参麦注射液及人参皂苷Rb1、Rg1抗神经、血管内皮、星形胶质细胞缺氧/缺糖损伤的研究

目的研究参麦注射液及其成分人参皂苷Rb1、Rg1对神经、血管内皮、Ⅰ型星形胶质细胞缺氧/缺糖再给氧损伤的保护作用,揭示参麦注射液脑保护作用的细胞机制,并初步确定其主要效应成分.方法培养神经、血管内皮、星形胶质三种细胞,含连二亚硫酸钠的无糖Earle's液模拟造成缺氧/缺糖损伤,台盼蓝染色、MTT法、乳酸脱氢酶(LDH)漏出率评价药效.结果参麦注射液及其成分人参皂苷Rb1、Rg1对正常培养的三种细胞均无明显毒性损伤;与缺氧/缺糖再给氧损伤模型组比较,参麦注射液及人参皂苷Rb1、Rg1各组的LDH漏出率、细胞死亡率显著下降(P<0.001),细胞存活率显著提高(P<0.001～P<0.05).结论参麦注射液的脑保护作用机制与其对神经、血管内皮、Ⅰ型星形胶质三种细胞缺氧/缺糖再给氧损伤的保护作用有关,人参皂苷Rb1、Rg1是其脑保护作用的主要效应成分;提示参麦注射液能够应用于中风病急性期的治疗.     

雌激素对星形胶质细胞缺氧缺糖损伤的影响

目的 研究雌激素对缺氧、缺糖诱导的鼠脑星形胶质细胞(As)损伤和凋亡的影响.方法 原代培养大鼠大脑皮层星形胶质细胞,并建立缺氧、缺糖诱导的细胞损伤模型;用不同终浓度的雌激素(1～100nmnol/L)预处理星形胶质细胞,以吉姆萨染色观察细胞形态学变化,以四甲基偶氮唑盐(MTT)还原实验检测细胞活力,以乳酸脱氢酶(LDH)漏出率作为细胞损伤指标,以流式细胞术检测凋亡细胞.结果 缺氧、缺糖处理后可引起细胞活力下降,LDH漏出率增高,细胞凋亡率增高.雌激素预处理后,与缺氧、缺糖损伤组相比,细胞活力增高、LDH漏出率降低,同时细胞凋亡率也降低(p＜0.05),最大效应剂量为20nmol/L.结论 雌激素能够减轻缺氧、缺糖诱导的鼠脑星形胶质细胞损伤、降低其凋亡率,并呈一定的剂量依赖关系.     

雌激素对星形胶质细胞缺氧缺糖损伤的影响

目的研究雌激素对缺氧、缺糖诱导的鼠脑星形胶质细胞(As)损伤和凋亡的影响。方法原代培养大鼠大脑皮层星形胶质细胞,并建立缺氧、缺糖诱导的细胞损伤模型;用不同终浓度的雌激素(1~100nmol/L)预处理星形胶质细胞,以吉姆萨染色观察细胞形态学变化,以四甲基偶氮唑盐(MTT)还原实验检测细胞活力,以乳酸脱氢酶(LDH)漏出率作为细胞损伤指标,以流式细胞术检测凋亡细胞。结果缺氧、缺糖处理后可引起细胞活力下降,LDH漏出率增高,细胞凋亡率增高。雌激素预处理后,与缺氧、缺糖损伤组相比,细胞活力增高、LDH漏出率降低,同时细胞凋亡率也降低(p&lt;0.05),最大效应剂量为20nmol/L。结论雌激素能够减轻缺氧、缺糖诱导的鼠脑星形胶质细胞损伤、降低其凋亡率,并呈一定的剂量依赖关系。     

肝细胞生长因子对星形胶质细胞缺氧缺糖损伤的影响

目的：研究肝细胞生长因子(HGF)对缺氧、缺糖诱导的星形胶质细胞（As）损伤及凋亡的影响。方法：以缺氧、缺糖来诱导原代培养的大鼠大脑皮层星形胶质细胞损伤。用不同终浓度（20～100ng/mL）的HGF处理星形胶质细胞,以乳酸脱氢酶（LDH）漏出率作为细胞损伤指标,四甲基偶氮唑盐（MTT）还原试验检测细胞活力,流式细胞术检测凋亡细胞,透射电镜观察细胞超微结构。结果：缺氧缺糖引起LDH漏出率增高,细胞活力下降,细胞凋亡率增高。HGF处理后,LDH漏出率降低,细胞活力增高,同时细胞凋亡率降低（P＜0.05）,最大效应剂量为60ng/mL。结论： HGF对星形胶质细胞缺氧缺糖损伤具有保护作用,能减少星形胶质细胞凋亡,并呈一定的剂量依赖关系。     

亚低温对缺氧缺糖星形胶质细胞活力的影响

目的 探讨亚低温对缺氧星形胶质细胞的保护作用.方法 原代培养大鼠大脑皮层星形胶质细胞,设亚低温组(34℃)和常温组(37℃),同时于缺氧缺糖条件下培养,在相应时间点观察细胞形态,并用台盼兰排染法检测细胞存活率,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞活力.结果 亚低温组各项指标均优于常温组(P＜0.01).结论 亚低温对缺氧/缺糖星形胶质细胞具有保护作用.     

瘦素对缺血缺氧损伤脑星形胶质细胞凋亡的影响

目的 研究瘦素对缺血缺氧/复氧损伤星形胶质细胞凋亡的影响及其作用机制.方法 制作缺血缺氧大鼠脑皮质星形胶质细胞损伤模型,MTT法检测星形胶质细胞活力;采用Annexin V-FITC试剂盒检测星形胶质细胞凋亡;RT-PCR和Western blot方法检测凋亡相关基因bcl-2、bax、caspase-3的表达.结果 与缺血缺氧损伤组比较,瘦素干预组星形胶质细胞存活率升高(P<0.01)、凋亡率下降(P<0.01);抑凋亡基因bcl-2 mRNA和蛋白表达水平上调(P<0.01),促凋亡基因bax、caspase-3 mRNA和蛋白表达水平下调(P<0.01),呈剂量依赖性.结论 瘦素能够使凋亡相关基因bcl-2表达上调、bax和caspase-3表达下调,从而抑制缺血缺氧损伤星形胶质细胞发生凋亡.     

丹酚酸B对大鼠皮层神经元缺糖缺氧损伤的影响

目的探讨丹酚酸B(SalB)对原代培养大鼠皮层神经元缺糖缺氧损伤的影响。方法采用原代培养的大鼠皮层神经元,随机分为正常组、模型组和丹酚酸B组,复制缺糖缺氧4h的细胞模型,MTT法观察神经元的活性和存活率,比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)漏出率,流式细胞仪检测线粒体膜电位(MMP)、细胞内游离Ca2 和细胞凋亡率。结果丹酚酸B组神经元的活性(0.450±0.105)、存活率(58.20±13.56)%以及MMP荧光值(126.24±12.09)高于模型组神经元的活性(0.336±0.037)、存活率(43.40±4.73)%以及MMP荧光值(109.75±10.15),两者比较有明显差异(P(0.05);而丹酚酸B组LDH漏出率(15.84±1.47)%、细胞内Ca2 荧光强度(66.75±5.93)及凋亡率(4.82±2.48)%则低于模型组的LDH漏出率(27.39±3.75)%、细胞内Ca2 荧光强度(101.09±16.08)及凋亡率(10.83±2.13)%,两者相比亦有显著性差异(P(0.01)。结论丹酚酸B通过维持细胞内Ca2 稳态,稳定线粒体膜电位及降低细胞凋亡率,对缺糖缺氧损伤的大鼠皮层神经元起到保护作用。     

黄芪甲苷的抗氧化性对缺氧缺糖H9c2细胞的保护作用探讨

目的:探讨黄芪甲苷(AST-Ⅳ)的抗氧化性对缺氧缺糖H9c2细胞的保护作用.方法:对用无糖Na2S2O4溶液制造的细胞缺氧模型给予AST-Ⅳ预处理,同时以抗氧化能力相近的抗氧化剂水溶性维生素E(Trolox)作为对照检测细胞内氧自由基(ROS)、丙二醛(MDA)的浓度和乳酸脱氢酶(LDH)漏出率,CCK-8检测细胞存活率,FITC-annexin V/PI双染检测凋亡情况.结果:经60 μmol·L-1的AST-Ⅳ预处理后,细胞内ROS、MDA浓度较模型组有明显下降(P<0.01),下降程度与Trolox预处理组相近.AST-Ⅳ预处理组细胞存活率明显高于模型组(P<0.01),但低于Trolox预处理组(P<0.01).AST-Ⅳ预处理组LDH漏出率和细胞凋亡率较模型组均下降(P<0.01),但不如Trolox预处理组下降明显(P<0.01).结论:AST-Ⅳ能减轻无糖Na2S2O4溶液造成的细胞氧化应激,但效果不如Trolox,其抗氧化性对H9c2细胞的保护作用有限.     

AMPK激动剂AICAR抑制糖氧剥夺损伤后星形胶质细胞的炎性反应及对神经元损伤的保护作用

目的:探讨AMPK激动剂AICAR对糖氧剥夺（oxygen-glucose deprivation,OGD）损伤后原代星形胶质细胞炎性反应的影响及对损伤神经元的保护作用。方法:通过构建原代培养星形胶质细胞和神经元的OGD模型,在正常培养的原代星形胶质细胞中加入对照溶剂和AICAR（0.5 mmol/L）,后给予OGD处理,在复氧第12小时通过ELISA检测促炎因子肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素（IL）-6和IL-1β的表达变化,通过Western blotting方法检测磷酸化p38的蛋白表达;再将上述对照组和AICAR组OGD处理后的星形胶质细胞培养液,加入OGD损伤后的原代培养神经元中,通过LDH检测及免疫荧光双标方法,检测AICAR对缺糖缺氧损伤神经元的保护作用。结果:在原代培养神经元及星形胶质细胞OGD损伤模型中,与对照组比较,AICAR组显著地降低了OGD损伤后星形胶质细胞分泌的促炎因子TNF-α、IL-6和IL-1β（P<0.01）,抑制p38磷酸化,且明显降低了缺糖缺氧造成的神经元损伤（P<0.01）,促进损伤的神经突起修复。结论:AICAR抑制OGD损伤后星形胶质细胞炎性因子的释放,对OGD损伤神经元具有保护作用。     

低浓度凝血酶预处理对星形胶质细胞氧糖剥夺损伤的影响

目的:研究低浓度凝血酶(TB)预处理对培养的鼠脑星形胶质细胞(As)在氧糖剥夺(OGD)诱导损伤后的影响.方法:原代培养的大鼠大脑皮层AS,预先用不同低浓度(0.005～5.000 kU/L)的TB处理(TB预处理,TPC),观察在缺糖和缺氧(氧糖剥夺)培养状态下细胞的功能状态和损伤情况.以四甲基偶氮唑盐(MTT)还原试验检测细胞活力,乳酸脱氢酶(LDH)漏出率作为细胞损伤指标,流式细胞术检测细胞凋亡发生率,[3H]-谷氨酸摄取法测定As对谷氨酸(Glu)摄取能力的变化.结果:OGD引起细胞活力下降,LDH漏出率增高,OGD诱发细胞凋亡,降低As对Glu的摄取,上述指标与正常对照组相比均具有统计学意义(P＜0.01);而经低浓度TB预处理后,OGD损伤造成的LDH漏出率较低,细胞凋亡发生率降低,同时MTT值提高,As对Glu的摄取也增高,与OGD组比较有统计学意义(P＜0.05),其中最佳TB效应剂量为0.10 kU/L.结论:低浓度TB预处理的As,可增强在OGD环境下的损伤耐受能力,具有细胞保护作用.     

不同干燥方法对潞党参药材品质的影响

目的?比较不同干燥方法对潞党参药材品质的影响,优选出潞党参的干燥工艺。方法?采集山西平顺产新鲜党参,分别采用传统与现代干燥方法加工,以党参炔苷、苍术内酯Ⅲ、紫丁香酚苷、党参多糖的含量,药材的外观性状为评价指标,探讨不同干燥方式对潞党参品质的影响;同时结合干燥时间、能耗等因素对各干燥方式综合评价,优选最佳干燥工艺。结果?不同干燥方法和条件下,潞党参功效物质含量差异明显,在低温下较稳定,温度过高会对其造成损失,若以党参炔苷、苍术内酯Ⅲ、紫丁香酚苷含量为指标,红外干燥方式最佳;以党参总多糖含量为指标,红外、热风及微波干燥方式均较好;综合功效物质含量、样品外观、干燥时间及能耗等多因素综合评价得出温度60?℃,红外干燥或热风干燥均为潞党参的适宜干燥方法。结论?不同干燥方法对潞党参药材品质有较大影响,通过多元指标监测潞党参的干燥工艺可实现潞党参加工的精准调控,为生产中提升潞党参药材品质提供借鉴。      

党参中党参炔苷的HPLC分析

目的:分析不同来源党参中党参炔苷的含量。方法:采用高效液相色谱分析,依利特E1515900色谱柱(4.6mm×200mm,5μm),以乙腈-0.1%HAc(28∶72)为流动相,检测波长267.3nm。结果:在选定的色谱条件下,党参炔苷分离度良好,线性好,线性范围宽,r=0.9990,平均回收率98.1%,RSD=0.81%(n=6)。测定结果显示,不同来源党参中党参炔苷的含量不同。结论:所建立的方法简便,灵敏,可以快速检测不同样品中的党参炔苷的含量。     

HPLC法测定不同产地党参药材中党参炔苷的含量

目的 测定不同产地党参药材中党参炔苷的含量,比较不同产地、不同规格党参的质量.方法 采用HPLC法,色谱柱为Diamonsil C18(250 mm x4.6 mm,5 μm)柱,流动相为乙腈-水(体积比25:75),检测波长为268 nm,进样量20 μL.结果 党参炔苷在0.008 5-0.425 mg/mL(r=...     

神经再生素对乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的:研究神经再生素(NRF)对纯化培养心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及机制。方法:采用纯化培养的心肌细胞建立缺氧/复氧损伤模型,观察心肌细胞形态学变化,测定细胞超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)和线粒体脱氢酶含量改变,探讨NRF对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用。结果:缺氧/复氧损伤后,胞体折光性下降,突起缩短或消失,搏动减弱或消失,NRF各剂量组心肌细胞形态均较缺氧/复氧组明显改善,NRF各剂量组SOD、MDA、线粒体脱氢酶活性与缺氧/复氧组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论:神经再生素具有明显的抗缺氧/复氧损伤,保护心肌作用,其机制可能与其抑制心肌脂质过氧化损伤有关。     

党参根系分泌物对自身种子萌发的影响

目的通过发芽试验,研究党参幼苗根系分泌物对自身种子萌发的影响,进而探索党参能否连作的问题,从而寻求一条更有利于党参集约化种植的方式。方法用不同提取时间的党参根系分泌物水溶液处理党参种子,观察各组的种子发芽率,并与自来水作对比。结果党参根系分泌物水溶液处理的自身种子发芽率显著低于自来水处理的种子发芽率,并且党参根系的生长时间越长,也就是根系分泌物越多,对党参种子发芽率的影响越大。结论党参根系分泌物对其自身种子萌发有一定的抑制作用,连作不利于党参种子的萌发,在耕作栽培时应当避免。     

山西省潞党参野生抚育技术研究

目的:通过对潞党参的野生抚育和大田种植两种模式的田间试验对比以及结果分析,研究潞党参最佳野生抚育模式、采收期及抚育密度等。方法:选取山西重点药材品种潞党参在其道地产区陵川县布点试验并分析。结果:潞党参野生抚育最适合荒地抚育;适宜生长年限为2年,适宜采收期为9月下旬～10月中旬;最佳抚育密度为13 cm×9 cm。结论:潞党参具有在山西进行野生抚育的优势,并值得在山西推广。     

潞党参多糖的提取及含量测定

目的：从潞党参中提取多糖并测定多糖含量。方法：用水提醇沉法提取潞党参多糖;用苯酚．硫酸法测定其含量。结果：测得潞党参中多糖含量为20．99％,平均收回率为99．03％,RSD=1．01％(n=3)。结论：潞党参中多糖含量较高,具有开发利用价值。     

明党参果实脂肪油成分GC/MSD分析

目的 分析明党参果实脂肪油中的化学成分，为开发新的药用资源提供一定的依据。方法 自明党参果实中提得游离脂肪油和结合脂肪油，分别制备成甲酯衍生物，采用GC/MSD联用技术分析鉴定。结果 明党参果实中游离脂肪油含（Z）9-十八碳烯酸[9-Octadecenoic acid(Z)],(Z,Z)9,11-十八碳二烯酸[9，11-Octadecadienoic acid(Z,Z)]，棕榈酸（Palmitic acid)等；结合脂肪油中主含棕榈酸，（Z，Z）9，12-十八碳二烯酸[9，12-Octadecadienoic acid(Z,Z)],(Z)9-十八碳烯酸[9-Octadecenoic acid(Z)]。硬脂酸（Stearic acid)。油酸（Oleic acid)等。结论 明党参果实含有较多的不饱和脂肪油。     

中药党参中微量元素与氨基酸含量的测定

目的：测定中药党参中微量元素与氨基酸的含量,并探讨其生理意义。方法：采用AAS-6000型原子吸收分光光度计测定微量元素的含量,采用LC98-ⅠAAA型氨基酸分析仪测定氨基酸的含量。结果：中药党参中含有12种微量元素和16种氨基酸。结论：党参具有极为重要的营养、保健、防病、治病的功效。