孕期边缘性维生素A缺乏对新生大鼠VA营养及LRAT的影响

目的:探讨孕期边缘性维生素A缺乏(Marginal vitamin A deficiency,MVAD)对胎鼠维生素A(Vitamin A,VA)营养及VA储存关键酶:卵磷脂视黄醇酰基转移酶(Lecithin retinol acyltransferase,LRAT)的影响.方法:16只健康成年雌性Wistar大鼠(260～300 g)随机分为正常对照(Control)组和MVAD组,每组8只,成功制备上述模型后,与正常雄性Wistar大鼠合笼.收集孕鼠和胎鼠血清、肝脏组织.采用高效液相色谱法测定VA含量;分别采用RT-PCR和Western blot技术检测肝脏LRAT在mRNA水平和蛋白水平上的变化.结果:MVAD组孕鼠,胎鼠血清VA,肝脏VA明显低于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.001);同时,相对于Control组,MVAD组LRAT mRNA和蛋白水平明显下调(P<0.00).结论:孕期MVAD,胎鼠的血清维生素A水平明显下降,不能满足肝脏VA储存.血清VA水平不能很好地反映机体VA营养的真实水平,肝脏VA含量更能准确反映机体VA含量.LRAT在维生素A储存过程中起着关键作用.     

边缘型维生素A缺乏对幼鼠铁营养状况和免疫功能的影响

目的研究边缘型维生素A缺乏（MVAD）对幼鼠铁营养状况和免疫功能的影响。方法实验分为正常对照组和MVAD组。正常对照组母鼠和幼鼠均给予维生素A（VA）充足饲料;MVAD组母鼠和幼鼠均给予边缘型维生素A缺乏饲料。待两组幼鼠长至7周龄后,测定血清VA、血清铁（SI）、血清铁蛋白（SF）、血红蛋白（Hb）、肝脏铁（LI）含量。MTT法检测T淋巴细胞增殖功能。LDH释放法检测NK细胞杀伤活性。结果与对照组比较,MVAD幼鼠血清铁水平降低,且MVAD幼鼠肝脏铁含量、血清铁蛋白含量显著降低（P〈0．05）。MVAD幼鼠的胸腺及脾脏指数、脾淋巴细胞增殖反应、NK细胞杀伤活性显著低于对照组（P〈0．05）。结论MVAD可能通过影响铁吸收、储存、转运。改变幼鼠体内铁的营养状况;大鼠孕期、哺乳期MVAD可能抑制幼鼠的免疫功能。     

维生素与阿司匹林合并应用对孕鼠及其胚胎发育的影响

观察了大剂量阿司匹林（aspirin）对大鼠妊娠和对其胚胎的致畸作用，以及维生素A、C、E和叶酸与aspirin合并用药对孕鼠及其胚胎发育的影响。结果；与正常组相比，大剂量aspirin可使孕鼠体重减轻（P＜O.01），胚胎吸收率增加18.66％、胚胎身长减短（P＜0.05）、存活率下降（P＜0.01)，且出现NTD和背颈部皮下淤血。维生素与其合并用药后，胚胎的吸收率和存活率与单用as-pirin相比，虽没有明显变化，但无NTD出现，背颈部皮下淤血减少（P＜0.05），说明维生素类与as-pirin合并用药可明显降低aspirin的毒性，预防其致畸作用。     

几种维生素对猪血清免疫性肝纤维化大鼠抗氧化损伤的研究

①目的 探讨几种维生素对肝纤维化大鼠的抗氧化损伤作用.②方法 用维生素C（vitamin C,VC）,维生素E（vitamin E,VE）,维生素A（vitamin A,VA）和β-胡萝卜素（β-carotene β-CAR）,干预免疫性肝纤维化大鼠,检查大鼠肝组织病理学变化,检测血清中超氧化歧化酶（superoxide dismutase,SOD）的活性、肝脏中过氧化氢酶（catalase,CAT）的活性,以及血清和肝脏中的丙二醛（malonaldehyde,MDA）含量变化.③结果 VC、VE、VA和β-CAR组的肝纤维化半定量计分,分别为（13.13±7.54）、（5.06±3.60）、（8.00±4.14）、（6.25±4.47）分;各维生素处理组的抗氧化指标（SOD,CAT和MDA）和模型对照组相比均有不同程度的改善（P＜0.05）.④结论 VC、VE、VA和β-CAR均有抗肝纤维化作用,且对免疫性肝纤维化大鼠有不同程度的抗氧化损伤的作用.     

维生素A对孤独症模型大鼠行为学的影响

目的：探讨维生素A（vitamin A,VA）对丙戊酸钠（sodium valproate acid,VPA）诱导的孤独症模型大鼠行为学的影响。方法：对孕12.5 d Wistar大鼠进行单次腹腔注射,注射物分别为VPA（600 mg/kg）和等量生理盐水,将出生雄性子鼠分为3组：对照组（VPA组,n=11）、维生素A治疗组（VPA+VA组,n=12）以及生理盐水组（SAL组,n=11）。从生后第7天开始对VPA+VA组大鼠以50 000 U/2.5 kg剂量的VA（豆油溶解）灌胃,其余两组予以等量的豆油灌胃,持续7 d。3组大鼠在生后第21天和第49天时进行眶静脉采血,比较3组血清VA浓度变化;3组大鼠生后第35天开始按序进行开场实验、三室实验、埋珠实验和水迷宫实验,比较3组的行为表现。结果：与SAL组相比,VPA组重复刻板行为增加、社会交往能力下降、自发活动水平增强、空间学习记忆能力减弱（P＜0.05）;②经VA治疗后,VPA+VA组与VPA组相比,社交能力增强、自发活动水平减轻、空间学习记忆能力增强（P＜0.05）,重复刻板行为无明显改善（P＞0.05）。结论：维生素A能够改善VPA诱导的孤独症模型大鼠的行为学表现。     

被动吸烟对雌鼠垂体生殖激素及其胚胎发育影响的研究

目的 观察被动吸烟对雌性Wistar大鼠垂体生殖激素和胚胎发育的影响.方法 健康雌性Wistar大鼠80只,体重为（200±10）g.随机分为对A,B,C,D,E组5组,每组16只.A组和B组为正常对照组,C,D,E组为被动吸烟组.被动吸烟组被动吸烟3个月,建立被动吸烟模型.被动吸烟3月后,取A组和C组大鼠,心脏取血,应用ELISA检测血清FSH和LH水平.B组、D组和E组大鼠雌雄合笼,计数怀孕大鼠.D组大鼠怀孕后停止吸烟,和B组在正常条件下饲养;E组继续被动吸烟.怀孕20d解剖孕鼠,记录每组胚胎植入数,活胎、吸收胎、死胎、畸胎数及胎重、身长、尾长等.结果 成功模拟年轻女性建立了被动吸烟模型;C组大鼠血清中FSH和LH水平明显低于A组（P＜0.05）.D组和E纽大鼠受孕率明显低于B组（P＜0.01）.D,E组大鼠与B组相比,及E组与D组相比吸收胎、死胎率升高,胎鼠体重、身长、尾长明显降低（P＜0 05）.结论 被动吸烟严重影响雌性大鼠垂体功能、受孕率和胚胎发育.雌鼠长期被动吸烟孕后戒烟,并不能完全消除对胚胎发育的影响.     

维生素与阿司匹林合并应用对孕鼠及其胚胎发育的影响

观察了大剂量阿司匹林对大鼠妊娠和对其胚胎的致畸作用，以及维生素Ａ、Ｃ、Ｅ和吉酸与ａｓｐｉｒｉｎ合并用药对孕鼠及其胚胎发育的影响，结果：与正常组相比，大剂量ａｓｐｉｒｉｎ可使孕鼠体重减轻（Ｐ＜０．０１），胚胎吸收率增加１８．６６％、胚胎身长减（Ｐ＜０．０５）、石头活率下降（Ｐ＜０．０１），且出现ＮＴＤ和北颈部皮下淤血。维生素与其合并用药后，胚胎的吸收率和存活率与单用ａｓｐｉｒｉｎ相比，虽没有显著变化     

针刺对胚胎着床障碍大鼠子宫内膜CCR2的影响

目的观察针刺对胚胎着床障碍大鼠子宫内膜趋化因子受体CCR2表达的影响。方法将72只孕鼠随机分为正常组（N ）、胚胎着床障碍组（M ）、针刺治疗组（A ）和黄体酮治疗组（W ）,每组随机再分为第6天组（D6）、第8天组（D8）、第10天组（D10）。其中M 组、A 组和W 组大鼠妊娠第1天给予米非司酮麻油溶液造模,N 组仅给予等量麻油溶液。同时,A 组固定并每天针刺三阴交、后三里,N 组和M 组仅固定,W 组肌肉注射黄体酮,直至处死。用免疫组织化学法、Western blot 和 Real-time PCR等方法测定着床点子宫内膜 CCR2的表达。结果与 N 组相比,M 组大鼠子宫内膜 CCR2蛋白和mRNA的表达均明显降低,差异有统计学意义（P＜0.05）;与 M 组相比,A 组和 W 组大鼠子宫内膜CCR2蛋白和 mRNA 的表达则明显增高（P＜0.05）。结论针刺能上调胚胎着床障碍大鼠母胎界面CCR2的表达,从而促进胚胎的着床和胎盘的形成。     

孕期维生素A缺乏对大鼠子代肝脏脂质合成的影响

目的 通过孕期维生素A(VA)缺乏大鼠模型,探讨孕期VA缺乏对子代肝脏组织中脂质合成的影响.方法 建立大鼠孕期VA缺乏模型,分VA正常(VAN)、VA缺乏(VAD)、VA缺乏后补充(VAS)3组,检测子代血脂水平;肝脏中乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)、脂肪酸合成酶(FAS)、固醇调节元件结合蛋白(SREBP1)等脂质合成分子的mRNA表达变化;观察子代肝脏组织切片HE染色后脂滴沉积情况.结果 VAD组的HDL-C水平显著低于VAN组和VAS组(P＜0.05),而VAN组和VAS组之间差异无统计学意义(P＞0.05).TG水平在3组间差异有统计学意义(P＜0.05).VAD组ACC1、FAS、SREBP1 mRNA表达水平显著增加.VAD组肝脏出现较多的脂滴沉积,细胞质中有部分脂滴空泡;而VAS组和VAN组肝细胞排列规则,未见明显脂滴沉积.结论 孕期VA缺乏可诱发大鼠子代肝脏脂质合成通路的异常活化,造成质脂代谢紊乱.     

不同胚龄人神经前体细胞分离培养及分化特性的比较

目的 研究不同胚龄人神经前体细胞(neural progenitor cell,NPC)培养及增殖分化特性.方法 取人胚原代细胞分为小胚龄全脑组、较大胚龄全脑组及较大胚龄纹状体组,悬浮培养.鉴定细胞球巢蛋白抗原的表达,分化及自我更新能力.观察各组培养细胞的生长、增殖状况.运用免疫荧光细胞化学法比较各组神经球分化后,神经元及星形胶质细胞的比例.结果 各组培养出的悬浮细胞球巢蛋白抗原阳性,可分化为MAP2或GFAP阳性细胞,BrdU掺入实验阳性.培养1周时,较大胚龄纹状体组的神经球数目最多,形态最规则,其次分别为小胚龄全脑组、较大胚龄全脑组.采用有限稀释法可从较大胚龄纹状体组挑选单细胞克隆球.各组NPC诱导分化后,MAP2或GFAP阳性细胞率组间比较差异无显著性.结论 不同胚龄人脑组织均可培养出NPC.取全脑时,随着胚龄的增加,NPC培养难度增大,但针对不同胚龄可采用不同的原代取材方法.不同胚龄NPC的星形胶质细胞及神经元分化比例一致.     

高温和香烟对鼠早期胚胎脑HSP70及蛋白质的影响

目的　探讨高温、香烟及其联合对鼠胎脑热休克蛋白 70 (HSP 70 )及蛋白质合成的影响。方法　孕d 10的大鼠给予高温 (4 0～ 42℃ )和香烟烟雾水溶物 (0～ 2支 /只鼠 )处理 ,取胎鼠全脑 ,用Westerndotblot和Lowrey方法测量HSP 70和蛋白质含量。结果　高温 (4 0～ 41℃ )、高浓度的香烟烟雾 (1.5支 /只鼠和 2 .0支 /只鼠 )及其联合与对照组比较胎脑蛋白质明显减少 ,与温度、温度持续时间及香烟浓度明显相关 ,并且高温与香烟具有联合作用 ;结果还显示高温和高浓度香烟均使胎脑HSP 70明显升高 ,高温与香烟联合其胎脑HSP70合成量与单独高温组相比HSP 70变化不明显。结论　高温、香烟烟雾及其联合可引起胎脑蛋白质含量减少 ,并诱导胎脑HSP 70合成 ,但香烟的诱导作用较高温弱 ,与高温联合胎脑HSP70的合成表现出交叉适应性反应。     

铅对生长发育期小鼠脑组织一氧化氮含量的影响

目的　研究铅对生长发育期小鼠脑组织一氧化氮 (Nitricoxide ,NO)含量的影响。方法　将 6 2只Babl/C近交系小鼠随机分成四组 :高铅组 (0 .0 75 %醋酸铅 )、中铅组 (0 .0 5 %醋酸铅 )、低铅组 (0 .0 2 5 %醋酸铅 )、对照组(蒸馏水 ) ,每组小鼠用相应浓度的醋酸铅溶液经饮水染毒 8周后 ,测定小鼠脑组织NO含量。结果　各铅染毒组与对照组相比体重增长减缓 ,其中 0 .0 75 %组体重增长减缓显著 (P <0 .0 5 )。与对照组相比 ,铅染毒小鼠脑内NO含量下降 ,其中 0 .0 75 %组与对照组比较下降明显 (P <0 .0 1)。结论　铅染毒使生长发育期小鼠体重增长减缓 ,且抑制小鼠脑内NO的合成。     

大鼠胚胎神经干细胞的分离培养和分化

探索大鼠胚胎神经干细胞的分离、培养和传代等方法,并用血清促使分化为神经元细胞、星形胶质细胞和少枝胶质细胞。方法从胚胎大鼠脑组织中分离得到神经干细胞;在无血清条件下,对神经干细胞进行培养、传代;用神经上皮干细胞蛋白（Nestin）对神经干细胞进行箍定;用免疫荧光方法对分化后神经干细胞进行神经纤维丝蛋白（NF68）、神经胶质酸性蛋白（GFAP）和半乳糖脑苷脂（Gale）染色。结果成功得到神经干细胞,并且进行多次传代培养。血清能促使其分化成为神经元细胞、星形胶质细胞和少枝胶质细胞。结论大鼠胚胎神经干细胞能够在体外适宜的条件下能大量增生,并且具有多向分化潜能。     

维生素A缺乏对大鼠肾脏ABCA1介导的脂质外流途径的影响

目的 探讨维生素A缺乏(vitaminA deficiency,VAD)大鼠模型肾脏脂质代谢状况及相关分子机制.方法 从孕期开始,给予Wistar大鼠正常饮食(正常对照组,维生素A含量为4000 IU/kg的饲料), VAD饮食(VAD组,维生素A含量为400 IU/kg的饲料),持续至8周后VAD组继续补充维生素A (VAS组,维生素A含量为6500 IU/kg的饲料) 15 d,每组6只.免疫组化分析肾脏载脂蛋白B100 (Apo-B100)、三磷酸腺苷结合盒转运体A1(adenosine triphosphate binding cassette A1,ABCA1)表达,Real-time PCR技术检测肾脏ABCA1、过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)、肝X受体α(LXRα)、视黄醇X受体α/β (RXRα/β) mRNA水平. 结果免疫组化分析,第8周VAD组肾脏Apo-B100水平(14.27±0.05)明显高于正常对照组(8.25±0.49)(P<0.05);与第8周正常对照组(37.44±0.46)比较,VAD组肾脏ABCA1表达(24.53±0.86)降低(P<0.05).Real-time PCR检测,与正常组比较,第8周VAD组肾脏ABCA1表达上调,VAD组RXRα/β、LXRα mRNA水平降低,差异有统计学意义(P<0.05), 而PPARα mRNA水平无明显改变(P>0.05);以上改变随维生素A补充即恢复至正常水平.结论 VAD可致PPARα/RXRs-LXRα/RXRs-ABCA1介导的脂质外流途径受损而导致大鼠肾脏脂质沉积增多,但及时补充维生素A能有效使肾脏脂质代谢恢复正常.     

青刺果黄酮对糖尿病大鼠肾组织c-fos基因表达上调的抑制作用

目的探讨青刺果黄酮对糖尿病大鼠肾组织c-fos及c-jun基因表达的影响。方法大鼠随机分为正常对照组（A组）、糖尿病组（B组）及青刺果黄酮治疗组（C组）,采用腹腔单剂量注射链脲佐菌素65mg·kg^-1建立糖尿病大鼠模型。治疗组给予青刺果黄酮300mg·kg^-1·d^-1腹腔注射。分别于第2周和4周末各组随机抽取4只大鼠处死,取肾脏称重;取第4周5只大鼠部分右肾皮质,采用RT-PCR及免疫组织化学方法检测青刺果黄酮对糖尿病大鼠肾组织c-foszaBNA、c-junmRNA及其蛋白表达．的影响。结果糖尿病大鼠肾脏指数显著增加,治疗组肾脏指数显著降低;糖尿病大鼠肾组织c-fosmRNA、c-junmRNA及其蛋白表达明显上调,青刺果黄酮可显著抑制上述指标的表达。结论青刺果黄酮通过抑制糖尿病大鼠肾组织c-fos及c-jun基因表达上调而减轻糖尿病大鼠肾脏损伤。     

低剂量γ射线与香烟对胎鼠脑蛋白质及热休克蛋白的影响

目的　探讨低剂量γ射线、香烟及其联合作用对脑蛋白质及热休克蛋白 (HSP70 )合成的影响。方法　利用Westerndotblot和Lowrey方法对经低剂量γ射线 (6 0 Co,0～ 1.0Gy)和香烟烟雾 (0～ 2支 /只 )处理的孕鼠的胎脑蛋白质和HSP70进行定量研究。结果　 0 .2 5Gy以上的照射和高浓度的香烟烟雾(2支 /只 )与对照组比较胎脑蛋白质明显减少 ,并且低剂量γ射线与香烟具有联合作用 ;低剂量γ射线、香烟烟雾及其联合作用下 ,胎脑HSP70明显升高 (P <0 .0 1) ,其中高照射组和高浓度香烟组脑HSP70升高明显低于低照射组和低浓度香烟组 (P <0 .0 1) ,照射与高浓度的香烟组联合明显较单独照射组低 ,有剂量依存关系。结论　低剂量γ射线、香烟及其联合可引起脑蛋白质的含量减少 ,并诱导胎脑HSP70的合成 ,提示胎脑发育损伤与脑蛋白和HSP70的合成有一定关系。     

大鼠脑外伤后胎脑移植的增殖细胞核抗原和Bcl-2的表达

目的:研究大鼠脑外伤后胎脑移植的增殖细胞核抗原(PCNA)和Bcl-2的表达.方法:自由落体撞击法制作脑外伤模型,延迟2周作创伤灶内胎脑细胞移植,伤后6周观察创伤灶HE染色,PCNA和Bcl-2的免疫组化染色、计数.结果:伤后均表现为胶质细胞和毛细血管的增生,胎脑移植后更明显;PCNA表达两者基本相同;Bcl-2在单纯损伤组未见表达,而在损伤后移植组明显表达.结论:胎脑移植可促进创伤脑区Bcl-2表达,对脑外伤引起的神经细胞死亡具有保护作用.     

维生素D中毒剂量的动物实验研究

将兔分组肌注维生素Ｄ０．５万，１万，３万及６万ＩＵ／ｋｇ，观察血清２５－羟维生素Ｄ与血清钙含量的变化及给药后４周，１２周肾脏和心血管的病理改变。结果显示：各实验组血清２５－ＯＨＤ给药后２－０４周上升达高峰，与对照组有显著性差异；与用药剂量呈正相关。