酶免疫法分别测定免疫球蛋白的轻链比

正常血清免疫球蛋白轻链k与λ之比为2/1,作者用ELISA方法分别测定了免疫球蛋白G、A 和M的k/λ。材料及方法:试剂有包被缓冲液(50mmol/LpH9.6碳酸盐缓冲液),PPS 缓冲液(10mmol/L磷酸氢二钾,150mmol/L 氯化钠,pH7.5,含100ml/L 小牛血清),BSA 溶液(PBS 中100g/L 牛血清白蛋白),冲洗液(PBS 中5mL/L 吐温-20),基质缓冲液(100mmol/L 柠檬酸,200mmol/L 磷酸氢二钠,pH5.0),基质液(20mg 尿素-过氧化     

速率法测定血浆（尿液）游离血红蛋白

血红蛋白（Hb）中亚铁血红素有类似过氧化物酶的作用，本文用ELISA试验广泛采用的显色剂TMB（3，3，5，5—四甲基联苯胺），建立了测定血浆和尿液中游离Hb的速率法，效果满意．1材料和方法1．1仪器意大利BT－224半自动生化仪。1．2试剂①TMB溶液：TMB用二甲亚飒溶解并配成10mg／ml，以0．1mol／LpH5．4醋酸钠一枸橼酸缓冲液稀释成1mmol／L，4℃避光保存备用。②0．3％H2O2：溶液：3％H2O2lml加于9ml蒸馏水中，4℃稳定6小时。③Hb标准液：Hb质控物用盐水稀释至100mg／L。1．3方法TMB液和0．3％H2O2。液各0．5ml混匀，再加肝素…     

102高效液相荧光检测法同时测定癌喋呤、生物喋呤及新喋呤

[英]／HibiyaM…∥JChromB．-1995，(672）．-143～148本文作者对高效液相法进行了优化研究，能同时测定生物喋呤和新喋呤。作者收集了12份癌症病人和10份健康对照者的晨尿，立即在-80℃避光冷冻保存至测定。测定时取120μl尿液，加入60μl6.0mol／L盐酸，在一用橡皮塞封口的玻璃管中用100℃加热2h，随后冷冻干燥，再加入120μl50mmol／LpH3.0磷酸铵缓冲液，700g离心10min，取5μl上清液（相当于5μl尿液）分析，肌酐用比色法测定。高效液相色谱系统由AS-8010自动进样器，CCPM泵、860-CO柱温炉、FP－777荧光检测器，ChromatopocC－…     

用生物发光技术测定ATPase活性的微量方法

作者用生物发光技术测定了大鼠肾胞浆膜囊泡Na.K-ATPase及人精液Ca.Mg-ATPase活性试剂:1)ATP检出液:含虫荧光素酶,D-荧光素,牛血清白蛋白50mg,醋酸镁0.5mmol,焦磷酸酶0.1mmol.2)发光缓冲液:含0.1mol Tris-醋酸,2mmol EDTA-Na2,pH7.5.3)缓冲液Ⅰ:含0.1mol Tris,0.5mmol EGTA,pH7.5.4)缓冲液Ⅱ:缓冲液Ⅰ+20mmol L(+)-酒石酸、2.5mmol四咪唑。5)缓冲液Ⅲ:缓冲液Ⅰ+2mmol哇巴因.上述缓冲液的pH值均用5mol醋酸校正.6)Ca、Mg-     

溴酚蓝-乙醇法测定脑脊液总蛋白

我们参考了有关资料设计了一种溴酚益－乙酸法测定脑脊液总蛋白的方法，效果满意，现报道如下。1材料和方法1．1材料①721型分光光度计．②磷酸氢二钠－枸橼酸缓冲液：0．1mmol／L枸椽酸被1000ml加入0．2mol／LNa1HPO4液20ml，调整pH2.1。③1mmol／LBPB液：取澳酚蓝0．6g9溶解于10ml0．1mmol／LNa0H液中，然后再加蒸馏水至1000ml。④100g／LBroj35液。⑤显色剂：分别取试剂②、③、④为200、200、30ml再加入无水乙醇200ml，然后加蒸馏水至l000ml．③0．sg／L蛋白标准波：取白蛋白、球蛋白标准液或已知浓度质技血清用生理盐水稀择而成…     

质粒DNA简单快速提取及纯化回收

质位DNA提取的方法较多，每种方法都有各自的优点及局限，由于费时仅力以及议钠等条件的限制使得实验者不甚满意．本文介绍一种简单快速提取及统化回收质位的方法．1材料与方法1．1仪器①电泳仪；②DNA回收相（南京大学生化系产）；③紫外线透射仪，④台式高速高心机．1．2试剂①LB培养基（tryl）tO。10yL，yysttX－tract5g几，NaCI109／L调PH7．4后高压灭菌），②溶液1（50mmol／Lglucose，25mmol几Tris－HCIpHS．0，10mmol／LEDTApHS．0）；③溶液！（0．2mol／LNa0H，1％SDS）④溶液三（3mol／LNaAcpH4．8）；⑤异丙四…     

高效毛细管电泳法快速检测毒品滥用人员尿液中吗啡的含量

目的建立高效毛细管电泳法快速检测毒品滥用人员尿液中吗啡的含量。方法运行缓冲液为100mmol／L磷酸盐缓冲液（pH=3．2），含15mmol／L β-环糊精，运行电压20kV：柱温25℃；检测波长205nm。结果吗啡与内源性杂质分离良好；在10～200μg／ml浓度范围线性关系良好（r=0．9983）；检测限为0．05μg／ml；回收率为97．08％～104．59％。结论本法简便、快速、准确，可用于测定海洛因依赖者尿液中的吗啡浓度。     

用溴酚蓝作为染料结合剂进行尿白蛋白的简单分光光度测定法

尿液中白蛋白含量如何,是反映肾小球渗透性的敏感指标,作者利用测定血清白蛋白的染料结合法来测定尿液中的白蛋白,以便临床上区分蛋白尿的不同来源.试剂①甘氨酸缓冲液(230mmol/LpH3.0),内含叠氮钠200mg/L防腐,室温至少稳定六个月.②溴酚蓝贮存液(1.25mol/L):溴酚蓝(BPB)125.7mg,溶于3ml的0.1mol/LNaOH中,后用水     

糖尿病性肾病实验室早期诊断

糖尿病性肾病（DN）是微血管病变之一，是糖尿病的重要死因［1］，本文研究的目的，用放免比浊法测定［2，3］患者尿蛋白，当糖尿病患者尿蛋白定性阴性，或定量在25～110ng／L范围内，Cr、BUN均正常，这时，对糖尿病患者在严重并发为糖尿病肾病前作出判断，如及时治疗，有改变可逆转，对治愈也有非常重要的意义。1材料与方法1．1试剂1．1．10．01mol／LpH7．4PBS1．1．2稀释液：在ILPBS中加15mmolNaN3（1．0g化学纯）和1mlTritonX－100（Robm－MaQS产品）。1．1．3缓冲液：在1LPBS中加15mmolNaN3（1．0g），240mmolNaF（10g）…     

用TBHBA色原测定血浆游离血红蛋白

我们对文献报道的血浆游离血红蛋白（Hb）的酚、4-氨基安替比林（4－AAP）测定法进行了改良，改用一种新色原剂2、4、6、一三溴间羟基苯甲酸（TBH－BA）代替酚，使灵敏度大大提高，此法试剂来源方便，结果准确可靠。材料和方法一、试剂1．包原缓冲液称取TBHBA2·0g、个AAP0·3g、加人0·lmol／L的磷酸盐缓冲液（PH7．4）至1000ml置棕色瓶中保存。2．Hb标准液取血红蛋白液，用氰化高铁血红蛋白法准确测定其浓度，稀释成10g／L浓度为贮存液。取贮存液0．lml用生理盐水稀释至10ml，为Hbldomg／L标准应用液。二、方法：按表1操作。裹1…     

尿素酰基裂解酶酶偶联法测定血清总钙

目的 介绍尿素酰基裂解酶酶偶联测定血清总钙的方法。方法 双试剂两点法；缓冲液为三乙醇胺（TEA，pH8.0,200mmol/L）；试剂I：含NaHCO326.0mmol/L,NADPH 0.4mmol/L,α－酮戊二酸8.0mmol/L，尿素酰基裂解酶115U／L，GLDH43．0kU/L；试剂Ⅱ：含NaCO3 26.0mmol/L,ATP6.2mmol/L。结果 方法线性范围为0．5－5．0mmol/L，批内和批间平均变异系数分别为2．13％和2．69％。平均回收率为102．7％ 。本法（Y）与邻甲酚酞络合酮法（OCPC法，X1）比较：r＝0．981，Y1＝1．02X1－0．021，与偶氮胂Ⅲ法（X2）比较：r＝0．978，Y＝0．99X2＋0．03。血清胆红素高达300μmol/L，血红蛋白4g/L，镁2.5mmol/L，NH4^ 2.0mmol/L,Trig 8.0mmol/L对本法无明显干扰。结论 本法具有简便、准确、快速，适用于自动分析等特点。     

肾上腺结核2例报告

1病历报告例1：男，40岁。困乏力、全身酸痛、色素沉着4个月，于1990年10月入院。病后无畏寒、发热，但精神、食欲差，近2个月体重下降5kg。查体：T36．2C，P84／min，BP13／8kPa；慢性病容；全县皮肤色素沉着，以面部、手掌、阴囊为著。实验室检查：血Hb109g／L，，WBC8×109／L，，N0．62，L0．38，K 4．6mmol／L，Na 134．0mmol／L，Cl－100．0mmol／L，Ca2 2．0mmol／L，血糖5．8mmol／L，肝、肾功能正常，ESR18mm／h，尿17-羟皮质类固醇14．3μmol／24h，尿17-酮类固醇19．4μmol／24h。B超：右肾上腺内有一实质性占位约3．…     

2—氯—4—硝基苯—β—D—半乳糖—麦芽二糖苷作底物测定淀粉酶总活性

目的 建立2－氯－4－硝基苯－β-D－半乳糖－麦芽二糖苷（GalG2-CNP）作底物测定淀粉酶的方法。方法 用连续监测法对pH值，Km值及最适底物浓度等反应条件进行实验研究，并对建立的方法进行评价。结果 用双试剂连续监测法；试剂Ⅰ：含KSCN 200mmol/L,CaCl26.7mmol/L,NaCl400mmol/L；试剂Ⅱ：含GalG2-CNP20mmol/L；均用pH6.0 50mmol/L MES缓冲液。线性范围达1200U/L批内CV＝2.77％，批间CV＝3.56％，与参考方法（BPS－G7）有良好的相关性。结论 本法操作简便，结果准确，可用于常规分析。     

一种适用于血清和尿液的尿素测定法

作者通过监测脲酶作用前后标本pH值的变化，建立了一种既适用于血清，又可用于不稀释尿液标本的尿素测定法。该法具有灵敏，简便等优点。1原理标本中的尿素在脲酶的作用下生成CO2和NH3，而引起标本的pH值发生变化。以邻甲酸欧络合剂为指示剂，通过使用适当的缓冲液，邻甲酚酞络合剂的吸光度与H+浓度间具有一定的比例关系。通过比色测定PH值变化，与同样处理的标准液进行比较，即可得出标本尿素的浓度。2试剂①显色剂：邻平醋酸络合剂2．smmol／L、Tris30Tnmol／L、NaN。15．4mmol／L、EDTANa：sin．mol／L，最后用lmoL／LHCI调节…     

5例鱼肝油中毒误诊分析

临床资料例1女，11个月，皮肤脱屑2个月伴双足肿胀，双下肢肿痛半月。病程中患儿易惊、哭闹、厌食、脱发。在当地诊断为“J；1崎病”。查体：全身皮肤干薄发亮，脱屑。头面部水肿，头围52cm，前囱饱满，颅缝裂开，右侧颞骨和枕骨明显突出。口唇红肿，口角皲裂。心肺正常。实验室检查血钙2．gmmol／L（参考值2．05－2．70mmol／L），尿钙8．7mmol／L（参考值2．5－7．lmmol／L）。X线检查：双侧股骨中段均见局限性骨膜增生隆起，右侧为著；双足第V趾骨均见平行骨膜增生。例2女，4岁，头痛、喷射性呕吐sd，伴低热、嗜睡与烦躁交替，在当地…     

用自动酶法检测血清和尿中肌酸含量

我这里介绍一个用自动酶法测定血和尿中肌酸含量的方法．该法不需预先处理标本，肌酸激酶（CK）和丙酮酸激酶（PK）作为辅酶，乳酸脱氨酶（LD）用作反应的指示剂。CK也被用作初始反应剂，现在的方法与Jaffe法相比，提高了精密度，血肌酸正常参考值：男13～74μmol／L.．女13～89μmol／L．24h尿肌酸；男175～70pμmol／L女150～1200μmol／L.1仪器Hitachi704自动分析仪(BoehringerMannheimMannheim,Germany)2试剂2.1试剂1甘氨酸－MgCl2缓冲液（0．25mol／L甘氨t，16uunol／LMPCI：．PHg．0）测血清中肌酸时，该皈加上ATP370mg…     

PEG—BCA显色法检测循环免疫复合物

BCA（4，4’－二羧酸—2，2’—二喹啉）为一种高灵敏度蛋白是色剂[1]。其呈色反应可不受PEG（聚乙二醇）的影响，对不同蛋白质的吴色力基本一致[1]。本文以BCA替代LOWRY氏试剂，用于PEG沉淀法检测循环免疫复合物（CIC），结果满意，现将试验方法与结果报告如下：1材料与方法1．1试剂①0．1mol／LpH8.4用酸盐缓冲被（BB液）。②70P／LPEG（分子量6000）溶液：以PHS．4BB液配制，内含EDTANa；80mmol／L，用10mol／LNaOH调正到PH为8．4。＠359／LPEG（分子量6000）溶液：以gHS．4BB液配制。＠100mm／L蛋白标准液。⑤be…     

2,4-二硝基苯肼液的快速配制法

2，4-二硝基苯肼（DNPH）液在一些基层单位，常用作ALT、AST和MAO比色法中的圣色剂，配制时多用1mol／L或10mol／LHCl作溶剂，因DNPH在HCl中清解缓慢．每配一次这件试剂约需数小时才能使DNPH全部治解，这对急用十分不利，经多次实验，笔者发现二甲亚风（DMSO）作为DNPH的助溶剂，效果非常满意，现介绍如下；精确秤取DNPH39．6ms，放人清洁干燥的容器内，加入二甲亚飒lml．充分混和约半分钟即可全部溶解，再加lmol／LHCI至200ml，混匀后存棕色瓶，此液浓度为lmmol／L。用此法配制与原法配制的DNPH液，按收氏法同时作ALT…     

新的柠檬酸裂解酶法测定尿液柠檬酸

传统的柠檬酸酶法测定需用柠檬酸裂解酶，苹果酸脱氢酶，乳酸脱氢酶和NADH。作者创立了一种仅用柠檬酸裂解酶的分光光度测定法。测定原理柠檬酸在柠檬酸裂解酶作用下生成a一酮酸（草酸乙酸），在PH65的微酸性条件下与本排反应生成相应的a一酮酸苯炼。在330urn有强的紫外吸收光密度值，与标准管比较得出标本中柠檬酸含量。试剂①柠檬酸裂解酶（120U／gmlH刃）水溶注13．3kU／L放4C稳定一个月，－20C稳定六个月。②246mmol／L本洪水溶液用时取50ml＋2mlH对稀释。③50mmol／LBis－Tris缓冲液（含O．】mmULznSO4，o．Zg／L叠氮钠，用1…     

采用修饰的ICD酶促法测定血清镁

已知Mg2+可激活300多种酶．到目前为止测定血清Mg2+的酶有：已糖激酶．葡萄糖激酶，甘油激酶和葡萄糖磷酸变位酶．用这些酶建立的酶法存在测定时间长，受干扰等缺点．故常规应用不能令人满意，为克服上述缺点本文介绍用化学修饰的异柠檬酸盐脱氢酶（ICD）简便快速地测定血清Mg2+，测定反应原理：以340um测定NADPH产生的吸光度，血清Mg2+浓度与吸光度的增加呈正比。试剂试剂I，0．2mol/L。pH8．0HEPES－TEA缓冲液，含0．67kU／L，修饰的ICD，6.7mmol／L异柠檬酸钾。试剂D．IOmn。of／I，pH60EDTA－Na。10Ommol／I。乙醇醚二…