肿瘤病人T细胞核仁嗜银蛋白和辅助性T细胞亚群变化

目的　探讨肿瘤病人外周血单个核细胞 (PBMC)中T细胞核仁嗜银蛋白 (AgNORs)变化和辅助性T(Th)细胞亚群变化的关系及其临床意义。方法　PBMC经多克隆T细胞活化剂刺激 ,以图像分析法检测AgNORs区面积与细胞核仁面积的百分比 (I.S % ) ;PBMC被离子霉素和佛波醇酯活化 5h后 ,以酶联免疫斑点法 (ELISPOT)检测γ干扰素 (IFNγ)和白细胞介素 4(IL 4)产生细胞的频度( % ) ;以离子霉素加佛波醇酯刺激 2 4h ,用ELISA试剂盒检测培养上清液中的IFNγ 和IL 4水平。结果86例肿瘤病人和 44名正常人 ,PBMC中活化T细胞AgNORs表达分别为 ( 4 90± 1 2 0 )I S %和 ( 7 82±1 2 8)I S % ,肿瘤组下降非常显著 (P <0 0 5 ) ;肿瘤组PBMC中Th2细胞频度显著上升 ,Th/Th2比值显著下降 ;同时 ,肿瘤组PBMC产生IFNγ 和IL 4水平发生相应变化 ,变化方式与Th亚群变化相似 ;肺癌转移组与未转移组、复发组与未复发组相比 ,Th1细胞数、Th1/Th2之比和IFNγ 的产生下降非常显著 ;在肿瘤组AgNORs表达与Th1细胞频度、Th1/Th2比值、IFNγ 产生和肿瘤病人生活质量评分呈正相关。结论　肿瘤病人PBMC中T细胞表达AgNORs下降 ,与患者Th1细胞功能下降呈正相关。     

系统性红斑狼疮外周血Tc与Th细胞漂移的变化及意义

目的:探讨Tc1/Tc2、Th1/Th2及Tc/Th的失衡与系统性红斑狼疮(SLE)分期的关系及意义。方法:采用全血培养、T淋巴细胞荧光标记的流式细胞术分析SLE稳定期和活动期患者及正常健康人外周血中T淋巴细胞亚群及其细胞内因子γ-干扰素(IFN-γ)和白介素4(IL-4)表达率的变化,比较Tc1、Tc2;Th1、Th2,Tc/Th细胞比率在系统性红斑狼疮患者稳定期、活动期的变化,与SLEDAI分期的相关性。结果:SLE活动期患者的CD4~+/CD8~+比值明显低于正常对照组,而其Tc1、Th1细胞表达水平、Tc1/Tc2、Th1/Th2比值则均明显高于SLE稳定期及正常对照组(P0.05),但在SLE稳定期与正常对照组无差异(P0.05)。结论:Tc/Th的失衡及Tc与Th细胞向Tc1、Th1漂移的变化在SLE的发病机理中有着重要的作用。     

系统性红斑狼疮患者外周血淋巴细胞亚群分析

目的研究系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血淋巴细胞亚群的变化。方法应用流式细胞仪检测了65例SLE患者(其中活动期30例,非活动期35例)及32例健康体检者外周血淋巴细胞亚群。结果与健康对照组相比,活动期患者的CD4+、NK细胞(CD16+CD56+)百分率明显降低(P<0.05),CD8+、B(CD19+)细胞百分率明显升高(P<0.05),CD4+/CD8+比值显著降低(P<0.05)。SLE患者活动期与非活动期比较,CD4细胞数低于稳定期,CD8细胞数明显高于稳定期。结论 SLE患者外周血淋巴细胞亚群细胞的变化与疾病的病情变化相关联。     

肿瘤病人T细胞核仁嗜银蛋白和辅助性T细胞亚群变化

目的:探讨肿瘤病人外周血单个核细胞(PBMC)中T细胞核仁嗜银蛋白(AgNORs)变化和辅助性T(Th)细胞亚群变化的关系及其临床意义。方法PBMC经多克隆T细胞活化剂刺激,以图像分析法检测AgNORs区面积与细胞核仁面积的百分比(1.S％):PBMC被离子霉素和佛波醇酯活化5h后,以酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测IFNY、和IL-4产生细胞的频度(％):以离子霉素加佛波醇酯刺激24h,用ELISA试刑盒检测培养上清液中的IFNY、和IL-4水平。结果 肿瘤病人(n=86)和正常人(n=44),PBMC中活化T细胞的AgNORs表达分别为4.9±1.21.S％和.7.82±1.28 1.S％,肿瘤组非常显著下降,P<0.05:肿瘤组PBMC中1112细胞额度显著上升,Th1／Th2比值显著下降:同时,肿瘤组PBMC产生IFN和IL-4水平发生相应变化,变化方式与Th亚群变化相似:在肺癌组中,转移的与未转移的,复发的与未复发的相比,Th1细胞数、Th1／Th2之比和IFNY、产生水平非常显著下降:在肿瘤组AgNORs表达与Th1细胞频度、Th1／Th2比值、IFNY产生和肿瘤病人生活状态的Kamofsky评分正相关。结论 现有病例观察结果表明,肿瘤病人PBMC小T细胞表达AgNORs下降,与患者Th1细胞功能下降正相关。     

T淋巴细胞核仁组成区嗜银蛋白在肿瘤诊断中的应用

目的探讨外周血T淋巴细胞核仁组成区(NOR)嗜银蛋白的含量在肿瘤诊断中的应用价值。方法应用银染技术对体外激活的人外周血T淋巴细胞染色,通过计算机显微图象分析计算硝酸银染色的嗜银蛋白(AgNORs)面积与核面积的比值(I.S%),对58例健康人、69例良性病变和123例种瘤病人进行对比研究。结果健康人、良性病变和恶性肿瘤病人的T淋巴细胞AgNORs检测的I.S%均值分别为7.66±0.92%、7.52±0.91%和5.42±0.88%,其中肿瘤病人与健康者和良性疾病患者之间的T细胞AgNORs活性差异有显著意义(P<0.01),而健康人与良性疾病患者之间差异无显著性(P>0.05);不同肿瘤之间相比,T细胞AgNORs差异也无显著意义(P>0.05)。结论人外周血T淋巴细胞AgNORs的检测对肿瘤的临床诊断与应用具有重要的指导意义。     

宫颈癌脱落细胞核仁形成区嗜银蛋白定量研究

目的对宫颈癌细胞核仁形成区嗜银蛋白(AgNORs)进行定量研究,探讨脱落细胞AgNORs在宫颈癌诊断中的价值。方法应用银染法结合计算机图像分析软件测定22例正常人,34例宫颈癌宫颈脱落细胞及相应石蜡切片中AgNORs银染面积。结果宫颈癌患者宫颈脱落细胞核仁银染面积与细胞核面积的比值(I/S%)为9.64±1.22%,与正常对照组比较具有显著性差异(P<0.05),与石蜡切片染色结果一致(10.12±1.65%)。结论宫颈脱落细胞AgNORs与细胞增殖活性有关,对宫颈癌的诊断有一定的临床应用价值。     

磁珠分选系统和胞内染色法联合分析细胞因子诱导杀伤细胞中Th1/Th2细胞亚群分布特点

目的　评价以磁珠分选系统和胞内染色法联合分析细胞因子诱导杀伤细胞(CIK)中Th1 /Th2细胞亚群分布特点,探讨胞内染色法的应用价值。方法　体外大规模扩增CIK,利用磁珠分离系统富集纯化CIK中的人白细胞分化抗原(CD)4+T细胞亚群。用胞内染色法分析其Th1 /Th2细胞亚群的分布特点。结果　经磁珠分离法富集的CD4+CIK细胞纯度高达96%,它与外周血单个核细胞(PBMC)相比变化显著,其中Th1 (IFN -γ+IL- 4 )亚群、Th0 (IFN -γ+IL- 4+ )亚群分别从( 1 .18±0. 94)%和( 0. 19 ±0. 16 )%升至( 33 .93 ±6 .38 )%和( 23. 07 ±8. 23 )% (P< 0 .01 ),而Th2(IFN -γIL- 4+ )亚群虽然从( 17 .56±16. 71 )%降至( 10 .21±7. 05 )%,但差异无统计学意义(P>0. 05)。结论　本试验提示CIK具有明显的“Th1优势”;磁珠分选系统和胞内染色法联合测定Th1 /Th2细胞亚群分布的方法简便快捷,结果稳定,适合临床应用。     

系统性红斑狼疮患者外周血T淋巴细胞亚群及Ag-NORs的变化

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血T淋巴细胞亚群及Ag-NORs的变化及意义。方法49例SLE病人及43例健康体检者分别检测外周血T淋巴细胞亚群(CD3 、CD4 、CD8 )及Ag-NORs。结果T淋巴细胞Ag-NORs含量在SLE初发病例升高,经治疗后有一定程度降低(P<0.05);稳定期与正常人相比无显著性差异(P>0.05)。CD3 T细胞SLE各期与对照组相比均无显著差异(P>0.05)。在初发病例及活动期,CD4 T细胞及CD4 /CD8 均降低(P<0.05),CD8 细胞均升高(P<0.05)。在SLE稳定期各亚群正常人相比均无显著性差异(P>0.05)。T淋巴细胞Ag-NORs与T淋巴细胞亚群间无相关性(P>0.05)。结论外周血T淋巴细胞亚群及Ag-NORs分析有助于了解SLE患者免疫功能紊乱的状况。     

Th1、Th2、Th17相关细胞因子与儿童系统性红斑狼疮疾病活动程度的相关性研究

目的 检测儿童系统性红斑狼疮(cSLE)血液辅助性T细胞(Th)亚群Th1、Th2、Th17相关细胞因子的表达水平,探讨其与疾病活动程度的相关性,寻找cSLE疾病活动期的潜在生物标志物.方法 选取该院cSLE患儿47例作为观察组.依据SLE疾病活动度评分(SLEDAI评分)将观察组分为非活动期组(18例),活动期组(29例).另选取同期该院健康体检儿童20例作为对照组.采用流式细胞术检测3组研究对象血浆中Th1亚群细胞因子白细胞介素(IL)-2、肿瘤坏死因子(TNF)-α和干扰素(IFN)-γ,Th2亚群细胞因子IL-4、IL-6和IL-10,Th17亚群细胞因子IL-17表达水平,以及CD4+T和CD8+T细胞水平.结果 非活动期组和活动期组TNF-α、IFN-γ、IL-6、IL-10和IL-17水平较对照组升高(P<0.05),活动期组IL-6、IL-10和IL-17水平高于非活动期组(P<0.05).活动期组CD4+/CD8+低于对照组(P<0.05).血清IL-6水平与IL-10、IL-17呈正相关(r=0.415、0.497,P<0.05),IL-10水平与IL-17呈正相关(r=0.402,P<0.05).血清IL-6、IL-10、IL-17水平与SLEDAI评分呈正相关(r=0.373、0.440、0.412,P<0.05).IL-6预测cSLE活动程度的最佳临界值为23.25 pg/mL,曲线下面积(AUC)为0.907(P<0.05);IL-10预测cSLE活动程度的最佳临界值为32.50 pg/mL,AUC为0.853(P<0.05);IL-17预测cSLE活动程度的最佳临界值为33.00 pg/mL,AUC为0.767(P<0.05).结论 血清IL-6、IL-10和IL-17与cSLE疾病活动程度具有相关性,IL-6和IL-10的预测效能高于IL-17,可作为预测疾病活动程度的生物标志物.     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞FcγRⅡb和血清sCD30水平变化与Th1/Th2细胞漂移关系的研究

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)FcγRⅡb、CD30的表达与辅助T细胞亚型(Th1/Th2)漂移在SLE发病机制中的作用。方法检测了129例SLE患者和30名健康对照者PBMCFcγRⅡb、Th1、Th2细胞以及血清sCD30;FcγRⅡb的检测采用流式细胞术,血清sCD30的检测采用酶联免疫吸附试验(ELISA),Th1、Th2细胞的检测采用免疫组化染色方法。结果SLE患者与健康对照者相比,PBMC FcγRⅡb的表达以及Th1细胞明显降低(P<0.01),而血清sCD30水平以及Th2细胞显著升高(P<0.01)。结论PBMC FcγRⅡb、CD30表达的变化以及Th1/Th2细胞漂移与SLE发病机制有关。