适宜标记的HFRS病毒组特异性McAb的建立与应用

本文用陕西省从黑线姬鼠肺分离的HFRS病毒81-14A株,感染BHK细胞,收集感染细胞。经紫外线灭活后,病毒抗原通过粗提,免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合,建立了适宜于标记的HFRS病毒组特异性3-1C_4 McAb。荧光素标记McAb效价为1:5120,标记后一年半效价下降一个滴度,与26株从不同地区分离的HFRS病毒株作直接免疫荧光反应,均产生较     

酶标记抗人IgM McAb及其初步鉴定应用

采用辣根过氧化物酶(HRP),以改良过碘酸钠法标记了国内三个单位制备的6种抗人IgM单克隆抗体(McAb),并对其进行了初步鉴定和应用,结果显示这些HRP标记抗体的效价高低不一。分析表明McAb与多克隆抗体一样,其标记前的效价高低是决定HRP标记后效价高低的关键因素。选择高效价的HRP-抗人IgM McAb用于ELISA间接夹心法中检测病人血清特异性IgM抗体,其特异性和敏感性与采用HRP-羊抗人μ链免疫血清检测结果基本相同。     

分泌抗rHuIL－6McAb杂交瘤细胞系的建立及其应用研究

应用常规方法建立了４株稳定分泌抗重组人ＩＬ－６（ｒＨｕＩＬ－６）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的小鼠杂交瘤细胞系１Ｈ３、２Ａ１０、３Ａ３和４Ｂ１。其中，１Ｈ３为ＩｇＧ２ｂ（ｋ），２Ａ１０为ＩｇＧ１（ｋ），３Ａ３和４Ｂ１为ＩｇＧ２ａ（ｋ）。４株ＭｃＡｂ特异性强，与细胞因子ＩＬ－１β、ＩＬ－３、ＩＬ－８、ＴＮＦ－α、ＧＭ－ＳＣＦ、ＩＣＡＭ－１，以及受体菌菌体蛋白成分均无交叉反应。间接ＥＬＩＳＡ测定小鼠腹水ＭｃＡｂ效价为１０（－６）～１０（－８）。应用识别不同表位的ＭｃＡｂ建立了双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法检测ＩＬ－６，敏感性为１００ｐｇ／ｍｌ。初步应用表明可用于临床标本的检测。     

分泌抗rHuIL—6McAb杂交瘤细胞系的建立及其应用研究

应用常规方法建立了４株稳定分泌抗重组人ＩＬ－６（ｒＨｕＩＬ－６）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）小鼠杂交瘤细胞系１Ｈ３、２Ａ１０、３Ａ３和４Ｂ１。其中，１Ｈ３为ＩｇＧ２ｂ（Ｋ），２Ａ１０为ＩｇＧ１（Ｋ），３Ａ３和４Ｂ１为ＩｇＧ２ａ（Ｋ）。４株ＭｃＡｂ特异性强，与细胞因子ＩＬ－１β、ＩＬ－３、ＩＬ－８、ＴＮＦ－α、ＧＭ－ＳＣＦ、ＩＣＡＭ－１，以及受体菌菌体蛋白成分均无交叉反应。间接ＥＬＩＳＡ测定小鼠腹水ＭｃＡ     

应用噬菌体肽文库筛选McAb F3特异性结合肽

目的：应用噬菌体展示肽文库筛选可与抗汉坦病毒囊膜蛋白单抗F3特异性结合的配体肽。方法：采用protein-A亲和层析纯化的F3单抗为筛选配基，对噬菌体展示的随机12肽文库进行生物亲和淘洗，夹心ELISA、竞争ELISA鉴定筛选克隆的结合特性，并进一步对阳性克隆进行序列测定和分析。结果：通过3轮生物淘洗，能被抗体捕获的噬菌体克隆为91．7％（11／12）；ELISA测定显示筛选到的噬菌体短肽能与F3单抗特异性结合；序列分析表明7个阳性克隆氨基酸序列相同，均为－MHGPTKNQMWHT，同源性分析显示该序列与HTNV／SEOV M蛋白G2区第750－759位氨基酸有较高的同源性，结论：获得了具有良好结合活性的模拟表位肽，为基于表位水平的HFRSV（肾病综合征出血热病毒）特异性分子多肽疫苗的设计提供了重要依据。     

天津地区抗霍乱弧菌单克隆抗体(McAb)细胞系的建立及其应用的研究

应用天津市防病中心保存的EL-Tor霍乱弧菌小川型和稻叶型菌体抗原,混合免疫BALB/c小鼠,小鼠免疫脾细胞与骨髓瘤细胞Sp 2/0-Ag 14融合,采用ELISA法筛选抗霍乱弧菌McAb阳性孔,细胞融合率为328/384(85.2％);经过三次克隆化后筛选出9株分泌抗霍乱弧菌菌体抗原的McAb杂交瘤细胞系。取其中两株细胞进行分析研究;培养上清抗体效价在     

霍乱弧菌稻叶型McAb杂交瘤细胞建株及其特异性敏感性的研究

本文报道的是采用化学缸简易法(另文发表)建立霍乱弧菌稻叶型杂交瘤细胞株,及其单克隆抗体(McAb)的特异性和敏感性的研究。用经煮沸除鞭毛的霍乱弧菌稻叶型菌体免疫BALB/c小鼠后,取脾按常规方法进行融合,用间接血凝法(IHA)筛选,从中筛选8株较     

分泌旋毛虫McAb杂交瘤细胞株的建立

<正> 用旋毛虫肌幼虫可溶性抗原免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与骨髓瘤细胞NS-1系融合,用50％的PEG(MW4,000)作融合剂,融合率达B2.8％。用ELISA间接法和环蚴沉淀试验检测培养上清,共获得抗体     

梅毒螺旋体McAb杂交瘤细胞株的建立

<正> 国内迄今未见有关梅毒螺旋体McAb的报道。我们应用由法国巴斯德研究所引入的梅毒螺旋体Nichols株菌体,经超声波处理,免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤SP2/o细胞融合,采用ELISA间接法测定筛选培养上清液,最终获得12株能分泌梅毒螺旋体McAb的杂交瘤株。初步鉴定了4株,其中3株为IgG_1,     

适于体内攻击肿瘤的抗原特异性选择

正如作者体外试验所预测的那样,那些在正常组织含量高于肿瘤组织的抗原,可成为体内肿瘤抗体选择性攻击目标,而在正常组织中几乎没有抗体的这种作用(Ballou et al.j.,Immunol.132,21111)。下面阐述寻找这种抗原的一般方法:     

用McAb测定人血清中特异性IgE的研究

<正> 近年来,测定过敏病人血清中过敏原特异性IgE水平常采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和放射性过敏原吸附试验(RAST)。过去国内测定特异性IgE所用的试剂均为抗人IgE多克隆抗体(PcAb)。     

异硫氰酸荧光黄直接标记小鼠腹水McAb的新方法

<正> 高质量FITC标记抗体的制备是免疫荧光试验的关键之一,但其制备过程中受到抗体纯度及其活性、标记试剂及标记程序,特别是荧光素与蛋白质的比例等影响。Goding氏报道了一种简便的改良标记程序,用于标记提纯的兔抗小鼠IgM免疫球蛋白,效果良好。鉴于单克隆抗体(McAb)的匀质性、其理化特性不及常规免疫血清稳定,往往在提纯过程中抗体变性较大。作者将 Goling氏方法进一步改进后用于将FITC直接标记小鼠腹McAb获得了较为满意的结果,现报告如下。     

一种简便快速的抗HRP McAb检测方法及其在McAb筛选中的初步应用

随着单克隆抗体(McAb)制备技术的成熟与普及,细胞的融合及其单克隆化过程通常已不是McAb制备的难点,而建立一种简便快速的检测方法以便从大量的细胞克隆中筛选出具有实用价值的预期细胞克隆,则往往成为实验研究成败的关键。我室为开展单克隆鼠PAP(PAPm)的研制,建立了一种十分简便、快速、敏感的检测抗HRP McAb的ELISA法,并对方法的有关特性进行了探讨。通过将其应用于抗HRP McAb分泌杂交瘤细胞选育,取得了很好效果。     

放射性碘标记McAb BAC5的两种方法比较

放射性碘标记ＭｃＡｂ　ＢＡＣ_５的两种方法比较任均田，李峰，梁维佳，迟文随着放射免疫显像与放射免疫治疗应用的不断发展，用放射性核素标记单克隆抗体（ＭｃＡｂ）也越来越受人关注。目前可选用的核素虽多达１０余种，但放射性碘因来源方便，价格便宜，标记简单，仍?..     

梅毒螺旋体NichoIs株McAb杂交瘤株的建立

<正> 本文对筛选的两株梅毒螺旋体(TP)单克隆抗体(McAb)的特异性进行了测试,其中一株具有较好的特异性。 材料和方法 梅毒螺旋体Nichols株:引自世界卫生组织。     

抗结核杆菌TB-15C3 McAb特异性和敏感性的研究

前文报道建立了抗结核杆菌McAb 5个杂交瘤细胞株,制备出McAb,这5种McAb采用ELISA法检测了7种抗原,除大肠杆菌外、均出现不同反应。因而有必要进一步筛选特异性强和稳定性高的抗结核杆菌McAb,以提供结核菌的菌种鉴定、分型、抗原提纯以及为结核病人血清学诊断等应用。现将筛选出来的1株TB-15C_3McAb,与6株分枝杆菌进行了交义试验,结果报告如下。