黑色素生物合成抑制剂产生菌95-F23-2代谢产物A组分的获得

目的 从黑色素生物合成抑制剂产生菌95-F23-2的代谢产物中获得活性组分。方法 采用二级发酵方法进行产生菌发酵，产生菌代谢产物采用大孔树脂CAD-40提取，用硅胶干柱层析方法分离粗提物，用制备性薄层层析方法和半制备性高效液相色谱方法进行纯化。结果 产生菌的代谢产物对光敏感，易失活，对酸、碱、热均不稳定，其粗提物含有十几个组分，经分离纯化，得到其中一个活性组分——A组分，A组分紫外吸收峰为232。320nm，相对分子质量840。结论 产生菌代谢产物的活性A组分具有对黑色素的抑制作用。     

肖乳香属Schinus molle中的ACE抑制剂

SchinusmolleL．是原产于南美洲的一种漆树科肖乳香属植物，现已广泛移植到许多热带和亚热带地区。其树汁有利尿，树叶有降压作用，在秘鲁曾作为传统的草药使用。作者等前曾对9种该属植物的提取液进行了抑制血管紧张素转化酶（ACE）活性的测定，发现都有不同程度的抑制作用。现报道在生物活性追踪下分离ACE抑制剂的试验结果。取粉碎的植物用已烧提取后，提取物在0．33mg／mL浓度下能抑制18％的ACE活性。继续用CH2Cl2提取浓缩后，其0．33mg／mL浓度的提取液能抑制46％的ACE活性。将CHZC12提取部分用中压液相色谱反复分离后，得2个…     

高效液相色谱法测定尿中海洛因代谢产物

本文介绍了从吸食海洛因的吸毒者尿中提取海洛因主要代谢产物吗啡的液相提取法。并建立了用反相高效液相色谱法分离、检测尿中吗啡的定量分析方法。其检测波长为２１０ｎｍ，最低检测限为０．３ｎｇ／１０ｕｌ，线性范围为３０ｎｇ－１ｕｇ。     

人胎盘中Sa抗原的制备

目的：探讨从人胎盘中提取和分离Sa抗原的方法及进行性质分析。方法：用DE52离子层析法初步提取人胎盘中可溶性蛋白，再应用SDS-PAGE进行各层析组分分离，确定Sa抗原所在组分；将Sa抗原用酸、碱和蛋白酶K处理后分析其性质。结果：Sa抗原是相对分子量为5000Ar的蛋白抗原，存在于0．20-0．25mol/L NaCl的TBS洗脱组分中，在-20℃下可稳定保存120d。结论：用人胎盘来制备Sa抗原其性质稳定、来源方便、方法较简单，适用于免疫印迹法检测抗Sa抗体。     

红花中酪氨酸酶抑制成分的快速筛选和分析

目的 通过红花中酪氨酸酶抑制剂的筛选,明确红花中酪氨酸酶抑制剂成分,为美白祛斑剂的研发提供实验依据。方法 采用索氏提取法依次提取红花石油醚、氯仿、醋酸乙酯、正丁醇和水5种提取物,分别检测其对酪氨酸酶的抑制作用;针对活性组分通过UPLC-Q/TOF鉴定活性成分,并结合分子对接和酶学检测验证药效成分。结果 初步筛选结果显示红花水层提取物具有较强的抑制作用,并进一步通过液相色谱分离,质谱检测,以及分子对接预测技术,推测其中9种成分可能具有酪氨酸酶抑制作用,选取代表性单体羟基红花黄色素A进行验证,确认其具有较强的抑制作用。结论 谱效结合构效的筛选模式为天然产物中美白祛斑成分的筛选提供了便捷方法;红花中羟基红花黄色素A对酪氨酸酶具有明显的抑制作用。     

大鼠输精管中蛋白激酶C抑制剂的分离纯化

应用凝胶过滤层析及等电聚焦等方法，对大鼠输精管中蛋白激酶Ｃ抑制剂进行了分离纯化。其等电点约在ｐＨ４．５，分子量约为６３ｋＤ。实验表明：大鼠输精管平滑肌中也存在着一种内源性ＰＫＣ抑制剂，并可能与ＰＫＣ共同参与组织细胞生物功能的调控。     

HPLC-柱后生物活性检测在线联用技术在天然活性成分筛选中的应用

HPLC由于分离度和灵敏度高,其在柱后与生物活性检测联用形成的天然活性成分筛选技术,具有操作简单、耗费低、灵敏度和专属性高等优点,已用于天然产物中抗氧化剂、乙酰胆碱酯酶（AChE）抑制剂、磷酸二酯酶（PDE）抑制剂、血管紧张素转移酶（ACE）抑制剂、细胞色素P450抑制剂等的筛选。综述了HPLC-柱后生物活性检测在线联用技术在天然活性成分筛选研究中的应用,同时对其优点和不足进行了总结。     

赤芍拮抗内毒素组分的提取分离研究

目的提取分离赤芍中拮抗内毒素(lipopolysaccharide, LPS)的有效组分.方法采用生物传感技术结合传统的中药分离技术,分离提取中药赤芍,应用鲎试验和ELISA法检测赤芍各组分对LPS的中和作用.结果从赤芍中分离提取6个组分,其中1、4号组分对LPS具有显著的中和作用(P<0.05),在体外能够显著抑制由LPS介导小鼠RAW264.7细胞释放TNF-α(P<0.01).结论我们以LPS为靶点,应用生物传感器技术,快速、有效地提取分离并证明赤芍中具有较强的中和LPS活性的有效组分.     

两种凝血酶原提取方法的比较

目的比较等电点沉淀法和柠檬酸钡吸附法从猪血浆中提取凝血酶原的纯度。方法分别采用等电点沉淀法和柠檬酸钡吸附法从猪血浆中提取凝血酶原,凝血酶原经单独钙离子激活得到凝血酶,通过凝血酶效价测定、蛋白质浓度测定,计算出凝血酶的比活性。结果采用等电点沉淀法提取的凝血酶原经激活后得到的凝血酶比活性为11．01±1．54U／mg,采用柠檬酸钡吸附法提取的凝血酶原经激活后得到的凝血酶比活性为130．17±12．30U／mg,经配对T检验,P〈0．01．结论与等电点沉淀法相比,采用柠檬酸钡吸附法从猪血浆中提取得到的凝血酶原纯度更高。     

中草药桃仁纤溶酶的亲和层析分离

目的 分离出高效、特异、安全、不良反应较小的纤溶酶，为溶栓药物的研究奠定基础。方法 利用硫铵沉淀法提取出桃仁纤溶酶，测定其比活力，并比较不同蛋白酶抑制剂对桃仁纤溶酶活性的抑制作用，采用亲和层析法对桃仁纤溶酶进行分离纯化。结果 亲和层析法分离得到了纤溶酶活性单一组分，比活力为89.08 U·mg^-1，比纯化前提高了7.37倍，该组分属于丝氨酸蛋白酶家族。结论 利用大豆胰蛋白酶抑制剂作为配基，采用亲和层析法分离桃仁纤溶酶可以得到单一活性成分，且比活力相对提高。     

Dipeptidyl peptidase IV of Streptococcus anginosus: purification and characterization

We found that N-unblocked nine p-nitroanilde derivatives of amino acids or peptides were hydrolyzed by the crude cell extracts of Streptococcus anginosus NCTC 10713. Then dipeptidyl peptidase IV was purified 323-fold by the procedures including ammonium sulfate concentration, anion exchange chromatography (twice), gel filtration (twice), hydrophobic interaction chromatography, and isoelectric focusing. The molecular weight was calculated as 84 kDa, and the isoelectric point was 4.9. The enzyme hydrolyzed mainly dipeptides containing proline residues at P1 position. It was strongly inhibited by serine enzyme inhibitors. General protease inhibitors, metal chelators, thiol alkylating agent, reducing agent, and several metal ions had no effect on the enzyme activity. Optimum pH for the activity was found at 7.0. The enzyme was mostly inactivated by heating at 50 degrees C for 15 min.     

大鼠脑阿片受体的溶脱与提纯

大鼠脑(去小脑)突触膜在含二硫苏糖醇和胰酶抑制剂的Tris中用CHAPS溶脱。将溶脱液先后通过自制的阿片类配体10b和10cd 2个亲和层析柱,均用纳洛酮溶液洗脱。洗脱液再经过麦胚凝集素亲和层析和N-乙酰葡萄糖胺洗脱。进一步用制备型粒状凝胶等电聚焦电泳纯化和浓缩,所用凝胶为SG200,在pH5和pH7.8各有一蛋白质峰。淋冼所得样品用银染法测蛋白质含量,并用RRA测与~3H-伊托啡结合的活性,结果表明二者都是OPR,纯化程度达80 000倍以上。分子量用凝胶过滤法测定,pH5和pH7.8样品中的OPR分子量分别为52kD和42kD。pH5中OPR经用与~3H-羟基芬太尼结合的活性鉴定为μ-型受体。     

仿生酶解法制备抗凝活性土鳖虫工艺研究

目的研究仿生酶解法水解土鳖虫的条件。方法以APTT和PT为指标,单因素考察仿生酶解法制备土鳖虫的工艺条件。结果土鳖虫酶解条件为：土鳖虫先用37℃人工胃液加入4%（酶底比）胃蛋白酶水解4h,再于人工肠液中加入4%胰蛋白酶水解3h。结论仿生酶解法适于提取具有抗凝活性的土鳖虫。     

磷脂酰肌醇激酶的非同位毒酶解测定法

A nonisotopic enzymolysis assay method of phosphatidylinositol kinase (PIK) has been developed. Phosphatidylinositol 4-phosphate (PIP), phosphorylated from phosphatidylinositol (PI) by PIK was hydrolyzed with phosphainositide-specific phospholipase C. The product, inositol 1, 4-bisphosphate (IP2), was separated from inositol 1-phosphate (IP) with Dowex-1 column chromatography. Then, the IP2 was hydrolyzed by alkaline phosphatase to yield PI, and the PI was determined by colorimetry. The PIK activity was defined as PI nmol/mg protein per min. The recovery was 91%, CV = 6.5%     

仿生酶解法提取蜈蚣的工艺研究

目的 研究仿生酶解法提取蜈蚣的工艺条件.方法 以水解度为指标,单因素考察了仿生酶解法提取蜈蚣的工艺条件;以APTT法、纤维蛋白原平板法为考察指标,对仿生酶解法提取蜈蚣的工艺进行验证.结果 仿生酶解法凝血时间长,抗血栓效果明显.酶解的条件为:蜈蚣先用37℃人工胃液加入4.0%(酶底比)胃蛋白酶酶解4 h,残渣转入37 ℃人工肠液加入5%(酶底比)胰蛋白酶酶解4h.结论 仿生酶解法适于提取蜈蚣抗凝血和溶栓的有效部分.     

维吾尔族妇女宫颈癌患者血清蛋白质组的二维液相色谱分析

目的：利用蛋白质二维液相色谱方法建立维吾尔族妇女宫颈癌患者血清蛋白质组特异的蛋白质差异表达谱。方法：收集与制备维吾尔族妇女宫颈癌患者血清样品,采用蛋白质二维液相色谱系统(ProteomeLabTM PF-2D)对血清样品进行分离与数据比较分析。结果：成功建立了基于蛋白质等电点和疏水性特征的血清蛋白质组差异表达图谱,能够鉴别出56个差异表达蛋白位点,其中12个位点的峰值存在显著差异。结论：蛋白质二维液相色谱是建立血清蛋白质组差异表达谱的有效和可行方法,为维吾尔族妇女宫颈癌患者血清蛋白质标志物的筛选开辟了新的途径。     

Chemical Forms of Selenium in Corn and Rice Grown in a High Selenium Area of China

The chemical forms of selenium were determined in maize grown near Yutangba Village and in rice grown near Haubei village, Exi Prefecture, Enshi county of Hubei Province, China. The maize sample contained 18 ppm and the rice samples an average of 3.6 ppm selenium. After thcy were ground to obtain a fine flour, this was acid hydrolyzed with hydrochloric acid in an inert atmosphere and the hydrolyzates chromatographed on columns of Dionex DC6A resin. The results indicate that the majority of the selenium is present as selenomethionine in both rice and corn.     

链霉菌胞外多糖、灵芝多糖和米糠多糖对HIV gp41六股螺旋束核心结构形成的影响

目的 对链霉菌胞外多糖、灵芝多糖和米糠多糖体外抑制HIV gp41六股螺旋束核心结构的形成进行比较研究.方法 采用作用于HIV gp41的HIV融合抑制剂的高通量筛选方法(夹心ELISA法)检测3种多糖对HIV gp41六股螺旋束核心结构形成的抑制作用.结果 和结论链霉菌胞外能有效抑制HIV胞膜糖蛋白gp41六股α-螺旋束核心结构的形成,其半效抑制浓度(IC50)为(145.48±7.25)mg/L-1,而灵芝多糖和米糠多糖不具有这种抑制活性.     

杠柳毒苷在模拟消化液中的稳定性研究

[目的]考察杠柳毒苷在模拟人体消化道液中的稳定性。[方法]配制不同pH值的模拟消化液,采用高效液相色谱法,检测杠柳毒苷在各种模拟消化液中的含量变化,并利用薄层鉴别、高效液相色谱-质谱联用法对水解产物进行定性分析。[结果]杠柳毒苷在模拟空腹胃液(pH=1.2)中1 h含量降低22.2%,其水解产物为脱去两分子糖的杠柳苷元;在模拟进食胃液、小肠液、大肠液中0～6 h含量均无变化。[结论]杠柳毒苷在不同pH值的模拟消化液中的稳定性不同,在模拟进食胃液、小肠液、大肠液中稳定,在模拟空腹胃液中不稳定,可被水解为杠柳苷元。模拟消化液的pH值是影响杠柳毒苷稳定性的重要因素,模拟消化液中的胃蛋白酶、胰蛋白酶不影响杠柳毒苷的稳定性。