骨肉瘤荷瘤裸鼠模型两种不同制作方法的比较

目的 比较腋下移植与原位移植两种骨肉瘤荷瘤裸鼠模型制作方法在成瘤率、成瘤时间、瘤体生长变化,特别是肺部转移情况的差别.方法 将骨肉瘤细胞分别接种到裸鼠左侧腋下及裸鼠股骨髓腔.6周后处死裸鼠,肉眼及光镜下观察两组肿瘤的肺部转移情况,比较两组肿瘤肺部转移率及转移灶的不同特点.结果 与原位接种方式相比,腋下接种方式操作简单、成瘤快,肿瘤组织表面容易较早发生摩擦破损(P<0.05),肿瘤内部也较早发生缺血坏死现象(P<0.05).在相同接种时间下,腋下接种组裸鼠肺部肿瘤转移率低(P相似文献   

低剂量辐射联合阿霉素对荷乳腺癌裸鼠移植瘤生长及其移植瘤组织中HIF-1α和VEGF表达的影响

目的: 探讨低剂量辐射(LDR)联合阿霉素(ADM)对荷乳腺癌裸鼠移植瘤生长及移植瘤组织缺氧诱导因子1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,阐明LDR联合ADM增强机体抗肿瘤作用的机制。方法: 24只荷乳腺癌裸鼠随机分为假照组(0 mGy)、LDR组(75 mGy)、ADM组和LDR-6h-ADM组(LDR后6h给予ADM),各组荷瘤裸鼠以不同方式处理4 d后全部处死,测量各组小鼠瘤质量,计算抑瘤率,光镜下观察肿瘤组织形态学表现,应用免疫组织化学方法检测肿瘤组织中HIF-1α和VEGF表达。结果: 与假照组比较,其余各组小鼠平均瘤质量均明显降低(P<0.05),LDR-6h-ADM组小鼠平均瘤质量最低,但与LDR组和ADM组比较差异无统计学意义(P>0.05);LDR-6h-ADM组小鼠抑瘤率显著高于ADM组和LDR组(P<0.05)。组织形态学观察,各组小鼠肿瘤组织均见癌细胞分布,LDR-6h-ADM组可见癌细胞片状坏死,癌组织间质疏松,癌细胞坏死程度较ADM组和LDR组明显。免疫组织化学,假照组VEGF和HIF-1α蛋白表达水平最高,LDR-6h-ADM组最低。与假照组比较,其余各组小鼠肿瘤组织HIF-1α和VEGF平均灰度值明显升高,即蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论: LDR联合ADM可使机体抗肿瘤作用增强,可能与LDR降低肿瘤组织HIF-1α和VEGF的表达、改善肿瘤缺氧及抑制肿瘤血管生成有关。     

sorafenib对裸鼠肝癌术后复发的抑制和促凋亡的实验研究

目的 多激酶抑制剂sorafenib具有抑制肿瘤细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用,其联合外科手术治疗肝癌的效果尚待研究.文中探讨裸鼠肝原位移植癌手术切除后,应用sorafenib抑制肿瘤复发的作用和机制. 方法 将肝癌细胞原位种植于30只裸鼠肝,2周后手术切除移植瘤.随机均分成3组:对照组、低剂量sorafenib治疗组(30mg/kg)和高剂量sorafenib治疗组(100mg/kg).3周后观察肿瘤复发情况和微血管密度(microvessel density,MVD),用免疫组化法检测肿瘤细胞中CD34、血管内皮生长因子(vascular epithelial growth factor,VEGF)、细胞增殖相关抗原Ki67,用TUNEL法检测细胞凋亡. 结果 低剂量和高剂量sorafenib治疗组肿瘤体积明显小于对照组 (P<0.05),高剂量组小于低剂量组(P<0.05).高低剂量sorafenib治疗组MVD和VEGF表达均较对照组明显减少(P<0.05);高剂量组低于低剂量组,但无统计学差异(P>0.05).2个治疗组肝癌细胞凋亡数量显著增多,凋亡率明显高于对照组(P<0.01),高剂量组凋亡率高于低剂量组(P<0.05). 结论 sorafenib可有效地抑制裸鼠肝癌术后残留肿瘤细胞的生长,控制肿瘤的复发.     

奥沙利铂化疗对荧光HepG2肝癌细胞裸鼠原位移植瘤侵袭转移潜能的影响

目的 探讨化疗对肝癌裸鼠原位移植瘤侵袭转移潜能的影响.方法 选用稳定表达绿色荧光蛋白的HepG2人肝癌细胞株构建肝癌裸鼠原位移植模型,成瘤后实验组给予10 mg/kg奥沙利铂腹腔注射化疗,每周1次,共3次.最后1次化疗后第7天,将2组裸鼠体内的残余肿瘤修剪成相同大小的瘤块再接种于新的裸鼠肝脏内.再接种后第6周,测量肿瘤大小,荧光显微镜下观察肿瘤的侵袭转移情况.结果 对照组和化疗预处理组裸鼠肿瘤体积分别为(2 376.29±573.69) mm3和(1 637.23±338.68) mm3 (P＜0.05).对照组裸鼠肿瘤均未发生肝脏、腹腔和肺转移,化疗预处理组裸鼠肿瘤发生肝内转移率为83.3％ (P=0.015),腹腔转移率为50％(P=0.182),肺转移率为50％ (P=0.182).结论 HepG2肝癌细胞在奥沙利铂化疗后生物学行为显著恶化.     

黑米花青素对HER-2/neu高表达人乳腺癌细胞株MDA-MB-453移植瘤血管生成的影响

目的 观察黑米花青素对HER-2/neu高表达人乳腺癌细胞株MDA-MB-453移植瘤血管生成的影响.方法 以24只雌性BALB/c裸鼠建立MDA-MB-453细胞移植瘤模型,按照完全随机设计原则平均分入对照组、VEGF组、黑米花青素组和联合组4个处理组,分别以VEGF和黑米花青素提取物进行单独和联合干预;免疫组织化学法检测瘤组织核抗原Ki-67和Ⅷ因子相关抗原表达,评价移植瘤肿瘤细胞生长能力和瘤组织微血管密度(MVD)的变化;Western blot检测瘤组织促m管生成凶子MMP-2、MMP-9和uPA表达水平的变化.结果 相对于对照组,黑米花青素组瘤体积、MVD值和促血管生成因子的表达水平均显著降低(P<0.05),VEGF组上述指标则均有明显升高(P<0.05),联合组上述指标同对照组之间均无显著差异.相对于VEGF组,黑米花青素组和联合组的上述指标均有显著降低(P<0.05),其中黑米花青素组瘤体积有非常显著的降低(P<0.01).与对照组相比,黑米花青素组核抗原Ki-67表达强阳性的细胞数显著减少,VEGF组核抗原Ki-67表达强阳性的细胞数显著增多.结论 黑米花青素可能通过抑制移植瘤内血管生成而抑制肿瘤生长.     

端粒酶反义寡核苷酸基因对裸鼠体内膀胱癌生长的抑制作用

目的：探讨端粒酶反义寡核苷酸(ASON)基因对裸鼠体内膀胱癌生长的抑制作用,阐明反义端粒酶基因对膀胱癌的治疗作用。方法：膀胱癌EJ细胞株分别采用换液培养和用硫代磷酸修饰的反义寡核苷酸(PS-ASON)处理,将换液培养及PS-ASON处理的EJ细胞分别接种BALB/c裸鼠（对照组24只和PS-ASON处理组12只）,观察致瘤率;肿瘤形成至20 mm后将对照组裸鼠随机分为3组(n=8),隔日注射生理盐水（空白对照组）、PS-ASON（PS-ASON注射组）及化疗药物表阿霉素（表阿霉素组）。观察各组裸鼠致瘤时间、裸鼠体质量及肿瘤体积的变化,计算各组裸鼠生存率;光镜下观察肿瘤组织形态学变化。结果：PS-ASON处理组裸鼠致瘤率低于对照组（P<0.01）,致瘤时间长于对照组（P<0.01）,裸鼠平均体质量高于对照组（P<0.01）。按照不同分组,裸鼠注射不同药物治疗12 d后,PS-ASON注射组和表阿霉素组裸鼠肿瘤体积均小于空白对照组（P<0.01）;PS-ASON注射组与表阿霉素组裸鼠肿瘤体积比较差异无统计学意义（P>0.05）。空白对照组裸鼠体质量持续下降;接种16 d后,PS-ASON注射组裸鼠体质量明显高于空白对照组（P<0.01）;接种肿瘤8 d后,表阿霉素组裸鼠体质量低于PS-ASON注射组（P<0.01）;空白对照组裸鼠体质量与表阿霉素组比较差异无统计学意义（P>0.05）。光镜下观察,PS-ASON注射组和表阿霉素组肿瘤细胞出现大量凋亡和坏死。PS-ASON注射组裸鼠生存率明显高于空白对照组（P<0.001）和表阿霉素组（P<0.01）。结论：反义端粒酶基因对体内膀胱癌形成及生长有明显的抑制作用,抑制程度与化疗药表阿霉素相当,可以用于膀胱癌治疗的进一步研究。     

EGCG逆转人耐药肝癌细胞株多药耐药的体内实验研究

目的:研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)体内逆转人肝癌细胞多药耐药性的作用及可能的机制.方法:MTT法检测肝癌耐药细胞株BEL-7404/ADR与其亲本细胞BEL-7404耐药倍数,采用BEL-7404/ADR种植于裸鼠皮下,建立肿瘤耐药模型,两周后EGCG灌胃,腹腔注射阿霉素(ADM),联合治疗两周;荧光分光光度法检测瘤体内ADM含量,HE染色观察形态学改变;RT-PCR检测瘤组织mdr1 mRNA的表达,免疫组化法检测瘤组织P糖蛋白(P-gp)的表达.结果:低、中、高EGCG联合ADM组肿瘤生长速度明显低于ADM组,瘤重明显低于阿霉素组;EGCG联合ADM可增加瘤体内ADM的含量 (P<0.01);三个EGCG联合 ADM组与阿霉素组相比HE病理图片显示肿瘤组织纤维包裹,炎细胞浸润; mdr1 mRNA和P-gp的表达明显低于对照组和阿霉素组 (P<0.01).结论:EGCG在体内具有逆转BEL-7404/ADR的耐药作用,机制可能是EGCG下调了肝癌细胞mdr1基因的表达,使P-gp的表达降低,瘤组织内药量增高.     

罗非昔布对裸鼠人胃癌原位种植瘤组织中血管内皮生长因子和诱导型一氧化氮合酶表达的影响

目的 探讨罗非昔布对裸鼠人胃癌原位种植瘤组织中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase, iNOS)表达的影响.方法 建立裸鼠人胃癌原位种植转移模型,以罗非昔布给裸鼠灌胃,通过免疫组化Envision法检测罗非昔布对原位种植瘤胃癌组织中VEGF、iNOS蛋白的表达.结果 VEGF的表达:对照组VEGF阳性率为81.25%, 罗非昔布组为61.25%, 联合组为35.00%, 罗非昔布组与对照组相比,差异有显著性(P＜0.05), 联合组与罗非昔布组相比,差异有显著性(P＜0.05).iNOS的表达显示:对照组iNOS阳性率为73.75%,罗非昔布组为52.50%,联合组为26.67%,罗非昔布组与对照组相比,差异有显著性(P＜0.05).结论 环氧合酶-2抑制剂罗非昔布可能通过降低胃癌肿瘤组织中 VEGF、iNOS的表达,使肿瘤血管生成受抑,从而抑制胃癌细胞的生长和转移.     

阿霉素前体药Ac-Phe-Lys-PABC-ADM通过ERK1/2途径促进胃癌细胞死亡

目的:研究阿霉素前体药(PADM)对人胃癌细胞系MGC-803生长以及ERK1/2信号通路的影响。方法:培养MGC-803人胃癌细胞系,检测组织蛋白酶B的表达、PADM及阿霉素(ADM)对细胞生长的抑制作用、p-ERK1/2、ERK1/2和β-actin的表达,以及细胞周期。结果:MGC-803细胞系中组织蛋白酶B表达丰富;PADM和ADM对细胞生长呈剂量依赖性抑制作用;处理48 h时,PADM的半数抑制浓度(IC50)为14.9μmol/L,是ADM(IC50=4.9μmol/L)的3.04倍。与ADM相比,PADM显著下调p-ERK1/2水平,并使细胞周期停滞在G2/S期。结论:PADM可通过ERK1/2途径诱导细胞死亡。PADM与ADM抗肿瘤机制可能不同。     

百里醌抑制胰腺癌裸鼠原位移植瘤生长的实验观察

目的 观察百里醌对胰腺癌裸鼠原位移植瘤生长和转移的影响及其作用机制.方法 建立外科胰腺癌原位移植模型,随机分为4组:对照( Control)组、低剂量百里醌(L-TQ)组、高剂量百里醌(H-TQ)组和吉西他滨(GEM)组,第3周开始分别给予溶媒(1％乙醇)0.2 ml/只、百里醌5 mg/kg、百里醌20 mg/kg和吉西他滨100 mg/kg治疗.术后第8周处死裸鼠,测量胰腺肿瘤瘤重并计算抑瘤率;观察裸鼠肿瘤转移情况;免疫组织化学法检测肿瘤组织中细胞增殖因子(Ki-67)、X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)和基质金属蛋白酶(MMP)-9的表达.结果 L-TQ组、H-TQ组和GEM组的抑瘤率分别为42.57％、64.11％和54.77％;与对照组相比,GEM组肿瘤转移未被明显抑制,而L-TQ组和H-TQ组肿瘤转移明显被抑制;与对照组相比较,L-TQ组和H-TQ组中Ki-67、XIAP和MMP-9的表达强度明显减弱,而GEM组中仅Ki-67表达下调.结论 百里醌具有抑制胰腺癌裸鼠原位移植瘤生长和转移的作用,此作用机制可能与抑制XIAP和MMP-9的表达有关.