三氯乙烯染毒SD大鼠肝脏的基因表达图谱

目的分析三氯乙烯(TCE)染毒多次后SD大鼠肝脏的基因表达图谱,为研究机体多次接触TCE其肝脏所产生的分子毒理学反应特性提供线索。方法SD大鼠背部皮内注射体积分数为15%的TCE,每7d1次。分别于第5和第7次染毒后24h收集大鼠的肝脏组织,提取总RNA,用Affymetrix的大鼠U34毒理基因芯片分析其基因表达谱。结果大鼠染毒TCE5次及7次24h肝脏中的Gadd45a、Myc和Mel基因及与固醇类、脂类代谢合成相关的基因或电子传递相关的P450家族基因显著性上调表达,而部分P450家族和热胁迫基因则下调表达。结论本文首次报道了SD大鼠多次接触TCE后肝脏组织的基因表达图谱。     

CD40及CD154在糖尿病大鼠肾损伤中的作用

目的研究CD40及CD154(CD40L)在不同时间段糖尿病肾损害大鼠外周血单个核细胞和肾小管上皮细胞的表达及作用。方法雄性SD大鼠40只,随机分为对照组10只和实验组30只。实验组用链脲佐菌素(STZ)60mg/kg一次性腹腔注射SD大鼠,分别于1、4、12周将模型组与对照组大鼠处死,流式细胞术测定外周血单个核细胞表面CD40及CD154的表达;取肾脏组织,做病理切片及抗CD40免疫组织化学染色。结果 HE染色显示,与正常对照组相比,模型组有炎症细胞浸润,肾小管上皮细胞损伤和肾小球膨胀,基底膜增厚。注射链脲佐菌素1周后与对照组相比,CD40-CD154+在单个核细胞中的表达无差异。4、12周与对照组相比,CD40-CD154+在单个核细胞中的表达上升(P0.05);免疫组化染色显示,4周和12周肾实质细胞CD40表达高于对照组(P0.05)。结论在模型组外周血单个核细胞表面CD154的表达升高和肾小管上皮细胞CD40的表达上调在糖尿病大鼠的肾损伤中起了非常重要的作用。     

三氯乙烯所致接触性皮炎小鼠免疫功能的变化

目的研究三氯乙烯(TCE)刺激BALB/c小鼠产生接触性皮炎,观察TCE对小鼠免疫功能的影响。方法采用背部皮内注射TCE染毒BALB/c小鼠,观察脾脏、胸腺脏器系数的变化情况,对脾和胸腺细胞进行体外淋巴细胞活力和增殖功能测定,腹腔巨噬细胞吞噬功能测定,NK细胞杀伤活性测定及小鼠血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)、干扰素(IFN-γ)含量的测定。结果TCE实验组胸腺脏器系数显著低于阴性对照组(P<0.01);TCE实验组T淋巴细胞活力及增殖能力显著高于阴性对照组(P<0.01);TCE实验组的巨噬细胞吞噬率和NK细胞杀伤活性显著高于阴性对照组(P<0.01);TCE实验组小鼠血清中TNF-α的含量显著高于阴性对照组(P<0.01)。结论三氯乙烯能够诱发接触性皮炎,其中毒机制属于迟发型超敏反应。     

气传真菌染毒对大鼠外周血单个核细胞白细胞介素-4mRNA表达的影响

采用气传真菌孢子混合悬液气管染毒大鼠 ,并以逆转录聚合酶链式反应的方法观察了大鼠外周血单个核细胞 (PBMCs)白细胞介素 4(IL 4)细胞因子mRNA表达情况。结果表明 ,气传真菌孢子气管染毒大鼠可使其外周血单个核细胞高表达IL 4mRNA。实验结果提示IL 4在真菌所致过敏反应中有重要作用。     

桑椹花青素对大鼠佐剂性关节炎抑制作用

目的 研究桑椹花青素对佐剂性关节炎的抗炎功效.方法 将60只大鼠随机分为6组,在除正常对照组外的所有大鼠右后足跖皮内注射弗氏完全佐剂0.1 ml,观察大鼠左后足肿胀度,用比色法检测动物血清的谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、总抗氧化能力(T-AOC)及一氧化氮(NO)的水平;用放射免疫法测定血清和继发性炎症区域炎症因子白细胞介素-1(IL-1)和肿瘤坏死因子(TNF)的水平.结果 桑椹花青素对大鼠继发性足肿胀有一定抑制作用,与模型组相比,桑椹花青素高、中、低组左侧继发性足肿胀度明显低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);能够明显提高大鼠血清中的GSH-Px、SOD活力及T-AOC水平,降低血清中MDA含量;降低血清及关节浸液中IL-1β和TNfa的水平,在抑制血清NO的合成中有一定的作用.结论 桑椹花青素对佐剂性关节炎具有一定抑制作用,其抗炎活性可能与其较强的抗氧化活性有关.     

新生鼠体外神经干细胞培养、分化及鉴定

目的 探索新生SD大鼠神经干细胞体外分离培养基鉴定的方法。方法 分离新生SD大鼠海马组织, 无血清培养技术培养神经干细胞, 免疫组织化学技术检测其巢蛋白的表达;并用溴脱氧尿嘧啶核苷掺入试验, 免疫荧光双标技术观测神经干细胞的增殖状况;诱导神经干细胞分化, 分别用神经元特异性烯醇化酶抗体和胶质纤维酸性蛋白抗体进行免疫组织化学技术鉴定分化细胞。结果 获得大量悬浮生长的单克隆神经球, 并可以分化为神经元和星形胶质细胞。结论 成功培养的新生SD大鼠神经干细胞具有增殖、自我更新和多分化潜能, 为体外基础和临床研究奠定基础。     

γ射线辐照外周血单个核细胞对人胃癌MKN-28细胞的杀伤作用

目的 观察γ射线辐照外周血单个核细胞对培养人胃癌细胞系MKN-28细胞的杀伤作用.方法 实验设MKN-28肿瘤细胞对照组、单纯外周血单个核细胞对照组、照射和未照射的外周血单个核细胞与肿瘤细胞共培养组,照射剂量为0.5～3Gy.利用吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)荧光双染色法,观察外周血单个核细胞对肿瘤细胞的杀伤情况.结果 在外周血单个核细胞照射后各组培养至144h均有大量细胞死亡,存活细胞明显少于未照射组,培养至240h时,照射与非照射组中存活的外周血单个核细胞均减少,但是在照射的各组中减少更为明显.在外周血单个核细胞与MKN-28肿瘤细胞共培养组中,各照射组间在培养72h内无明显差异,在共培养96～240h时,0.5～2Gy γ射线照射外周血单个核细胞对胃癌细胞的杀伤作用明显增强,尤其是1Gy 组.而2.5与3Gy γ射线辐照组对肿瘤细胞的杀伤作用明显低于0.5～2Gy各组,在培养至240h时,仍有肿瘤细胞存活并出现增生.结论 γ射线辐照对某些外周血单个核细胞有损伤作用,0.5～2Gy γ射线辐照的外周血单个核细胞杀伤肿瘤细胞活性增强,肿瘤细胞对辐照后的外周血单个核细胞有趋化及细胞毒作用,2.5Gy和3Gy γ射线辐照对分离后的外周血单个核细胞对肿瘤细胞杀伤有抑制作用.     

药物建立大鼠心衰恶病质模型

目的:是通过异丙肾上腺素建立能够代表心衰恶病质特征的大鼠模型.方法:100只雄性SD大鼠随机分成异丙肾上腺素(ISO)组和对照组,ISO组大鼠共30只注射ISO(250mg/kg·d),隔日一次,共2次;对照组(n=10),注射等体积9g/L·d生理盐水.4周后超声心动图检测存活大鼠的左室舒张末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVESD)、左室射血分数(LVEF).结果:ISO组模型成功率60%;(2)超声心动图:与对照组相比,ISO组LVEDD、LVESD显著增大(P<0.05),LVEF降低(P<0.05),差异均有统计学意义;结论:应用异丙肾上腺素建立大鼠心衰恶病质模型是较为方便、可行的方法.     

三氯乙烯对大鼠睾丸细胞DNA损伤和氧化应激的影响

目的 研究三氯乙烯(TCE)对大鼠睾丸细胞DNA损伤和睾丸组织氧化应激的作用.方法 选用雄性SD大鼠,分为3组,每组5只,用1 500、3 000 mg/kg的TCE经口灌胃染毒,48 h处死动物.用单细胞凝胶电泳(彗星实验)检测睾丸细胞DNA损伤并检测睾丸组织中活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)的含量.结果 TCE在1 500、3 000 mg/kg剂量条件下,睾丸细胞DNA的Olive尾矩增加,DNA损伤细胞率也明显增高(P<0.01);大鼠睾丸组织的ROS、MDA均较对照组显著增高(P<0.01),同时还原型GSH叉较对照组明显下降(P<0.01).结论 TCE在1 500、3000 mg/kg剂量条件下染毒大鼠后,造成睾丸组织明显的氧化应激并引起睾丸细胞DNA损伤.     

T、B淋巴细胞及细胞因子在三氯乙烯诱发过敏反应中的作用

目的利用三氯乙烯(TCE)染毒的小鼠模型,研究T、B淋巴细胞及细胞因子在TCE诱发过敏反应中的作用。方法以皮肤接触同时结合吸入对12只小鼠进行致敏处理,6周后耳部涂抹TCE进行激发。以耳肿胀系数作为评价小鼠过敏反应的指标;分离脾细胞体外培养,采用噻唑蓝(MTT)法测定脾淋巴细胞抗原特异性增殖反应;酶联免疫吸附测定(ELISA)方法测定细胞培养上清液中IgG和白介素-4(IL-4)、γ型干扰素(IFN-γ)水平;应用流式细胞技术进行淋巴细胞亚群分析。结果TCE致敏组小鼠脾淋巴细胞加入TCE体外培养后,细胞存活率明显高于溶剂对照组[(79±10)%vs(63±11)%,P<0·05];细胞培养上清液中IgG水平(与二甲基亚砜对照孔比较的相对值)在两组间比较差异有显著性[(70±5%)vs(53±6)%,P<0·01]。流式细胞分析结果显示,TCE致敏组脾淋巴细胞与TCE共培养后,CD3 T细胞占总淋巴细胞的比例[(41·6±4·4)%]及CD4 /CD8 (2·1±0·6)与对照组比较[分别为(39·4±4·0)%和(2·3±0·9)],差异无显著性(P>0·05)。TCE致敏组小鼠激发时未见耳肿胀,然而TCE致敏组小鼠IFN-γ/IL-4比值(0·54±0·12)明显低于溶剂对照组(0·90±0·22,P<0·01)。结论TCE能够诱导T淋巴细胞的增殖活化,分泌Th2型细胞因子,并刺激B淋巴细胞分泌抗原特异性的IgG抗体。     

白芍总苷对大鼠佐剂关节炎抗炎作用及机制研究

目的 探讨白芍总苷(total glucosides of paeonia:TGP)对佐剂关节炎大鼠足爪组织中核转录因子NF-κB/p65蛋白表达的抑制作用和对大鼠足爪组织病理改变的影响及血清中血管内皮生长因子(VEGF)和白介素-17(IL-17)含量的影响.方法 建立Ⅱ型胶原诱导的佐剂关节炎大鼠模型,用免疫组化染色法检测足爪组织中NF-κB/p65蛋白的表达.病理切片观察不同剂量的TGP对佐剂关节炎大鼠的治疗效果.用ELISA法检测佐剂关节炎大鼠血清中VEGF和IL-17的含量.结果 大、中剂量组的胞浆内NF-κB/p65的阳性表达比模型对照组明显降低(P＜0.01),TGP大、中剂量治疗组与地塞米松组能明显改变佐剂关节炎大鼠皮下组织细胞排列、炎性细胞浸润及血管增生现象,TGP小剂量组对改善佐剂关节炎大鼠足部皮肤的病理状况无明显作用.中、大剂量的TGP组和地塞米松组血清VEGF和IL-17的含量明显降低(P＜0.01).结论 TGP能抑制佐剂关节炎大鼠的炎症反应,其机制可能是TGP可下调NF-κB/p65蛋白的表达,降低炎性细胞因子IL-17和血清VEGF的产生,最终抑制血管增生及炎性细胞浸润.     

药物对急性羰基镍中毒大鼠肝细胞损伤的治疗作用

目的 评价药物对急性羰基镍中毒大鼠肝细胞DNA损伤的影响.方法 将SD大鼠分为正常对照组(10只)、染毒组(10只),治疗组为甲泼尼龙组(20mg/kg)、二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDC)组(100mg/kg)、亚硒酸钠组(10 μmol/kg)、参附回阳汤组(0.25ml)、甲泼尼龙组(20mg/kg)+DDC(100mg/kg)组,每组40只.除正常对照组外,其余各组大鼠静态吸入250mg/m3羰基镍染毒30min,分别于染毒后4 h和30 h给药,3 d和7 d取材,每组各10只,采用单细胞凝胶电泳试验检测药物对肝细胞DNA损伤的影响,电子显微镜观察大鼠肝细胞超微结构改变.结果 与染毒组比较,甲泼尼龙组、DDC组、亚硒酸钠组、参附回阳汤组及甲泼尼龙+DDC组染毒4 h和30 h给药,观察3、7 d时彗星尾长均减小,差异有统计学意义(P＜0.05);与正常对照组比较,亚硒酸钠组、参附回阳汤组4 h给药及DDC组、亚硒酸钠组、参附回阳汤组及甲泼尼龙+DDC组30 h给药,观察3 d时彗星尾长均明显增大,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).除甲泼尼龙组4 h给药,观察7 d时彗星尾长差异无统计学意义(P＞0.05)外,其他各组4 h、30 h给药,观察7 d时彗星尾长均明显增大,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).与染毒组比较,甲泼尼龙组、DDC组、亚硒酸钠组、参附回阳汤组及甲泼尼龙+DDC组4 h和30 h给药,观察3、7 d时彗星Olive尾距均减小,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01);与正常对照组比较,4h和30 h给药亚硒酸钠组、参附回阳汤组(观察3、7 d)及DDC组(观察7 d),30 h给药DDC组(观察3d)和甲泼尼龙+DDC组(观察7 d)时彗星Olive尾距明显增大,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).肝细胞超微结构观察显示,与染毒组比较,甲泼尼龙组、DDC组和甲泼尼龙+DDC组4 h给药,观察3 d时胞质内细胞器及细胞核损伤已基本恢复到接近正常水平.结论 甲泼尼龙、DDC和甲泼尼龙+DDC具有较强促进急性羰基镍中毒后大鼠肝细胞损伤的修复作用,且早期治疗效果明显优于晚期.

Abstract：

Objective To assess the curative effects of different drugs on liver cell damage of rats induced by acute nickel carbonyl poisoning. Methods In present study 220 SD rats were divided into control group (10 rats), carbonyl nickel group (10 rats),20 mg/kg methylprednisolone group (40 rats), 100 mg/kg DDC group (40 rats), 10 μmol/kg sodium selenite group (40 rats),0.25 ml shenfuhuiyangtang group (40 rats) and 20 mg/kg methylprednisolone with 100 mg/kg DDC group (40 rats ). All rats except for control group inhaled passively 250 mg/m3 carbonyl nickel for 30 minutes. At 4h and 30h after exposure, the drugs were given intraperitoneally to the rats. On the 3rd and 7th days after exposure, the liver samples were taken from 10 rats each group. The DNA damage of liver cells was detected using comet assay, the ultrastructure changes in liver cells were examined under an electronmicroscope. Results Compared to carbonyl nickel group, the tail lengths of liver cells in 5 groups administrated at 4h or 30h and tested on the 3rd or 7th day after exposure decreased significantly (P＜0.05). Compared to the control group, the tail lengths of liver cells in sodium selenite and shenfuhuiyangtang groups administrated at 4h after exposure or sodium selenite,shenfuhuiyangtang and methylprednisolone with DDC groups administrated at 30h after exposure increased significantly (P＜0.05 or P＜0.01 ), when tested on the 3rd day after exposure. Except from methylprednisolonesub-group administrated at 4h and tested on the 7th day after exposure, the tail lengths of liver cells in other groups administrated at 4 h or 30 h and tested on the 7th day after exposure increased significantly (P＜0.05).Compared to carbonyl nickel group, the Olive moment of liver cells in 5 groups administrated at 4 h or 30 h tested on the 3rd or 7th day after exposure decreased significantly (P＜0.05 or P＜0.01 ). Compared to the control group, the Olive moment of liver cells in following groups (selenite and shenfuhuiyangtang groups administrated at 4 h or 30 h and tested on the 3rd or 7th day after exposure, DDC group administrated at 4h or 30h and tested on the 7th day after exposure, DDC group administrated at 30 h and tested on the 3rd day after exposure, and methylprednisolone with DDC group administrated at 30 h and tested on the 7th day after exposure) increased significantly (P＜0.05 or P＜0.01). As compared with carbonyl nickel group, the ultrastructure observation indicated that the nucleus and other organelles of liver cells in methylprednisolone,DDC and methylprednisolone with DDC groups administrated at 4h and tested on the 3rd day were access to normal levels. Conclusion The results of present study showed that methylprednisolone, DDC and methylprednisolone with DDC could improve obviously the repair of rat liver cell damage induced by acute carbonyl nickel poisoning, and the curative effects of early treatment were better than those of later treatment.     

三氯乙烯染毒小鼠免疫功能变化研究

目的观察三氯乙烯对NIH小鼠染毒后免疫功能的变化.方法给予NIH小鼠皮下三氯乙烯染毒后研究胸腺、脾、肝脏等脏器系数变化情况、进行足跖肿胀实验、脾细胞转化实验等.结果三氯乙烯染毒小鼠胸腺、脾脏器系数未见明显变化.24h、48h时小鼠足跖肿胀系数明显高于溶剂对照组.80 mg/L三氯乙烯可抑制溶剂对照组脾淋巴细胞的增殖,但可促进三氟乙烯染毒组脾淋巴细胞增殖.结论三氯乙烯可能诱导NIH小鼠产生迟发性变态反应.     

大鼠哮喘模型肺组织血红素氧合酶-1蛋白及基因表达

目的 探讨大鼠哮喘模型肺组织血红素氧合酶-1(HO-1)蛋白及基因表达特点以及其与HO-1的活性之间的相关性.方法 清洁级雄性SD大鼠20只,随机分为对照组和哮喘组,每组10只.测定全血碳氧血红蛋白(COHb)的百分比含量;计算肺泡灌洗液(BALF)沉渣中细胞总数和分类;计数气道壁中浸润的炎性细胞数;用免疫组织化学染色法观察HO-1在哮喘大鼠肺组织的表达;用RT-PCR方法 检测哮喘大鼠肺组织HO-1基因表达.结果 HO-1阳性细胞主要定位于支气管上皮细胞及黏膜下巨噬细胞,气道平滑肌细胞偶有表达.2组表达HO-1的阳性细胞百分比分别为(5.03±1.22)%和(27.14±4.68)%;2组HO-1基因表达光密度比值分别为(0.32±0.05),(0.68±0.02);2组全血COHb的百分比含量分别为(0.45±0.35),(3.89±1.15);哮喘组HO-1蛋白、基因的表达水平以及全血COHb的百分比含量均显著高于正常组(P＜0.01).HO-1蛋白表达水平、基因表达水平与全血COHb的百分比含量均呈正相关(r=0.897,0.971,P＜0.01).结论 哮喘大鼠的肺组织HO-1蛋白基因表达水平显著增加,且反应HO-1活性的全血COHb的百分比含量亦显著增加,提示HO-1可能参与了哮喘的发病过程.     

亚慢性砷暴露对大鼠肾脏功能和形态的影响

目的观察亚慢性亚砷酸钠暴露对大鼠肾脏结构和功能的影响。方法 27只雄性SD大鼠,随机分对照组,砷暴露低剂量组和砷暴露高剂量组,分别自由饮用去离子水和亚砷酸钠水溶液,时间为3个月。观察肾脏组织,采用全自动生化分析仪检测肾功,苏木精-伊红染色（HE染色）检测组织病理学改变,电镜观察超微结构改变。结果①生化分析发现尿素氮和葡萄糖水平随染毒剂量增加而显著增加。②HE染色镜检发现砷暴露组大鼠肾小管发生空泡样变、嗜酸性变,损伤效应具有剂量依赖性,且发现有炎性细胞的浸润。③电镜检查发现砷暴露组大鼠肾小球有轻度的系膜增生。结论亚慢性饮水染砷可对肾脏功能产生显著影响,导致肾小球系膜轻度增生和肾小球空泡样变。     

QKX口服液促进排铅作用初步研究

目的 :评价一种拟申报保健食品— QKX口服液的驱铅作用。方法 :使用清洁级健康雄性 SD大鼠 ,按体重随机分为 5组 ,即空白对照、高铅模型对照和 1.6 7m l/ kg.bw、 3.33ml/ kg.bw、 6 .6 7ml/ kg.bw 3个剂量组 ,饮水给予 0 .1%醋酸铅水溶液建立大鼠预防性铅中毒模型 ,同时灌胃给予受试物 ,每周称体重两次并调整灌胃量 ,喂养 30 d后测定血、肝脏和股骨中的铅含量。结果 :QKX口服液能显著降低高铅摄入大鼠的肝铅含量 ,但对血铅和股骨铅含量无明显影响。结论 :QKX口服液有一定程度的促进高铅摄入动物排铅和降低肝铅蓄积的作用     

放射性核素内照射诱发的DNA损伤效应

目的 研究晚期混合裂变产物内照射对大鼠外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)DNA的损伤作用。方法 雄性Wistar大鼠经不同累积剂量和不同剂量率的晚期混合裂变产物内照射后,获得PBMC单细胞悬液,采用单细胞凝胶电泳(Single cell gel electrophoresis,SCGE)技术,检测细胞DNA链的断裂改变。结果 经晚期混合裂变产物作用后,各照射组PBMC DNA链断裂的迁移长度增加(P <0.05),显示良好的剂量效应关系和剂量率效应关系,均符合直线模型。结论 在本实验的内照射剂量下,晚期混合裂变产物能引起PBMC的DNA损伤,且呈现良好的剂量效应关系和剂量率效应关系。     

灵芝虫草菌丝体对大鼠NK细胞活性影响的流式细胞术研究

目的：研究灵芝与虫草菌丝体联合使用对SD大鼠NK细胞免疫调节的作用。方法：将灵芝虫草菌丝按0．75％和1．50％的比例掺入饲料中（分别相当于0．75g/kg、1．50g/kg BW剂量）给SD大鼠自由摄食，连续30d后取其外周血用流式细胞术检测NK细胞活性。结果：1．50g／kg BW剂量组大鼠外周血CD161a^-／CD25^＋和CD161a^＋／CD25^＋的表达明显高于对照组，差异比较有统计学意义（P〈0．05）。结论：灵芝虫草菌丝体有增强大鼠NK细胞活性的作用。     

Effects of sodium alginate and fish oil to reduce trichloroethylene accumulation in rats.

This study was conducted to examine the effect of dietary sodium alginate and fish oil on bodily accumulated trichloroethylene (TCE), which has been widely used as a halogenated solvent and is metabolized at a high rate. Each of three groups of rats was fed on either of diets containing cellulose-soybean oil (control), Na-alginate-soybean oil or cellulose-fish oil for 3 wk, and thereafter given a single oral dose of TCE (100 mg (0.76 mmol)/rat). TCE levels in the blood were monitored for 10 h after the administration of TCE. The peak concentrations of TCE in the blood tended to be higher in the alginate and fish oil groups as compared with those in the cellulose-soybean oil group, but not to a significant extent. TCE concentrations in the liver, kidney, brain and the three fat tissues (epididymal, perirenal and subcutaneous) were significantly lower in the alginate and fish oil groups than in the cellulose-soybean oil group. Fat tissue weights were also lower in the alginate group and fish oil group. The hepatic drug metabolizing enzymes could not account for the remarkable decreases of residual TCE contents in the alginate and fish oil groups. These findings indicate that the metabolism and excretion of TCE might be accelerated in animals with reduced fat tissue mass.