塞来昔布联合奥曲肽抑制胃癌转移的体内试验研究

目的探讨塞来昔布联合奥曲肽能否抑制人胃癌细胞转移。方法75例胃癌患者被随机分为3组,每组25例。(1)对照组:术前不用任何抗肿瘤药物。(2)塞来昔布组:术前口服塞来昔布200mg/d,7d。(3)联合组:术前口服塞来昔布200mg/d(7d)+奥曲肽100μg/d(皮下注射7d)。免疫组化显示胃癌上皮性钙黏附蛋白(E-Cad)及基质金属蛋白酶(MMP)的表达,免疫印迹法定量检测胃癌组织MMP-2及MMP-9蛋白表达。术后胃癌组织经消化、免疫磁珠分离而得原代胃癌细胞,用改良的BodyenChamber膜侵袭系统比较3组术后胃癌细胞运动能力。结果胃癌组织E-Cad异常表达率在联合组(28·0%)及塞来昔布组(44·0%)明显低于对照组(56·0%,P<0·05)。3组MMP-2、MMP-9蛋白条带面积光密度积分值分别为99±20、260±15、314±11及89±13、180±13、241±12,联合组及塞来昔布组也都明显低于对照组(P<0·05)。联合组胃癌细胞迁移力较对照组低了38%(P<0·05)。结论塞来昔布联合奥曲肽有助于抑制胃癌细胞在人体内的转移。     

塞来昔布联合吡咯烷二硫氨基甲酸对人鼻咽癌细胞株CNE-2Z生长的影响

目的 探讨塞来昔布与吡咯烷二硫氨基甲酸(PDTC)联合应用对人鼻咽癌CNE-2Z细胞株生长的影响及其可能机制.方法 实验分为对照组(不含任何药物)、塞来昔布组(含塞来昔布50μmol/L)、PDTC (含PDTC 50μmol/L)组和塞来昔布+PDTC (含塞来昔布、PDTC均为25μmol/L)组.细胞抑制率以四甲基偶氮唑蓝实验方法检测;CNE-2Z细胞周期以流式细胞仪检测;用免疫细胞化学染色法检测核因子(NF)-κB和环氧合酶(COX)-2蛋白的表达;用Western-blot方法检测含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-3蛋白表达.结果 塞来昔布、PDTC单独作用及塞来昔布+PDTC联合作用于鼻咽癌CNE-2Z细胞24 h、48 h、72 h细胞的生长均受到抑制(P<0.05),二药联合组与单独用药组比较,细胞的生长抑制率差异有统计学意义(P<0.05).塞来昔布+PDTC联合用药作用于细胞48 h后G0/G1期细胞比例明显高于塞来昔布组和PDTC组,抑制效果更显著(P<0.05).免疫细胞化学染色显示塞来昔布+PDTC组NF-κB、COX-2的表达明显低于单独用药组(P<0.05).Western-blot实验示联合用药组Caspase-3蛋白表达高于单独用药组(P<0.05).结论 Cox-2抑制剂塞来昔布联合PDTC能够显著抑制人鼻咽癌细胞株CNE-2Z增殖,其机制可能是通过降低COX-2、NF-κB表达,增强Caspase-3蛋白表达来实现.     

塞来昔布通过诱导人NAG-1基因表达抑制胃癌生长

目的 探讨环氧合酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布在人体内抑制胃癌及诱导非甾体类抗炎药物(NSAID)活化基因(NAG-1)的作用.方法 36例胃癌患者在接受胃癌根治术或胃大部切除术前随机分为2组.塞来昔布组:20例,术前口服塞来昔布,0.2 g,qd×7 d.对照组:16例,术前不用任何抗肿瘤药物.术中切除标本送组织病理学研究;采用DNA末端原位标记染色法检测胃癌细胞凋亡;免疫组化检测胃癌细胞COX-2表达;半定量RT-PCR技术检测两组胃癌组织NAG-1 mRNA表达.结果 塞来昔布组胃癌组织凋亡阳性细胞的积分光密度值高于对照组(180.20±42.67 vs 10.28±5.02,P<0.05),塞来昔布组NAG-1 mRNA(0.22±0.13)也较对照组(0.12±0.08)上调(P<0.05).两组COX-2蛋白表达率(75.0% vs 87.6%)差异无统计学意义.结论 塞来昔布在人体内通过诱导NAG-1基因转录,促进胃癌细胞凋亡.     

塞来昔布对Lewis肺癌细胞增殖及移植瘤的抑制作用

目的:探讨选择性环氧化酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布对Lewis肺癌细胞株增殖及小鼠皮下移植瘤的影响。方法:常规培养Lewis肺癌细胞,实验分为对照组和塞来昔布用药组。MTT法检测细胞增殖水平,损伤修复实验检测细胞迁移能力;将Lewis肺癌细胞接种于12只C57BL/6小鼠皮下,对照组隔日腹腔注射生理盐水;塞来昔布用药组隔日腹腔注射塞来昔布30 mg/kg,24 d后处死,计算抑瘤率,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测移植瘤组织中VEGF mRNA表达水平,同时酶联免疫检测小鼠血清中MMP-9浓度。结果:塞来昔布对Lewis肺癌细胞增殖的抑制作用呈时间-剂量依赖性效应(P<0.05)。20μmol/L塞来昔布组细胞迁移速度(0.37±0.03)μm/h明显减慢,与对照组(3.17±0.22)μm/h相比具有显著性差异(P<0.01);在体实验显示,塞来昔布具有明显的抑制Lewis肺癌移植瘤增殖的作用,同时能抑制移植瘤组织中VEGF表达、降低血清MMP-9浓度。结论:塞来昔布可以显著抑制Lewis肺癌细胞的增殖与迁移能力,且对Lewis肺癌移植瘤有明显抑制作用。     

联合应用干扰素α-2b及选择性环氧化酶2抑制剂对肝癌细胞抑制作用的研究

目的观察干扰素α-2b(IFN-α-2b),选择性环氧化酶2(COX-2)抑制剂非甾体类消炎药塞来昔布单用以及两者联合应用时,对人肝癌细胞株HepG2的生长抑制作用及同时检测药物作用后COX-2和血管内皮生长因子(VEGF)及Bcl-2表达的情况,探讨药物作用的机制。方法 HepG2细胞根据所加药物不同分为不同浓度的IFN-α-2b组(1250、2500、5000、10 000、20 000、40 000 U/mL)、塞来昔布组(25、50、100、200μmol/L)、联合用药组(IFN-α-2b 5000 U/mL+塞来昔布50μmol/L、IFN-α-2b 5000 U/mL+选择性COX-2 100μmol/L)。MTT法检测不同时间(24、48 h)各组细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot检测用药前后COX-2、VEGF、Bcl-2蛋白在HepG2细胞中的表达变化。结果不同浓度的塞来昔布和干扰素对HepG2细胞均有抑制作用,且联合效果明显优于单用,各组与对照组差异有统计学意义(P<0.05);流式细胞术分析:塞来昔布50μmol/L组、塞来昔布100μmol/L组、IFN-α-2b 5000 U/mL组、IFN-α-2b 5000 U/mL+塞来昔布50μmol/L组、IFN-α-2b 5000 U/mL+塞来昔布100μmol/L组细胞凋亡率分别为(14.93±0.79)%、(25.43±0.89)%、(20.52±1.46)%、(27.12±3.34)%、(48.17±2.04)%,与阴性对照组(8.73±0.83)%比较差异均有统计学意义(P<0.05);塞来昔布单用及联合IFN-α-2b作用48 h后,各组COX-2、VEGF、Bcl-2蛋白的表达下调,呈剂量依赖性,联合用药组较单药组作用明显。结论干扰素α-2b和塞来昔布均有抑制肝癌细胞HepG2增殖的作用,同时对细胞具有凋亡诱导作用,亦能抑制细胞中COX-2、VEGF、Bcl-2的表达。上述抑制作用随药物浓度的增加、作用时间的延长而增强,联合作用更强。     

非甾体类抗炎药促进神经元轴突生长机制研究

目的研究非甾体类抗炎药促进中枢神经元轴突生长的机制。方法分别培养PC12和DRG细胞,用轴突生长抑制蛋白硫酸软骨素蛋白聚糖(CSPGs)和髓磷脂(Mye)处理,再分别予奈普生、布洛芬、消炎痛、塞来昔布干预,以常用做细胞培养的中性等渗磷酸盐缓冲液(PBS)作为对照组。检测神经元轴突生长和RhoA活性。结果布洛芬组(Ibu)、消炎痛组(Indo)、塞来昔布组(Cel)与对照组(PBS)比较,能促进轴突生长(P<0.01),而奈普生组(Nap)与对照组差异无统计学意义。布洛芬组、消炎痛组、塞来昔布组的RhoA活性与对照组比较,能显著降低RhoA活性(P<0.01),而奈普生组与对照组差异无统计学意义。结论非甾体类抗炎药:布洛芬、消炎痛、塞来昔布,可能通过抑制RhoA活性促进神经元轴突生长。     

中效原理在胃癌联合化疗中的应用及药物抗癌机制的初步探索

目的 运用中效原理分析姜黄素联合顺铂或塞来昔布对胃癌SGC-7901细胞的化疗效应,并初步探索上述三种药物对胃癌的抗癌机制.方法 将实验组分为姜黄素组、顺铂组、塞来昔布组、姜黄素联合顺铂组、姜黄素联合塞来昔布组,用相应药物作用于胃癌SGC-7901细胞,阴性对照组为不含药物组.然后采用MTT法测定药物对SGC-7901细胞的增殖抑制率,并运用中效原理分析药物联用的效果;同时采用流式细胞术检测细胞凋亡率;实时荧光定量RT-PCR法检测COX-2 mRNA的表达;分光光度法检测Caspase-3的活性.结果 姜黄素、顺铂和塞来昔布组均能抑制SGC-7901细胞的增殖,且呈浓度依赖性;姜黄素与顺铂或塞来昔布联用时可增强这种抑制,表现为协同作用.上述三种药物均能诱导胃癌SGC-7901发生凋亡,两药联用组的细胞凋亡率较单药作用组均显著升高（均P＜0.01）.单药作用组细胞中COX-2 mRNA的表达较阴性对照组均显著下降（均P＜0.01）.单药作用组细胞中Caspase-3的活性较阴性对照组均显著升高（均P＜0.01）.结论 在一定药物浓度范围内,姜黄素、顺铂和塞来昔布均能抑制胃癌SGC-7901细胞的增殖、诱导其凋亡.姜黄素与顺铂或塞来昔布联用时均呈现协同作用,这可能与三药均能抑制COX-2 mRNA的表达、提高Caspase-3的活性有关.     

核因子κB在支气管哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞增殖中的作用

目的探讨核因子κB(NFκ-B)在支气管哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞(ASMCs)增殖中的作用。方法采用卵清蛋白(OVA)致敏OVA激发的方法制备大鼠哮喘模型。将18只Wistar大鼠分为:①哮喘组;②吡咯烷二硫氨基甲酸(PDTC)组:OVA激发前腹腔注射NFκ-B的特异性抑制剂PDTC(100 mg/kg);③对照组:注射及吸入等量生理盐水。采用流式细胞术、MTT法及增殖细胞核抗原(PCNA)免疫荧光技术等方法观察ASMCs增殖;免疫荧光技术及电泳迁移率改变分析(EMSA)检测NFκ-B活性;Western blot检测NFκ-B的抑制蛋白I-κBα表达。结果①PDTC组ASMCs S期比例、A值、PCNA阳性表达率分别为(11.77±3.37)%、(0.283±0.034)、(27.9±6.7)%,与哮喘组[(22.17±3.64)%、(0.469±0.050)、(77.3±8.4)%]比较均显著降低(均P<0.05),与对照组[(12.08±2.86)%、(0.302±0.059)、(25.3±3.8)%]比较差异均无显著性意义(均P>0.05)。②PDTC组ASMCs NFκ-B活性与哮喘组比较显著降低(P<0.05),与对照组比较差异无显著性意义。结论NF-κB参与哮喘大鼠ASMCs增殖,抑制NF-κB活性能降低哮喘大鼠ASMCs增殖。     

选择性COX-2抑制剂塞来昔布对转移性肾癌增殖和凋亡的影响

目的探讨COX-2抑制剂塞来昔布对转移性肾癌细胞增殖和凋亡作用的影响。方法选择21例转移性肾癌患者,均经口服选择性COX-2抑制剂塞来昔布每天两次每次400 mg连续治疗,直到疾病不再进展或达到患者不能耐受药物毒性而终止。分别于处理前、用后1周、4周、12周、24周、36周,采用Western blotting法检测COX-2表达,噻唑蓝(MTT)法检测转移灶癌细胞的增殖活性。流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果塞来昔布处理前、用后1周、4周、12周、24周和36周,肾癌细胞中的COX-2蛋白表达水平随着作用时间的延长,表达水平越低。口服塞来昔布后与服用前相比,COX-2表达明显降低。MTT法检测表明,12周、24周、36周塞来昔布的细胞抑制率分别为(4.3±1.17)%、(33.2±5.34)%、(53.4±5.87)%,显著高于处理前的(2.16±0.57)%,表明塞来昔布可以抑制转移性肾癌细胞的增殖。流式细胞仪检测结果,塞来昔布作用12周、24周、36周后的转移性肾癌细胞凋亡率分别为(8.42±0.3)%、(15.12±1.4)%、(32.16±2.1)%,与处理前凋亡率(3.13±0.4)%比较,凋亡率显著上升(P<0.01)。结论选择性COX-2抑制剂可能通过降低COX-2表达,抑制转移肾癌细胞增殖并诱导其凋亡。     

塞来昔布对子宫内膜癌细胞株HEC-1-B生长及其VEGF表达的影响

目的 研究塞来昔布对子宫内膜癌细胞株HEC-1-B的生长及其血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法 应用不同浓度的塞来昔布作用于HEC-1-B细胞,MTF法检测塞来昔布作用于HEC-1-B细胞24、48、72h后,对HEC-1-B细胞增殖的影响.用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析其对HEC-1-B细胞VEGF mRNA表达的影响,同时用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测HEC-1-B细胞上清中VEGF蛋白表达量.结果 塞来昔布对HEC-1-B细胞的生长有抑制作用,且呈剂量和时间依赖性;与对照组相比,塞来昔布能降低HEC-1-B细胞VEGF mRNA及蛋白的表达.结论 塞来昔布能抑制HEC-1-B细胞的生长及VEGF的分泌.     

核转录因子kappa B在山羊早期心肌缺血再灌注损伤中的作用研究

目的探讨核转录因子kappa B(NF—κB)在心肌早期缺血再灌注损伤中的作用。方法将 18只山羊随机分为单纯体外循环组(CPB组)、缺血再灌注组(IR组)、缺血再灌注加特异性NF- κB抑制剂(二硫代氨基甲酸吡咯烷,PDTC)组(PDTC组)。建立山羊CPB模型,心脏行缺血60 min, 恢复血流再灌注90 min,PDTC组在心肌缺血前应用PDTC(100 mg／kg)。于心肌再灌注后,测量血流动力学数据及测定局部心功能,并应用TUNEL染色检测心肌细胞凋亡数量,同时采用 EMSA法检测心肌组织中NF-κB的含量。结果缺血再灌注能引起典型心肌缺血损伤的组织学改变,IR组NF-κB在缺血心肌组织中大量激活,心肌组织中NF-κB的活性水平显著高于CPB组(P <0．05);而PDTC组再灌注60 min、90 min后,NF-κB的核转录活性明显减弱,显著低于IR组(P <0．05);原位末端标记表明,IR和PDTC组中心肌细胞凋亡指数分别为11．2％±0．4％和6．35％± 0．2％,心肌损伤显著减轻(P<0．05)。结论核转录因子-κB在心肌早期缺血再灌注损伤中起重要作用,PDTC通过抑制NF-κB的核转录活性,从而减轻了心肌缺血再灌注损伤。     

选择性环氧化酶2抑制剂对梗阻性肾病大鼠肾组织中核因子κB和转化生长因子β1的调节

目的：探讨塞来昔布与吲哚美辛比较对单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠模型肾脏的保护作用及可能机制。方法：将塞来昔布和吲哚美辛应用于UUO大鼠，4周后测定血清肌酐及尿素氮水平，放射免疫法测定大鼠尿液血栓烷素B2（TXB2）浓度，免疫组化法检测肾脏核因子κB（NF-κB）和转化生长因子β1（TGF-β1）的表达。结果：塞来昔布及吲哚美辛均降低尿TXB2浓度，塞来昔布组更为显著；与对照组相比，其余3组NF-κB及TGF-β1的蛋白表达水平均显著上升，肾间质纤维化严重；塞来昔布治疗后，上述蛋白表达水平显著下调，肾间质纤维化程度明显减轻。结论：塞来昔布能减轻UUO大鼠肾间质纤维化，下调NF-κB的表达，减少肾间质单核巨噬细胞浸润可能是其机制之一。     

塞来昔布对人食管癌细胞株Eca-109 增殖和凋亡的影响

目的 体外研究选择性环氧化酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布(celecoxib)对人食管癌细胞株Fca-109增殖和凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制.方法 采用噻唑蓝(MTT)比色法、流式细胞仪(FCM)、吖啶橙染色结合荧光显微镜观察细胞形态等技术,研究塞来昔布对Eca-109细胞增殖的抑制和促进凋亡的影响.结果 MTT比色法显示塞来昔布对人食管癌Eca-109细胞有较强的抑制作用,呈时间和浓度依赖性;FCM显示有凋亡峰出现,凋亡率在(15.89±0.87)%～(73.57±1.63)%;塞来昔布使G0/G1期细胞比例升高,S期和G2/M期比例下降,呈一定效应关系;荧光显微镜下可见典型的细胞凋亡形态学特征细胞体积缩小、细胞核固缩,凋亡小体形成等.凋亡比例呈剂量和时间依赖.结论 塞来昔布体外能够显著抑制Eca-109增殖,诱导凋亡,可能与诱导凋亡和阻止细胞周期进展有关.     

核因子-κB对TNF-α诱导的脂肪细胞葡萄糖转运 蛋白4表达的影响

 【目的】 观察TNF-α对3T3-L1脂肪细胞葡萄糖转运蛋白4(GLUT4) mRNA与蛋白表达的作用,并探讨核因子-κB(NF-κB)对上述作用的影响。【方法】 成熟的3T3-L1脂肪细胞分成3组:A组正常对照组,B组肿瘤坏死因子α(TNF-α)组,C组吡咯烷二硫基甲酸酯(NF-κB活性抑制剂) + TNF-α组。各组干预48 h后检测phospho- NF-κB p65(Ser536)的蛋白水平。GLUT4 mRNA及蛋白水平。蛋白检测采用Western法,mRNA检测采用RT-PCR法。【结果】 B组phospho- NF-κB p65蛋白水平(71.1 ± 5.9)高于A组(41.3 ± 1.7, P < 0.001)和C组(25.4 ± 4.7, P < 0.001)。B组GLUT4的mRNA水平(0.86 ± 0.14, P < 0.001)与蛋白水平(31.6 ± 7.2, P < 0.001)低于A组(2.01 ± 0.65; 60.7 ± 8.4),C组mRNA水平(0.46 ± 0.12)与B组比较有下降趋势但无统计学意义(P = 0.100),C组蛋白水平(9.5 ± 3.0)低于B组(P = 0.001)。【结论】 TNF-α下调3T3-L1脂肪细胞的GLUT4表达,抑制NF-κB活性后GLUT4表达进一步下调。这提示了TNF-α可能不是通过激活NF-κB而使GLUT4的表达下调。     

塞来昔布与吉西他滨合用对胰腺癌的抑制作用及其机制

目的探讨环氧合酶2(COX2)选择性抑制剂塞来昔布和吉西他滨抑制胰腺癌生长的影响及其机制。方法观察塞来昔布与吉西他滨联合作用对裸鼠SW1990胰腺癌细胞移植瘤生长的影响,并与两者单独应用作比较,免疫组织化学染色观察肿瘤组织增殖细胞核抗原(PCNA)和细胞周期蛋白D1表达的变化;四唑蓝法、克隆形成试验观察塞来昔布和吉西他滨体外对SW1990细胞增殖的影响;流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期变化;Western印迹检测细胞周期蛋白D1、A和B1表达的变化。结果药物作用于裸鼠移植瘤32d后,对照组、吉西他滨组、塞来昔布组和联合组肿瘤体积分别为(2.31±0.41)cm3、(0.41±0.12)cm3、(1.56±0.17)cm3、(0.05±0.04)cm3,塞来昔布和吉西他滨联合可明显抑制胰腺癌移植瘤的生长,对照组PCNA、细胞周期蛋白D1呈强阳性表达,吉西他滨组PCNA、细胞周期蛋白D1阳性细胞数明显减少,塞来昔布组PCNA阳性细胞数较对照组略有减少,细胞周期蛋白D1阳性细胞数则无明显减少,而联合组中PCNA、细胞周期蛋白D1阳性细胞数较前3组明显减少。塞来昔布和吉西他滨剂量依赖性抑制SW1990细胞增殖,两药联合应用,对细胞增殖的抑制有增强作用。药物作用24h或72h后,塞来昔布组和联合组凋亡细胞数较对照组及吉西他滨组明显增加(P<0.05)。药物作用24h后,塞来昔布组和联合组G0/G1期细胞比例明显增加,G2/M期细胞明显减少,吉西他滨组G0/G1期细胞明显减少,而S期和G2/M期细胞明显增加,药物作用72h后,塞来昔布组和联合组G0/G1期细胞进一步增加,S期细胞明显减少,G2/M期细胞进一步减少,而联合组在作用24h和72h,G2/M期细胞比例均为0。细胞周期素的表达与细胞周期的分布相一致。结论COX2选择性抑制剂塞来昔布可增强吉西他滨对胰腺癌增殖的抑制作用,其机制可能部分通过调节细胞周期素的表达,诱导细胞周期阻滞和胰腺癌细胞凋亡而实现的。     

氯胺酮抑制内毒素诱导的核因子-κB及肿瘤坏死因子α的体内研究

目的：研究氯胺酮对脓毒症时重要器官核因子-κB(NF—κB)活性及其肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平的的影响。方法：成年雄性Wistar大鼠被随机分为6组：正常对照组(等渗盐水10ml／kg)；内毒素(5mg／kg)组；内毒素(5mg／kg) 氯胺酮(0．5mg／kg)组；内毒素(5mg／kg) 氯胺酮(5mg／kg)组；内毒素(5mg／kg) 氯胺酮(50mg／kg)组；氯胺酮(50mg／kg)组。2h后以EMSA法测定肺、肝、肠和肾组织NF-κB的活性；以ELISA法测定TNF-α的水平。结果：与对照组相比，体内注射内毒素可增强肺、肝、肠和肾组织NF—κB的活性及TNF-α的释放。氯胺酮(0．5、5、50mg／kg)可抑制肠和肾组织NF—κB活性及TNF-α的释放，而抑制肺部NF-κB及TNF—α所需氯胺酮的最小剂量为5mg／kg。氯胺酮(0．5、5、50mg／kg)不能抑制肝NF-κB活性及TNF-α的释放，50mg／kg的氯胺酮反而会增加肝NF-κB的活性，促进TNF-α的生成。结论：氯胺酮可抑制脓毒症时NF—κB的活性及TNF-α的释放，亚麻醉剂量氯胺酮具有抗炎作用；而大剂量可能对机体有害。     

非甾体类消炎药对胃黏膜的损伤及替普瑞酮预防作用的实验研究

目的建立大鼠非甾体类消炎药(NSAID)胃病模型,观察替普瑞酮对NSAID胃病的预防作用。方法成年雄性SD大鼠91只,分为生理盐水组、NSAID组(Ⅰ)、替普瑞酮组(Ⅱ)。后两组再分为如下亚组Ⅰa组(吲哚美辛5mg.kg-1.d-1)、Ⅰb组(吲哚美辛5mg.kg-1.d-1及泼尼松10mg.kg-1.d-1),Ⅰc组(塞来昔布100mg.kg-1.d-1),Ⅰd组(塞来昔布100mg.kg-1.d-1及泼尼松10mg.kg-1.d-1)Ⅱa组(替普瑞酮12mg.kg-1.d-1,吲哚美辛5mg.kg-1.d-1)Ⅱb组(替普瑞酮12mg.kg-1.d-1,吲哚美辛5mg.kg-1.d-1及泼尼松10mg.kg-1.d-1),Ⅱc组(替普瑞酮12mg.kg-1.d-1,塞来昔布100mg.kg-1.d-1),Ⅱd组(替普瑞酮12mg.kg-1.d-1,塞来昔布100mg.kg-1.d-1及泼尼松10mg.kg-1.d-1)。每组连续用药4d后观察损伤指数(LI)和病理组织学变化(Whittle评分),评价胃黏膜损伤情况。同时用RT-PCR检测环氧合酶(COX)同工酶表达情况。结果Ⅰ组的LI(除Ic外)(11.00(1.00~22.5)、8.50(0.75~14.50)、11.00(3.50~14.75),P<0.01)及Whittle评分均比生理盐水组显著降低(1.00(0.00~1.25)、2.00(0.00~5.00)、1.00(0.00~3.00)、2.00(0.00~2.00),P<0.01);Ⅱ各亚组的LI(0.00(0.00~0.25)、1.00(0.00~1.50)、0.00(0.00~0.00)、0.00(0.00~1.00),P<0.05)及Whittle评分比相应的Ⅰ组显著降低(0.00(0.00~0.00)、0.00(0.00~0.50)、0.00(0.00~0.25)、0.00(0.00~0.50),P<0.05);Ⅰc与Ⅰa组间和Ⅰd与Ⅰc组间比较,LI差异有统计学意义(P<0.05)。Ⅰ组(除Ⅰc外)和Ⅱ组(除Ⅱc外)的胃黏膜COX-1表达比生理盐水明显减少(0.384±0.031、0.354±0.026、0.753±0.049、0.366±0.035、0.381±0.036、0.766±0.401,P<0.001),而Ⅰa、Ⅰb、Ⅱa、Ⅱb组COX-2mRNA表达明显增多(0.483±0.056、0.448±0.046、0.461±0.050、0.479±0.032,P<0.001)。Ⅰ亚组和Ⅱ亚组组间比较COX差异无统计学意义。结论COX-2抑制剂有胃黏膜损伤作用,但轻于传统NSAID;糖皮质激素泼尼松能加重NSAID胃病;NSAID胃病的发病机制除了COX-1抑制外,可能有其他因素参与其中;替普瑞酮能有效预防NSAID胃病,但作用机制可能与COX的表达无关。     

氟伐他汀对兔动脉粥样硬化血管壁NF-κB及ICAM-1表达的影响

目的:观察氟伐他汀对动脉粥样硬化(As)家兔模型血管壁核因子-kappaB(NF-κB)活性及mRNA、细胞间粘附分子-1(ICAM-1)表达的影响,以探讨氟伐他汀抗As的作用机制。方法:雄性新西兰家兔32只,随机分为对照组、高脂饮食组、氟伐他汀组。喂养12周后处死动物并留取主动脉标本,观察组织形态学变化,用免疫组化法观察NF-κB活性、ICAM-1表达,用原位杂交法观察NF-κBmRNA表达。结果:氟伐他汀组与高脂饮食组相比,As病变明显减轻(P<0.01);NF-κB活性由(40.3±5.9)%减弱为(17.3±2.4)%(P<0.01);NF-κBmRNA表达由(41.7±5.5)%减弱为(19.6±1.7)%(P<0.01);ICAM-1表达由(31.6±2.7)%减弱为(16.5±2.1)%(P<0.01)。结论:氟伐他汀抗As作用与抑制NF-κB活性,下调ICAM-1表达有关。     

复元活血汤治疗肋骨骨折所致疼痛50例临床疗效观察

本文采用随机分组对照观察法,治疗组25例予中药复元活血汤内服,对照组25例予非甾体类消炎药(塞来昔布)内服;两组均采取卧床休息、肋骨固定带固定及一般常规骨科治疗,观察复元活血汤治疗肋骨骨折所致疼痛的疗效。     

COX-2抑制剂塞来昔布对肝癌小鼠CD4+CD25+调节T细胞的影响

目的 探讨环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)抑制剂塞来昔布对肝癌小鼠调节T细胞(regulatory T,Treg)的影响。 方法 昆明种小鼠随机分成正常组及肝癌组,每组各20只。肝癌小鼠和正常小鼠于背部皮下注射肝癌H22荷瘤小鼠腹水稀释液或生理盐水0.2 mL一次。于次日开始,每组各取10只采用塞来昔布30 mg/(kg·d)灌胃;肝癌组另外10只予以相同容积的生理盐水灌胃,作为肝癌对照组。灌胃均为1次/d,共24 d。正常组另外10只不做任何干预,作为健康对照组。给药24 d后处死全部小鼠,完整取出肿瘤后称取瘤重,HE染色检测是否成瘤;采用流式细胞学技术测定小鼠外周血中Treg细胞数量变化;免疫组织化学方法检测肝癌组织中叉头样/翼状螺旋转录因子-3(Foxp3)及COX-2的表达情况。 结果 塞来昔布干预后小鼠瘤重低于肝癌对照组[(0.82±0.30)g vs.(1.41±0.63)g,P<0.05]。HE染色证实所有肿瘤小鼠均已成瘤。肝癌对照组小鼠外周血中Treg占CD4+T细胞的比例高于健康对照组[(4.26±0.89)% vs.(3.01±0.65)%,P<0.05];经塞来昔布作用后,其Treg占CD4+T细胞的比例下降[(3.04±0.74)% vs.(4.26±0.89)%,P<0.05]。正常小鼠经塞来昔布作用后,其外周血Treg与健康对照组相比无明显变化。塞来昔布干预后肝癌小鼠肿瘤浸润淋巴细胞中Foxp3蛋白阳性细胞低于肝癌对照组[(8.87±3.72)% vs.(30.78±9.26)%,P<0.05],肿瘤组织中COX-2表达水平亦下调[IOD值(2.90±1.030)vs.(6.63±2.279),P<0.01]。 结论 肝癌小鼠外周血中Treg比例增高;COX-2抑制剂能明显降低其外周血及肿瘤浸润淋巴细胞中Treg的比例。