疫组织化学检测黑质酪氨酸羟化酶阳性细胞,色谱法检测黑质氧化应激指标。结果 CS(20mg/kg)组抑制C57BL小鼠黑质细胞内的ROS、MDA,促进细胞内谷胱甘肽的合成,保护了多巴胺能神经元;CS(75mg/kg)组对黑质多巴胺浓度及多巴胺能神经元数目无改善作用。结论半胱胺抗氧化保护PD小鼠模型的多巴胺能神经元,保护作用与给药剂量密切相关。