HPLC-DAD-ELSD法同时测定消栓通络片中10种成分的含量

摘要：目的:同时测定消栓通络片中10种成分的含量。方法:采用HPLC-DAD-ELSD法,色谱柱:Waters Symmetry C18（250mm×4.6 mm,5μm）;流动相:乙腈（A）-0.1%磷酸溶液（B）,梯度洗脱;流速:1.0 ml·min-1;柱温:30℃;毛蕊异黄酮葡萄糖苷、阿魏酸、芦丁、金丝桃苷、丹酚酸B、肉桂酸测定的DAD检测器参数:检测波长:260 nm（毛蕊异黄酮葡萄糖苷）、316 nm（阿魏酸）、360 nm（芦丁和金丝桃苷）、285 nm（丹酚酸B和肉桂酸）;三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、黄芪甲苷测定的ELSD检测器参数:漂移管温度40℃;气体流量:1.5 L·min-1。结果:毛蕊异黄酮葡萄糖苷、阿魏酸、芦丁、金丝桃苷、丹酚酸B、肉桂酸、三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、黄芪甲苷分别在为0.268～5.350,0.232～4.650,5.016～100.32,0.606～12.128,4.924～98.480,8.208～164.160,5.068～101.360,14.008～280.160,12.392～247.840,1.029～20.576μg·ml-1（r为0.999 5～0.999 8）浓度范围内呈良好的线性关系;平均加样回收率分别为94.9%,95.9%,96.9%,101.6%,97.3%,98.2%,99.3%,99.9%,97.0%,94.8%,RSD分别为1.1%,1.1%,0.2%,1.0%,0.7%,1.1%,0.4%,0.4%,0.5%,1.2%（n=6）。结论:本文建立测定方法专属性强,重复性好,灵敏度高,适用于消栓通络片中10种成分的测定,为完善消栓通络片质量评价标准提供依据。     

碱处理在微量黄芪药材质控指标成分含量测定中的应用研究北大核心CSCD

目的:建立碱处理微量黄芪药材测定黄芪皂苷Ⅳ、毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花苷含量的方法,表征碱处理提高上述指标成分收率的有关物质转化特征。方法:取传统采收期黄芪根0.15 g,按1∶30的比例加入70%乙醇(内含不同浓度的氨水),超声提取,进行碱处理体系的优化。利用UPLC-QTRAP-MS多反应离子监测模式,采用BEH C18(2.1mm×50 mm,1.7μm)色谱柱,以0.1%甲酸水(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱,流速:0.2 mL·min-1,柱温:30℃,测定黄芪皂苷IV含量;采用2015年版《中华人民共和国药典》黄芪含量测定项下毛蕊异黄酮葡萄糖苷色谱条件,HPLC法测定毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花苷含量;UPLC-Q-TOF-MS法进行有关化合物的指认。结果:用含4%氨水的70%乙醇提取时,三质控指标成分收率最高,对应的检测线性范围分别为10.70~85.60μg·mL-1、1.039~72.73μg·mL-1和1.051~73.57μg·mL-1。该优化体系中,黄芪皂苷Ⅰ、酰基化毛蕊异黄酮葡萄糖苷和酰基化芒柄花苷转化较为完全,黄芪皂苷Ⅱ部分转化;此外,还存在一未知化合物向黄芪皂苷Ⅳ的明显转化。采用该优化体系分析发现,根施外源正己醛组黄芪药材中黄芪皂苷Ⅳ含量明显高于对照,但两异黄酮组分组间无显著差异。结论:建立了一种碱处理微量黄芪测定黄芪皂苷Ⅳ、毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花苷含量的方法,该方法显著提高了黄芪药材中3个质控指标成分的收率,可应用于微量黄芪的质量评价与品质形成研究。     

益心舒颗粒HPLC指纹图谱的建立及多成分含量测定

摘要：目的:建立益心舒颗粒HPLC指纹图谱,并同时测定毛蕊异黄酮葡萄糖苷、阿魏酸、五味子醇甲、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、丹酚酸B、人参皂苷Rb17个成分的含量。方法:该样品粉末用75%甲醇提取液提取,采用Agilent Poroshell 120EC-C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相乙腈（A）-0.1%甲酸溶液（B）,梯度洗脱;检测波长为205,280 nm,柱温:30℃,流速:1.0 ml·min-1,进样量:10μl。结果:15批样品中有22个共有峰,相似度均大于0.97。毛蕊异黄酮葡萄糖苷、阿魏酸、五味子醇甲、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、丹酚酸B在各自范围内线性关系良好（r≥0.999 4）,15批益心舒颗粒中上述7个成分的含量分别为1.024 0～1.796 0 mg·g-1、0.653 2～0.996 2 mg·g-1、1.856 0～3.163 0 mg·g-1、0.469 6～0.784 1 mg·g-1、0.547 1～0.925 8 mg·g-1、1.142 0～2.231 0 mg·g-1、1.032 0～1.524 0 mg·g-1。结论:所建立方法稳定简单,多成分含量测定结合指纹图谱分析为全面评价益心舒颗粒的产品质量提供了依据。     

一测多评法同时测定炙黄芪中4种黄酮类成分

目的: 利用一测多评法（QAMS）同时测定炙黄芪配方颗粒中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮及芒柄花素4种黄酮类成分,为炙黄芪配方颗粒的质量评价分析提供科学依据。方法: 炙黄芪配方颗粒经70%甲醇超声提取后,利用Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,以乙腈-0.2%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 mL·min-1,柱温为30℃,检测波长为250 nm。以毛蕊异黄酮葡萄糖苷为内参物,建立其与芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素的相对校正因子。分析比较外标法（ESM）和一测多评法（QAMS）同时测定其4种成分的含量差异。结果：在一定线性范围内,毛蕊异黄酮葡萄糖苷相对毛蕊异黄酮、芒柄花苷、芒柄花素的相对校正因子耐用性良好,外标法（ESM）和一测多评法（QAMS）所测含量无明显差异。结论: 建立的一测多评法（QAMS）测定炙黄芪配方颗粒中4种成分含量的方法,快捷、简便、准确度高、重复性好,可为其质量标准研究及评价分析提供依据。     

芪苓益肾颗粒传统制备方法与配方颗粒的指纹图谱差异性研究

目的对比芪苓益肾颗粒传统制备工艺(TPP)与中药配方颗粒(CFG)化学成分种类和含量的差异。方法建立芪苓益肾颗粒指纹图谱,从相似度、化学成分种类、指标性成分含量、共有峰峰面积4个方面研究芪苓益肾颗粒TPP与CFG样品的差异。结果芪苓益肾颗粒TPP样品、A厂及B厂CFG样品相似度较高(0.959、0.956、0.926),C厂CFG样品相似度稍低(0.894)。TPP和CFG有20个(峰1～13,峰15～21)共有峰;TPP与CFG相比有峰14的出现及峰22的消失。测定了毛蕊异黄酮葡萄糖苷、阿魏酸、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素5种指标成分的含量,发现CFG中各成分含量相对TPP均有不同程度降低。CFG共有峰总峰面积均低于TPP,A、B、C三厂CFG相对TPP共有峰总峰面积相对值分别为0.89、0.77、0.72。结论芪苓益肾颗粒TPP与CFG相比有化学成分的变化,TPP样品指标成分含量高于CFG样品;两者在化学成分种类、数目及指标成分含量均存在一定差异,表明CFG的标识当量存在一定误差,在临床应用中应进行修正,以促进临床合理应用。     

HPLC-CAD一测多评法同时测定黄芪中6种成分含量

建立高效液相串联电雾式检测器(HPLC-CAD)同时测定黄芪药材中黄芪皂苷Ⅰ、黄芪皂苷Ⅱ、黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花素和7,2’-二羟基-3’,4’-二甲氧基异黄烷的一测多评方法。采用Agilent SB-C18(150 mm×4.6 mm,3.5μm)色谱柱,0.05%甲酸水-0.05%甲酸乙腈为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,柱温35℃,进样量为20μL;CAD雾化室温度50℃。建立内参物黄芪皂苷Ⅱ与其他成分的相对校正因子,并通过相对校正因子计算其含量。同时采用外标法验证所建立的一测多评法的合理性、可行性和重复性。结果表明:各色谱峰分离度较高,黄芪皂苷Ⅰ、黄芪皂苷Ⅱ、黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花素和7,2’-二羟基-3’,4’-二甲氧基异黄烷分别在0.1132.250、0.0120.240、0.0040.080、0.0651.300、0.0050.100和0.0070.150 mg·mL^-1内线性关系良好;20批黄芪药材中黄芪皂苷Ⅰ、黄芪皂苷Ⅱ、黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花素、7,2’-二羟基-3’,4’-二甲氧基异黄烷的含量分别为0.3060.922、0.0530.183、0.0150.092、0.0690.823、00.098和0.0200.107 mg·g-1;内参物黄芪皂苷Ⅱ与黄芪皂苷Ⅰ、黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花素和7,2’-二羟基-3’,4’-二甲氧基异黄烷的相对校正因子分别为0.561、0.835、0.299、0.796和0.799;一测多评法含量测定结果与外标法测定结果无显著性差异。建立的HPLC-CAD一测多评法简便、准确,可用于黄芪中6种化学成分的含量测定,研究结果为黄芪药材的质量评价提供了科学依据。     

基于层次分析法综合评分优选芪灵消积颗粒的提取工艺

摘要：目的:优选芪灵消积颗粒的提取工艺。方法:采用HPLC测定毛蕊异黄酮葡萄糖苷、迷迭香酸、淫羊藿苷含量,比色法测定总皂苷含量。基于层次分析及多指标综合评价法,结合正交试验设计,优选最佳提取工艺。结果:优选的提取工艺条件为处方饮片加10倍量的水,煎煮2次,每次1.5 h。结论:采用多层次多指标综合评价法优选的提取工艺科学、合理、可行,适用于芪灵消积颗粒的制备。     

基于UPLC-QTOF-MSE植物代谢组学的不同产地黄芪差异性研究

摘要：目的:研究不同产地黄芪整体化学成分及多糖、黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷的差异性。方法:采用UPLC-QTOF-MS~E植物代谢组学技术建立山西浑源县、宁夏彭阳县、内蒙古固阳县三个产地黄芪整体化学成分的指纹图谱,采用多元统计分析方法研究不同产地黄芪整体化学成分的差异性。色谱柱：Waters Acquity UPLCHSS PFP(100 mm×2.1 mm, 1.8μm);流动相：0.1%的甲酸水溶液(A)和0.1%的甲酸乙腈溶液(B),梯度洗脱;流速：0.3 ml·min-1,柱温：40℃;电喷雾(Electrospray ionization, ESI)源;MS~E负离子扫描模式;采用液相色谱法、紫外分光光度法分别测定黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、黄芪多糖含量,研究不同产地黄芪三种物质的含量差异。结果:UPLC-QTOF-MS~E植物代谢组学结果显示,山西浑源、宁夏彭阳、内蒙古固阳三个产地的黄芪整体化学成分存在差异性,山西浑源与宁夏彭阳、内蒙古固阳黄芪整体化学成分差异较大,内蒙古与宁夏黄芪整体化学成分存在相似性。经鉴定,得到不同产地黄芪共有差异代谢物8种,分别为沙苑子苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、黄芪甲苷、芒柄花素、芒柄花苷、美迪紫檀素、红车轴草素-7-O-β-D-吡喃葡糖苷、黄芪皂苷Ⅰ。含量测定结果显示,三个产地中,山西浑源2年生黄芪多糖含量最低,毛蕊异黄酮葡萄糖苷和黄芪甲苷含量最高。结论:本文建立了不同产地黄芪UPLC-QTOF-MS~E整体化学成分指纹图谱,鉴定出不同产地黄芪共有差异成分8种,并结合多糖、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、黄芪甲苷含量测定进一步表明了不同产地黄芪化学物质的差异性,为不同产地黄芪质量控制提供了参考。     

三七皂苷R1对LPS诱导的小鼠心肌损伤的保护作用

目的探讨三七皂苷R1(Notoginsenoside R1)对内毒素诱导的C57BL/6J小鼠心肌损伤的保护作用,阐明其抗心肌炎症的作用机制。方法 C57BL/6J小鼠预防性给予三七皂苷R1 3 d后,注射LPS(10 mg.kg-1,ip)建立急性内毒素心肌损伤模型。采用超声心动测定射血分数(EF),缩短分数(FS)等指标,观察小鼠心功能;采用免疫组化检测心室肌中ED-1+和CD11b+炎性细胞的浸润情况;Western blot检测IκBα和NF-κB p65的表达变化;应用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测心肌组织匀浆中TNF-α、IL-1β和VCAM-1、ICAM-1的表达水平。结果超声心动显示,与模型组(LPS组)相比三七皂苷R1能明显抑制LPS诱导的小鼠的左心室收缩功能减弱的情况;免疫组化可观察到R1有效抑制了ED-1+和CD11b+细胞的侵入;Western blot法显示R1对IκBα的降解具有抑制作用,同时对由此产生的NF-κB的活化也具有抑制作用;ELISA实验显示与模型组相比,R1明显降低了组织中TNF-α、IL-1β的浓度,抑制心肌组织中VCAM-1和ICAM-1的表达。结论三七皂苷R1对LPS引起的心肌炎症具有明显的抑制作用,能有效改善由此导致的心肌损伤。     

硫磺熏蒸对黄芪中黄酮类和皂苷类成分的影响

目的测定硫磺熏前后黄芪中黄酮类和皂苷类成分的变化,确定硫磺熏对黄芪药材质量的影响,为评价熏硫加工对黄芪质量的影响提供依据。方法对收集的黄芪进行熏硫加工,采用HPLC-DAD法测定了毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素4种黄酮成分,UPLC-ELSD法测定了黄芪皂苷I、黄芪皂苷II、黄芪皂苷III、黄芪甲苷4种皂苷成分。结果硫磺熏过的黄芪药材中毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷含量降低,毛蕊异黄酮、芒柄花素、黄芪皂苷I、黄芪皂苷III、黄芪甲苷的含量变化不明显。结论黄芪熏硫加工后,黄酮苷成分有所降低,其余成分变化不明显。     

3个指标性成分用于指示芪贞降糖颗粒浓缩工艺可靠性的研究

目的 探索以3个主要成分作为指标监控芪贞降糖颗粒浓缩工艺稳定性。方法 选择枸橼酸、特女贞苷和毛蕊异黄酮葡萄糖苷3个主要成分作为HPLC检测指标,分别在常压和减压条件下进行芪贞降糖颗粒提取液的浓缩,测定不同温度下不同时间点样品中指标性成分的含量变化情况,系统考察其热稳定性规律,用于浓缩工艺的参数确定。结果 常压浓缩条件下,枸橼酸稳定性在温度超过80℃后明显下降,特女贞苷稳定性在温度超过70℃后明显下降,毛蕊异黄酮葡萄糖苷稳定性在60-90℃良好,因此,常压浓缩温度应不超过70℃;减压浓缩条件下,枸橼酸稳定性在温度超过80℃后明显下降,特女贞苷稳定性在温度超过80℃后明显下降,毛蕊异黄酮葡萄糖苷稳定性在60-90℃良好,因此,减压浓缩温度应不超过80℃。结论 中试放大试验验证了以上规律,以枸橼酸、特女贞苷和毛蕊异黄酮葡糖糖苷作为指标得到的浓缩工艺参数,可用于芪贞降糖颗粒的制剂工艺质量控制。     

一测多评法测定补心气口服液中7种成分的含量

目的建立一测多评法(QAMS)同时测定补心气口服液中人参皂苷Rg_1、人参皂苷Re、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素、β-细辛醚和α-细辛醚的含量。方法色谱柱为Agilent Extend-C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-1 mL·L~(-1)磷酸为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min~(-1),检测波长分别为203 nm(检测人参皂苷Rg_1和人参皂苷Re),257 nm(检测毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素、β-细辛醚和α-细辛醚),柱温为25℃。以毛蕊异黄酮葡萄糖苷为内参物,建立其与人参皂苷Rg_1、人参皂苷Re、毛蕊异黄酮、芒柄花素、β-细辛醚和α-细辛醚的相对校正因子,并计算各成分含量,计算结果与外标法(ESM)实测值进行比较。结果 7种成分分别在0.81～20.25(r_1=0.999 3),1.59～39.75(r_2=0.999 6),3.73～93.25(r_3=0.999 1),1.86～46.50(r_4=0.999 2),6.47～161.75(r_5=0.999 5),14.78～369.50 (r_6=0.999 4),4.89～122.25μg·mL~(-1)(r_7=0.999 1)范围内线性关系良好;平均回收率(RSD值)分别为97.44%(1.14%),99.80%(0.75%),100.05%(0.68%),96.98%(0.90%),98.87%(1.35%),99.88%(0.73%),97.91%(1.49%);QAMS法计算结果与ESM法实测值无明显差异。结论所建立的QAMS法操作便捷、结果准确,可用于补心气口服液的质量控制。     

一测多评法测定升提颗粒中8种成分的含量

目的 建立同时测定升提颗粒中党参炔苷、紫丁香苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花素、芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷含量的一测多评法(quantitative analysis of multi-components with single-marker, QAMS)。方法 该药物甲醇提取液的分析采用Agilent HC-C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm, 5μm);柱温为30℃;流动相为乙腈(A)-1 mL·L^(-1)甲酸溶液(B);流速为1.0 mL·min(-1)甲酸溶液(B);流速为1.0 mL·min^(-1);梯度洗脱;检测波长为254 nm(检测党参炔苷、紫丁香苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花素)和283 nm(检测芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷)。以毛蕊异黄酮葡萄糖苷为内参物,建立与其他7种成分的相对校正因子,检测各成分的含量。结果 党参炔苷、紫丁香苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花素、芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷的质量浓度分别在2.99～74.75、0.53～13.25、1.36～34.00、2.09～52.25、4.87～121.75、24.45～611.25、1.81～45.25、12.54～313.50μg·mL(-1);梯度洗脱;检测波长为254 nm(检测党参炔苷、紫丁香苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花素)和283 nm(检测芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷)。以毛蕊异黄酮葡萄糖苷为内参物,建立与其他7种成分的相对校正因子,检测各成分的含量。结果 党参炔苷、紫丁香苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花素、芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷的质量浓度分别在2.99～74.75、0.53～13.25、1.36～34.00、2.09～52.25、4.87～121.75、24.45～611.25、1.81～45.25、12.54～313.50μg·mL^(-1)范围内有较好的线性关系(r≥0.999 1);平均加样回收率(RSD%)分别为99.02%(0.58%)、98.13%(1.46%)、99.35%(1.51%)、96.78%(1.40%)、99.39%(0.76%)、100.08%(0.62%)、97.71%(1.27%)、99.36%(0.85%);QAMS计算结果与外标法(external standard method, ESM)实测值无明显差异。结论 建立的方法易操作,结果准确,能用于升提颗粒中党参炔苷、紫丁香苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花素、芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷含量的测定。     

HPLC法同时测定参芪颗粒中3种异黄酮成分的含量

目的:建立同时测定参芪颗粒中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Welch Ultimate XB-C_(18),流动相为乙腈-0.2%甲酸溶液(梯度洗脱),检测波长为250 nm,柱温为35℃,流速为1.0 ml/min,进样量为10μl。结果:毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素进样量线性范围分别为0.008~0.32、0.005~0.20、0.007~0.28μg(r为0.999 9、0.999 7、0.999 8);精密度、稳定性、重复性试验的RSD≤1.59%;加样回收率范围分别为98.17%~99.71%、98.03%~99.66%、98.16%~99.12%,RSD分别为0.67%、0.57%、0.43%(n=6)。结论:该方法简便、准确、可靠,可用于参芪颗粒中黄酮类成分的含量测定。     

保元汤颗粒剂制备工艺和质量控制

目的 基于质量源于设计(QbD)理念筛选保元汤颗粒剂的制备工艺，采用物理指纹图谱对颗粒剂进行一致性评价，建立高效液相色谱(HPLC)含量测定方法用于其质量控制研究。方法 以成型率、吸湿率、溶化率、休止角为评价指标，考察不同类型辅料及配比，并采用正交实验优选保元汤干法制粒的工艺参数；以相对均齐度指数、松密度、振实密度、水分、吸湿率、休止角、豪斯纳比为二级物理指标，建立颗粒剂的物理指纹图谱，评价不同批次颗粒剂质量的一致性；采用HPLC法测定颗粒剂中指标性成分人参皂苷Rg₁、Rb₁、毛蕊异黄酮葡萄糖苷和甘草酸铵的含量。结果 保元汤颗粒剂以麦芽糊精为辅料，药辅质量比2:1,干法制粒制备工艺参数为辊轮压力22 bar,辊轮转速8 r·min^-1,进料速度120 r·min^-1;测定的各批次颗粒剂物理指纹图谱相似度均大于0.99;人参皂苷Rg₁、Rb₁、毛蕊异黄酮葡萄糖苷和甘草酸铵分别在9.5156～1218、8.406～1076、1.1680～149.5和8.453...     

HPLC-MS/MS法测定芪葵颗粒中25个成分的含量

目的:建立高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法测定芪葵颗粒中25个成分(7,2’-二羟基-3’,4’-二甲氧基异黄烷、L-苯丙氨酸、毛蕊异黄酮-7-O-葡萄糖苷、芦丁、2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-葡萄糖苷、美迪紫檀苷、异黄芪皂苷Ⅱ、杨梅素、无水柠檬酸、紫檀烷、黄芪皂苷Ⅲ、黄芪甲苷、黄芪皂苷Ⅰ、环黄芪苷Ⅱ、异黄芪皂苷Ⅰ、L-色氨酸、黄芪皂苷Ⅱ、异槲皮苷、刺芒柄花苷、金丝桃苷、没食子酸、槲皮素、毛蕊异黄酮、芒柄花素、大黄素)的含量。方法:采用Agilent Poroshell 120 SB-C₁₈色谱柱(100 mm×3.0 mm, 2.7μm),以含0.1%甲酸和1 mmol·L^-1甲酸铵的水溶液(A)-甲醇(B)为流动相,梯度洗脱,流速0.4 mL·min^-1,柱温45℃,进样体积2μL;采用电喷雾离子源(ESI),多反应监测(MRM)模式,负离子模式扫描。结果:25个成分在测定的质量浓度范围内线性关系良好,相关系数(r)均>0.995 0,精密度、重复性、稳定性均良好,平均加样回收率在8...     

高压蒸汽灭菌法对三七细粉中3种成分含量的影响

目的探索高压蒸汽灭菌法对三七药材中3种成分含量的影响。方法采用高效液相色谱法对灭菌处理和非灭菌处理的三七药材细粉中的指标成分三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1进行含量测定,记录2种处理方式各指标成分的含量变化情况。结果与结论三七药材细粉经高压蒸汽灭菌后指标成分含量显著降低,不宜采用高压蒸汽灭菌法灭菌。     

三七总皂苷对烫伤后核因子—κB及肿瘤坏死因子的影响

目的观察不同剂量的三七总皂苷对严重烫伤小鼠腹腔巨噬细胞内核因子-κB(NF-κB)活性及肿瘤坏死因子(TNF-α)mRNA的影响,阐明三七总皂苷对巨噬细胞分泌TNF-α影响的机制,探索体外运用该药的最佳剂量。方法以15%体表面积Ⅲ度烫伤小鼠为模型,收集腹腔巨噬细胞,电泳迁移率改变分析法测NF-κB的活性,反转录PCR测TNF-αmRNA的表达。结果烫伤后巨噬细胞内NF-κB活性与TNF-αmRNA的表达均显著升高,三七总皂苷在一定的浓度范围内呈剂量依赖性的抑制NF-κB活性与TNF-αmRNA的表达,以0.8mg*mL-1的剂量最明显,两者变化趋势相类似。结论三七总皂苷可能通过抑制NF-κB活性而降低TNF-αmRNA的表达。     

黄芪和三七的主要有效成分配伍对脑缺血/再灌注小鼠NF-κB信号通路及炎性因子表达的影响

目的从炎症反应探讨黄芪和三七主要有效成分配伍抗脑缺血/再灌注损伤的机制。方法将C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组、黄芪甲苷(ASTⅣ)组、人参皂苷Rg1(Rg1)组、人参皂苷Rb1(Rb1)组、三七皂苷R1(R1)组、4种有效成分配伍组、ASTⅣ+Rg1组、ASTⅣ+Rb1组、ASTⅣ+R1组及阳性对照药依达拉奉组。预先给药3 d,末次给药1 h后,结扎双侧颈总动脉,造成脑缺血20 min,再灌注24h。RT-PCR法测定TNF-α、IL-1β、ICAM-1 mRNA表达,Western blot法测定脑组织p-IκBα蛋白及胞质、胞核NF-κB蛋白表达,计算NF-κB核转位率。结果 1脑缺血/再灌注后,脑组织TNF-α、IL-1β、ICAM-1 mRNA表达增加。ASTⅣ可降低TNF-αmRNA表达,Rg1可降低ICAM-1 mRNA的表达,R1能同时下调TNF-α、ICAM-1 mRNA的表达。ASTⅣ与Rg1、Rb1、R1配伍对TNF-α、IL-1β、ICAM-1 mRNA的表达均有不同程度的抑制作用,且以4种有效成分配伍组和ASTⅣ+R1组对炎性细胞因子表达的抑制效应更加明显。2脑缺血/再灌注后,脑组织p-IκBα蛋白表达明显增加,胞质NF-κB蛋白表达明显减少,而胞核NF-κB蛋白表达增加,NF-κB核转位率升高。ASTⅣ、Rg1、R1及各有效成分配伍均能抑制IκB磷酸化,减少NF-κB核转位的发生,且配伍组的效应大于各有效成分单用,4种有效成分配伍组的效应大于ASTⅣ+Rb1和ASTⅣ+Rg1组。结论黄芪和三七的主要有效成分配伍能通过抑制缺血/再灌注后脑组织NF-κB信号通路的激活,减少炎性细胞因子的生成,从而减轻脑缺血后脑组织的继发性炎症反应,发挥对脑组织的保护作用。     

益心通脉颗粒HPLC指纹图谱及多成分含量考察

摘要：目的:建立益心通脉颗粒HPLC指纹图谱,并测定哈巴苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、阿魏酸、甘草苷、丹酚酸B、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、丹参酮ⅡA的含量。方法:用75%甲醇水溶液提取该样品细粉,采用Phenomenex Luna-C18色谱柱（250 mm×4.6 mm, 5μm）,流动相为乙腈（A）-0.05%磷酸溶液（B）,梯度洗脱;检测波长为205,260 nm,柱温:30℃,流速:1.0 ml·min-1,进样量:10μl。结果:16批样品中有31个共有峰,相似度均大于0.98。8个成分在试验范围内线性关系良好（r≥0.999 4）,平均加样回收率为98.19%～99.33%,RSD为0.8%～1.4%（n=6）。结论:所建立方法稳定简单,指纹图谱结合多成分含量测定为益心通脉颗粒的质量评价提供了试验依据。