他克莫司对糖尿病大鼠肾组织巨噬细胞浸润、增殖及活化的影响

目的探讨他克莫司对糖尿病大鼠肾脏保护作用的机制与肾脏内巨噬细胞浸润、增殖及活化的关系。方法应用链脲佐菌素建立大鼠糖尿病模型,随机分为对照组、模型组、他克莫司0．5及1．0mg-1·kg-1·d-1给药组（模型组＋他克莫司0．5、1．0）,4周后观察大鼠相对。肾质量、尿白蛋白排泄率,应用免疫组化方法,检测肾组织巨噬细胞表面标志、增殖细胞核抗原及诱生性一氧化氮合酶的表达。结果模型组＋他克莫司0．5、1．0组大鼠尿白蛋白排泄率水平明显低于模型组。免疫组化显示模型组大鼠肾组织巨噬细胞表面标志阳性、巨噬细胞表面标志阳性增殖细胞核抗原阳性及巨噬细胞表面标志阳性诱生性一氧化氮合酶细胞数阳性明显高于对照组,模型组＋他克莫司0．5、1．0组巨噬细胞表面标志阳性细胞数与模型组比较无明显差异,巨噬细胞表面标志阳性增殖细胞核抗原阳性及巨噬细胞表面标志阳性诱生性一氧化氮合酶细胞数明显低于模型组。结论他克莫司肾脏保护作用的机制可能部分与抑制肾组织中巨噬细胞增殖及活化有关。     

氯沙坦对糖尿病大鼠肾组织TLR4表达的影响

目的观察氯沙坦对糖尿病大鼠肾组织TOLL样受体4（TLR4）表达的影响。方法采用链脲佐菌素（STZ,65mg·kg^-1）腹腔注射建立糖尿病大鼠模型,将其分为对照组、模型组、治疗组。治疗组在造模成功后1周给予氯沙坦20mg·kg^-1灌胃。12周后测3组24h尿蛋白、血肌酐、肾重／体重、血CRP及TNF-α水平;观察肾脏病理形态学变化;应用免疫组化法检测肾组织TLR4、核因子-κB（NF-κB）的蛋白表达。结果模型组24h尿蛋白、血肌酐、尿素氮、肾重／体重明显升高,肾小球肥大、细胞增生,PAS阳性物质沉积增多。血CRP、TNF-α含量及肾组织TLR4、NF-κB的蛋白表达上调。经氯沙坦治疗后,血CRP、TNF-α含量下降,TLR4、NF-κB的表达下调。结论氯沙坦对糖尿病肾病具有保护作用,其作用机制可能是通过下调NF-κB、TLR4的表达,降低血浆CRP、TNF-α含量来实现的。     

白芍总苷对糖尿病大鼠肾组织白介素1与肿瘤坏死因子α表达的影响

炎性反应在糖尿病肾病（DN）的发生和进展中起着十分重要的作用^[1-2]。白芍总苷（TGP）是从我国传统中药白芍根中提取的有效成分，其药理作用主要有抗炎、抗氧化与免疫调节活性。我们既往研究表明TGP对糖尿病大鼠肾脏有明显保护作用131。本研究观察了TGP对糖尿病模型肾内白细胞介素1（IL-1）与肿瘤坏死因子α（TNF-α）表达的影响，旨在进一步探讨TGP对糖尿病肾脏的保护作用机制。     

益肾胶囊对糖尿病肾病大鼠模型肾组织TLR4表达的影响

目的：观察益肾胶囊对糖尿病肾病（DN）大鼠模型肾组织Toll样受体4（toll-like receptor4,TLR4）、白细胞介素-6（IL-6）及白细胞介素-8（IL-8）表达水平的影响。方法：36只Wistar雄性大鼠随机分成正常对照组、DN模型组、益肾胶囊治疗组,每组12只,利用单侧肾切除加腹腔注射链脲佐菌素建立DN大鼠模型,连续给药12周。记录大鼠体重、观察24h尿蛋白定量、血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）变化;取肾组织行病理组织学观察;用免疫荧光方法检测肾组织中TLR4、IL-6及IL-8的表达水平的变化。结果：12周末,DN模型组大鼠的24h尿蛋白定量、Scr、BUN均高于正常对照组（P〈0.05）,肾组织中TLR4、IL-6及IL-8表达水平明显高于正常对照组（P〈0.05）;益肾胶囊治疗组大鼠24h尿蛋白定量、Scr、BUN均低于模型组（P〈0.05）,肾组织TLR4、IL-6及IL-8表达水平明显低于DN模型组（P〈0.05）。结论：益肾胶囊可能通过调节肾组织TLR4、IL-6及IL-8的表达,减少DN的炎症反应,从而延缓了DN的进展。     

补脾益气升阳方对糖尿病大鼠肾组织CD68标记巨噬细胞表达的影响

目的：本研究旨在通过动物实验,从糖尿病肾病（DN）存在炎症反应的角度,观察补脾益气升阳方对糖尿病大鼠肾组织CD68标记巨噬细胞表达的影响,探讨其减轻DN的肾脏损伤,降低蛋白尿的作用机制。方法：链脲佐菌素（STZ）大鼠6组,分别为空白对照组、模型对照组、补脾益气升阳方高剂量组、低剂量组、霉酚酸酯组、雷公藤多苷组,观察8周,检测大鼠体重、肾重、尿量、血糖、血肌酐、尿微量白蛋白,ELISA法检测尿C-反应蛋白（CRP）含量,免疫组化法检测大鼠肾脏CD6R标记巨噬细胞的表达。结果：补脾益气升阳方治疗后,与模型组比较,各治疗组大鼠体重、尿量、血糖、血清肌酐无明显变化,肾重减轻,肾重指数下降,6、8周高剂量组尿微量白蛋白明显降低（P〈0．01）;8周末尿CRP降低（P〈0．05）;高剂量组肾组织CD6s标记巨噬细胞的表达与模型组比较有明显降低（P〈0．05）。结论：健脾益气升阳方能够一定程度改善降低STZ大鼠尿蛋白与尿CRP的含量;下调CD6S标记巨噬细胞在STZ大鼠肾组织的表达,此可能是其降低DN尿蛋白的作用机制之一。     

神经生长因子在2型糖尿病大鼠肾组织中的表达及意义

目的建立2型糖尿病大鼠模型,观察神经生长因子（NGF）在该大鼠肾组织中的表达及单核／巨噬细胞（CD68）的浸润情况。方法应用高糖高脂饮食加小剂量链脲佐菌素（STZ）制备2型糖尿病大鼠模型。采用免疫组化技术检测各组肾组织中NGF及CD68的表达水平。结果①高糖高脂可成功诱导胰岛素抵抗,小量STZ可使血糖升高,达到糖尿病标准。2型糖尿病大鼠模型制备成功后,继续喂养6周,血肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）、内生肌酐清除率（Ccr）、尿白蛋白排泄率（UAE）、肾重／体重增加等特征,肾组织出现明显基底膜增厚、系膜区扩张等病理学改变。②糖尿病组大鼠肾组织中NGF、CD68表达较正常组明显增加。且NGF、CD68二者数量呈正相关。结论①糖尿病模型建立后6周,已出现糖尿病肾病早期改变。②NGF可能通过介导炎症反应参与糖尿病肾脏损害过程,且此炎症反应至少部分与单核／巨噬细胞的增殖活化及浸润有关。     

白芍总苷对糖尿病大鼠肾小管-间质细胞转分化的影响

目的探讨白芍总苷（TGP）对糖尿病大鼠肾小管-间质细胞转分化的影响。方法建立链脲佐菌素（STZ）诱导的大鼠糖尿病模型,将大鼠随机分对照组、模型组、TGP给药组（50、100、200mg·kg-1·d-1灌胃）,8w后观察肾小管-间质损伤指数（TII）的变化,应用免疫组化方法检测肾组织E-钙黏蛋白（E-cadherin,E-cad）、α平滑肌肌动蛋白（a-smooth muscleactin,α-SMA）以及波形蛋白（Vim—entin,Vh）的表达。结果TGP给药呈剂量依赖性降低糖尿病大鼠24h尿白蛋白排泄率。模型组TⅡ明显高于对照组,TGP给药组（100mg·kg-1·d-1与200mg·kg-1·d-1）TII明显低于模型组。模型组肾小管-间质E-cad表达明显低于对照组（P〈0．05）,TGP50、100、200mg·kg-1·d-1给药组E-cad表达明显高于模型组（P〈0．01）。模型组肾小管-间质α—SMA与Vim蛋白表达明显高于对照组（P〈0．叭）,TGP50、100、200mg·kg-1·d-1给药组肾小管-间质α-SMA与Vim蛋白表达明显低于模型组（P〈0．01）。结论TGP可降低肾小管-间质α—SMA和vim的表达,增加E—cad的表达,抑制肾小管-间质细胞转分化。     

巨噬细胞与糖尿病肾病

近年认为糖尿病是一种炎症性疾病。巨噬细胞是一种重要的炎症细胞,与糖尿病肾病的发生和进展有密切关系。调控巨噬细胞的浸润与活化可能是糖尿病肾病的防治新途径。     

辛夷挥发油对糖尿病大鼠肾组织中P-selectin mRNA表达的影响

目的：观察辛夷挥发油对糖尿病大鼠肾组织中P-selectin mRNA表达的影响,探讨其对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及机制。方法：SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病对照组及辛夷挥发油大、中、小剂量治疗组。造模前、后及成模后第4、8、12周检测各组大鼠的体重、血糖、24h尿蛋白定量;第12周处死大鼠检测肾功能;光镜及电镜观察肾组织病理变化;Realtime PCR检测肾组织中P-selectin mRNA表达。结果：与正常对照组相比,糖尿病对照组血糖、肾重/体重、24h尿蛋白定量、血尿素氮、肾组织中P-selectin mRNA表达显著升高（P〈0.01）;血肌酐显著降低（P〈0.01）;病理改变较明显。辛夷挥发油各治疗组24h尿蛋白定量、肾组织中P-selectin mRNA表达较糖尿病对照组显著降低（P〈0.01）,病理改变亦较糖尿病对照组轻。结论：辛夷挥发油可能通过抑制糖尿病大鼠肾组织中P-selectin mRNA表达而对肾脏具有保护作用。     

厄贝沙坦对2型糖尿病大鼠肾组织中核因子-κB的调节

目的 建立2型糖尿病大鼠模型。观察血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)受体拮抗剂厄贝沙坦对该模型大鼠肾组织中核因子-κB(NF-κB)活化的影响。方法 应用高糖高脂饮食加小剂量链脲佐菌素(STZ)制备2型糖尿病大鼠模型。采用免疫组织化学技术检测各组肾小球中NFκB及单核/巨噬细胞(ED-1)的表达水平。结果 (1)高糖高脂饮食加低剂量STZ使大鼠血糖升高(22.48±6.54 vs 4.71±0.34,P<0.01),并出现胰岛素抵抗。继续喂养6周后,模型成功动物具有血胰岛素不低,内生肌酐清除率、尿微量白蛋白、肾重/体重增加等特征。(2)糖尿病组大鼠肾组织中NF-κB、ED-1表达较对照组明显增加。厄贝沙坦治疗6周后,NF-κB活性降低(5.10±1.80 vs 8.45±1.09,P<0.01),单核/巨噬细胞浸润减轻,肾功能指标及组织病理学损害得以改善。结论 (1)通过饮食加小剂量STZ的方法,成功复制了2型糖尿病大鼠模型。该模型在6周后已出现糖尿病肾病的早期改变。(2)上述大鼠肾组织中NF-κB活性增加,厄贝沙坦的肾脏保护作用至少部分与减少肾组织中激活的NF-κB表达,减轻肾组织中单核/巨噬细胞浸润有关。     

白芍总苷对维持性血液透析患者自身炎症因子及血清NGAL、TLR4、MYD88表达的影响

目的探究白芍总苷(total glucosides of paeony,TGP)对维持性血液透析患者(maintenance hemodialysis,MHD)炎症因子和血清中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(NGAL)、Toll受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MYD88)表达的影响。方法回顾性分析2017年6月至2019年6月期间成都市青白江区人民医院收治的75例MHD患者,按照治疗方法不同分为白芍总苷组(n=38)和常规治疗组(n=37),比较治疗后两组肾功能指标、炎性因子水平(IL-6,CRP,TNF-α,NGAL)、氧化应激水平(GSH-PX,SOD,MDA)、TLR4、MYD88表达和不良事件发生情况。结果治疗后白芍总苷组血肌肝、周均脱水量低于常规治疗组,日均尿量、GSH-PX、SOD高于常规治疗组,NGAL、IL-6、CRP、TNF-α、MDA水平均低于常规治疗组,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗后白芍总苷组TLR4、MYD88 mRNA均低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);两组不良事件发生概率无明显差异(P>0.05)。结论白芍总苷能降低MHD患者NGAL水平,改善微炎症状态,这可能是通过影响氧化应激反应或TLR4/MYD88通路蛋白表达而发挥作用的。     

白芍总苷对糖尿病大鼠肾脏巨噬细胞增殖及Stat3激活的调节作用

巨噬细胞浸润是糖尿病肾病(DN)的特征性病理表现[1].巨噬细胞致损伤作用与其激活状态有关.研究表明JAK-Stat信号通路是多种细胞因子调节巨噬细胞表型及活性的通路之一[2].白芍总苷(total glucosides of paeony,TGP)是中药白芍根提取的有效成分,药理上主要有抗炎与调节免疫作用.我们先前的研究表明TGP对肾脏保护作用机制部分与其抑制肾组织JAK2-Stat3信号通路有关[3].本研究进一步探讨TGP对糖尿病(DM)肾组织巨噬细胞增殖及Stat3激活的调节作用.     

糖尿病大鼠血清瘦素与肾脏瘦素受体表达观察

目的研究2型糖尿病大鼠血清瘦素（leptin）及肾脏瘦素受体（Ob-R）表达变化。方法高糖高脂饮食结合小剂量链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠动物模型。在8周末测量大鼠体质量、血压、空腹血糖、三酰甘油、胆固醇和24h尿蛋白排泄量等指标,用酶联免疫吸附法测定大鼠的血清瘦素、胰岛素,计算胰岛素抵抗指数。免疫组化检测Ob-R在肾脏的表达情况。结果糖尿病大鼠体质量、血糖、总胆固醇、三酰甘油、血清胰岛素较对照组均明显升高,24h尿蛋白排泄量轻度升高。与对照组比较,大鼠血清瘦素明显升高,同时糖尿病组肾脏Ob—R的表达水平下降,二者呈负相关。结论2型糖尿病大鼠高血清瘦素可能对肾脏0b-R表达有抑制作用。     

霉酚酸酯对糖尿病大鼠肾组织T细胞浸润的影响

目的 探讨霉酚酸酯(MMF)对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠T淋巴细胞在肾脏组织浸润的影响.方法 30只雄性Wistar大鼠(鼠龄2～3个月),随机分为正常对照组、糖尿病模型组和MMF治疗组[15mg·(kg·d)-1].观察16周后,检测大鼠血糖(BG)、血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、肾肥大指数(肾重KW/体重BW)和24h尿蛋白定量(24Upro).用流式细胞仪方法检测肾组织中CD3+、CD4+T淋巴细胞以及细胞因子TNF-α、IFN-y的含量,免疫组化法测肾组织中CD4+、CD8+T细胞的表达.结果 与对照组相比,糖尿病(DM)组大鼠BG、BUN、Scr、Kw/Bw、24Upro等指标均显著升高,差异有统计学意义(P＜0.01).通过流式细胞仪检测,糖尿病大鼠肾脏内CD3+、CD4+T细胞以及由CD4+T细胞产生IFN-γ、TNF-α均显著上调(P＜0.01),通过免疫组化肾脏内CD4+、CD8+T细胞均显著升高(P＜0.01).除血糖、肾肥大指数外,治疗组上述指标均比糖尿病组低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 霉酚酸酯通过抑制T淋巴细胞在糖尿病大鼠肾脏组织中的浸润从而下调炎症因子的表达发挥肾脏保护作用.     

2型糖尿病肾脏病与2型糖尿病合并非糖尿病肾损害的临床及病理比较

目的分析比较2型糖尿病。肾脏病与2型糖尿病合并非糖尿病肾损害的临床及病理特征异同点。方法回顾性分析2008年1月至2011年4月在我科住院的患者,临床诊断2型糖尿病、并有蛋白尿,行经皮肾活检穿刺术病理检查共105例患者的临床病理资料。结果（1）非糖尿病肾损害组5I例,占48．57％,一般情况如糖尿病病程、高血压病程、代谢紊乱及肾脏损害均较2型糖尿病肾脏病轻。病理类型以原发性肾小球疾病为主,病理改变包括。肾小球损伤及小管-间质改变较2型糖尿病肾脏病组轻微。（2）2型糖尿病肾脏病患者54例,占51．43％。病理损伤的严重程度与体质量指数、血肌酐、胱抑素C、视黄醇结合蛋白、尿素氮呈正相关,而与血红蛋白、白蛋白和肌酐清除率呈负相关。结论在f临床上,对于病程长、代谢紊乱及临床肾损害指标严重的患者,考虑2型糖尿病肾脏病可能性大。