新生大鼠肺组织石蜡包埋的适宜条件

目的:探索新生大鼠肺组织蜡块制作的合适条件。方法:取20只出生5天的新生大鼠肺组织进行固定、脱水、浸蜡、包埋。结果:新生大鼠肺组织适宜的包埋条件为:①4%甲醛固定液固定18～24h;②65%的酒精和4%的甲醛固定液1:1体积的液体中浸泡(12～24h);③70%酒精里浸泡(12～24h)后进行本文结果中的包埋程序可得到较高质量的新生大鼠肺组织石蜡切片。结论:通过细致的摸索过程可以得到新生大鼠肺组织的适宜包埋条件。     

江苏医学会病理学组1979年病理技术交流活动部分论文摘要选登(二)

心脏组织石蜡大切片法我室在克山病研究工作中为进行病灶立体重建,在一张切片上全面地观察整个心脏的病灶分布,我们试作了大块心脏及整个小儿心脏石蜡切片。由于克山病心肌癜痕组织较多,经酒精脱水,二甲苯透明后其硬度更强,加以组织块大,给切片带来了较大的困难,为克服这些难点,我们在软化组织、充分透阴、改进??木块等方面采取了措施,而成功地在Rechard滑坳式切片机上切出7×5×O.5公分的小儿整个心脏,厚度为5—8微米,染色种类为HE,VG结缔组织、Mallory氏三色胶元纤维以及磷钨酸苏木素横纹肌。兹将所用的脱水包埋流程分述如下:冲水12小时,5％石炭酸软化24小时,水洗4小时,85％酒精15小时,95％酒精I 9小时,95％酒精I 15小时,100％洒精I 4小时,100％酒精I 4小时,酒精二甲苯I液1小时,二甲苯I 1小时,石蜡I4～6小时,石蜡I 4～6小时。为弥补脱水前软化不足,可以在切片前用70％酒精甘油-石炭酸直接浸泡蜡块2～7天。此外,为保证充分脱水,故采用了较长时间的酒精脱水。在室温下二次二甲苯透明,必须以肉眼控制其透明程度。在切片时进刀必须缓慢,用力均匀,可以采用锐角进刀以减少阻力。     

石蜡切片的酶组织化学方法应用(摘要)

为了研究恶性淋巴瘤,区分 T,B 或组织细胞,我们四年多来试用新鲜甲醛——蔗糖及HOIt 氏固定液固定,石蜡包埋,切片的方法。首先用大白鼠的肾、脾及肠系膜淋巴结的新鲜组织切片,获得成功以后,应用于人体的新鲜淋巴结组织及淋巴瘤标本中。经过这样固定和包埋的组织,一次切片10余张,作 ANAE、ACP、AKP、ATP 染色,均获得满意的效果。同时作双 PAP 染色,亦能清楚地判定 B 细胞淋巴瘤瘤细胞浆内的免疫球蛋白。我们认为这些方法对淋巴组织非肿瘤性病变,特别是对恶性淋巴瘤的研究有一定的实用价值,值得在本省内基层单位推广应用。我们的体会是:1.必须是新鲜组织,取材要小,一般为0.5×0.5×0.2cm,立即放入固定液内。     

皮肤组织冰冻切片在直接免疫荧光法中包埋剂的改良应用

目的用普通胶水代替OCT包埋皮肤组织来制作冰冻切片,不仅降低了成本,而且所制切片与用OCT包埋剂包埋所制切片在制片质量与染色效果上无异。方法行冰冻切片时,用普通胶水代替OCT对皮肤组织起支托固定作用。结果用普通胶水包埋制作的冰冻切片,在制片质量及染色效果上均与用OCT包埋剂包埋制片无异。结论冰冻切片行直接免疫荧光法要求冰冻切片质量优良,且在制片过程中快捷、力求保持抗原的完整性。质量优良的包埋剂在制片过程中可以达到以上要求,但其价格昂贵;用普通胶水代替质量优良的包埋剂,不仅在制片质量及染色效果上与前者无异,且价格便宜,值得推广使用。     

低压快速病理切片法

在临床工作中,往往急需病理诊断以便决定采取手术方式。通常均以冰冻切片法作出病理切片,此种切片较厚,一般为10微米,故组织结构模糊,细胞之胞核及胞浆不清楚而影响诊断的准确性。且目前在一般中小城市中,冰冻切片所需二氧化碳之供应尚有困难。我们在低压石腊埋藏法的基础上加以改进,缩短制片时间为30分钟,切片质量优良,能和石腊包埋切片嫓美,故在临床工作中能代替冰冻切片广泛应用。本法之简单程序如下:固定:新鲜组织块置入9份95%酒精及1份36%福尔马林(即市场出售之纯福尔马林)混合液中,煮沸固定1分钟以后,即在1/4匹马力电力真空抽气下     

应用超声波快速组织处理仪制备快速石蜡切片的体会

笔者２００１年应用ＹＴＧ -５Ｅ型生物组织快速处理机(湖北孝感亚光医用电子技术研究所 )制作了１２０例病理组织学切片 ,其制片快且能弥补冰冻切片和石蜡切片的不足 ,介绍如下。１制片过程１ １内窥镜及针吸活检的小组织ＡＡＦ液中固定３ｍｉｎ ,ＡＣ液中脱水３ｍｉｎ ,ＳＰ液中浸蜡１０ｍｉｎ ,包埋切片。１ ２大组织２０%甲醛中固定５ｍｉｎ ,组织重新取材后修正厚薄０ １ｃｍ ,ＡＡＦ液中固定３ｍｉｎ ,ＡＣ液中脱水３ｍｉｎ ,丙酮苯中脱水兼透明５ｍｉｎ，ＳＰ液中浸蜡１０ｍｉｎ ,包埋切片。１ ３骨组织１５%硝酸中脱钙２０ｍｉｎ ,…     

使用超声波快速组织处理仪对胃粘膜组织快速处理的体会

使用超声波快速处理仪对胃粘膜组织进行处理制取的切片 ,能使组织形态不变、切片薄 ,操作方便 ,且时间短 ,能在9～ 12分钟内完成固定、脱水、浸蜡过程。1　材料我院两年内 10 0例胃粘膜组织 ;超声波处理仪一台 ;10 0 ml小烧杯 3只 ;AF液 :15 %甲醛 10 ml,95 %酒精 85 m l,冰乙酸5 ml;丙酮 ;硬脂酸石蜡 (硬脂酸 1份 ,石蜡 3份 )。2　方法开启超声波使水温达到 75～ 80℃ ,用绵纸将胃粘膜组织包好投入 AF液固定 ,时间不宜过长 ,一般 2～ 3分钟 ,因胃粘膜标本较小 ,以保持原有组织结构完整 ,不至于使组织过于收缩而结构消失 ,影响染色。用丙…     

半簿切片技术

半薄切片(Semithin section)又称厚切片,名称是相对于电镜的超薄切片而讲的。半薄切片厚度介于0.5～2μ,介于光镜石蜡切片(7μ)和电镜超薄切片(0.07μ)之间。半薄切片的制法是按常规电镜制备的树脂包埋组织块,在超薄切片机或经改制的石蜡切片机上用玻璃刀制取的,经一定方法处理后进行染色,光学显微镜下观察。主要用于电镜观察前的定位,但由于半薄切片的制备是按电镜制样程序进行固定、脱水、包埋,组织结构保存较好,又兼切片较薄,故在光镜下分辨率较常规光镜切片为优,若把照相底片加以适当     

乳腺癌癌旁增生腺上皮的p53蛋白表达

p53蛋白在乳腺癌的发生发展过程中起着重要作用,但p53蛋白究竟作用于哪一环节,表达于哪个阶段,目前尚不清楚。结合本文材料对此作一探讨。1材料与方法1.1材料收集武警黑龙江省总队医院、黑龙江省第二肿瘤医院1993～2003年资料完整的乳腺癌病例156例,另选乳腺增生症、乳腺纤维腺瘤20例作为对照。所有组织均经10%福尔马林固定,常规脱水、透明、浸蜡、石蜡包埋。1.2方法蜡块切片,常规脱蜡入水,单克隆抗体p53蛋白,超敏SP试剂盒(购于福州迈新公司)。切片经高压处理后,再用抗原修复液Ⅱ孵育10m in,PBS冲洗3×5m in,常规SP法免疫组化染色步骤[1]…     

病理试验室细小质嫩穿刺组织行脱水处理的方法及探讨

目的细小质嫩穿刺组织应用脱水、透明、浸蜡处理,其处理方法改进后组织有韧性,不易碎裂,石蜡包埋组织后能切出完整组织,易于镜下观察。方法收到组织后,立即置于中性缓冲固定液中固定,再进行脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、染色。结果组织在制片过程中经过改进方法处理后,保证了组织结构的完整,使组织无过度收缩、变硬,切片时无碎裂,着色优质且能准确表达。结论细小质嫩穿刺组织脱水、透明、浸蜡的处理方法改进后,组织结构最大限度保持与活体组织结构相近,用石蜡包埋组织后,可切出组织结构完整的切片,同时易于切出超薄切片及连续切片,切片染色易着色,镜下观察组织细胞结构完整,细胞表达的效果明显优于未改进之前的效果。     

小标本的固定、脱水、包埋技巧

各种内镜活检及穿刺活检标本体积小、形状不规则、颜色不鲜明,在标本处理过程中容易发生组织块丢失、与其他组织碎屑相混淆、包埋不平、切片不全或全部切掉等现象。我们结合自己20余年的工作经验,对于在小标本的固定、脱水、包埋过程中应采取一些措施介绍如下。     

特殊染色

地衣素(Orcein)染色显示石蜡切片内的乙型肝炎表面抗原方法:石蜡切片厚4～5微米,常规用二甲苯脱蜡到水,用0.25％高锰酸钾硫酸液氧化5分钟(0.5％高锰酸钾水溶液,0.5％硫酸水溶液,两液在临用时等分混合,用滴管滴入盖过切片,每一玻片约需0.5～1毫升巳足),入水稍洗,以2％草酸漂白5分钟,流水稍冲洗2～3分钟,70％酒精稍洗,置入酸化的地衣素酒精液内染3～5小时(地衣素1克,70％酒精100毫升,浓盐酸0.84毫升,先把浓盐酸倾入70％酒精,然后加入地衣素,搅拌溶解,翌日即可使用),70％酒精漂洗二次,每次约半分钟,常规脱水透明,最后以中性树胶封固。结果:肝细胞内的地衣素阳性物质染为深棕色或紫棕色,呈微细颗粒状或均质状。阳性物质可形成圆形或椭圆形的团块,也可充满整个胞浆,呈环形或半     

石蜡切片制作的注意事项

为了适应教学时大批量使用的要求,针对石蜡切片制作过程中容易出差错的环节、导致光镜下组织或细胞形态结构异常等问题,探索提高批量制备组织学石蜡切片标本整体质量的方法,对制作过程中组织的取材、固定、固定后的修整、洗涤、脱水与透明、浸蜡、包埋、切片、染色及封固等步骤进行改进。实验结果表明石蜡切片必须注意各步骤的制作,有效地提高了组织学教学切片的质量,延长使用时间。     

对胶原纤维三色特殊染色过程的一点改进

我院采用《实用病理特殊染色和组化技术》[1] (以下称《特染技术》)中介绍的胶原纤维特殊染色Masson三色法 ,对子宫平滑肌瘤进行特殊染色 ,发现用其介绍的 1%冰醋酸处理、95 %酒精两次脱水后 ,所染绿色将消失或仅残留淡棕黄色 ,对此 ,我们改用流动自来水漂洗代替其 1%冰醋酸处理 1分钟 ,用 10 1型电热鼓风干燥箱烘干 10分钟～ 15分钟代替其 95 %酒精两次脱水 ,效果良好。1　材料与方法1 1　材料　①制片 :自子宫肌瘤 5例标本取材 16块 ,常规脱水透明 ,脱蜡至水 ,制切片 16张 ,Bouin氏固定液浸泡一晚。②按《特染技术》中所示剂量配制各种所…     

加热快速石蜡制片法在病检中的应用

在某些情况下病理活检需在当日或几小时内作出报告。如病因不明的阴道大出血、肿瘤以及偏僻山区基层医院的活检急待病理报告 ,为临床提供诊断依据 ,制定治疗方案。这需要提高制片速度 ,以前曾有过这方面的报道 ,但本法与其它报道均有所不同。1　材料与方法1 1　收到活检标本 ,立即取材 ,组织切成 2 0ｃｍ× 1 5ｃｍ×0 2ｃｍ切块 ,放入新配的酒精福尔马林液中 ,在 70℃水浴锅中固定 2 0ｍｉｎ。1 2　移入 70℃丙酮液中脱水 30ｍｉｎ。1 3　移入 70℃二甲苯中透明 2 0ｍｉｎ。1 4　移入 75℃石蜡中浸蜡 30～ 60ｍｉｎ。1 5　新蜡包埋…     

冰水混合物在病理组织制片中的应用研究

目的 探讨冰水混合物在病理组织制片中的应用价值,以寻求提高HE切片质量的方法.方法 手术切除的人体标本经脱水、浸蜡后包埋成蜡块,蜡块分别用自来水、冰块、冰水混合物处理后切片,常规HE染色,光学显微镜观察.结果 经冰水混合物处理的组织蜡块,切出的蜡片成带完整、厚薄均匀,无重叠、皱褶、脱片、空洞、龟裂或波浪样改变;HE染色鲜艳,组织结构清晰,细胞形态完整.与经自来水、冰块处理的蜡块制作的切片有明显差异.结论 切片前用冰水混合物处理蜡块的方法是可行的,可明显提高HE制片质量.     

冰水混合物在病理组织制片中的应用研究

目的 探讨冰水混合物在病理组织制片中的应用价值,以寻求提高HE切片质量的方法.方法 手术切除的人体标本经脱水、浸蜡后包埋成蜡块,蜡块分别用自来水、冰块、冰水混合物处理后切片,常规HE染色,光学显微镜观察.结果 经冰水混合物处理的组织蜡块,切出的蜡片成带完整、厚薄均匀,无重叠、皱褶、脱片、空洞、龟裂或波浪样改变;HE染色...     

冰冻切片染色的进一步改进

关于冰冻切片染色作者曾于1966年间提出了一些初步改进意见,经实践我们又进一步作了改进,以提高染色质量。一、组织块体积不超过1×1×0.2厘米,在煮沸的10%甲醛液中固定半分钟。二、采用手工进刀,右手转动机轮,旋转不超过30°,上下连续切片,本方法要比自动进刀法优越。三、切片用毛笔尖取下后放入玻璃皿水中,玻皿底面垫一黑纸,以便选取较完整、最菲薄的组织片,经贴附之后在酒精灯上烤至微干。四、贴有组织片的载玻片放入下列试剂中脱水、脱脂、溶去杂质(试剂在56度温箱中预热)     

乙型脑炎病毒进入培养的神经原细胞并在其中复制

作者用电镜观察乙型脑炎病毒(JEV)在小鼠成神经细胞瘤(N18TG2)细胞和小鼠成神经细胞瘤与大鼠神经胶质瘤(NG108-15)杂交细胞上的进入方式和复制模式。将JEV中国株SA14,接种于成神经细胞瘤细胞和杂交细胞,在10% CO_2、37℃下培育,观察接种后2分钟病毒进入情况和1、2、3天病毒复制情况。将接种后各期的细胞用固定液固定、4℃过夜,然后用0.1M,pH7.4的二甲胂酸盐缓冲液冲洗,再固定、脱水、包埋、切片、染色、以电镜观察。以标准空斑试验检测传染性病毒滴度。观察接种后2分钟病毒进入情况,经电镜放大20000倍扫描每个样品中50个细胞     

活检组织的快速石蜡制片

我们对内窥镜活检组织在常规条件下的快速石蜡制片进行了探索。在不增加任何设备的条件下,使石蜡制片在两小时内完成,大大缩短了病检时间。 1 材料与方法 材料取自胃镜、结肠镜、支气管镜等内窥镜活检组织。①用镜头纸包好组织,放入组织盒中,置于AF液(95％乙醇90ml,福尔马林10ml)中固定15分钟;②无水乙醇①中涮洗10秒,无水乙醇②中脱水45秒;③二甲苯①中涮洗10秒,二甲苯②中透明20分钟;④将组织从镜头纸中取出,放入小蜡杯。在酒精灯上间断摇动加热至组织不再冒气泡。再置入60℃的恒温箱共15分钟;⑤蜡块