病毒性心肌炎患者外周血单核细胞来源DCs的功能研究

目的:体外诱导病毒性心肌炎患者外周血单核细胞来源的DCs(Mo-DCs),并探讨其功能状态的变化,为寻求病毒性心肌炎的致病机制和新的治疗途径提供实验依据。方法:无菌分离18例临床病毒性心肌炎患者及20例健康志愿者外周血单核细胞,分别加入粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony-stimulating factor,GM-CSF)和白细胞介素4(IL-4)诱导外周血Mo-DCs,应用免疫荧光标记技术、流式细胞分析和酶联免疫吸附试验(ELISA)等方法比较病毒性心肌炎患者和健康志愿者外周血Mo-DCs的表型、吞噬能力和表达细胞因子的差异。结果:病毒性心肌炎患者外周血Mo-DCs表达较高水平的CD83、CD80、CD86和MHCⅡ,但是吞噬能力下降,并且分泌较高水平的TNFα-(P<0.01)和IL-12(P<0.01),可以更有效地刺激T淋巴细胞增殖。结论:病毒性心肌炎患者外周血Mo-DCs处于较成熟功能状态,且表达较高水平的IL-12和TNFα-。进而有可能通过调节T细胞、NK细胞和巨噬细胞发挥效应而在病毒性心肌炎的发生发展中起到举足轻重的作用。     

氧化修饰低密度脂蛋白对人外周血单核细胞和THP-1细胞功能的影响

以天然低密度脂蛋白(nLDL) 为对照组, 探讨了氧化修饰低密度脂蛋白(oxLDL)对人外周血单核细胞(PBMs) 和人前单核白血病细胞株THP 1 粘附和分泌功能的影响。结果表明: oxLDL可上调单核细胞粘附分子CD11b 表达, 促进其与内皮的粘附, 并进一步诱导TNF α、IL 8 的分泌; 而nLDL无此作用。说明oxLDL是单核细胞粘附和激活的诱导剂, 经oxLDL诱导的THP 1 表现出与成熟单核 巨噬细胞相似的特征, 可作为体外动脉粥样硬化单核细胞分化激活的细胞模型     

用单核细胞来源的IL-8活化中性粒细胞

多核白细胞(PMN)、单核细胞(MONC)和巨噬细胞(Mφ)在防御局部微生物感染中有重要作用,它们通过大量催化因子作用而移向感染区,并受到细胞因子调节而发挥吞噬、杀菌和ADCC 等活性。过去发现IL-1、TNF 是很好的趋化及调节因子。IL-8是与IL-1和TNF 有所不同的新的     

IL-2/IL-2R对单核来源树突状细胞的体外分化发育和功能的作用

目的 分别比较抗人CD40单抗和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)对单核来源树突状细胞(monocyte-derived dendritic cell,Mo-DC)体外诱导表达CD25(IL-2Rα)的作用,并进一步探讨了IL-2在Mo-DC分化成熟和功能介导中的生物学效应.方法 采用联合粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)和IL-4体外诱导Mo-DC的培养方法 ,分别加入CD40单抗和TNF-α诱导Mo-DC成熟;免疫荧光标记分析Mo-DC表型;ELISA法测定γ干扰素(interferon-r,IFN-γ)的分泌水平;3H-TdR掺入法分析Mo-DC对自体T细胞的促增殖效应.结果 (1)CD40信号能有效诱导成熟Mo-DC上调表达CD25(IL-2Rα),而TNF-α则无此作用;(2)Mo-DC在CD40激发后,加入不同剂量的IL-2继续培养可促进Mo-DC对IFN-γ的分泌,同时3H-TdR掺入法的结果也显示,在Mo-DC培养时加入IL-2可以增强Mo-DC对T细胞的促增殖作用.结论 CD40激发的Mo-DC上调表达CD25(IL-2Rα),外源性IL-2能促进Mo-DC分泌IFN-γ和介导T细胞的促增殖效应.     

肿瘤相关性巨噬细胞的特性及功能

肿瘤相关性巨噬细胞(TAM)是一类具有异质性的特殊的巨噬细胞群体,其数量和功能受到宿主、肿瘤等多方面因素的影响,其表达Fc 受体和Ia 抗原的水平高于静止巨噬细胞,但其分泌细胞因子(如IL-1,TNF)的水平较低。目前大多数体外实验和体内实验证明TAM 可通过直接或间接的作用促进肿瘤细胞生长和转移,最近发现TAM 在某些因子如CSF 的作用下可增殖并发挥抗肿瘤作用,表明TAM 经体外适当处理后有可能成为一类应用于肿瘤免疫治疗的抗肿瘤效应细胞。     

多抗甲素对人类单核细细IL-1生成及淋巴细胞IL-1反应性的促进作用

新抗生素多抗甲素对免疫功能有明显的促进作用,其作用机理包括促进白细胞介素2(IL-2)的分泌及反应性。最近我们又发现多抗甲素在体外和体内均能促进小鼠腹腔巨噬细胞分泌白细胞介素1(IL-1)。本文进一步针讨多抗甲素在体外对人外周血单核     

单核细胞增殖特性的实验研究

<正>单核细胞参与机体许多正常生理及病理过程.在动脉粥样硬化(AS)的发生过程中,单核细胞可转变成泡沫细胞,分泌细胞因子,并出现增殖细胞所具有的特性.本实验在行外周血体外培养及单核细胞与血管内皮细胞联合培养的基础上,采用免疫组织化学碱性磷酸酶标记ABC(ABC—AP)法,观察了IL-1、TNF和IFN     

单核细胞在含内毒素的微环境中分化时表型与功能的改变

目的　观察单核细胞在含内毒素 (LPS)的微环境中分化成巨噬细胞时 ,其表型与功能的变化。方法　以含LPS的介质体外培养纯化的正常人循环单核细胞 ,在其分化为巨噬细胞的不同阶段观察形态、超微结构、细胞表面HLA DR、补体 3受体 (C3R)和甘露糖受体 (MR)的表达以及细胞分泌超氧离子 (O-2 )、白细胞介素 1β(IL 1β)和肿瘤坏死因子α(TNF α)的变化。结果　与在自身血清中分化的巨噬细胞相比 ,(1)在含LPS介质中发育的巨噬细胞体积较小 ,但具有正常巨噬细胞的超微结构特征 ;(2 )在分化早期 (第 1天 ) ,其HLA DR的表达明显上调 ,而在成熟阶段 (第 5天 )表达下调。LPS对C3R和MR的表达无明显作用 ;(3)在含LPS介质中分化的巨噬细胞 ,其在佛波醇肉豆蔻乙酸盐刺激下生成O-2 的能力得以保持。自发分泌IL 1β和TNF α的水平明显高于在血清中分化的巨噬细胞。结论　在含LPS微环境中分化的巨噬细胞具有与正常单核细胞衍生的巨噬细胞所不同的功能特征 ,表现为MHCⅡ类抗原的表达降低 ,促炎症介质的生成增加。     

脂多糖预处理对人外周血单核细胞分泌TNFα和PGE2的影响

探讨不同剂量脂多糖预处理对健康人外周血单核细胞分泌细胞因子TNFα和PGE2的影响。分离健康志愿者外周血单核细胞，以不同剂量脂多糖(0、10、100、1000μg/L)预处理24h，然后测定其再次受到不同剂量脂多糖(0,10、100、1000μg/L)刺激后分泌TNFα和PGE2水平。采用ELISA方法测定TNFα，EIA方法测定PGE2。脂多糖可刺激人外周血单核细胞分泌TNFα和PGE2。脂多糖预处理导致外周血单核细胞分泌。TNFα减少，而明显增加PGE2的生成。脂多糖预处理可以引起人单核细胞产生耐受。     

肺泡巨噬细胞因子与肺纤维母细胞

本文对有关肺泡巨噬细胞的分泌产物如生长因子、纤维粘连蛋白以及IL-1、TNF 等细胞因子作了简述,并对这些产物在正常和病理状态下对肺纤维母细胞生长的调节效应作了简要评介,认为在病理状态下肺泡巨噬细胞分泌产物的不平衡可能是导致肺纤维母细胞增生的主要原因。     

白细胞介素6是急性期反应的第三种介质,可调节人及小鼠的肝脏蛋白合成—与IL-1β及TNF-α的比较

白细胞介素6(IL-6)是一种由巨噬细胞、单核细胞及成纤维细胞合成的多功能的细胞因子。最近有人提出,IL-6可能是急性期反应的主要介质,而IL-1β和TNF-α则作用甚微。作者的研究旨在比较人IL-1β、TNF-α及IL-6在体内及体外对肝脏蛋白合成的效应。     

游离脂肪酸受体4(FFAR4/GPR120)调控巨噬细胞功能的研究进展

游离脂肪酸受体4(FFAR4/GPR120)表达于巨噬细胞,调控白细胞介素1(IL-1)、IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)等细胞因子的表达与分泌,介导ω-3多不饱和脂肪酸的抑炎效应。FFAR4可通过Gq/11蛋白激活磷脂酶C和胞质磷脂酶A2介导的信号分子途径,或者通过β抑制蛋白2(β-arrestin 2)调控炎症相关分子,改变核因子κB(NF-κB)等转录因子活性。巨噬细胞在机体分布广泛,FFAR4调节巨噬细胞状态,进而影响脂肪组织、肌肉组织、肝脏等组织器官的功能,参与肥胖、胰岛素抵抗、骨质疏松、脂肪肝等疾病发生。目前对FFAR4激活在巨噬细胞的效应和对疾病的治疗作用还处于认识的初期,许多问题仍待更深入研究。     

五加皮抗肿瘤活性物质Age对单核细胞产生TNF-α和IL-12的影响

目的 :研究五加皮抗肿瘤成分Age对单核细胞功能的影响 ,揭示Age抗肿瘤机制。方法 :使用对TNF敏感的L92 9细胞采用生物法测定了TNF含量 ,用ELISA法测定了IL 12的含量。用RT PCR法分析了单核细胞的细胞因子mRNA表达。用同位素法分析了Age对单核细胞吞噬功能的作用。结果 :Age与单核细胞共同培养后 ,单核细胞TNF α、IL 12等细胞因子的产生明显增加 (P <0 0 1) ,而且有较好的量效关系。在单核细胞与LPS的培养液中加入不同浓度的Age ,经培养后与单独加入LPS相比TNF α分泌的量显著增加 ,显示了Age对LPS的单核细胞刺激有相加作用。经Age处理后 ,单核细胞的TNF α、IL 12等细胞因子的mRNA表达也明显增强。体内实验结果也显示 ,Age对单核细胞的细胞因子产生有一定的影响。荷瘤小鼠经口连续投入Age后 ,血清中和脾脏分离的单核细胞体外培养上清中TNF α和IL 12含量明显提高 ,单核细胞TNF α、IL 12mR NA表达也明显增强 (P <0 0 1) ,从蛋白水平和分子水平证明了Age对单核细胞的细胞因子产生有促进作用。结论 :中药五加皮抗肿瘤有效成分Age对单核细胞有较强的刺激作用。通过促进其细胞因子的分泌和吞噬功能的增强杀伤肿瘤或抵抗肿瘤发生 ,所分泌的细胞因子还可通过调节免疫功能达到治疗肿瘤作用。该结果对五加皮     

血小板活化因子增强人类单核细胞的细胞毒性

IFN-γ、IFN-α、TNF、IL-1及IL-2等细胞因子都能增强人类单核细胞的细胞毒性,这些细胞因子均为免疫反应期间合成并释放的蛋白质,而血小板活化因子(PAF)则是急性和亚急性免疫反应中释放的磷质介质。在炎症反应发生的最初几分钟其合成和释放量即可达高峰。因此,单核细胞在受到蛋白类细胞因子激活之前,PAF 就已开始发挥作用。PAF 不但能促进单核细胞或巨噬细胞的趋化和聚合,还有助于超氧化物、前列腺素及白细胞介素的合成。虽然TNF、IFN-γ和IL-1均有促进单核细胞合成PAF 的作用,但是PAF 也能促进单核细胞和巨噬细胞     

IL-2诱导单核细胞产生IL-6

能刺激T 细胞有丝分裂活性的IL-2是人单核细胞发挥效应细胞活性和分泌细胞因子的主要激活物,新鲜人单核细胞可表达P75IL-2β受体,IL-2与P75相互作用时,可触发单核细胞活化。因单核细胞是IL-6的主要来源,故探讨了IL-2对人单核细胞     

Lactobacillus casei胞外多糖对体外培养的巨噬细胞分泌TNF-α、NO及IL-10的影响

目的:探究干酪乳杆菌胞外多糖(EPS)对体外培养的小鼠腹腔来源巨噬细胞分泌炎症相关因子的影响.方法:采用倒置显微镜,观察干酪乳杆菌EPS对腹腔来源巨噬细胞形态的影响;采用双抗体夹心ELISA和Griess法,分析干酪乳杆菌EPS对腹腔来源巨噬细胞分泌促炎症因子TNF-α、NO及抗炎症因子IL-10的变化.结果:EPS能够抑制由脂多糖导致的巨噬细胞形态的变化,与空白组相比,350、400和450 μg/ml EPS均能提高TNF-α、NO及IL-10的分泌量.脂多糖(Lipopolysac-charide,LPS)能诱导TNF-α和NO的分泌,抑制IL-10的分泌.350、400和450 μg/ml EPS能抑制由10μg/ml脂多糖诱导的TNF-α和NO的分泌,促进LPS抑制的巨噬细胞分泌IL-10,且呈剂量依赖关系.结论:干酪乳杆菌EPS能双向调节体外培养的腹腔巨噬细胞分泌炎症相关因子功能.     

乙型肝炎病毒及其核心抗原对巨噬细胞极化的影响

目的:探讨乙型肝炎病毒(HBV)和乙型肝炎核心抗原(HBcAg)对巨噬细胞M1/M2极化的影响。方法:体外培养人白血病单核细胞系THP-1,用佛波酯将其诱导为人巨噬细胞,然后分别与HepG2/HepG2.2.15细胞和HBcAg共培养。通过流式细胞术观察共培养后THP-1巨噬细胞极化相关分子的变化;收集细胞培养上清,用ELISA检测巨噬细胞中促炎和抗炎细胞因子的分泌水平;应用RT-qPCR检测共培养后巨噬细胞极化相关分子和细胞因子的表达水平。结果:与HepG2细胞对照组相比,分泌HBV的HepG2.2.15细胞与THP-1巨噬细胞共培养能够上调其CD86和CCR7表达水平,同时促进IL-6、TNF-α和IL-10的分泌。而与HBcAg共培养后,THP-1巨噬细胞上CD163、CD206以及CD86表达水平升高,同时促进TGF-β、IL-10和TNF-α的分泌。结论:①HBV主要促进THP-1巨噬细胞向促炎的M1方向极化;②HBcAg主要促进THP-1巨噬细胞向抑炎的M2方向极化但同时也影响THP-1巨噬细胞向M1方向的极化。     

PMA及IL4序贯诱导人单核细胞系成为M2型巨噬细胞

目的将人单核细胞系U937及THP-1体外诱导得到M2型巨噬细胞。方法将U937及THP-1细胞以phorbol 12-Myristate 13-Acetate(PMA)及白介素-4(interleukin,IL-4)序贯诱导,采用q RT-PCR法及ELISA法检测M1/M2标志物m RNA及蛋白表达。结果 PMA使两种细胞转化为巨噬细胞,IL-4序贯诱导使巨噬细胞伸出伪足,序贯诱导后巨噬细胞M1表型标志物(IL-1β、IL-6、IL-12及i NOS)m RNA表达水平下调,M2表型标志物(IL-10、CD163)m RNA表达水平上调。同时,CCL18蛋白和m RNA表达水平均上调,而雷帕霉素可下调升高的CCL18表达水平。结论及IL-4序贯诱导人单核细胞系成为M2型巨噬细胞,雷帕霉素可逆转这一过程。     

中药牛膝提取物抗肿瘤活性的初步研究

目的　探讨中药牛膝提取物的抗肿瘤活性及其作用机制。方法　MTT法检测细胞抑制率;流式细胞仪分析细胞周期及凋亡情况;分别用生物化学法和ELISA法检测巨噬细胞因子TNF α和IL- 6的表达;用RT -PCR法检测巨噬细胞因子IL 6mRNA表达。结果　牛膝提取物在体外对两种肿瘤细胞株的增殖具有明显抑制作用,量效、时效关系显著(P <0 .0 1) ,细胞周期停滞于G0 G1 期,诱导细胞凋亡可能是其发生作用的机制之一;牛膝提取物虽然在体外不能促进小鼠脾细胞的生长增殖,但对巨噬细胞的吞噬功能却有较强的刺激作用(P <0 .0 1) ,并可促进细胞因子TNF -α和IL- 6的产生以及IL- 6mRNA的表达。结论　该提取物具有抗肿瘤作用,不仅对免疫功能没有抑制作用,而且可以通过延缓肿瘤细胞周期、诱导凋亡、增强巨噬细胞对肿瘤细胞的杀伤作用及分泌细胞因子如TNF- α、IL -6等参与其抗肿瘤机制。     

人脐带血来源树突状细胞、巨噬细胞和单核细胞体外培养及鉴定

目的建立从人脐带血体外诱导扩增树突状细胞、巨噬细胞和单核细胞的方法。方法从正常人脐带血中分离出单核细胞,经3种细胞因子—重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rh GM-CSF)、重组人白细胞介素4(rh IL-4)和重组人肿瘤坏死因子(rh TNF-α)联合诱导培养,7 d后收获细胞,并利用光学显微镜、免疫组化的方法进行鉴定。结果培养收获了高纯度的树突状细胞、巨噬细胞、单核细胞,细胞高水平表达CD1a、CD86、CD68和CD14。结论人脐带血单核细胞经细胞因子诱导培养可以得到大量的成熟树突状细胞、巨噬细胞和单核细胞。