紫杉醇局部瞬时释放对损伤后血管壁新内膜增生及组织因子TF表达的影响

目的 探讨紫杉醇局部瞬时用药对血管成形术(PTA)后新内膜增生及凝血因子TF表达的影响.材料与方法 建立大鼠颈总动脉损伤模型,采取腔内给药,分别在损伤后15、30天观察不同浓度紫杉醇局部瞬时释放对新内膜增生、血管重塑的影响,并通过免疫组织化学染色及原位杂交对损伤后30天血管壁TF的表达进行评估.结果 损伤后15天及30天,紫杉醇高浓度(180 ug/30 ul)2 min、10 min组及低浓度(90 ug/30 ul)10 min组新生内膜厚度、面积、内膜与中膜面积比及狭窄率等均低于对照组(P<0.05);内、外弹力膜围绕面积与对照组无统计学差异(P>0.05);实验组TF mRNA及TF在新内膜中的表达与对照组没有统计学差别(P>0.05).结论 紫杉醇局部瞬时用药可以在有效持续抑制新内膜增生的同时不增加局部TF的表达.     

紫杉醇局部缓释对血管成形术后血管壁TF、PAI-1及t-PA表达的影响

目的 探讨紫杉醇局部缓慢释放对成形术血管壁TF、PAI-1及t-PA表达的影响.方法 建立大鼠颈动脉损伤模型30只,分为实验组(20只)和对照组(10只),均采取外膜给药(以pluronic F-127为药物释放载体).另外实验组再给予紫杉醇,按其给予的浓度不同分为高浓度组(40 μg/100 μl)和低浓度组(20 μg/100 μl),每组10只.应用免疫组化染色检测紫杉醇局部缓释对血管壁TF、PAI-1及t-PA表达的影响.结果 与对照组相比,损伤后15 d及30 d紫杉醇高、低2种浓度组均促进新生内膜中TF的表达(P<0.05),但对中膜TF表达出现不同的效应:低浓度15 d组高于对照组(P<0.05),高浓度15 d组与对照组无统计学差别(P>0.05),而低浓度与高浓度30 d组低于对照组(P<0.05).紫杉醇高、低2种浓度组均促进新生内膜中PAI-1的表达(P<0.05),对中膜PAI-1表达的影响各组结果不一致:低浓度与高浓度15 d组与对照组相比没有统计学差别(P>0.05),低浓度与高浓度30 d组高于对照组(P<0.05).紫杉醇高、低2种浓度组均降低新生内膜中t-PA的表达(P<0.05),而对中膜t-PA的表达除了高浓度30 d组低于对照组(P<0.05)外,其他各组与对照组无统计学差别(P>0.05).结论 紫杉醇局部缓释诱导损伤后血管壁新生内膜TF及PAI-1的高表达及t-PA的较低表达,可能成为DES支架置入后迟发性血栓形成的重要原因.     

西罗莫司局部缓释对成形术后血管壁PAI-1及t-PA表达的影响

目的 探讨西罗莫司局部缓释对成形术后血管壁纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)及组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)表达的影响.方法 建立大鼠颈动脉损伤模型,Wistar雄性大鼠30只,分为实验组(20只)及对照组(10只).西罗莫司采取外膜给药,以pluronic F-127为药物释放载体,给药浓度分为高浓度组600 μ...     

雷帕霉素涂层支架预防血管再狭窄的研究进展

药物涂层支架是通过某种多聚体涂层携带药物的支架.在支架置入后即开始释放药物,并可在靶血管的局部达到较高的药物浓度,从而达到预防血管再狭窄的目的.目前此项研究已成为备受关位的课题.雷帕霉素涂层支架的临床应用取得了前所未有的疗效,为临床预防血管再狭窄带来新的希望.     

糖尿病患者接受雷帕霉素洗脱支架植入术后血管再狭窄的研究进展

自从1987年报道的第一例血管成形术以来,经皮冠状动脉介入治疗（percutaneous coronary intervention,PCI）成为治疗冠状动脉狭窄的最常见术式。但是这种血管成形术后半年内冠状动脉再狭窄的发生率高达30％～50％。PCI术后再狭窄是指复查冠状动脉造影提示支架内或支架后5mm范围内血管管腔狭窄程度〉50％,参照血管为支架远端正常血管。随着药物洗脱支架的使用,冠脉再狭窄的发生率下降至5％以下。同时患有糖尿病的患者较未患糖尿病的患者更容易出现再狭窄,而且只在使用雷帕霉素洗脱支架的病患中发现这种显著性差异,使用紫杉醇洗脱支架的患者中未发现这种显著性差异。     

雷帕霉素对内皮祖细胞数量与功能的影响

目的观察雷帕霉素对外周血内皮祖细胞（EPCs）数量与功能的影响。方法采用密度梯度离心法从外周血获得单个核细胞,将其接种在人纤维连接蛋白包被的培养板上,培养7天后收集贴壁细胞,加入不同浓度（1.0、2．0、5．0ug／m^3）雷帕霉素分别培养6、12、24、48h。激光共聚焦显微镜鉴定,FITC-UEA-I和Dil-acLDL双染色阳性细胞为正在分化的EPCs,流式细胞仪检测其表面标志以进一步鉴定EPCs,并在倒置荧光显微镜下计数。然后分别采用MTT比色法、改良的Boyden小室、黏附能力测定实验和体外血管生成试剂盒来观察EPCs的增殖能力、迁移能力、黏附能力和体外血管形成能力。结果EPCs数量随雷帕霉素浓度与作用时问增加而减少,其增殖能力、迁移能力、黏附能力和体外血管形成能力亦随雷帕霉素浓度与作用时间增加而降低。结论雷帕霉素降低EPCs的数量、增殖能力、迁移能力、黏附能力和体外血管形成能力,并呈浓度和时间依赖性。     

紫杉醇局部瞬时释放对血管成形术后再狭窄及PAI1、tPA表达的影响

目的 探讨紫杉醇局部瞬时用药对血管成形术(PTA)后再狭窄及PAI1、tPA表达的影响.方法 建立大鼠颈动脉损伤模型,采取腔内局部瞬时给药,通过形态测定观察损伤后30 d紫杉醇对血管壁新内膜增生、狭窄率及血管重塑的变化,并应用原位杂交及免疫组化染色对不同浓度紫杉醇局部瞬时释放对血管壁PAI1及tPA表达的影响进行评估.结果 损伤后30 d,紫杉醇高浓度(180 μg/30 μL)2 min、10 min组及低浓度(90 μg/30 μL)10 min组新生内膜厚度、面积、内膜与中膜面积比及狭窄率等均低于对照组(P＜0.05);内、外弹力膜围绕面积与对照组无统计学差异(P＞0.05).实验组PAI1 mRNA在新内膜中的表达与对照组没有统计学差别(P＞0.05);PAI1在新内膜中的表达,高浓度10 min组高于对照组(P＜0.05),而其他各组与对照组相比无统计学差别(P＞0.05);新内膜中tPA蛋白的表达,高浓度2 min组低于对照组(P＜0.05),其余各组与对照组无统计学差别(P＞0.05).结论 紫杉醇局部瞬时用药可以在有效抑制新内膜增生的同时不影响局部PAI1及tPA的表达.     

国产雷帕霉素洗脱支架和裸支架植入后血管再内皮化实验研究

目的 评价国产雷帕霉素洗脱支架与裸支架植入兔腹主动脉后不同时间血管再内皮化差异.方法 雄性新西兰大白兔24只,高脂喂养28 d后随机分为两组,分别于腹主动脉植入国产雷帕霉素洗脱支架Firebird(SES)和裸金属支架Mustang(BMS).每组分别于术后第3、7、14和28天各处死3只动物,经处理后以扫描电镜观察支架段血管内皮,应用图像处理系统分析支架植入段血管再内皮化程度.结果 支架植入术后第3天两组儿乎均无新生内皮,炎症反应较明显.术后第7、14和28天,SES组内皮覆盖程度明显低于BMS组(分别为15%±8%比53%±9%;49%±16%比83%±4%和73%±3%比93%±4%,P<0.05).结论 SES植入后靶血管出现明显的再内皮化延迟.     

雷帕霉素眼膏的制备及其含量测定

目的探讨雷帕霉素（RAPA）眼膏制备方法并评价其性能。方法制备RAPA眼膏,评价眼膏性质,稳定性,刺激性,鉴别眼膏中有无RAPA存在,测定眼膏载药率。结果本实验可以制备出性质稳定,无刺激性,白色RAPA眼膏,pH7.0,高效液相色谱法（HPLC）可检测出RAPA眼膏色谱图主峰保留时间与对照品色谱图主峰保留时间一致,理论载药率及实际载药率为：5.14%、2.57146±0.62351%。结论 RAPA在眼膏基质中能完全溶解分布。本实验制得RAPA眼膏质地均一,性质稳定,使用安全,无刺激性,对眼表结构无损伤。     

聚合物涂层改性对药物洗脱支架植入后血管内膜修复的作用

目的研究雷帕霉素洗脱支架聚合物涂层改性促进血管内皮化及抑制内膜增殖的作用。方法选择32只小型猪,在冠状动脉内随机植入裸支架(BMS)15枚、新型聚合物涂层支架(Polymer)17枚、FireBird2雷帕霉素洗脱支架(SES-FB2)17枚和新型聚合物涂层的雷帕霉素洗脱支架(SES-Plus)15枚,分别于植入后7、28 d取材,用扫描电镜分析内皮化程度,并分别于28、180 d取材,病理分析内膜增生程度。结果扫描电镜分析显示,与SES-FB2组相比,支架植入后7 d和28 d,SES-Plus组内皮覆盖率显著增加(分别为23%±11%比47%±21%和84±21%比100%,P<0.05),而BMS、Polymer和SES-Plus三组之间差异无统计学意义(P>0.05)。病理分析显示,支架植入后28 d和180 d,SES-Plus组和SES-FB2组间的新生内膜面积差异无统计学意义[分别为(2.28±0.84)mm~2比(2.08±0.76)mm~2和(3.19±0.63)mm~2比(3.06±1.33)mm~2,P>0.05]。结论 SES-Plus能有效抑制内膜增生,具有明显的促进内皮化作用。     

MD-CTA对颈动脉不同类型粥样斑块血管壁强化特征的研究

目的通过分析动脉粥样硬化(AS)血管壁的强化特征,评价血管壁强化程度与斑块稳定性之间的关系。资料与方法212例临床拟诊为颈部血管狭窄的患者接受了多层螺旋CT血管造影(MD-CTA)检查。根据颈动脉有无AS斑块分为病例组和对照组。分析斑块的类型并测量邻近血管壁的强化程度,评价管壁强化特征与斑块稳定性之间的关系。结果病例组102例,共检出斑块145处,43例发生在双侧,59例发生在单侧。其中富含脂质的斑块16处,纤维化斑块34处,钙化斑块95处。相应的血管壁强化程度:富含脂质斑块为(33.63±7.02)HU,纤维化斑块为(25.21±7.54)HU,钙化斑块为(22.67±4.08)HU。而110例对照组血管壁强化程度为(26.45±6.47)HU。统计学分析显示富含脂质斑块组与对照组之间差异有统计学意义(t=4.11,P=0.0001);纤维斑块组和对照组之间差异无统计学意义(t=0.94,P=0.345);钙化斑块组则明显低于对照组(t=5.07,P<0.05)。富含脂质斑块的强化程度与管壁强化程度之间存在显著性相关(r=0.89,P<0.01)。结论AS血管壁强化程度与斑块的稳定性之间存在相关性,血管壁强化程度越高提示斑块稳定性越差。     

三维磁共振管壁成像与数字减影血管造影诊断颈动脉闭塞的对照研究

目的通过与数字减影血管造影(DSA)比较,评价三维磁共振管壁成像(3D-MR-VWI)技术诊断颈动脉闭塞形态学特征的可行性。资料与方法纳入经超声诊断为颅外段颈动脉闭塞(CAO),并于1周内完成3D-MR-VWI和DSA检查的124例患者。评价3D-MR-VWI与DSA在诊断CAO类型和闭塞发生部位的一致性。结果3D-MR-VWI对于颈动脉完全闭塞及闭塞起始部位的诊断与DSA结果均有较高的一致性(Cohen’s κ=0.85,95%CI 0.71~0.94;Cohen’s κ=0.85,95%CI 0.71~0.97)。3DMR-VWI诊断颈动脉完全闭塞的敏感度为97.0%,特异度为86.7%,准确率为94.6%。结论3D-MR-VWI能够准确诊断CAO并判定闭塞的形态学特征,可为临床诊治颈动脉闭塞性病变提供参考。     

Early Changes of Gene Expression Profiles in the Rat Model of Arterial Injury

PurposeRestenosis caused by intimal hyperplasia (IH) remains a significant drawback for vascular interventions. It is crucial to understand the molecular mechanisms that control activation of smooth muscle cells (SMCs) after the injury in order to develop strategies to prevent IH. The purpose of the present study was to investigate the early alterations in arterial-wall gene expression after balloon injury in the rat carotid artery with focus on the induction of an inflammatory response.Materials and MethodsTwenty-four male Sprague–Dawley rats were subjected to injury of the left common carotid artery by using a 2-F Fogarty catheter. The arteries were harvested 5, 10, and 20 hours after injury. Uninjured arteries from an additional eight rats were used as controls. RNA was isolated and used for genome-wide microarray expression analysis, followed by validation of selected genes with quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR). Immunohistochemistry was performed on the cross-sectioned vessels.ResultsAnalysis of gene expression by microarrays showed that the most differentially expressed genes were primarily associated with inflammation, cell proliferation, migration, and adhesion. As confirmed by qRT-PCR, microarray data showed a significant (P < .005) upregulation of cytokines and chemokines (IL-6, CCL2, CXCL1, AIMP1, and CD44) just 5 hours after injury. Immunohistochemistry demonstrated that CCL2 and the adhesion receptor CD44 were expressed by SMCs in the early response to injury and in the absence of leukocyte infiltration.ConclusionsArterial injury is followed by an early induction of inflammatory genes in the vessel wall that appears to be confined to SMCs.     

运动预处理对大鼠心肌CuZn-SOD基因表达的影响

为探讨在高原或仿高原环境下高强度运动的心脏适应机制,通过动物实验模拟高原运动心脏,观察了心肌组织中CuZn-sODmRNA的表达情况.结果表明,在海拔5000米环境下,大鼠6%负重游泳10分钟,常压休息10分钟,重复3次,在运动后30分钟和24小时,心肌CuZn-SODmRNA的表达出现两个高峰,分别比对照组升高了47%和112%;而大鼠在单独低压氧环境下不运动,只在缺氧后30分钟时有CuZn-SODmRNA的表达增高.结果提示与经典的缺血预处理类似,在高原或仿高原环境下进行高强度训练,很可能是一种由心肌缺血和缺氧等因素所诱发的"运动预处理”现象.     

缺血心肌应用bFGF后心肌中VEGF的表达

目的　探讨心肌内注射碱性成纤维生长因子 (basicfibroblastgrowthfactor ,bFGF)对急性心肌梗死 (myocardialinfarction ,MI)血管内皮生长因子 (vascularendothelialgrowthfactor ,VEGF)的表达作用。方法　 2 4只犬建立急性MI模型后随机分成对照组 (MI区注射生理盐水 15ml)和实验组 (MI区注射 5 0mgbFGF与生理盐水的混合液 15ml) ;每组观察 4个不同的时间点 (术后第 1、3、10、17天 )。各组动物分别在处死前应用敏感编码技术 (sensitivityencodedtechnique ,SENSE)行磁共振电影成像 (cinemagneticresonanceimag ing ,cine -MRI)。免疫组织化学方法检测VEGF的表达。结果　心肌缺血区对照组VEGF的表达增多 ;实验组左心室射血分数 (leftventricularejectionfraction ,LVEF)自第 10天明显增加 (第 10天 :对照组 2 4.0 9± 3 .3 2、实验组 45 .71± 6.2 7;第 17天 :对照组 3 1.46± 4.60、实验组 5 3 .46± 5 .2 4;单位 :%)。结论　局部心肌内注射bFGF有促进MI区域VEGF的表达及提高左心室功能的作用     

低强度810nm半导体激光照射对大鼠视神经损伤后视网膜脑源性神经营养因子的影响

目的观察低强度810 nm半导体激光照射对大鼠视神经钳夹伤后视神经再生的影响。方法健康成年Wistar大鼠44只,体重180～220 g,分成激光治疗组20只、单纯损伤组16只、正常对照组8只,每组按治疗时间又分成1、3、6和9周4个时间点。标准的视神经钳夹伤模型制备成功后,激光治疗组行激光照射,照射参数：光斑直径5 mm,照射功率60 mW,时间3 min,经皮至视神经损伤处,每日照射1次。单纯损伤组及正常对照组在进行激光照射时,激光器无功率输出。激光治疗1、3、6和9周后测量视网膜中脑源性神经营养因子（BDNF）mRNA的含量。结果激光治疗组大鼠视神经损伤后1周视网膜中的BDNFmRNA的含量达到最高,随后降低;治疗后1、3、6和9周与同一时间单纯损伤组视网膜中的BDNFmRNA表达相比有所提高（P〈0.05）。结论低强度810 nm半导体激光照射能促进视神经钳夹伤后视神经再生,增加视网膜中BDNF mRNA的表达。     

雌激素对PD模型大鼠黑质纹状体通路的保护作用及其机制探讨

目的研究雌激素（Estrogen）对6-羟基多巴（6-OHDA）制备的去卵巢（OVX）帕金森病（PD）模型大鼠黑质纹状体通路的保护作用及其可能机制。方法应用6-OHDA两点注射单侧损毁内侧前脑束（MFB）制备OVXPD模型大鼠,侧脑室给予17-β雌二醇（17-βestradiol,1μg/5μl）,观察大鼠旋转行为、黑质酪氨酸羟化酶（TH）基因表达、黑质铁染色阳性细胞数量和纹状体内多巴胺（DA）及其代谢产物含量的变化。结果雌激素用药组可明显减少阿朴吗啡诱导的PD模型大鼠单侧旋转行为（P〈0.01）。在损毁侧黑质,雌激素用药组TH基因的表达较PD模型组明显增加（P〈0.01）;纹状体DA及其代谢产物亦较PD模型组显著升高（P〈0.01）。黑质铁染色阳性细胞数量较PD模型组明显减少（P〈0.01）。结论雌激素对PD模型大鼠黑质DA能神经元有明显的保护作用,其作用机制可能与降低铁负载有关。     

阿霉素肾病模型大鼠细胞因子的变化及低分子肝素对其影响

目的　探讨细胞因子在阿霉素 (ADR)肾病模型大鼠中的作用及低分子肝素 (LMWH)对其影响。方法　健康SD♂大鼠随机分为 3组 ,正常对照组 (Ⅰ组 ) 12只 ,尾静脉一次注入生理氯化钠溶液 1ml,后予生理氯化钠溶液 1ml,ip ,qd ;模型组 (Ⅱ组 )12只 ,尾静脉一次注入阿霉素 6 .0mg·kg-1,后予生理氯化钠溶液 1ml,ip ,qd ;低分子肝素组 (Ⅲ组 ) 12只 ,尾静脉一次注入阿霉素 6 .0mg·kg-1,后予LMWH 2 0 0IU·kg-1,ip ,qd ,所有各组共给药 14d。所有的大鼠于注射前及注射后第 3、7、14d抽血测肿瘤坏死因子a、白介素 6及放入代谢笼留 2 4h尿测蛋白定量。结果　用药后Ⅱ组、Ⅲ组的TNF a、IL 6水平、尿蛋白定量上升 ,且TNF a,IL 6水平与尿蛋白程度相关 ,与Ⅰ组比较 ,Ⅱ组有显著性差异 (P <0 .0 1)、Ⅲ组有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;Ⅱ组与Ⅲ组比较有显著性差异 (P<0 .0 5 )。结论　本实验提示TNF a ,IL 6水平与阿霉素肾病模型大鼠的尿蛋白程度有关 ,LMWH能减轻TNF a ,IL 6对肾小球的损害。