Smad4表达异常与结直肠癌的相关性研究

目的 探讨结直肠组织Smad4 mRNA及其蛋白表达水平变化、Smad4基因CpG岛异常甲基化与结直肠癌及其临床病理特征的关联性.方法 应用RT-PCR方法及测序、半定量RT-PCR方法、甲基化特异性PCR(MSP)技术和免疫组织化学方法,各自检测43例患者的结直肠癌组织、癌旁组织及30例结直肠腺瘤组织、12例健康人结肠黏膜组织.结果 43例结直肠癌组织中有25例(58.14%)Smad4 mRNA检测到阳性表达,其阳性表达率(58.14%)及表达水平(0.73±0.25)均低于相应的癌旁组织(88.37%,0.95±0.29)、腺瘤组织(90.63%,1.01±0.37)和健康人黏膜组织(100.00%,1.18±0.33),差异均有统计学意义(P＜0.05).Smad4基因启动子甲基化阳性率结直肠癌组织(60.53%)明显高于癌旁组织(27.03%)、腺瘤组织(25.00%)和健康人黏膜组织(16.67%),差异均有统计学意义(P＜0.05).Smad4蛋白表达的阳性率结直肠癌组织(44.19%)明显低于癌旁组织(81.40%)、腺瘤组织(87.50%)和健康人黏膜组织(91.67%),差异均有统计学意义(P＜0.05),并随着浸润深度加深和淋巴结转移,阳性率也随之下降.结论 Smad4的低表达与结直肠癌的发展、生物学行为和预后可能有关,可作为重要的生物学标志及病期评估的标志之一.     

Skp2在结直肠癌中的表达及其与VEGF、MVD的关系

背景:近年来结直肠癌的发病率和死亡率呈上升趋势,从基因水平诊断和治疗癌症已成为一种新兴的有效手段。目的:探讨S期激酶相关蛋白2(Skp2)在结直肠癌中的表达及其与血管内皮生长因子(VEGF)、肿瘤微血管密度(MVD)的关系。方法:选取2014年3月—2015年3月湖北医药学院附属人民医院35例结直肠癌患者,以15例癌旁组织作为对照。采用免疫组化SP法检测Skp2、VEGF表达和MVD值,分析其与临床病理特征的关系。结果:结直肠癌组织中Skp2表达显著高于癌旁组织(P=0.000),且与肿瘤分化、淋巴结转移呈正相关(P0.05),与性别、年龄、TNM分期无明显相关性(P0.05)。结直肠癌VEGF表达和MVD值显著高于癌旁组织(P=0.019,P=0.002),且与结直肠癌淋巴结转移和TNM分期相关(P0.05)。结直肠癌Skp2表达与VEGF表达、MVD值均呈正相关(r=0.569,P=0.000;r=0.481,P=0.017)。结论:结直肠癌组织Skp2异常高表达可能与肿瘤血管生成有关,Skp2、VEGF表达和MVD值可作为判断结直肠癌恶性程度的重要指标。     

Clusterin、Livin、Caspase-3在结直肠腺瘤和腺癌组织中的表达及其相关性

目的探讨clusterin、livin、caspase-3蛋白在结直肠腺瘤和腺癌组织中的表达及相关性。方法应用免疫组织化学SP法检测Clus-terin、Livin、Caspase-3蛋白在140例结直肠癌、40例结直肠腺瘤及20例切缘黏膜石蜡切片组织中的表达。结果 (1)结直肠癌组织中Clusterin的表达率(71.4%)明显高于腺瘤的阳性表达率(15%)和结直肠切缘组织的阳性表达率(0%,P0.05)。随着TNM分期增高、分化程度降低及淋巴结转移,Clusterin在结直肠癌中的表达明显增高(P0.05)。(2)Livin在结直肠癌组织中的阳性表达率(64.3%)高于在腺瘤(20%)和结直肠切缘组织的阳性表达率(10%,P0.05)。Livin在结直肠癌中的表达随着TNM分期增高而明显增高(P0.05)。(3)Caspase-3在癌组织中的阳性表达率(45.7%)明显低于腺瘤(75%)和结直肠切缘组织的阳性表达率(80%,P0.05)。结直肠癌中Caspase-3的表达随着TNM分期的增加而降低(P0.05)。(4)结直肠癌组织中Clusterin与Livin的表达呈正相关(r=0.387,P0.05),Clusterin、Livin与Caspase-3的表达呈负相关(r=-0.308、r=-0.333,均P0.05)。结论Clusterin、Livin在结直肠癌发生中起促进作用,Caspase-3对Clusterin、Livin抗凋亡通路发挥着负调节作用。Clusterin与Livin的联合靶向治疗,有望成为大肠癌治疗的新方法。     

结直肠癌组织中CD40mRNA的表达变化及临床意义

目的 观察结直肠癌组织中CD40 mRNA的表达变化,并探讨其临床意义.方法 应用RT-PCR法分别检测30例结直肠癌及其癌旁组织中CD40 mRNA的相对表达量,并分析其表达与结直肠癌患者性别、肿瘤大小、浸润深度、淋巴结转移、远处转移、TNM分期相关性.结果 结直肠癌组织中CD40 mRNA的表达水平显著低于癌旁组织(P＜0.05);结直肠癌组织中CD40 mRNA的表达水平与肿瘤大小、淋巴结转移、TNM分期相关(P＜0.05),与患者性别、浸润深度及远处转移无关(P＞0.05).结论 结直肠癌组织中CD40mRNA表达显著降低,并与肿瘤的浸润性生长相关;CD40分子可能成为判断结直肠癌预后的有效指标.     

结直肠中组蛋白去乙酰化酶的表达及意义

目的探讨组蛋白去乙酰化酶(HDAC1)在结直肠癌中的表达并分析其临床意义。方法免疫组织化学法检测89例结直肠癌组织、89例癌旁组织、32例正常结/直肠组织和21例腺瘤组织中HDAC1表达情况,统计学分析HDAC1染色强度与临床病理特征关系。结果癌组织、癌旁组织、腺瘤组织和正常结/直肠组织中HDAC1表达强阳性率分别为73.0%(65/89)、56.2%(50/89)、66.7%(14/21)和40.6%(13/32);HDAC1表达与患者Dukes分期、组织学分型和淋巴结转移相关,与患者性别、年龄及肿瘤的大小无关。Dukes A~B分期HDAC1强阳性表达率明显低于Dukes C~D分期(χ2=5.939,P=0.031)。低、未分化组HDAC1强阳性表达率显著高于高、中分化腺癌(χ2=18.692,P=0.036)。有淋巴结转移患者HDAC1强阳性表达率显著高于无淋巴结转移组(χ2=21.025,P=0.030)。结论 HDAC1高表达与结直肠癌患者临床病理学特征相关。免疫组化方法检测HDAC1在结直肠癌中的表达,有可能成为预测结直肠癌患者对HDAC抑制剂治疗反应的新手段。     

NF-κB信号通路关键蛋白I-κBα的磷酸化与结直肠癌组织发生发展的关联性

目的探究I-κB蛋白磷酸化在炎症因子高表达的结直肠癌组织中的作用。方法选取进行结直肠癌治疗的患者30例作为病例组,另选取进行肠镜活检且结直肠正常的患者30例作为对照组,观察比较两组血清白细胞介素(IL)-1、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α的表达水平,观察病例组癌组织、癌旁组织、正常组织中IL-1、IL-6、TNF-αmRNA表达量及Toll样受体(TLR)通路转录因子核因子(NF)-κB和I-κB的表达,I-κB与不同组织中炎症因子表达的关联性。结果病例组血清炎症因子IL-1、IL-6、TNF-α表达显著高于对照组(P0.05);癌组织中IL-1、IL-6和TNF-αmRNA表达量显著高于癌旁组织和正常组织,且癌旁组织上述指标显著高于正常组织,差异具有统计学意义(P0.05);NF-κB和β-actin在癌组织、癌旁组织和正常组织中的表达灰度值相比,差异不具有统计学意义(P0.05),但正常组织的I-κB蛋白表达量显著高于癌旁组织和癌组织,差异具有统计学意义(P0.001);病例组中I-κB的表达与组织中炎症因子IL-1(r=-0.551,P=0.031)、IL-6(r=-0.658,P=0.004)和TNF-α(r=-0.947,P=0.000)表达呈显著负相关。结论 I-κB表达缺失可能介导了结直肠癌中炎性因子的高表达,靶向调节I-κB具有潜在治疗前景。     

Rab5A在结直肠癌中的表达及其意义

背景:结直肠癌是消化系统常见恶性肿瘤之一,多数患者确诊时已为进展期,预后较差,早期诊断对改善患者预后尤为重要。目前,分子标记物诊断结直肠癌备受关注。目的:探讨Rab5A在结直肠癌中的表达及其意义。方法:收集135例行结直肠癌切除术患者的癌组织及其配对癌旁非癌组织。采用real-time PCR检测21例患者癌组织及其配对癌旁非癌组织以及结肠癌细胞株HCT116、HT-29、LoV o、SW480和正常结肠上皮细胞株NCM460中的Rab5A mRNA表达;采用蛋白质印迹法检测4例患者癌组织及其配对癌旁非癌组织中的Rab5A蛋白表达;采用免疫组化法检测110例患者癌组织中的Rab5A蛋白表达;分析Rab5A表达与结直肠癌临床病理特征和预后的关系。结果:结直肠癌组织中的Rab5A mRNA表达水平显著高于癌旁非癌组织(P=0.003);结肠癌细胞株HCT116、HT-29、LoV o、SW480中的Rab5A mRNA表达水平显著高于正常结肠上皮细胞株NCM460(P0.05)。结直肠癌组织中的Rab5A蛋白表达水平显著高于癌旁非癌组织。110例结直肠癌组织中,51例(46.4%)为Rab5A低表达,59例(53.6%)为Rab5A高表达。Rab5A蛋白表达与肿瘤大小、血清癌胚抗原(CEA)水平和TNM分期相关(P=0.008;P=0.002;P=0.010)。Rab5A高表达患者的3年生存率显著低于低表达者(52.1%对77.5%,P0.05)。Rab5A、血清CEA和TNM分期与结直肠癌患者的预后相关(P=0.009;P=0.006;P=0.017),是影响预后的独立因素(P=0.026;P=0.032;P=0.014)。结论:Rab5A参与了结直肠癌的恶性演进过程,其高表达提示患者预后不良,可作为预测结直肠癌患者预后的有效指标。     

老年结直肠癌组织中miR-182表达及其与临床病理参数的关系

目的探讨老年结直肠癌组织中微小RNA(miR)-182的表达及其与临床病理参数的关系。方法选择绍兴市人民医院2010年1月至2011年12月70岁以上老年结直肠癌患者120例结直肠癌组织及其相应的癌旁组织标本。采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)测定结直肠癌组织和癌旁组织中miR-182水平。结果结直肠癌组织中miR-182水平明显高于癌旁组织(P0.05)。结直肠癌组织中miR-182水平与结直肠癌TNM分期、淋巴结转移和远处转移明显相关(P0.05),TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴结转移、有远处转移患者结直肠癌组织中miR-182水平明显高于Ⅰ～Ⅱ期、无淋巴结转移、无远处转移患者(P0.05);结直肠癌组织中miR-182水平与结直肠癌患者年龄、性别、肿瘤部位、肿瘤浸润深度、癌胚抗原(CEA)水平无关(P0.05)。结直肠癌组织中miR-182水平诊断结直肠癌的受试者工作特征(ROC)曲线下面积为0.812,95%CI为0.809～0.815,miR-182水平界值为1.623,灵敏度为86.34%,特异度为77.16%。miR-182低表达患者的生存率明显高于高表达者(P=0.009)。结论老年结直肠癌组织中miR-182水平升高,miR-182水平与结直肠癌的临床分期、淋巴结转移、远处转移有关,有望成为结直肠癌诊断和预后预测的潜在指标。     

趋化因子受体CCR7在结直肠癌中的异常表达

目的: 检测趋化因子受体CCR7在结直肠癌中的表达状态,探讨CCR7在结直肠癌发病中的作用.方法:采用免疫组化检测标本中CCR7蛋白表达,逆转录PCR(RT-PCR)检测CCR7mRNA表达,Western blotting检测结肠癌细胞CCR7蛋白表达.结果:45例结直肠癌组织标本检出CCR7 mRNA表达,而其相应的癌旁组织中12例检出(x2=34.44,P<0.01).34例结直肠癌组织标本检出CCR7蛋白表达,其相应的癌旁组织中,则有6例检出(x2=28.51,P<0.01).结肠癌细胞SW-480中CCR7mRNA和蛋白表达显著,而在HT-29中表达较弱.结论:CCR7参与结直肠癌的发病过程,其表达与结直肠癌转移有关.     

Role of insulin-like growth factor-1R system in colorectal carcinogenesis

The insulin-like growth factor (IGF) system is comprised of receptors, ligands (IGF-I and IGF-II), and a family of binding proteins (IGFBPs). It plays an important role in growth and development and in the maintenance of normal homeostasis. We present a review of the current laboratory and epidemiologic evidence that suggests an important role of the IGF system in colorectal carcinogenesis. Due to the complexity of this system, we have focused the review on the role of the IGF-1 receptor and its ligands in colorectal carcinogenesis and the strategies to block this pathway as a potential anti-cancer therapy.     

大肠癌患者血清sIL-2R和TNF检测的临床意义

目的研究大肠癌患者血清可溶性白细胞介素－２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）变化的临床意义．方法采用双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法对７６例大肠癌患者手术前后血清ｓＩＬ－２Ｒ和ＴＮＦ水平进行检测，其中根治性手术４８例，姑息性手术２８例，以４０例献血员为正常对照组．结果大肠癌患者血清ｓＩＬ－２Ｒ（Ｕ／Ｌ）和ＴＮＦ（ｐｇ／Ｌ）分别为６０３６±９４３和９６２±９１，明显高于正常对照组的２０８３±７９６和２５１±４７（Ｐ＜００１），两者的增高与大肠癌Ｄｕｋｅ分期及手术方式不同密切相关．结论动态观察血清ｓＩＬ－２Ｒ和ＴＮＦ的变化，可作为大肠癌诊断、评价疗效及监测预后的参考指标．     

大肠癌患者血清中sIL-2R、IL-8水平变化及其意义

目的:探讨sIL-2R、IL-8在大肠癌患者术前术后血清中表达及临床意义.方法:双抗体夹心ELISA法检测28例大肠癌患者的sIL-2R、IL-8血清水平;并同时检测大肠息肉患者17例和健康人25例作为对照组.结果:大肠癌患者血清中sIL-2R、IL-8含量明显高于对照组以及大肠息肉组(180.1±83.22VS 61.3±12.12,52.3±11.21;3.09±0.21 VS 2.49±0.19,2-33±0.18,均P＜0.001),手术后显著下降,其中根治组下降显著(80.2±40.31VS 114.1±72.3,2.53±0.15 VS 2.81±0.17,均P＜0.01),姑息组亦有所下降(242.1±60.3 V5 319.84±67.3,2.77±0.20 VS 3.67±0.19;均P＜0.05).大肠癌患者血清slL-2R、IL-8变化与分化程度呈正相关.结论:动态监测sIL-2R、IL-8的血清表达量有助于临床进行疗效评价,判断大肠癌患者的预后.     

Current and future molecular diagnostics in colorectal cancer and colorectal adenoma

Colorectal cancer(CRC)is one of the most prevalent cancers in developed countries.On the other hand,CRC is also one of the most curable cancers if it is detected in early stages through regular colonoscopy or sigmoidoscopy.Since CRC develops slowly from precancerous lesions,early detection can reduce both the incidence and mortality of the disease.Fecal occult blood test is a widely used non-invasive screening tool for CRC.Although fecal occult blood test is simple and cost-effective in screening CRC,there is room for improvement in terms of the accuracy of the test.Genetic dysregulations have been found to play an important role in CRC development.With better understanding of the molecular basis of CRC,there is a growing expectation on the development of diagnostic tests based on more sensitive and specific molecular markers and those tests may provide a breakthrough to the limitations of current screening tests for CRC.In this review,the molecular basis of CRC development,the characteristics and applications of different non-invasive molecular biomarkers,as well as the technologies available for the detection were discussed.This review intended to provide a summary on the current and future molecular diagnostics in CRC and its pre-malignant state,colorectal adenoma.     

Liver resection for colorectal liver metastases with peri‐operative chemotherapy: oncological results of R1 resections

BackgroundRetrospective analysis of outcomes of R0 (negative margin) versus R1 (positive margin) liver resections for colorectal metastases (CLM) in the context of peri‐operative chemotherapy.MethodsAll CLM resections between 2000 and 2006 were reviewed. Exclusion criteria included: macroscopically incomplete (R2) resections, the use of local treatment modalities, the presence of extra‐hepatic disease and no peri‐operative chemotherapy. R0/R1 status was based on pathological examination.ResultsOf 86 eligible patients, 63 (73%) had R0 and 23 (27%) had R1 resections. The two groups were comparable for the number, size of metastases and type of hepatectomy. The R1 group had more bilobar CLM (52% versus 24%, P = 0.018). The median follow‐up was 3.1 years. Five‐year overall and disease‐free survival were 54% and 21% for the R0 group and 49% and 22% for the R1 group (P = 0.55 and P = 0.39, respectively). An intra‐hepatic recurrence was more frequent in the R1 group (52% versus 27%, P = 0.02) and occurred more frequently at the surgical margin (22% versus 3%, P = 0.01).DiscussionR1 resections were associated with a higher risk of intra‐hepatic and surgical margin recurrence but did not negatively impact survival suggesting that in the era of efficient chemotherapy, the risk of an R1 resection should not be considered as a contraindication to surgery.