miR-495-3p、miR-181d-5p在宫颈癌患者中的表达及临床意义

目的 探讨miR-495-3p、miR-181d-5p在宫颈癌及宫颈癌前病变组织中的表达差异及对宫颈癌诊断的价值。方法 收集2020年6月—2022年12月河北中石油中心医院收治的30例宫颈低级别鳞状上皮内病变(CINⅠ级组)、30例宫颈高级别鳞状上皮内瘤变(CINⅡ～Ⅲ级组)、50例宫颈癌(宫颈癌组)患者的临床资料及宫颈组织标本。采用免疫组化法检测各组宫颈组织中miR-495-3p、miR-181d-5p阳性表达情况,比较各组miR-495-3p、miR-181d-5p阳性表达率;采用RT-qPCR法检测宫颈癌组患者癌组织中miR-495-3p、miR-181d-5p表达量,分析miR-495-3p和miR-181d-5p表达量与宫颈癌患者临床病理特征的关系、miR-495-3p和miR-181d-5p对宫颈癌的诊断价值及二者在宫颈癌组织中表达的相关性。结果 宫颈癌组miR-495-3p、miR-181d-5p阳性表达率均明显低于CINⅠ级组及CINⅡ～Ⅲ级组(P均<0.05)。宫颈癌组织中miR-495-3p、miR-181d-5p表达量与FIGO分期、肿瘤浸润深度、淋巴结转...     

上调miR-590-3p对胰腺癌细胞侵袭转移的作用及影响机制

目的 观察miR-590-3p基因表达对人胰腺癌Capan-2细胞侵袭转移能力的影响。方法 人胰腺癌Capan-2细胞分为两组：阴性对照组（NC组）及转染miR-590-3p mimics组（miR-590-3p mimics组）。采用qRT-PCR法检测正常胰腺导管上皮细胞hTERT-HPNE以及胰腺癌Capan-2细胞中miR-590-3p的表达,通过流式细胞术检测miR-590-3p对Capan-2细胞凋亡的影响,通过MTT实验检测miR-590-3p对Capan-2细胞增殖的影响,通过划痕实验检测细胞迁移能力的变化,通过Transwell实验检测细胞侵袭能力的变化,采用Western blot法检测AKT/mTOR通路相关蛋白表达变化。结果 胰腺癌Capan-2细胞较正常胰腺导管上皮细胞中miR-590-3p表达水平显著降低,差异有统计学意义（P<0.05）;与NC组相比,miR-590-3p mimics组miR-590-3p mRNA表达水平显著升高,差异有统计学意义（P<0.05）;流式细胞术实验结果显示,与NC组相比,miR-590-3p mimics组细胞...     

五味子乙素调控miR-22-3p/RUNX3分子轴对重症急性胰腺炎腺泡细胞损伤影响的研究

目的：探讨五味子乙素（Sch B） 调控miR-22-3p/runt 相关转录因子3（RUNX3） 分子轴对重症急性胰腺炎（SAP）腺泡细胞损伤的影响。方法：将大鼠胰腺腺泡细胞AR42J 分为Con 组、SAP 组、SAP+Sch-L 组、SAP+Sch-M 组、SAP+Sch-H组、SAP+anti-miR-NC 组、SAP+anti-miR-22-3p 组、SAP+Sch+miR-NC 组、SAP+Sch+miR-22-3p 组。除Con 组外,其余各组采用10 nmol/L 雨蛙素联合10 mg/L 脂多糖刺激AR42J 细胞24 h 构建SAP 细胞模型。SAP+Sch-L 组、SAP+Sch-M 组、SAP+Sch-H 组采用浓度为10、20、40 μmol/L 的Sch B 处理细胞;SAP+anti-miR-NC 组、SAP+anti-miR-22-3p 组为分别转染antimiR-NC、anti-miR-22-3p;SAP+Sch+miR-NC 组、SAP+Sch+miR-22-3p 组为分别转染miR-NC、miR-22-3p mimics 并用40 μmol/L的Sch B 干预。酶联免疫吸附法测定细胞培养液上清中白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α） 表达水平;流式细胞术检测细胞凋亡率;实时荧光定量PCR 检测miR-22-3p 和RUNX3 mRNA 表达水平;BCA 法检测RUNX3、B 细胞淋巴瘤-2 基因（Bcl-2）、Bcl-2 相关X 蛋白（Bax）、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（cleaved-caspase3） 表达水平;双荧光素酶报告基因实验检测miR-22-3p 与RUNX3 的靶向结合关系。结果：与Con 组比较,SAP 组AR42J 细胞IL-6、TNF-α、miR-22-3p、Bax、cleaved-caspase3 的表达及细胞凋亡率升高（P＜0.05）,RUNX3、Bcl-2 的表达降低（P＜0.05）。与SAP 组比较,SAP+Sch-L组、SAP+Sch-M 组、SAP+Sch-H 组IL-L、TNF-α、miR-22-3P、Bcl-2 表达降低（P＜0.05）,Bax、cleaved-caspase3、RUNX3 表达及细胞凋亡率升高（P＜0.05）,且呈剂量依赖性（P＜0.05）。与SAP+anti-miR-NC 组比较,SAP+anti-miR-22-3p 组细胞IL-6、TNF-α、Bcl-2 的表达降低（P＜0.05）,细胞凋亡率及Bax、cleaved-caspase3、RUNX3 的表达升高（P＜0.05）。与SAP+Sch+miR-NC 组比较,SAP+Sch+miR-22-3p 组细胞IL-6、TNF-α、Bcl-2 的表达升高（P＜0.05）,细胞凋亡率及Bax、cleavedcaspase3、RUNX3 的表达降低（P＜0.05）。结论：Sch B 可通过下调miR-22-3p/RUNX3 分子轴减轻SAP 腺泡细胞损伤。     

黄芪-丹参药对通过下调miR-466b-5p改善高血压肾损害

目的：探讨黄芪-丹参药对通过调节微小核糖核酸-466b-5P（miR-466b-5p）改善高血压肾损害的机制。方法：基于微RNA（miRNA）测序寻找自发性高血压大鼠与Wistar-京都鼠（WKY）的差异基因,构建腺相关病毒转染小鼠,24只C57BL/6小鼠,随机选取12只尾静脉注射小鼠腺相关病毒miR-466b-5P（rAAV-miR-466b-5P）构建miR-466b-5p过表达组,余12只作为空白对照组注射腺相关病毒-9（AAV-9）空载体,转染6周后再各随机分为2组,每组6只,A组（黄芪-丹参+miR-466b-5P过表达组）和C组（黄芪-丹参+空白对照组）以黄芪配方颗粒：2.036 g/kg+丹参配方颗粒：0.255 g/kg灌胃;B组（miR-466b-5P过表达组）和D组（空白对照组）以相同体积生理盐水灌胃;灌胃28 d后观察各组小鼠尿β2-微球蛋白（β2-MG）、N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（NAG）、微量白蛋白（mALB）,血清胱抑素C（Cys-C）、血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）、C反应蛋白（CRP）水平和肾脏病理,进行实时荧光定量(RT-qPCR)与蛋白质印迹法(Western Blotting)寻找其靶基因。结果：1）基于前期miRNA测序选定了miR-466b-5p;2）与D组比较,B组小鼠尿β2-MG、NAG、mALB、血清Cys-C、AngⅡ、CRP均显著升高（P<0.01）;与B组比较,A组小鼠血清Cys-C、CRP明显升高（P<0.05）,尿β2-MG、NAG、mALB、血清AngⅡ无明显改变（P>0.05）;3）与D组比较,B组小鼠出现明显肾小球硬化、小管纤维化,A组较B组有明显改善;4）与D组比较,B组小鼠透明质酸酶2（HAS2）明显下调,而经黄芪-丹参干预后有所回调。结论：miR-466b-5p的过表达会导致高血压肾损害的发生,黄芪-丹参药对通过靶向HAS2下调miR-466b-5p改善高血压肾损害。     

解毒复正汤通过干扰miR-223-3p并靶向调控TGFBR3影响肺癌侵袭转移的实验研究

目的 探讨解毒复正汤（JieduFuzhengdecoction,JDFZ）通过影响微小核糖核酸-223-3p(Mircro ribonucleic acid-223-3p,miR-223-3p)靶向调控转化生长因子β受体3(Transforming growth factor β Receptor3,TGFBR3)的表达及其对肺癌细胞迁移的影响。方法 利用RT-qPCR技术检测肺腺癌患者癌组织及癌旁组织、肺腺癌患者及健康人外周血清中miR-223-3p表达水平的差异;并检测不同种类的NSCLC细胞系肺癌细胞（95D、LTEP-α-2、A549及NCI-H460）以及人肺上皮细胞BEAS-2B中miR-223-3p的本底表达量,从组织、血浆及细胞3个维度验证miR-223-3p的差异性。利用生物信息学网站重叠分析,初步预测到miR-223-3p与TGFBR33’UTR具有潜在的结合位点序列。接着运用双荧光素酶报告基因实验验证miR-223-3p与TGFBR3的靶向关系。体外培养肺癌A549细胞,采用脂质体法分别将miR-223-3p-过表达序列（miR-223-3p-mimics）及携...     

雪松醇调节miR-503-5p/TCF3轴对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

[目的]探讨雪松醇调节miR-503-5p/T细胞因子3(TCF3)轴对乳腺癌（BC）细胞增殖、迁移和侵袭的影响。[方法]实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）、蛋白免疫印迹法（Western blot）分别检测BC组织和细胞中miR-503-5p及TCF3蛋白表达水平;以不同浓度的雪松醇（0、14、28、56、112、225μmol/L）干预MCF7细胞,噻唑蓝比色法（MTT）法检测细胞增殖情况;将MCF7细胞分为：control组（正常培养）、雪松醇组（112μmol/L）、inhibitor-NC（转染inhibitor-NC）、miR-503-5p inhibitor组（转染miR-503-5p inhibitor）。qRT-PCR检测细胞中miR-503-5p的表达水平;MTT法与胸腺嘧啶核苷类似物（Edu）染色和Transwell小室分别检测细胞增殖、迁移和侵袭;蛋白免疫印迹（Western blot）方法检测增殖细胞核抗原（PCNA）、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、TCF3蛋白的表达;双荧光素酶报告基因实验验证miR-503-5p和TCF3的靶向关系;小鼠体内肿...     

款冬花多糖调控miR-889-3p/TLR4对IL-6诱导的乳腺癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响

[目的] 探讨款冬花多糖对白细胞介素-6（IL-6）诱导的乳腺癌细胞恶性行为作用机制。[方法] IL-6诱导人乳腺癌细胞MCF-7后,不同浓度的款冬花多糖处理。转染miR-NC、miR-889-3p mimics的MCF-7细胞经IL-6处理;转染NC-inhibitor、miR-889-3p-inhibitors的MCF-7细胞经款冬花多糖与IL-6处理;噻唑蓝（MTT）、平板克隆形成以及Transwell^TM实验分析细胞增殖、迁移及侵袭;实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测miR-889-3p、Toll 样受体 4（TLR4）的表达量;蛋白免疫印迹（Western blot）法检测基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9、TLR4蛋白表达量;双荧光素酶报告实验验证miR-889-3p与TLR4的靶向关系。[结果] 款冬花多糖可降低IL-6诱导的MCF-7细胞增殖（P＜0.05）、迁移及侵袭能力（P＜0.05）,而提高miR-889-3p的表达（P＜0.05）,呈剂量依赖性;TLR4是miR-889-3p的靶基因,miR-889-3p可靶向调控TLR4的表达;转染miR-889-3p mimics可降低IL-6诱导的MCF-7细胞增殖、迁移及侵袭（P＜0.05）;转染miR-889-3p-inhibitors可恢复款冬花多糖对IL-6诱导的MCF-7细胞增殖、迁移及侵袭。[结论] 款冬花多糖可通过调节miR-889-3p/TLR4表达而抑制IL-6诱导的乳腺癌细胞恶性行为。     

不稳定型心绞痛气虚血瘀证患者外泌体MicroRNA差异表达

目的 分析冠心病不稳定型心绞痛（UA）气虚血瘀证患者血清外泌体中MicroRNA(miRNA)的差异表达。方法 收集115例UA患者（气虚血瘀证患者59例、非气虚血瘀证患者56例）和36名健康志愿者的外周血液，提取上清中的外泌体。采用高通量测序方法，检测9例气虚血瘀证、9例非气虚血瘀证UA患者以及6名健康志愿者血清外泌体中miRNA，分析他们之间差异表达的miRNA检测结果，确定目标miRNA。再采用qRT-PCR检测方法对未作高通量测试的97例UA患者（50例气虚血瘀证、47例非气虚血瘀证）及30名健康志愿者进行验证。结果 （1）经过高通量测序后分析发现，与健康志愿者比较，miR-125b(P=0.032)、miR-10b(P=0.038)在UA患者血清外泌体中呈高表达。与UA非气虚血瘀证患者比较，miR-125b(P=0.028)、miR-10b(P=0.043)在气虚血瘀证患者血清外泌体中呈高表达。确定miR-125b、miR-10b为本研究的血清外泌体中目标miRNA。（2）对目标miRNA进行qRT-PCR检测验证发现，UA患者血清外泌体中miR-125b、miR-10b表达...     

血清miR-34 c和miR-127-3p表达在结肠癌诊治中的临床意义

目的观察血清miR-34 c和miR-127-3p表达在结肠癌诊治中的临床意义。方法选择手术治疗的结肠癌患者183例和结肠腺瘤的患者60例,分别为结肠癌组和结肠良性肿瘤组。选择同期行健康体检者30例为健康对照组。用Real time PCR方法检测各组血清miR-34 c和miR-127-3p表达。观察结肠癌组、结肠良性肿瘤组和健康对照组的miR-34 c和miR-127-3p表达水平变化,并观察结肠癌患者血清miR-34 c和miR-127-3p表达水平与临床病理指标的关系,以及手术后其水平的变化及其相关性。结果结肠癌患者血清miR-34 c表达水平明显低于良性肿瘤和健康对照组(P均0.05),而良性肿瘤组明显低于健康对照组(P0.05);手术后结肠癌患者血清miR-34c表达水平较手术前明显升高(P0.05)。结肠癌患者血清表达miR-127-3p水平明显高于良性肿瘤组和健康对照组(P均0.05),而良性肿瘤组明显高于健康对照组(P0.05);手术后结肠癌患者血清表达miR-127-3p较术前明显降低(P0.05)。结肠癌患者血清miR-34 c和miR-127-3p表达量与年龄、性别、浸润深度、脉管浸润和神经浸润无明显相关性(P均0.05),与肿瘤直径、TNM分期、淋巴转移和CEA表达具有明显的相关性(P均0.05)。结肠癌患者的血清miR-34 c表达量与miR-127-3p表达量呈明显的负相关(r=-0.684,P0.05)。结论miR-34 c和miR-127-3p基因参与了结肠癌的发生发展,miR-34 c为抑癌基因,而miR-127-3p为促癌基因,在结肠癌的侵袭和转移过程中具有重要作用。     

熊果酸调控外泌体介导的miR-155-5p保护脓毒症大鼠心肌组织的作用研究＊

目的 研究熊果酸通过外泌体介导微小核糖核酸-155-5p（micro ribonucleic acid-155-5p，miR-155-5p）对脓毒症大鼠心肌的保护作用。方法 从60只SD雄鼠中随机挑出50只为建模大鼠，通过腹腔注射内毒素（lipopolysaccharide，LPS）法建立脓毒症大鼠模型。余下10只为正常对照组。将建模成功大鼠随机分为5组，熊果酸高、中、低剂量组、GW4869组、模型组。熊果酸高、中、低剂量组腹腔注射5 mg/kg LPS+50%二甲基亚砜（dimethylsurfoxide，DMSO）后立即尾静脉注射熊果酸120、80、40 mg/kg+50% DMSO混合液；GW4869组腹腔注射5 mg/kg LPS+50% DMSO后立即尾静脉注射鞘磷脂酶抑制剂GW4869 2.5 μg/g+50% DMSO混合液；模型组大鼠腹腔注射5 mg/kg LPS+50% DMSO后，尾静脉注射等体积生理盐水；正常对照组仅腹腔注射等体积生理盐水后，尾静脉注射等体积生理盐水。另将各组外泌体与原代培养乳鼠心肌细胞共培养，设置未加外泌体仅加入等体积PBS的心肌细胞为PBS对照组；通过脂质体转染技术将miR-155-5p minic转染至大鼠心肌细胞，将转染miR-155-5p心肌细胞与动物实验中各组外泌体共培养24 h，另设置未转染miR-155-5p minic且不加外泌体仅加入等体积PBS的心肌细胞为PBS对照组，仅转染miR-155-5p minic且不加外泌体的心肌细胞为miRNA-155-5p minic转染组和GW4869+熊果酸+miR-155-5p minic组（其中熊果酸分别设置低、中、高剂量）。结果 模型组和GW4869组大鼠心肌细胞出现明显空泡样变、核肿胀，组织水肿明显，可见明显炎性浸润，熊果酸3剂量组大鼠心肌组织病变均出现好转；各组均从外周血中分离出外泌体；模型组和熊果酸3剂量组外泌体中miR155-5p表达水平均高于正常对照组（P<0.05），GW4869组外泌体中miR155-5p表达水平低于正常对照组（P<0.05）；经培养鉴定证实所取细胞为乳鼠心肌细胞；模型组、GW4869组、熊果酸3剂量组白介素1β（interleukin-1β，IL-1β）、白介素6（interleukin-6，IL-6）水平均高于磷酸盐缓冲液（phosphate buffered saline，PBS）对照组和正常对照组（P<0.05），熊果酸3剂量组上述指标水平均低于模型组和GW4869组（P<0.05）；miR-155-5p minic转染乳鼠心肌细胞后miR-155-5p minic转染组细胞中miR-155-5p表达水平升高（P<0.05）。将各组外泌体与miR-155-5p minic转染后细胞共孵育，GW4869组细胞培养基中IL-1β、IL-6浓度均高于其余各组（P<0.05），模型组+miR-155-5p minic均高于miR-155-5p minic转染组（P<0.05），GW4869+熊果酸高剂量+miR-155-5p minic组与miR-155-5p minic转染组差异均无统计学意义（P>0.05）。结论 熊果酸可改善脓毒症大鼠心肌病变，且可通过抑制外泌体中miR-155-5p表达水平，抑制心肌细胞炎症反应。     

外周血miR-150-5p、SOCS1 mRNA对类风湿关节炎“病”“证”诊断意义的初步探讨＊

目的 探讨类风湿关节炎患者外周血miR-150-5p、细胞因子信号抑制因子1（suppressor of cytokine signaling 1，SOCS1）mRNA的表达及对类风湿关节炎（Rheumatoid Arthritis，RA）疾病诊断、中医证型判断的意义。方法 纳入符合诊断标准的RA患者57例及健康对照组19例，根据《22个专业95个病种中医诊疗方案》有关RA的中医证候诊断标准，判断RA的中医证型。qPCR检测RA患者及健康对照组miR-150-5p、SOCS1mRNA的相对表达水平，同时检测血常规、肝功能、肾功能等常规指标。双荧光素酶分析方法判断两者是否存在靶向关系。统计分析miR-150-5p、SOCS1 mRNA对RA疾病的诊断意义及其与中医证型的相关性。结果 RA患者外周血miR-150-5p的相对表达水平下调，低于正常人群（t = -19.019，P < 0.05）；其表达水平随疾病活动度升高，有下降趋势；患者外周血SOCS1 mRNA的相对表达水平上调，低于正常人群（t = 5.333，P < 0.05）；其表达水平随疾病活动度升高，有上升趋势。MiR-150-5p与SOCS1 mRNA有靶向结合关系（P < 0.05）。通过AUC曲线比较，miR-150-5p的相对表达水平区分RA的敏感性及特异性分别为98.1%、92.1%（AUC = 0.972，P < 0.05）；SOCS1 mRNA的相对表达水平无法区分RA（AUC = 0.472，P > 0.05）。RA患者中miR-150-5p的相对表达水平低于3.06，RA患者风湿痹阻证、寒湿痹阻证的相对风险分别为8.33、250.00（P < 0.05）。结论 miR-150-5p、SOCS1 mRNA在RA患者中有差异性表达，且有靶向结合关系。miR-150-5p可能是RA的疾病诊断及中医风湿痹阻证、寒湿痹阻证证型诊断的潜在生物标志物。     

艾灸通过调节腹泻型肠易激综合征大鼠结肠组织miR-345-3p/miR-216a-5p表达抑制炎性反应

目的:观察艾灸对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)大鼠结肠组织miR-345-3p、miR-216a-5p、核因子-κB p65(NF-κB p65)表达的影响,探讨艾灸治疗IBS-D的抗炎机制。方法:SD幼鼠随机分为正常组、模型组、艾灸组、吡咯烷二硫代甲酸铵盐(PDTC)组,每组12只。采用新生仔鼠母子分离联合醋酸灌肠刺激联合慢性束缚法复制IBS-D大鼠模型。艾灸组艾灸“天枢”“上巨虚”,每次20 min,每天1次,治疗7 d。PDTC组腹腔注射PDTC(50 mg·kg^-1·d^-1),共治疗7 d。观察各组幼鼠体质量、稀便率和腹部回缩反射(AWR)最小容量阈值;HE染色法观察各组幼鼠结肠黏膜层病理形态;ELISA法检测各组幼鼠血清中白细胞介素(IL)-1β、IL-4、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α含量;荧光定量PCR法检测各组幼鼠结肠组织中miR-345-3p、miR-216a-5p、NF-κB p65 mRNA表达水平;免疫荧光法检测各组幼鼠结肠组织中IL-1β、IL-6、TNF-α、NF-κB p65表达水平。结果:与正常组比较,...     

黑树莓花青素靶向调控miR-338-5p/SIRT1相关信号通路对结直肠癌的化学预防作用

目的研究miR-338-5p/SIRT1相关信号通路在黑树莓花青素化学预防结直肠癌中的作用。方法小鼠分为健康对照组,氧化偶氮甲烷(AOM)/葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的炎症相关性结直肠癌小鼠模型组,AOM/DSS诱导联合黑树莓花青素处理组。利用miRNA基因芯片筛选差异表达miRNAs,选定miR-338-5p,采用RT-q PCR确认miR-338-5p在小鼠结肠组织及在人结直肠癌细胞株Caco-2、Lo Vo、HCT-116、HT29、SW480中的mRNA表达,生物信息学软件预测miR-338-5p和SIRT1靶向调节关系。Western blotting检测小鼠结肠组织中SIRT1蛋白及其下游mTOR等信号通路相关蛋白表达。结果miRNA基因芯片分析发现,与常规饮食的模型小鼠相比,喂食添加黑树莓花青素的模型小鼠结直肠肿瘤组织中miR-338-5p表达量显著减少,进一步研究几种结肠癌细胞系,确认了miR-338-5p表达趋势;黑树莓花青素处理结直肠癌细胞,miR-338-5p的表达能够显著降低。生物信息学预测miR-338-5p和SIRT1存在靶向调节关系。机制研究发现黑树莓花青素可以促进肠上皮细胞SIRT1蛋白的表达,并对其下游m TOR等相关信号通路分子蛋白水平具有调控作用。结论黑树莓花青素可能通过靶向调控miR-338-5p/SIRT1相关信号通路而发挥对结直肠癌的化学预防作用,进而为结直肠癌提供新的化学预防策略。     

醉茄素A通过circOSBPL10/miR-128-3p通路调控乳腺癌MDA-MB-231细胞糖酵解、增殖、迁移及侵袭的机制研究

目的 探讨醉茄素A对乳腺癌MDA-MB-231细胞糖酵解、增殖、迁移、侵袭的影响及其对环状RNAOSBPL10（circOSBPL10）/微小RNA-128-3p（miR-128-3p）通路的调控作用。方法 采用不同浓度（10、20、40 μg/mL）的醉茄素A处理乳腺癌细胞MDA-MB-231（醉茄素A低剂量组、醉茄素A中剂量组、醉茄素A高剂量组）;si-NC、si-circOSBPL10分别转染入MDA-MB-231细胞（si-NC组、si-circOSBPL10组）;pcDNA、pcDNA-circOSBPL10分别转染入MDA-MB-231细胞后加入40 μg/mL的醉茄素A处理细胞（醉茄素A+pcDNA组、醉茄素A+pcDNA-circOSBPL10组）;根据试剂盒检测葡萄糖消耗与乳酸产生量,以及丙酮酸激酶、己糖激酶的水平;采用噻唑蓝（MTT）法检测细胞增殖抑制率;采用Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭能力;采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）法检测circOSBPL10与miR-128-3p的表达量;双荧光素酶报告基因实验检测circOSBPL10与miR-128-3p的靶向关系;Western blot法检测增殖标记蛋白细胞增殖核抗原-67（Ki-67）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）蛋白表达量。结果 与对照组比较,醉茄素A低剂量组、醉茄素A中剂量组、醉茄素A高剂量组葡萄糖消耗与乳酸生成量以及丙酮酸激酶、己糖激酶的水平均明显降低（P＜0.05）,迁移及侵袭细胞数减少（P＜0.05）,细胞增殖抑制率升高（P＜0.05）,Ki-67、MMP-2、MMP-9蛋白水平降低（P＜0.05）,circOSBPL10的表达水平降低（P＜0.05）,miR-128-3p的表达水平升高（P＜0.05）;双荧光素酶报告基因实验证实circOSBPL10可靶向结合miR-128-3p;与si-NC组比较,si-circOSBPL10组葡萄糖消耗与乳酸生成量以及丙酮酸激酶、己糖激酶的水平均明显降低（P＜0.05）,细胞增殖抑制率升高（P＜0.05）,迁移及侵袭细胞数减少（P＜0.05）,Ki-67、MMP-2、MMP-9蛋白水平降低（P＜0.05）;与醉茄素A+pcDNA组比较,醉茄素A+pcDNA-circOSBPL10组葡萄糖消耗与乳酸生成量以及丙酮酸激酶、己糖激酶的水平均明显升高（P＜0.05）,细胞增殖抑制率降低（P＜0.05）,迁移及侵袭细胞数增多（P＜0.05）,Ki-67、MMP-2、MMP-9蛋白水平升高（P＜0.05）。结论 醉茄素A可通过调控circOSBPL10/miR-128-3p通路而抑制乳腺癌细胞糖酵解、增殖、迁移及侵袭。     

miR-122-5p靶向调控人骨髓间充质干细胞诱导成骨分化的分子机制研究

目的：研究miR- 122-5p对人骨髓间充质干细胞hBMSCs细胞成骨分化诱导的作用分子机制。方法：运用茜素红 S、 碱性磷酸酶活性ALP染色试剂盒检测hBMSCs成骨分化的钙结节与成骨活性；使用双荧光素酶报告基因实验验证miR - 122- 5p与 BRCC3之间的靶向关系；运用 qRT-PCR分别检测Runx2、Osterix、wnt3a、β -catenin、GSK3- β 、miR- 122-5 以及BRCC3基因 的表达情况；Western 印迹检测 β-catenin蛋白的表达量。结果：过表达miR- 122-5p对人骨髓间充质干细胞hBMSCs细胞成骨分 化诱导21天后的钙结节与干细胞成骨活性均有明显促进作用，对成骨分化中wnt/β-catenin信号通路主要转录因子Runx2、Os- terix及wnt3a、β-catenin、GSK3- β 主要基因均激活作用，过表达BRCC3对干细胞成骨分化中wnt/β-catenin信号通路主要转录因 子 Runx2、Osterix 及 wnt3a、β -catenin、GSK3- β 主要基因有抑制作用；并且通过双荧光素酶报告基因与回复性实验确定miR- 122-5p与 BRCC3之间的靶向关系，差异均有统计学意义 (P<0. 05) 。结论：miR- 122-5p靶向抑制BRCC3 的表达诱导hBMSCs 细胞通过wnt/β-catenin通路进行成骨分化诱导。     

木瓜乙酸乙酯萃取部位对急性胃溃疡小鼠胃黏膜中miR-423-5p、TFF1和p53表达的影响

目的:观察木瓜乙酸乙酯萃取部位对急性胃溃疡实验小鼠胃黏膜miR-423-5p、TFF1和p53表达的影响,在此基础上探讨其可能的机制。方法:实验小鼠随机分为正常组、模型组、木瓜乙酸乙酯萃取部位(100、200mg/kg)和奥美拉唑组(20mg/kg)组,每天给药1次,连续给药5天,处理前24小时禁食不禁水,第5日给药后1小时,胃溃疡模型组和给药组分别灌胃给予80%乙醇10ml/kg和15mg/kg阿司匹林,4小时小鼠颈椎脱臼处死,取胃,用实时定量PCR检测胃黏膜中miR-423-5p、TFF1和p53基因表达,Western blot检测胃黏膜组织中TFF1和p53蛋白表达。结果:胃溃疡模型组胃黏膜组织中miR-423-5p基因和p53基因和蛋白表达水平明显升高,TFF1基因和蛋白表达水平略有升高,但与正常组比较无显著性差异;用木瓜乙酸乙酯萃取部位(100、200mg/kg)治疗后,miR-423-5p基因和p53基因和蛋白表达水平明显降低,TFF1基因和蛋白表达水平显著升高,与胃溃疡模型组比较具有显著性差异,奥美拉唑组作用效果不明显。结论:木瓜乙酸乙酯萃取部位(100、200mg/kg)对急性胃溃疡实验小鼠胃粘膜损伤有较好的保护作用,调节miR-423-5p、TFF1及p53表达水平,抑制miR-423-5p/TFF1/p53信号通路异常激活可能是其对酒精和阿司匹林致胃溃疡损伤保护作用的重要机制之一。     

益肾健脑汤联合针刺对脑梗死后轻度认知障碍患者血清miR-27-3p、miR-409-3p表达的影响

目的:探讨益肾健脑汤联合针刺对脑梗死后轻度认知障碍患者血清微小核糖核酸-27-3p(miR-27-3p)、微小核糖核酸-409-3p(miR-409-3p)表达影响.方法:将94例脑梗死后轻度认知障碍患者按照随机数字表法分为治疗组和对照组,每组47例.对照组采用针刺治疗,治疗组在对照组基础上加用益肾健脑汤治疗.比较两组...     

miR-21、miR-182、miR-382在非小细胞肺癌中的临床意义及益气除痰法的干预作用

【目的】 分析miR-21、miR-182、miR-382基因对肺癌进展的影响及益气除痰法的干预作用。【方法】 应用生存分析在线软件 Kaplan-Meier plotter 分析 miR-21、miR-182、miR-382 对肺癌预后的影响，应用功能富集分析工具 FunRich 数据库对miR-21、miR-182、miR-382进行功能富集、通路富集分析，GeneMANIA数据库分析靶基因蛋白的互作网络。选取单纯中药治疗中晚期非小细胞肺癌患者（设为“中医组”）和中药联合维持化疗的中晚期非小细胞肺癌患者（设为“结合组”），采用定量聚合酶链反应（PCR）方法分析益气除痰法对患者外周血中miR-21、miR-182、miR-382表达的影响。【结果】 miR-21、miR-382的表达量与肺腺癌的生存期呈负相关，与肺鳞癌的生存期关系不明显。miR-182的表达量与肺腺癌患者的生存期无明显相关性，与肺鳞癌的生存期呈正相关。miR-21、miR-182、miR-382靶基因的功能主要为信号传导、细胞之间的通讯，所涉及的信号通路主要包括：整合素家族信号通路、血管内皮生长因子（VEGF）/血管内皮生长因子受体（VEGFR）通路及肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）通路等。miR-21与肿瘤转移密切相关的靶基因包括： RECK、TNFRSF11B、TGFBI、PDCD4、SPRY2、FOXF2。中医组miR-21的增加水平较结合组低。【结论】 miR-21可能影响肿瘤转移及肺腺癌的生存，益气除痰法可能通过调控miR-21的表达有效治疗中晚期非小细胞肺癌。     

Hsa-miR-3074在肾阳虚证中的表达差异性研究

目的探讨miR-3074-3p的表达对肾阳虚证发生的影响。方法采集14例肾阳虚证患者和10例健康者外周静脉血,取其白细胞,使用TRIzol法提取RNA并进行质量检测。将该样本的总RNA逆转录合成cDNA,通过实时定量PCR检测,分析miR-3074-3P的相对表达量。结果miR-3074-3p在肾阳虚证组中相对于健康对照组表达上调。结论miR-3074-3p在肾阳虚证患者基因表达中相对于健康人上调明显,其作用机制需进一步研究证实。     

行气活血复方对闭塞性动脉硬化症血瘀证患者CD62p基因表达的调控

目的：从基因啦平对行气活血复方的微观机理进行探索。方法：以病证结合方式．严格按照诊断标准选取160例闭塞性动脉硬化症血瘀证和非血瘀证患者．用流式细胞技术,进行治疗前后CD62p基因表达的观察、对比、分析,并以健康人为对照。结果：（1）闭塞性动脉硬化症惠者组血小板CD62p的表达水平高于正常对照组（P〈0.01）。（2）与正常对照组比较．血瘀证组和非血瘀证组血小板CD62p的表达水平均升高（P〈0.01或P〈0.05）。血瘀证组血小板CD62p的表达水平显著高于非血瘀证组（P〈0．01）。（3）血小板CD62p的表达水平．气虚血瘀组、气滞血瘀组厦阴虚血瘀组、痰浊血瘀组均高于正常对照组（P〈0．01）：气滞血瘀组明显高于气虚血瘀组、阴虚血瘀组和痰浊血瘀组（P〈0．01）：气虚血瘀组、阴虚血瘀组和痰浊血瘀组之间相比较．血小板CD62p的表达水平无明显差异．（4）治疗后闭塞性动脉硬化症患者CD62p的表达水平低于治疗前（P〈0．05）。结论：闭塞性动脉硬化症血瘀证患者存在CD62p基因的异常表达．并且其指标异常与基因表达水平的高低与血瘀证各型之间存在密切关系,行气活血中药可有效抑制CD62p基因的异常表达。