TNF-α对骨巨细胞瘤u-PA系统表达的调节及意义

目的探讨TNF-α对骨巨细胞瘤u-PA系统mRNA表达的调节及意义。方法骨巨细胞瘤原代培养及传代,加入外源性TNF-α,观察加入TNF-α前后细胞生长特性的变化,流式细胞分析仪检测细胞的增殖指数,RTPCR检测u-PA系统mRNA的表达。结果原代培养过程中可见到三种细胞:多核巨细胞(MGC)、巨噬细胞样单核细胞(MC)及纤维母细胞样单核细胞(FC),传代几次以后只有FC及MC;RT-PCR检测细胞中有u-PA、uPAR及PAI-1mRNA表达,加入TNF-α后mRNA的表达较加入前增高(P<0.05);流式细胞分析仪检测细胞的增殖指数(PI),加入TNF-α后PI值较加入前增高(P<0.05)。结论外源性TNF-α促进骨巨细胞瘤原代培养细胞u-PA系统mRNA的表达及细胞增殖。     

骨巨细胞瘤DNA图像分析

目的 探讨骨巨细胞瘤病理分级与ＤＮＡ含量和倍体的关系。方法 将３６例骨巨细胞瘤进行Ｆｅｕｌｇｅｎ染色,然后用彩色图像分析系统进行ＤＮＡ含量和倍体测定。结果 骨巨细胞瘤各病理分级之间的ＤＮＡ含量和倍体差异均无显著性。结论传统的Ｊａｆｆｅ分级已不能全面反映骨巨细胞瘤的生物学行为 。     

人骨巨细胞瘤细胞系GCT-0404的建立和生物学特性

目的:研究骨巨细胞瘤细胞体外培养的生物学特性,并建立人骨巨细胞瘤细胞系. 方法: 采用原代组织块培养法培养骨巨细胞瘤手术标本,对存活细胞进行形态学观察、免疫组织化学染色、细胞周期检查、核型分析、裸鼠移植. 结果: 建立人骨巨细胞瘤细胞系GCT-0404,其形态学表现、免疫组织化学染色均符合骨巨细胞瘤纤维母细胞样基质细胞的特征. 经过近1 a的体外培养,现已传代100次,细胞倍增时间39.7 h,细胞周期测定G1期为67.5%,G2期为8.9%,S期为23.6%. 染色体具有三倍体核型. 裸鼠移植成瘤率100%,无支原体污染. 结论: 人骨巨细胞瘤细胞系GCT-0404可以用于对骨巨细胞瘤的研究.     

颅骨恶性骨巨细胞瘤术后复发1例

骨巨细胞瘤是原发性骨肿瘤,组织学起源为中胚叶组织的破骨细胞,多发生于长骨骨端,其次为椎骨、肋骨及盆骨,原发于颅骨的骨巨细胞瘤较少见．延边大学附属医院收治了1例颅顶骨恶性骨巨细胞瘤病例,现报告如下．     

骨巨细胞瘤25例治疗体会

骨巨细胞瘤是常见的骨原发性肿瘤之一,来源尚不清楚;骨巨细胞瘤好发于长骨端,呈偏心性生长,但很少穿过关节面,瘤细胞生长活跃、骨质侵蚀性强、破坏迅速,被归类于低度恶性或潜在恶性肿瘤.骨巨细胞瘤易复发及恶变,很难一次性治愈,2010-2013年我院收治骨巨细胞瘤患者25例,本文就治疗体会报告如下.     

骨巨细胞瘤体外培养观察

对３例骨巨细胞瘤采用组织块培养法和单层培养法进行体外培养，３例原代培养全部成活，生存日数２６－６６日，例１共传５代，例２共传３代，例３传１代。单核间质细胞可见有丝分裂，并敏殖传代，而多核巨细胞不能繁殖传代，培养结果说明单核间质细胞是骨巨细胞瘤的实质性细胞。     

食指、尺骨下端骨巨细胞瘤3例

<正> 骨巨细胞瘤,又称破骨细胞瘤,为原发骨组织肿瘤之一,局部破坏性较大,是生长活跃的肿瘤。经常有复发、恶变转移的倾向。 我院收治3例骨巨细胞瘤行搔刮术或截骨3例中2例为短管状指骨,搔刮术后未行植骨,1例尺骨下端截骨,植骨术后观察2年。3例骨巨细胞瘤,例1,男性,10岁,近节第二指骨;例2,男性,16岁,近节第一拇指指骨;例3,男性,18岁,尺骨下端,拍片骨呈不规则小泡沫溶骨改变,向一侧扩张膨胀,骨皮质变薄,软组织肿胀,未侵蚀骨骺线,指骨两骨骺端有部分正常骨小梁,病理回报,骨巨细胞瘤(Ⅱ级)。     

星形细胞瘤细胞的原代培养及形态学研究

目的:通过建立人星形细胞瘤细胞原代培养的方法,观察不同级别星形细胞瘤细胞的生长状态及形态学特点。方法:应用胰蛋白酶消化法,对不同级别的新鲜星形细胞瘤手术标本进行肿瘤细胞原代培养及传代培养,通过调整培养参数,观察肿瘤细胞的生长情况,并从形态学及细胞免疫组化染色等方法进行研究。结果:Ⅱ级及以上的星形细胞瘤均成功进行原代细胞培养,Ⅲ及Ⅳ级星形细胞瘤还成功获得传代培养,并表达免疫组化GFAP,不表达Ⅳ胶原。结论:星形细胞瘤细胞的原代培养可以用胰酶消化法成功培养,培养显示,不同级别的星形细胞瘤其生长活性不同,与其恶性生物学行为呈密切相关。     

骨巨细胞瘤内多核巨细胞的超微结构观察

本文观察了六例骨巨细胞瘤,探讨了多核巨细胞的超微結构改变,其组织发生有迹象表明由单核基质细胞融合形成的。根据形态特征、恒定存在和生物学行为综合分析,认为多核巨细胞也是骨巨细胞瘤的实质瘤细胞。     

细胞DNA含量与大肠癌临床分期及生物学特性的关系

为进一步探讨大肠癌DNA倍体与临床分期及生物学特性的关系,采用流式细胞仪对86例大肠癌患者手术切除的新鲜大肠癌标本细胞DN A含量进行了检测.结果显示:本组病例中41例(47.7%)为二倍体;45例(53.3%)为非二倍体.DNA倍体与性别、年龄、分化程度、肿瘤部位无关,但与Dukes'分期相关,Dukes' A期肿瘤病例DNA二倍体比Dukes'B、C、D期肿瘤病例更常见;Dukes' B～D期肿瘤病例之间DNA倍体分布无明显差异;局部有淋巴结转移肿瘤病例DNA非二倍体更常见.提示DNA倍体与临床分期、淋巴结转移有关.     

人骨巨细胞瘤细胞DNA含量的研究

将体外培养的人骨巨细胞瘤第四代和第五代瘤细胞,进行~3H—TdR放射自显影术和Feulgen反应,先计算出银粒标记细胞(S,G_2)的增殖比率,再用显微分光光度法测定未被标记的细胞(G_0和G_1期)的DNA含量。结果,第四代单核瘤细胞DNA含量为亚四倍体值((?)=87.36,DI=1.83),第五代单核瘤细胞DNA含量为超四倍体值((?)=118.13,DI=2.47).两代瘤细胞DNA含量经统计学处理,有显著差异(P<0.01),证实了骨巨细胞瘤细胞长期传代培养可以恶化。     

骨巨细胞瘤中多核巨细胞的纯化及其性质的探讨

目的 :利用酶消化方法对骨巨细胞瘤中多核巨细胞进行纯化 ,以弥补破骨细胞获取量少的问题 ,为骨质疏松的体外研究提供丰富的细胞来源。并用免疫组化的方法对骨巨细胞瘤中多核巨细胞的性质和来源进行探讨。方法 :体外分离培养 8例骨巨细胞瘤的多核巨细胞 ,在培养 2 0h后 ,用 0 .5 g·L-1胰蛋白酶 / 0 .2 g·L-1EDTA联合消化的方法去除贴壁能力较弱的单核基质细胞。将分离培养的骨巨细胞瘤多核巨细胞与牙磨片共培养 ,观察骨巨细胞中多核巨细胞的噬骨能力。并用破骨细胞特异表达的空泡型质子泵、Ⅱ型碳酸酐酶、组织蛋白酶K、基质金属蛋白酶 9对多核巨细胞进行免疫组化染色和TRAP染色。结果 :利用酶联合消化的方法可以获得较高纯度的多核巨细胞 ,纯化率达 85 %。骨巨细胞瘤中的多核巨细胞对破骨细胞所特异表达的空泡型质子泵、Ⅱ型碳酸酐酶、组织蛋白酶K、基质金属蛋白酶 9呈强阳性表达 ,TRAP染色阳性 ,体外培养具有噬骨能力。结论 :利用 0 .5 g·L-1胰蛋白酶 / 0 .2g·L-1EDTA消化的方法可获得较高纯度的多核巨细胞 ,可为破骨细胞体外研究提供丰富的细胞来源。骨巨细胞瘤中的多核巨细胞在功能表达上与破骨细胞相似 ,它可能来源于病变中圆形单核基质细胞的融合     

人脐血间充质干细胞的改良分离培养

目的探讨人间脐血来源的充质干细胞在体外分离培养与扩增的方法。方法用重力离心-密度梯度离心法结合贴壁筛选法分离细胞,用含15%FBS的DMEM低糖培养基培养并传代,流式细胞仪检测P3代间充质干细胞的表面标志。结果脐血来源的单个核细胞24 h即开始贴壁,主要表现为破骨样细胞和间充质样细胞。经自然纯化法传代后,可得到形态单一的长梭形间充质干细胞。流式细胞仪检测结果显示该细胞表达CD44。结论脐血来源的MSCs可以在体外分离培养和扩增,细胞表面标记与骨髓来源间充质干细胞一致。     

大鼠骨髓间充质干细胞分离和培养方法的研究

目的研究在体外培养和纯化SD大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的方法。方法采用改良全骨髓贴壁方法,分离和纯化3～4周的大鼠BMSCs,镜下连续观察细胞的形态变化。流式细胞仪鉴定其表面抗原CD45和CD29的表达情况。结果原代培养的细胞呈圆形和梭形等,24 h后大部分细胞均贴壁。8～10 d可达80%～90%融合,纯化后传代周期为6～8 d。流式细胞术鉴定表明CD45阴性,CD29阳性。结论改良全骨髓贴壁法可有效分离培养大鼠的骨髓间充质干细胞,是一种比较理想的分离培养方法。     

人骨髓间充质干细胞分离培养及多向分化的实验研究

目的:探索体外分离子与培养人骨髓间充质干细胞的方法,同时研究其细胞生物学特性,分析其作为骨组织工程种子细胞的可行性。方法:分离人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stemcells,hBMSCs),通过常规培养,在体外观察其生长特性、抗原表达等特征;然后通过条件培养基定向诱导,观察其分化潜能。结果:人骨髓间充质干细胞在体外可以大量增殖,常规培养条件下,原代培养需要2～3周,转代后生长速度加快;应用流式细胞仪检测MSCs的表面抗原,CD44、CD29、CD105阳性,CD45、CD06、CD34以及HLA-DR阴性;在相应条件培养基的诱导作用下,MSCs可以分化为成骨细胞、软骨细胞以及神经细胞。结论:人骨髓间充质干细胞可以从骨髓中分离并在体外培养增殖,同时在体外具有多向分化潜能,可以分化成为骨细胞,符合骨组织工程种子细胞的要求。     

CYTOLOGICAL CHARACTERISTICS OF MAIN CELLULAR ELEMENTS IN BFNIGN AND MALIGNANT GIANT CELL TUMOR OF BONE

Cytological characterist;cs of three main cellular elements iii benign and malignant giant cell tumor of bone were investigated by cytochemistry, tissue ccilture. electron microscopy and microspectropho. toinetry. The macrophage (MO), as identified by EA rosette assay, and the multinucleated giant celf (MGC) had similar enzyme activities, which differed from those of the non rosette-forming cell (NRFC). MO and MGC of malignant giant cell tumor of bone (MCCT) did not proliferate in vitro while ;ts NRFC could maintain seri81 growtfi with concomi tant formation of some multinuclear cells which are clifferent from MCC in the light and eleccron of atypical MCCs were certain aspects. Under both microscope a small number found in MGCT. The;r nii clei varied in size and shape. The NRFC in MGCT showed more prominent ritypical ultrastructural features. Part of the NRFCs had aneuploid DNA content above 4C (-4C), which is generally consi dered as the evidence of rnalignancy. Some nuclei i" the MGCs of MGCT contained }40 DNA con tent, but not those in MGCs of benign giant cell tumor of bone. Usually, no aneupaoidy was detected in MO of all the samples with the exception of one MGCT sample. in which l O% M¢ contains :4C DNA content. Iri the in virro labelling, :II-TdR labelled NRFC were in varying percentage, but labelled MO and MGC were infrequently found. The circumstan tial evidences suggest a close relationship exists be. tween M¢ and MGC: but NRFC presents neoplastic featurea. The atypical giant cells in MGCT might be of tumor origin.     

ULTRASTRUCTURAL INVESTIGAT10N OF GIANT CELL TUMOR OF BONE

The surface and internal ultrastructure of multinuclear giant cells and stromal cells are studied in 3 cases of giant cell tumors of bone by means of scanning electronmicroscope and transmission electronmicroscope. The fibroblast- like type of stromal cells was the principal stro- mal cell and has the function of forming collagen. Like the fibroblastic type of stromal cells, the multinuclear giant cells can also be deemed as true tumor cells. Various surface ultrastruct- ural configurations of the multinuclear giant cells can be attributed more to heightened me- tabolism than to manifestation of malignancy.     

肺软组织恶性巨细胞瘤(附1例病例报告)

软组织恶性巨细胞瘤较少见,发生于肺内者国内尚未见报道。对于其组织学来源尚无定论。本文报告1例肺软组织恶性巨细胞瘤,其主要组成为破骨细胞样巨细胞及单核性瘤细胞,组织学上颇似骨巨细胞瘤。通过特殊染色及免疫组化研究,确定其组织来源为组织细胞。