三七总皂苷保护PC12细胞对抗过氧化氢损伤的作用

目的:考察三七总皂苷在PC12细胞中对过氧化氢引起损伤的细胞保护作用.方法:采用MTT法考察0.01～100mg·L-1三七总皂苷对正常PC12细胞活力的影响,并在H2O2刺激的PC12细胞中考察0.1～10 mg·L-1的三七总皂苷对细胞活力的影响,通过对细胞活力的考察选择三七总皂苷合适的实验剂量,测定三七总皂苷0.1,1 mg·L-1对H2O2刺激的PC12细胞中活性氧水平、过氧化氢酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力的影响以及对丙二醛(MDA)含量的影响.结果:三七总皂苷在0.1～10 mg·L-1浓度能提高正常PC12细胞活力,并能显著提高H202刺激的PC12细胞活力(P＜0.01).0.1,1mg·L-12个剂量的三七总皂苷均能显著减少H2O2刺激的PC12细胞中活性氧水平,提高SOD活力(P ＜0.001)和GSH-Px活力(P ＜0.001),并减少MDA生成(P ＜0.001).结论:三七总皂苷能通过增强细胞内抗氧化酶活力,保护PC12细胞对抗氧化损伤.     

三七总皂苷对血管紧张素Ⅱ致脐静脉内皮细胞损伤的保护作用

目的:研究三七总皂苷(血塞通)对血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)致脐静脉内皮细胞(HUVECS)损伤的保护作用。方法:体外培养HUVECS细胞,采用CCK8法,采用不同浓度的血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)干预正常HUVECS细胞,然后得到损伤条件为10~(-6) mol·L~(-1),24 h。对于损伤后的HUVECS给予不同浓度的三七总皂苷(血塞通)进行保护治疗,设置100、50、25 mg·L-1为高、中、低剂量组,10~(-4)、10~(-5)、10~(-6)mol·L~(-1)氯沙坦为阳性对照组。按对照组、模型组、氯沙坦高、中、低剂量组,三七总皂苷高、中、低剂量组进行实验。对LDH、NO、NOS、eNOS、ET-1、PGI2、TX-B2、t-PA、PAI-1指标进行检测。结果:三七总皂苷对Ang Ⅱ损伤的细胞可以降低LDH、ET-1、TXB2、PAI-1的分泌,增加NO、NOS、eNOS、PGI2、t-PA的分泌。结论:三七总皂苷对Ang Ⅱ损伤的脐静脉内皮细胞具有保护作用,并可促进内皮细胞分泌扩血管物质和抗血栓物质。     

三七总皂苷对人脐静脉内皮细胞的促血管新生作用

目的:研究三七总皂苷(PNS)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的增殖作用。方法:采用体外培养HUVEC的方法,通过XTT法以及细胞计数法观察对细胞的增殖作用;细胞侵入实验观察细胞迁移的能力。结果:PNS对HUVEC有促增殖作用,XTT实验中100μg/ml浓度增殖率为(33.58±2.41)%;在细胞计数实验100μg/ml浓度增殖率为(94.15±10.96)%;在细胞侵入实验中100μg/ml浓度侵入率为(42.64±9.50)%。结论:PNS能够促进HUVEC的增殖与侵入。     

三七总皂苷对腹膜间皮细胞表达MCP-1的影响

目的:研究三七总皂苷对腹膜间皮细胞表达单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的影响。方法:原代培养腹膜间皮细胞,研究不同浓度三七总皂苷对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的腹膜间皮细胞表达MCP-1的影响,研究三七总皂苷作用不同时间对脂多糖诱导的腹膜间皮细胞表达MCP-1的影响。结果:不同浓度三七总皂苷可以抑制脂多糖诱导的腹膜间皮细胞MCP-1mRNA和蛋白表达,这种作用随三七总皂苷浓度的增加而增强;三七总皂苷作用不同时间可抑制脂多糖诱导的腹膜间皮细胞MCP-1mRNA和蛋白表达,这种作用随三七总皂苷作用时间的延长而增强。结论:三七总皂苷可抑制脂多糖诱导的腹膜间皮细胞MCP-1表达,呈浓度和时间依赖性。     

三七总皂苷对大鼠慢性高眼压视网膜损伤的保护作用

目的探讨三七总皂苷对实验性高眼压导致的大鼠视网膜神经节细胞层(RGCL)神经元损伤有无保护作用。方法健康SD大鼠42只,其中6只为正常对照组,6只为正常用药组(三七总皂苷200mg/kg),其余30只用Akira法,烙闭大鼠右眼上巩膜静脉,制作大鼠持续性高眼压模型后随机分为生理盐水组和量效关系组,分别予tPNS50mg/kg(A组),100mg/kg(B组),150mg/kg(C组)和200mg/kg(D组)治疗1个月。处死大鼠剥取视网膜做全层铺片,进行RGCL神经元计数分析。结果正常对照组大鼠双眼RGCL神经元计数比较差异无显著性意义(P>0.05),正常对照组与正常用药组比较差异无显著性(P>0.05),正常对照组与各浓度tPNS治疗组实验眼RGCL计数差异均有显著性(P<0.05),各浓度tPNS治疗组实验眼与其自身对照眼RGCL计数差异均有显著性(P<0.05),生理盐水组与C组实验眼RGCL计数差异有显著性(P<0.05)。结论单独使用tPNS对正常大鼠RGCL神经元计数无影响,tPNS对持续性高眼压大鼠RGCL神经元损伤有部分保护作用。RGCL中的大神经元对高眼压更敏感,与青光眼RGC丧失的模式相似。     

三七总皂苷对大鼠急性心肌梗死的保护作用

目的:通过观察三七总皂苷(Panax Notoginseng Saponin,PNS)对大鼠急性心肌梗塞(AMI)后血流动力学及血清酶的影响,探讨PNS对AMI大鼠保护作用及可能机制。方法:成年雄性SD大鼠40只随机分为4组:假手术组、急性心梗模型(AMI)组、三七总皂苷(PNS,20mg/kg)组、地尔硫卓组(22.5mg/kg)。采用麻醉开胸结扎冠状动脉左前降支造成AMI模型,观察AMI后各组大鼠血流动力学,左心室收缩峰压均值(mlVSP)、左心室舒张压均值(mlVDP)、左心室收缩压最大上升速率(+dp/dtmax)、左心室舒张压最大下降速率(-dp/dtmax)、左心室开始收缩至达到室内压最大上升速率时间(t-dp/dtmax)及心电图、心律失常、血清游离脂肪酸(FFA)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)、以及血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、心梗面积的变化。结果:大鼠AMI后,mlVSP、±dp/dtma明显降低,mlVDP明显升高(P相似文献   

两头尖总皂苷对血管内皮细胞损伤的保护作用

两头尖（Anemone raddeana Regel.）系毛茛科银莲花属多年生植物。该属植物约有150种左右,世界各大洲均有分布,我国有54种,除海南省外,其它各省均有分布,其中两头尖在我国有广泛的分布。现代药理研究表明,两头尖和同属其他数种植物皂苷类成分主要生物活性有抗炎、解热镇痛、抗肝纤维化、镇静、抗惊厥等等。     

三七总皂苷对大鼠脑缺血再灌注损伤保护研究

目的：观察三七总皂苷（PNS）对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法：采用栓线阻断大鼠大脑中动脉血流制备脑缺血模型,进行神经病学体征观察,TTC染色测定缺血侧大脑脑梗死面积。另取大鼠分别测定颈总动脉血栓形成时间和血小板聚集率。结果：与模型组相比,脑梗死面积缩小,大鼠神经功能缺损症状得到不同程度的改善。与空白组相比,血栓形成时间延长,血小板聚集率下降。结论：三七总皂苷对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有明显的保护作用。     

三七总皂苷对以尿酸钠诱导血管内皮细胞凋亡的影响

目的:观察三七总皂苷片剂对以尿酸钠(MSU)100μg.mL-1诱导血管内皮细胞凋亡的影响。方法:体外培养的血管内皮细胞,以尿酸钠(MSU)100μg.mL-1为凋亡诱导因子,建立血管内皮细胞凋亡诱导模型,继而采用2.5、5、10μg.mL-1浓度的三七总皂苷进行干预,用流式细胞仪测定细胞凋亡率,采用实时定量PCR检测ICAM-1基因的表达。结果:三七总皂苷组2.5μg.mL-1明显抑制细胞凋亡(6.9±1.07)%,与模型组比较P0.01;能显著抑制ICAM-1基因的表达。结论:三七总皂苷能明显抑制以尿酸钠(MSU)100μg.mL-1诱导的血管内皮细胞凋亡。     

三七总皂苷对氧化型低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞的细胞间黏附分子-1的影响

目的 研究三七总皂苷对氧化型低密度脂蛋白(ox LDL )损伤血管内皮细胞的保护作用,以探讨其治疗动脉硬化闭塞症 (ASO)的机制。方法 以培养原代人脐静脉内皮细胞（HUVEC）作为靶细胞, 用ox LDL造成HUVEC损伤模型,以三七总皂苷进行干预。光镜下观察细胞形态变化,MTT法检测细胞活性;采用蛋白定量法检测HUVEC与单核细胞的黏附率;用流式细胞仪测定HUVEC的细胞间黏附分子-1（ICAM-1）的蛋白表达。结果 ox-LDL作用HUVEC后12、24 h时,HUVEC损伤明显,细胞活性显著降低,人单核细胞与HUVEC的黏附率显著升高, HUVEC的ICAM 1的蛋白表达水平也明显升高, 均明显高于正常对照组(P＜0.05,P＜0.01),而三七总皂苷能使ox-LDL损伤的HUVEC形态趋于正常,活性增强,并明显降低人单核细胞与HUVEC的黏附率,显著降低ICAM-1蛋白的表达水平,与ox-LDL组比较差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01),这种作用随着剂量的增加而增强。结论 三七总皂苷能通过下调内皮细胞表面黏附分子的表达抑制单核－血管内皮细胞黏附,从而发挥对血管内皮细胞的保护作用,这可能是其治疗ASO的机制之一。     

白藜芦醇对过氧化氢诱导的人脐静脉血管内皮细胞损伤的保护作用

目的 研究白藜芦醇(Res)对过氧化氢(H2O2)诱导人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)损伤及凋亡的保护作用及机制.方法体外培养第4～6代HUVECs,分为空白对照组、H2O2损伤组(300μmoL)、Res低浓度(5 μmoL/L)、中浓度(10 μmoL/L)、高浓度(20 μmoL/L)预处理1 h加H2O2损伤组.用噻唑蓝比色法检测HUVECs活力,试剂盒检测丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)量、超氧化物歧化酶(SOD)和还原型谷胱甘肽(GSH)活性,流式细胞仪分析细胞凋亡率,western blot检测caspase-3的表达.结果 与空白对照组比较,H2O2损伤模型组细胞活力显著降低、MDA和LDH量显著增加、SOD和GSH活性显著下降、细胞凋亡率和caspase-3表达显著增加(P＜0.01).结论 Res通过降低与凋亡过程直接相关的caspase-3表达,抑制H2O2诱导内皮细胞凋亡,减轻H2O2对内皮细胞的损伤作用,从而产生保护血管内皮细胞的作用.     

蛇毒三肽pENW对H_2O_2诱导人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用

目的:研究蛇毒三肽pENW对体外过氧化氢诱导人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用。方法:用体外培养的人脐静脉内皮细胞株传代后进行实验,H2O2(300μmol/L,12h)模拟氧化损伤模型;药物处理组分别加入不同剂量的蛇毒三肽pENW(10-4mol/L,10-5mol/L,10-6mol/L)以及阳性对照药依达拉奉(10-5mol/L);用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活力;比色法检测细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)的漏出率,细胞中超氧化物歧化酶(SOD)的活性和谷胱甘肽(GSH-Px)的含量;Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞仪检测细胞凋亡。结果:蛇毒三肽pENW(10-4mol/L,10-5mol/L)能够显著抑制H2O2对人脐静脉内皮细胞的氧化损伤作用,降低H2O2诱导人脐静脉内皮细胞的凋亡,降低LDH漏出率,提高人脐静脉内皮细胞中SOD、GSH-Px活性。结论:蛇毒三肽pENW可降低过氧化氢对人脐静脉内皮细胞的氧化损伤作用,其保护作用可能与抗氧化及抑制细胞凋亡有关。     

Protective effects of hyperoside against human umbilical vein endothelial cell damage induced by hydrogen peroxide

Ethnopharmacological relevance

Hyperoside (Hyp) is a flavonoid compound isolated from Rhododendron ponticum L. leaves that elicits vascular protective effects in vitro. Treatment with Hyp has been found to attenuate endothelial cell damage induced by oxidative stress, but its mechanisms of action remain unclear.This study investigated the action of Hyp in an endothelial injury model induced by hydrogen peroxide (H₂O₂), as well as its possible mechanisms.

Materials and methods

Human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) were treated with H₂O₂ alone or in combination with Hyp. The protective effects of Hyp against H₂O₂ were evaluated, and the activation of extracellular signal-regulated protein kinase (ERK) in Hyp was assayed in HUVECs.

Results

Loss of cell viability as well as excessive cell apoptosis and death were observed in HUVECs after 18 h of challenge with H₂O₂ (400 μM); however, both cell apoptosis and death were attenuated in the Hyp-pretreated cells. Western blot analysis revealed that Hyp increased the expression of Bcl-2 but decreased that of Bax. In addition, Hyp induced the phosphorylation of ERK1/2 in HUVECs.

Conclusion

These observations provide preliminary evidence that Hyp protects HUVECs against H₂O₂ damage, at least partially, by activating the ERK signaling pathway.     

淫羊藿苷对高糖损伤人脐静脉内皮细胞的保护作用及机制研究

目的:探讨淫羊藿苷对抗体外高浓度葡萄糖诱导人脐静脉内皮细胞的损伤及其机制。方法人脐静脉内皮细胞株分别培养在含5.5mmol/L葡萄糖(正常对照组)、5.5mmol/L葡萄糖+24.5mmol/L甘露醇(高渗对照组)、30mmol/L葡萄糖(高糖损伤组)、30mmol/L葡萄糖+10μmol/L淫羊藿苷(低剂量淫羊藿苷组)和30mmol/L葡萄糖+100μmol/L淫羊藿苷(高剂量淫羊藿苷组)的培养基中培养48h,分别进行细胞活力、细胞培养上清液乳酸脱氢酶及一氧化氮含量、细胞丙二醛含量及谷胱甘肽-过氧化物酶活力的测定。结果:高糖损伤组及低、高剂量淫羊藿苷组的细胞活力、乳酸脱氢酶、一氧化氮、丙二醛含量及谷胱甘肽-过氧化物酶活力与正常对照组比差异均有统计学意义(P<0.01);低、高剂量淫羊藿苷组的细胞活力、乳酸脱氢酶、一氧化氮、丙二醛含量及谷胱甘肽-过氧化物酶活力与高糖损伤组比差异均有统计学意义(P<0.01)。高渗对照组各项指标与正常对照组相比无显著性差异。结论淫羊藿苷对体外高糖损伤的内皮细胞具有保护作用,其作用机制可能通过提高内皮细胞抗氧化酶活力,维持NO正常水平;减少细胞膜脂质过氧化损伤,维持膜完整性而实现的。     

天香丹对人脐静脉内皮细胞氧化损伤的保护作用研究

目的:探讨天香丹对tBHP诱导损伤的人脐静脉内皮细胞的保护作用。方法:将HUVECs分为对照组、模型组、阳性对照药(维生素C)组和天香丹剂量组(30、60、90μg/mL)。MTT法筛选tBHP最佳造模浓度,并评价天香丹对内皮细胞氧化损伤的保护作用;微板法和WST法检测各组细胞乳酸脱氢酶(LDH)、还原型谷胱甘肽(GSH)和超氧化物歧化酶(SOD)表达情况;显微镜下观察各组细胞形态学变化,Hoechst 33258荧光染色法检测各组细胞凋亡情况。结果:经tBHP诱导24 h后,模型组细胞存活率、SOD活性和GSH含量较对照组显著降低(P<0.01),LDH释放量和细胞凋亡率明显增加(P<0.01);经维生素C和不同浓度天香丹预处理后,与模型组相比较,各组细胞存活率、SOD活性和GSH含量显著增加,LDH的释放和细胞凋亡率得到减轻(P<0.01)。结论:天香丹具有保护HUVECs免于氧化损伤的作用,其机制可能与抗氧化通路的激活,抗氧化能力的增强及逆转细胞凋亡有关。     

红景天苷对H2O2和高糖诱导损伤的血管内皮细胞保护作用研究

目的:探讨红景天苷对H2O2和高糖诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的保护作用。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞,分别以H2O2和高糖诱导内皮细胞损伤,分别给予10-6、10-5、10-4mol/L的红景天苷处理,MTT法测定细胞活力,检测LDH、MDA释放量和SOD活性。结果:结果显示红景天苷10-6、10-5、10-4mol/L组对正常人脐静脉内皮细胞皆无损伤作用;红景天苷10-5、10-4mol/L组对H2O2损伤模型的细胞活力有显著改善(P<0.05或P<0.01),红景天苷10-6、10-5、10-4mol/L组对高糖损伤模型的细胞活力均有显著改善(P<0.01),并且红景天苷10-5、10-4mol/L组能显著降低H2O2和高糖损伤组培养液中LDH和MDA释放量,升高细胞内SOD活性(P<0.05或P<0.01)。结论:红景天苷对H2O2和高糖诱导的人脐静脉内皮细胞损伤有明显的保护作用。     

桃红四物汤含药血清对过氧化氢损伤的人脐静脉内皮细胞的保护作用

目的:研究桃红四物汤含药血清对过氧化氢损伤的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的保护作用.方法:SD大鼠灌胃给予桃红四物汤提取液(生药1.75 g·mL-1),每天2次,按10 mL·kg-1连续给药3d后,制备桃红四物汤含药血清.MTT法考察桃红四物汤含药血清(终浓度为5％,10％,15％)预处理对H2O2诱导细胞活力减少的作用;显微镜观察细胞形态学变化;以丙二醛(MDA)和乳酸脱氢酶(LDH)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性以及AO/EB染色考察桃红四物汤含药血清对HUVECs凋亡及抗氧化能力的影响;Western blot法检测细胞Caspase-3的表达.结果:与空白血清对照组比较,经400 μmol·L-1H2O2刺激后细胞活性显著降低,含药血清组可显著提高SOD活力、降低MDA和LDH含量,并抑制Caspase-3表达.AO/EB染色及相差倒置显微镜也观察到桃红四物汤含药血清能降低H2O2诱导的细胞凋亡.结论:桃红四物汤含药血清对H2O2诱导的HUVECs损伤有显著地保护作用.     

三七总皂苷对大鼠扭体模型的镇痛作用

目的:观测三七总皂苷对大鼠扭体模型的镇痛作用。方法:24只SD大鼠随机分为生理盐水对照组(n=12)、三七总皂苷组(n=12),各组大鼠腹腔给药,12h一次,给药7天。于第8天给药后30min腹腔注射乙酸建立扭体模型,观测给药后15min扭体反应次数。结果:三七总皂苷具有较强的镇痛作用,三七总皂苷组大鼠扭体反应次数明显少于生理盐水对照组(P<0.01)。结论:三七总皂苷对乙酸所致大鼠扭体模型有一定的镇痛作用。     

熊果酸对ox-LDL诱导的人脐静脉内皮细胞氧化损伤的保护作用

目的:复制氧化性低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVECs)氧化损伤模型,并探讨熊果酸(Ursolic Acid,UA)对其保护作用。方法:以体外培养的HUVECs为实验对象,采用不同浓度(5,10,15,20μM)熊果酸及阳性对照药物维生素E预处理细胞16 h,再加入100μg/ml的ox-LDL培养24 h造成细胞氧化损伤。CCK-8检测细胞存活率,酶联免疫法检测各组细胞培养上清液过氧化氢(H2O2)、一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)活力以及各组细胞裂解液中一氧化氮合成酶(NOS)活力;采用SPSS 17.0软件对实验数据进行统计学分析。结果:与正常组相比,模型组细胞存活率、NO、SOD、NOS水平明显降低,MDA、H2O2水平明显增加;与模型组比较,熊果酸在5²0μM范围内,呈剂量依赖性提高细胞存活率,上调NO、SOD、NOS水平,并下调MDA、H2O2水平。结论:100μg/ml的ox-LDL能够诱导HUVECs发生氧化损伤,熊果酸能够通过抗氧化发挥保护作用,其机制可能与维持NOS、SOD活性、减少MDA、H2O2生成等有关。     

三七总皂苷配合双联抗血小板药物对人脐静脉内皮细胞损伤和内皮血小板黏附的影响

目的:探究三七总皂苷配合双联抗血小板药物对人脐静脉内皮细胞损伤和内皮血小板黏附的影响。方法:对人脐静脉细胞进行培养,培养后分为7组,向空白组加入生理盐水,模型组加入80mg/kg的氧化低密度脂蛋白,双联抗血小板药物(简称:双抗组)加入80mg/kg氧化低密度脂蛋白+10mg/kg氯吡格雷+15mg/kg阿司匹林,三七总皂苷组加入80mg/kg氧化低密度脂蛋白+三七总皂苷终浓度100mg/kg,联合组分别加入80mg/kg氧化低密度脂蛋白+10mg/kg氯吡格雷+15mg/kg阿司匹林+三七总皂苷终浓度50、100、200mg/kg。作用48h后采用流式细胞仪检测7组细胞凋亡率以及内皮血小板黏附情况,检测7组细胞乳酸脱氢酶(LDH)、细胞间黏附分子(ICAM)、一氧化氮(NO)水平,并采用Western blot法检测P38MAPK、p-P38MAPK、ERK-1/2、p-ERK-1/2蛋白含量。结果:与空白组比较,模型组细胞凋亡率、LDH、ICAM,CD61平均荧光强度以及p-P38MAPK、p-ERK-1/2蛋白表达均明显为高,NO水平均明显为低;与模型组比较,双抗组、三七总皂苷组、50mg/kg联合组、100mg/kg联合组100mg/kg及200mg/kg联合组细胞凋亡率、LDH、ICAM,CD61平均荧光强度以及p-P38MAPK、p-ERK-1/2蛋白表达均明显降低,NO水平均明显升高;其中200mg/kg联合组细胞凋亡率、LDH、ICAM,CD61平均荧光强度以及p-P38MAPK、p-ERK-1/2蛋白表达明显高于其他各组,NO水平明显低于其他各组。结论:200mg/kg三七总皂苷配合双联抗血小板药物对人脐静脉内皮细胞具有保护作用,且可改善内皮血小板黏附情况,其机制可能与内皮细胞MAPA通路p-P38MAPK、p-ERK-1/2蛋白含量有关。