耐亚胺培南鲍氏不动杆菌超广谱β-内酰胺酶与AmpC酶研究

目的：研究临床分离的54株耐亚胺培南鲍氏不动杆菌耐药表型和基因型。方法：应用VITEK 2-compact全自动细菌鉴定仪进行细菌鉴定和药物敏感试验,采用改良三维试验方法同时检测AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶,用PCR检测ampC和blaTEM基因,并进行基因测序。结果：54株耐亚胺培南鲍氏不动杆菌中,对抗菌药物耐药率除左氧氟沙星、美罗培南和头孢哌酮/舒巴坦外均〉77%,对头孢哌酮/舒巴坦的耐药率最低（24.1%）。三维试验表明,36株（66.7%）单产AmpC酶,6株（11.1%）单产超广谱β-内酰胺酶,6株（11.1%）同时产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶。54株菌（100.0%）经PCR扩增和序列分析表明均同时携带ampC和blaTEM-1基因。结论：耐亚胺培南鲍氏不动杆菌多重耐药现象严重,同时携带ampC和blaTEM-1基因是本组鲍氏不动杆菌对β-内酰胺类药物耐药的主要原因。     

鲍曼不动杆菌超广谱β-内酰胺酶、AmpC酶检测及耐药性分析

目的:了解鲍曼不动杆菌超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、AmpC酶的产生情况及耐药特点.方法:用酶提取物三维试验分别检测98株鲍曼不动杆菌ESBLs、AmpC酶产生情况,并用VITEK60型全自动微生物分析系统和K-B纸片扩散法检测其对多种抗生素的耐药性.结果:98株鲍曼不动杆菌中,共检测到ESBLs阳性株7株,阳性率为7.1%(7/98);AmpC酶阳性株17株,阳性率为17.3%(17/98).AmpC酶阳性株均呈多重耐药,其对多种抗生素的耐药性明显高于AmpC酶阴性株.结论:产AmpC酶是我院鲍曼不动杆菌多重耐药的主要原因,应加强对AmpC酶的检测及其感染者的治疗.     

革兰阴性杆菌中超广谱β-内酰胺酶和AmpC酶的检测与分析

目的：了解革兰阴性杆菌中超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、AmpC酶的产生情况，为临床用药提供参考依据。方法：用纸片扩散确证试验检测345株革兰阴性杆菌的ESBLs产生情况，同时用酶提取物三维试验检测其中194株菌的AmpC酶产生情况。结果：革兰阴性杆菌中，ESBLs阳性率为30．4％，主要产生菌为阴沟肠杆菌68．2％，大肠埃希菌45．9％，肺炎克雷伯菌31．0％；AmpC酶阳性率为11．9％，主要产生菌为阴沟肠杆菌29．5％，鲍曼不动杆菌18．2％。结论：在革兰阴性杆菌中ESBLs、AmpC酶产生情况已相当严重和普遍，应重视对这两类酶的检测。     

重症监护病房感染鲍氏不动杆菌产AmpC酶的耐药性分析

目的 探讨医院重症监护病房(ICU)感染鲍氏不动杆菌产AmpC酶的耐药性.方法 对临床住院患者分离的364株鲍氏不动杆菌分布科室和感染部位分析,并用三维试验检测AmpC酶.结果 ICU感染162株鲍氏不动杆菌中产AmpC酶76株,产AmpC酶阳性率为46.91%;而非ICU科室感染202株鲍氏不动杆菌中产AmpC酶36株,产AmpC酶阳性率为17.82%.IcU感染鲍氏不动杆菌的耐药性明显高于非ICU科室感染(P＜O.01).结论 ICU感染鲍氏不动杆菌产AmpC酶的分离率高,耐药率也较高,应针对它的易感因素,采取相应的措施,防止该菌引起的ICU感染.     

革兰阴性杆菌产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药相关性

目的了解革兰阴性杆菌产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的情况及其耐药性，指导临床合理用药。方法K—B法检测184株革兰阴性杆菌对11种抗生素的耐药性；采用头孢西丁（FOX）药敏纸片进行AmpC酶的初筛，通过酶提取物三维试验方法确证产AmpC酶细菌；采用NCCLS推荐的纸片扩散确证试验检测184株革兰阴性杆菌中大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs的情况。结果184株革兰阴性杆菌中，AmpC酶阳性率为23．3％主要产生菌为鲍曼不动杆菌57．7％，铜绿假单胞菌37．5％，AmpC酶阳性菌对头孢噻肟（CTX）、头孢曲松（CRO）、复方新诺明（SXT）、左旋氧氟沙星（LEV）、哌拉西林（PRL）、氨曲南（ATM）、头孢他啶（CAZ）、阿米卡星（AK）、头孢吡肟（FEP）、美洛培南（MEM）的耐药率分男11为94．7％、86．8％、84．2％、81．6％、71．0％、68．4％、68．4％、55．3％、50．O％、5．3％；38株大肠埃希菌和26株肺炎克雷伯菌中ESBLs阳性率分别为42．1％、23．1％，ESBLs阳性菌对头孢噻肟（CTX）、头孢曲松（CRO）、哌拉西林（PRL）、氨曲南（ATM）、复方新诺明（SXT）、头孢他啶（CAZ）的耐药率较高。对头孢吡肟（FEP）、阿米卡星（AK）、头孢西丁（FOX）、美洛培南（MEM）的耐药率较低，对左旋氧氟沙星（LEV）的耐药率大肠埃希菌则远高于肺炎克雷伯菌。结论在革兰阴性杆菌中，AmpC酶和ESBLs产生情况已相当严重，应重视对其的检测；产酶菌与非产酶菌对抗生素的耐药性有明显区别；临床用药以碳青霉烯类如美洛培南（MEM）为首选。     

医院感染产AmpC酶鲍曼不动杆菌的调查

鲍曼不动杆菌在非发酵菌中，分离的阳性率仅次于铜绿假单胞菌，由于它作为条件致病菌不断地引起院内感染而被广泛关注，其多重耐药性给临床治疗带来极大困难。随着β-内酰胺类抗生紊的广泛应用，医院内感染的病原菌，革兰阴性杆菌除了产生的超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）外、AmpC酶的产生已逐渐引起临床医师的关注。为此，对医院感染鲍曼不动杆菌作以下总结。     

大肠埃希菌耐药性及ESBLs、AmpC酶检测临床分析

目的 研究笔者所在医院2008年1月至2008年12月临床分离的大肠埃希菌耐药性及产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)和质粒(AmpC)酶的发生率.方法 收集笔者所在医院2008年1月至2008年12月大肠埃希菌53株,用K-B法测定细菌对头孢他啶等17种抗菌药物的敏感性,采用头孢西丁改良三维试验检测ESBLs和AmpC酶.结果 53株大肠埃希菌对美罗培南、亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星、头孢美唑、头孢西丁、头孢他啶、头孢吡肟的耐药率在0%～18.9%,对其他抗生素耐药率在30.2%～71.7%.53株大肠埃希菌中,24株ESBLs阳性,检出率为45.3%;4株AmpC酶阳性,检出率为7.5%.结论 笔者所在医院ESBLs发生率较高,产ESBLs是大肠埃希菌对多种抗生素耐药的主要原因.     

奇异变形杆菌ESBL和AmpC酶的检测与耐药分析

目的 了解本地区奇异变形杆菌超广谱β-内酰胺酶(ESBL)和AmpC酶的流行分布以及对临床常用抗生素的耐药情况.方法 奇异变形杆菌的鉴定和药敏采用法国梅里埃公司的VITEK-32系统进行,对56株奇异变形杆菌采用双纸片法和头孢西丁三维试验,分别用于ESBL和AmpC酶的检测.结果 56株奇异变形杆菌对临床常用的抗生素敏感性较好的是亚胺培南、美罗培南、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星、头孢他啶、拉氧头孢等,其敏感率分别为100%(56/56),100%(56/56)、91.1%(51/56)、87.5%(49/56)、78.6%(44/56)、76.8%(43/56);奇异变形杆菌中产ESBL菌株检出率为10.7%(6/56),产AmpC酶菌株的检出率为0%(0/56),对氨曲南、头孢他啶、头孢曲松、哌拉西林、环丙沙星,产酶菌的耐药率明显高于不产酶菌(P均＜0.05).结论 本地区奇异变形杆菌感染的治疗中,亚胺培南、美洛培南、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星、头孢他啶、拉氧头孢等仍是较好的选择;奇异变形杆菌的耐药与其产生的β-内酰胺酶有关.     

ESBLs与AmpC酶的检测及意义

目的对近年耐三代头孢的阴沟肠杆菌进行β-内酰酶（主要是ESBLs与AmpC酶）监测以进行流行病学调查，同时作相关统计以指导实验室检测及临床用药。方法收集来自各种标本对三代头孢耐药的阴沟肠杆菌33例，进行表型筛选试验及三维试验双重检测ESBLs与AmpC酶。结果表型筛选试验结果有24株产ESBLs，占72．73％；三维试验结果有32株产ESBLs，占96．97％，两者符合率为71．88％（23／32）。表型筛选试验结果产AmpC酶10株，占30．30％；三维试验结果产AmpC酶8株，占24．24％，两者符合率为80．00％（8／10）。其中表型筛选试验结果两种酶均产的有1株，三维试验结果两种酶均产的有8株。结论对三代头孢耐药的阴沟肠杆菌主要产ESBLs，体外实验对亚胺培南敏感率为97．66％，对其它抗菌药物敏感性差。     

耐药不动杆菌AmpC酶及其相关基因分析

目的 了解不动杆菌产AmpC酶的情况,研究AmpC酶的调控基因AmpD、AmpR对产酶的影响.方法 126株不动杆菌,用Nitrocefin显色法、头孢西丁纸片筛选法和三维试验进行AmpC酶的检测,AmpC基因引物对提取的质粒DNA和染色体DNA进行PCR扩增并测序,对AmpC基因扩增阳性菌株进行AmpR、AmpD基因的扩增.结果 本组不动杆菌总β-内酰胺酶的检出率为78.6%(99/126).AmpC基因引物对质粒DNA和染色体DNA进行PCR扩增并测序显示,染色体DNA中存在AmpC基因,质粒DNA中未检测出AmpC基因.三维试验与PCR法相比,假阳性率为54.7%,假阴性率为17.4%.结论 不动杆菌产AmpC酶率较高,AmpC基因位于染色体上,在质粒上未发现.不动杆菌中AmpD、AmpR基因的改变导致AmpC酶表达水平的变化.AmpD的改变比AmpR改变更多见.三维试验与PCR法扩增AmpC基因检测方法相比,有一定的假阳性.除了亚胺培南外,产AmpC酶菌株的耐药率较不产AmpC酶株为高.     

儿童感染肺炎克雷伯菌产AmpC酶和ESBLs的检测及耐药性分析

目的了解广州地区儿童感染肺炎克雷伯菌产质粒介导的AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况及其耐药特征,为临床合理用药提供参考依据。方法采用标准纸片扩散法检测ESBLs,头孢西丁三维试验法检测AmpC酶,K-B纸片法测定肺炎克雷伯菌对抗菌药物的敏感性。结果共检出248株肺炎克雷伯菌,其中46株产AmpC酶,阳性率为18.5%;157株产ESBLs,阳性率为63.3%;同时产AmpC酶和ESBLs菌株阳性率为18.1%。产AmpC酶肺炎克雷伯菌对第三代头孢菌素高度耐药,耐药率达80%～100%;对头孢吡肟、含酶抑制剂复合药的耐药率也在56.5%～93.5%之间;但对环丙沙星、阿米卡星的耐药率则在30%以下,对亚胺培南全部敏感。产ESBLs菌株对头孢菌素、含酶抑制剂复合药的耐药率也较高,在50%～91.7%之间,但对阿米卡星、环丙沙星、亚胺培南仍高度敏感。ESBLs阴性肺炎克雷伯菌对所测抗生素的敏感率均在81.2%以上。产酶菌株耐药率明显比非产酶菌株高。结论广州地区儿童感染肺炎克雷伯菌产ESBLs和AmpC酶的状况已十分突出;产酶菌株对常用抗生素的耐药率较高;碳青霉烯类抗生素可作为治疗产AmpC酶和/或E...     

136析革兰阴性杆菌ESBLs和AmpC酶的检测

随着抗生素的广泛使用,细菌的耐药性已成为人们关心的热点问题。已发现越来越多的革兰阴性杆菌对B-内酰胺类抗生素产生耐药性。细菌产超广谱B-内酰胺酶(ESBLs)和1-型β-内酰胺酶(AmpC酶)是革兰阴性杆菌对β-内酰胺类抗生素产生耐药性的机制之一。其中AmpC酶对β-内酰胺酶抑制剂不敏感,使高产AmpC酶的菌株引起的感染更加难治。此外,出现AmpC酶由原来局限于染色体编码向质粒转移的趋势,大大提高了AmpC酶的横向传播能力[1]。为调查革兰阴性杆菌的产酶情况,我们对136株革兰阴性杆菌进行ESBLs和AmpC酶检测,并对检测结果进行分析。     

产AmpC酶多重耐药不动杆菌的耐药性研究

目的 了解AmpC酶在多重耐药不动杆菌中的分布,分析其对β-内酰胺类抗生素的耐药情况.方法 采用K-B扩散法、三维试验、PCR法检测126株不动杆菌的耐药情况以及所产的AmpC酶.结果 126株不动杆菌中,经三维试验和PCR扩增AmpC基因确证产AmpC酶的有38株.产AmpC酶不动杆菌对亚胺培南的敏感率最高达40.1%,,对头孢吡肟的敏感率为30.9%,对羧苄西林、替卡西林、氨曲南、头孢他啶、头孢噻肟的耐药率均在90%左右,对氨苄西林均不敏感.结论 临床分离的不动杆菌以鲍曼不动杆菌为主,产AmpC酶的不动杆菌对三代头孢类抗生素、亚胺培南的耐药率较高.     

亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌的耐药性及耐药基因型分析

目的 调查重庆医科大学附属第一医院临床分离的亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌的耐药性特点及碳青霉烯酶基因型和16S rRNA甲基化酶分析.方法 收集2009年11月至2010年2月临床分离出耐亚胺培南的鲍曼不动杆菌菌株54株,经Vitek-2 Compact进行细菌鉴定、药敏实验及最小抑菌浓度(MIC)值测定;基因扩增仪(PCR)扩增碳青霉烯酶、16S rRNA甲基化酶耐药基因及其克隆测序.结果 54株耐亚胺培南的鲍曼不动杆菌均为多重耐药表型,全部都携带OXA-66基因,其中53株携带有OXA-23基因,全部53株菌都检测到OXA-23基因上游插入序列ISAbal,41株菌检测到16S rRNA甲基化酶armA基因阳性.结论 产OXA-23型碳青霉烯酶是鲍曼不动杆菌对亚胺培南耐药的最主要原因,其上游插入序列ISAbal 在耐药中起重要作用.     

147株阴沟肠杆菌AmpC酶及ESBLs的表型测定

目的 检测147株阴沟肠杆菌AmpC酶及ESBLs的表型测定,了解阴沟肠杆菌的耐药机制,以利于耐药性的控制与指导临床用药.方法 收集2004年1月至2006年6月广东省中医院的阴沟肠杆菌147株,用三维试验检测ESBLs 与AmpC酶.结果 147株阴沟肠杆菌中,产ESBLs 104株,占70.7%,产AmpC酶有36株,占24.5%,同时产2种酶的有3株,占2%,2种酶均不产的有4株,占2.7%.体外抗生素敏感试验显示,亚胺培南、头孢替坦、头孢吡肟、环丙沙星的耐药率分别为2.0%,61.2%,65.3%和89.1%,氨苄西林耐药率达到100%.结论 产ESBLs和AmpC酶是阴沟肠杆菌耐药的主要机制,阴沟肠杆菌主要产ESBLs,药物敏感试验表明亚胺培南敏感率最高(98.0%),头孢替坦次之(32.7%),而对其他抗菌药物敏感率较低.     

重症监护病房产ESBLs和AmpC酶的大肠埃希菌耐药性分析

目的了解我院重症监护病房患者中大肠埃希菌产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的耐药性特征：方法采用纸片扩散确证法检测ESBLs,酶提取物三维试验方法检测AmpC酶。结果226株大肠埃希菌中检出单产ESBLs131株,AmpC酶24株,同时产AmpC酶和ESBLs共9株,检出率分别为58．0％、10．6％和4．0％。产酶大肠埃希菌对抗生素的耐药率大部分均高于不产酶菌株;结论重症监护病房产AmpC酶和ESBLs的大肠埃希菌日益增多且呈多重耐药,临床经验用药应首选碳青霉烯类抗生素.     

120例肺炎克雷伯菌ESBLs和AmpC酶检测及耐药分析

目的探讨本院儿科病区下呼吸道标本中分离的肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）和头孢菌素酶（AmpC酶）的情况及耐药分析。方法采用改良的酶提取物三维试验法检测ESBLs和AmpC酶,采用纸片扩散（K-B）法检测肺炎克雷伯菌对13种抗生素的耐药率。结果从120株下呼吸道标本中分离的肺炎克雷伯菌中单产ESBLS,单产AmpC酶和同时产AmpC酶＋ESBLs的阳性率分别为20.8％（25／120）,10.0％（12／120）和4.2％（5／120）。单产AmpC酶、单产ESBLs及同时产AmpC酶＋ESBLs对13种抗生素的耐药率大部分均高于不产酶菌株。结论本院儿科病区下呼吸道标本中分离的肺炎克雷伯菌对β-内酰胺类抗生素耐药的主要原因是产生AmpC酶和ESBLs,对产酶菌株临床经验用药首选碳青霉烯类抗生素,其次是β-内酰酶类抗生素和酶抑制剂、头霉类抗生素及其他敏感抗生素。     

大肠埃希菌耐药特征及AmpC酶基因分析

目的：了解产生超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的大肠埃希菌耐药表型和AmpC酶基因型。方法：用双纸片扩散法和E-test筛选确认大肠埃希菌产ESBLs和AmpC酶菌株,通过PCR基因扩增对AmpC酶耐药基因型进行确认。结果：68株产生超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌中有1株为AmpC酶。结论：大肠埃希菌是产生ES-BLs的常见菌,同时产生AmpC酶的菌株使其耐药性增强,实验室对其检测和监控非常重要。     

肝硬化腹水感染E.coli AmpC酶和ESBLs的检测及耐药性分析

目的了解肝硬化患者腹水感染大肠埃希菌产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶的情况及耐药分析。方法采用改良的酶提取物三维试验法检测从肝硬化并发自发性细菌性腹膜炎患者的腹水中分离的60株大肠埃希菌产AmpC酶和ESBLs的情况及耐药特征。结果从60株大肠埃希菌中检出单产ESBLs29株,检出率为48.3%;单产AmpC酶6株,检出率为10.0%;同时产AmpC酶和ESBLs共3株,检出率为5.0%。单产AmpC酶、ESBLs及同时产AmpC酶、ESBLs对18种抗生素（除亚胺培南）的耐药率均高于平均水平。结论住院肝硬化伴自发性细菌性腹膜炎患者腹水感染大肠埃希菌对抗生素耐药的主要原因是产生AmpC酶和ESBLs。临床上对治疗此类患者需及时进行腹水的病原菌培养和药敏试验。临床经验性用药一般首选碳青霉烯类。     

血流感染病原菌AmpC酶及相关耐药机制的初步研究

目的 了解血流感染病原菌中产AmpC β-内酰胺酶(简称AmpC酶)菌株的分布情况和临床病例特点,并对相关基因ampC和ampD进行初步研究.方法 收集2006年1月-2008年9月血流感染革兰阴性菌181株,分别采用头孢西丁初筛试验和三维试验筛选产AmpC酶菌株和高产AmpC酶菌株;对初筛试验阳性相关临床病例进行回顾性分析.同时对初筛试验阳性菌株ampC,ampD基因PCR扩增、测序和比对,Rep-PCR分析ampC阳性菌株基因型.结果 181株病原菌中头孢西丁初筛试验法检出产AmpC酶39株,概率为21.5%(39/181);三维试验法检出高产AmpC酶菌株的概率为43.6%(17/39).PCR结果显示ampC和ampD基因阳性率分别为41%(16/39)和56.4%(22/39).对16株ampC阳性菌进行基因测序,与GenBank相应ampC核酸序列比对发现同源性达98%-100%;2株阴沟肠杆菌ampD基因的测序发现在ampD基因羧基端存在可疑的突变位点.结论 本研究相关败血症患者血流耐药病原菌感染主要源自院内感染.在产AmpC酶的血流病原菌中,ampC基因突变比较少见,而阴沟肠杆菌ampD基因突变发生率比较高,且ampD蛋白羧基末端氨基酸的缺失或替代可能与AmpC酶去阻遏表达高度相关.