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1.
目的:探讨核因子T-bet/GATA-3在支气管哮喘小鼠发病机制中的作用,观察地塞米松干预后T-bet、GATA-3 mRNA的变化.方法:建立卵清蛋白(OVA)诱导的哮喘小鼠模型;24只BALB/c小鼠随机分为正常组、哮喘组及地塞米松治疗组.地塞米松腹腔注射(2 mg/kg)给药.HE染色观察气道炎症变化;采用RT-PCR方法检测T-bet、GATA-3 mRNA的表达:流式细胞技术检测小鼠脾脏CD4T细胞IFN-γ、IL4水平.结果:与正常组相比,哮喘组小鼠GATA-3 mRNA表达显著增Dn(P<0.05).T-bet mRNA水平明显降低(P<0.05),IFN-γ水平明显降低(P<0.01),IL-4水平明显升高(P<0.05);经地塞米松干预后,肺组织GATA-3、T-bet mRNA均有所降低,以GATA-3 mRNA降低更为明显,IL-4表达明显降低(P<0.05),而IFN-γ水平有减少倾向.结论:支气管哮喘小鼠T-bet/GATA-3表达失衡与气道炎症密切相关,地塞米松通过抑制GATA-3和T-bet的表达,调节IL-4/IFN-γ比率并纠正Th1/Th2平衡失调,可能是其治疗哮喘的机制之一. 相似文献
2.
寿胎丸调节原因不明复发性自然流产患者免疫失衡机制 总被引:2,自引:0,他引:2
目的通过检测原因不明复发性自然流产患者寿胎丸治疗前后血单核粒细胞转录因子T-bet、GATA-3的mRNA表达强度及白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-10(IL-10)水平的变化,探讨寿胎丸的保胎作用机制。方法选取50例原因不明复发性自然流产患者,随机分为中药组(30例)和对照组(20例),中药组给予寿胎丸治疗;另设正常对照组(20例),为正常早孕妊娠妇女。3组患者分别抽外周静脉血2份,1份血液离心分离出血浆,采用ELISA法测定血浆中IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10水平,另1份血液按密度梯度离心法分离出单个核细胞(PBMCs)。采用RT-PCR法测定各组PBMCs中T-bet、GATA-3的mRNA表达强度。结果原因不明复发性自然流产患者(A、B)组治疗前血IL-2、IFN-γ水平及T-bet mRNA的表达强度高于正常对照组,IL-4、IL-10水平及GATA-3 mRNA表达强度低于正常对照组(P<0.05);T-betmRNA表达强度与IL-2、IFN-γ正相关,与IL-4、IL-10负相关;GATA-3 mRNA表达强度与IL-4、IL-10正相关,与IL-2、IFN-γ负相关。寿胎丸治疗后患者IL-4、IL-10水平上升,GATA-3 mRNA表达强度显著增高;IL-2、IFN-γ水平下降,T-bet mRNA表达强度下降,与对照组比较流产率降低,有显著性差异(P<0.05)。结论寿胎丸可以上调GATA-3,下调T-bet mRNA的表达来调节T-bet/GATA-3的比率,进而上调IL-4、IL-10水平,下调IL-2、IFN-γ水平,逆转Th1/Th2细胞的失衡,维持正常妊娠。 相似文献
3.
【目的】研究转录因子T-bet/GATA-3在小儿哮喘发病以及Th1/Th2失衡中的作用。【方法】本实验拟通过半定量RT-PCR检测部分哮喘患儿外周血单个核细胞(PBMC)中T-bet、GATA-3 mRNA表达情况,同时采用三色荧光流式细胞仪检测哮喘患儿的Th1、Th2细胞数量,并对T-bet、GATA-3 mRNA表达水平与Th1、Th2细胞比率进行相关分析,了解T-bet/GATA-3对哮喘患儿的Th细胞分化的调节作用。【结果】哮喘患儿外周血淋巴细胞转录因子T-bet mRNA表达水平显著低于正常对照组,其中哮喘发作组显著低于缓解组(P〈0.05);转录因子GATA-3 mRNA表达水平显著高于正常对照组,哮喘发作组又显著高于缓解组(P〈0.05)。哮喘患儿外周血淋巴细胞亚群Th1百分率显著低于正常对照组,其中哮喘发作组又显著低于缓解组(P〈0.05);Th2细胞百分率显著高于正常对照组,哮喘发作组又显著高于缓解组(P〈0.05)。哮喘患儿T-bet mRNA表达量与Th1细胞比率呈正相关(r=0.731),与Th2细胞比率呈负相关(r=-0.685);GATA-3 mRNA表达量与Th1细胞比率呈负相关(r=-0.692),与Th2细胞比率呈正相关(r=0.717);T-bet/GATA-3 mRNA比值与Th1细胞比率呈正相关(r=0.793),与Th2细胞比率呈负相关(r=-0.639),与Th1/Th2比值呈正相关(r=0.801)。【结论】哮喘患儿T-bet/GATA-3 mRNA表达水平失调,与哮喘患儿Th1/Th2失衡密切相关,可作为衡量Th1/Th2平衡的新指标。 相似文献
4.
目的:研究食管癌患者转录因子T-bet,GATA-3的基因表达及其对患者免疫状态的影响。方法:根据其CT分期将40例食管癌患者分为两组:一组为第Ⅰ,Ⅱ期患者,另一组为第Ⅲ,Ⅳ期患者;荧光定量PCR技术检测40例食管癌患者及20例健康对照者外周血单核细胞T-bet,GATA-3 mRNA的表达水平;ELISA法检测血浆中辅助性T细胞1型(Th1)细胞因子IFN-γ及辅助性T细胞2型(Th2)细胞因子IL-4。结果:食管癌组较对照组T-bet mRNA表达明显降低,GATA-3 mRNA表达明显升高,IFN-γ表达明显降低,IL-4表达明显升高,不同期别食管癌组间差异不显著。T-bet,GATA-3分别与IFN-γ,IL-4呈正相关。结论:食管癌患者Th1型细胞因子表达降低,Th2型细胞因子表达升高,即Th1/Th2平衡被打破,发生了向Th2方向的漂移,免疫功能受损;这种改变受到转录因子T-bet,GATA-3的调控,T-bet表达的减少在这种调控中可能起着关键的作用。 相似文献
5.
目的 观察血必净注射液对严重脓毒症患者Th1细胞转录因子T-bet mRNA和Th2细胞转录因子GATA-3 mRNA表达的影响,探讨其能否通过影响Th1/Th2漂移来调理严重脓毒症患者的免疫紊乱.方法 将15例严重脓毒症患者分为血必净治疗组(n=9)和常规治疗组(n=6).常规治疗组给予脓毒症的一般治疗,包括液体复苏、抗感染、必要时呼吸机辅助治疗以及营养支持等.血必净治疗组在相同的常规治疗基础上加用血必净注射液(100 mL,2次/d,应用7 d).两组分别于入院当天(0 d)和入院后第1、3和7 天抽外周静脉血;应用Real-time RT-PCR检测T-bet和GATA-3 mRNAs;ELISA法检测血Th1分泌的IFN-γ和Th2分泌的IL-4;并同时进行APACHE II评分.结果 常规治疗组患者入院第3 天和第7 天的血IFN-γ、T-bet mRNA、T-bet/GATA-3、IFN-γ/IL-4均明显高于0 d(均P<0.05),GATA-3 mRNA和IL-4明显低于0 d(均P<0.05);血必净注射液治疗后第3 天和第7天患者的血IFN-γ、T-bet mRNA、T-bet /GATA-3、IFN-γ/IL-4明显低于常规治疗组(均P<0.05),GATA-3 mRNA和IL-4明显高于常规治疗组(均P<0.05).血必净注射液治疗后第7 天 APACHE II评分较常规治疗组显著下降(18.22±1.99 vs.22.67±2.16,P=0.042).结论 严重脓毒症患者存在Th1/Th2 失衡;血必净注射液能通过抑制T-bet mRNA表达和促进GATA-3 mRNA表达来改善Th1/Th2 失衡和缓解病情的严重程度. 相似文献
6.
目的探讨Th1、Th2型细胞及Treg细胞在慢性心衰发病中的作用机制。方法采用RT-PCR技术检测62例慢性心衰患者和42例正常人外周血单个核细胞中T—bet、GATA-3及Foxp3mRNA的表达水平;ELISA法检测血浆中Th1/Th2型细胞因子IFN-γ/IL-4水平。结果慢性心衰患者T-bet表达水平高于正常对照组,GATA-3及Foxp3表达水平低于正常对照组(均P〈0.05)。慢性心衰组患者血浆中IFN-γ水平及IFN-γ/IL-4高于对照组(均P〈0.01)。结论慢性心衰患者T-bet/GATA-3及IFN-γ/IL-4升高,Foxp3降低,提示Th1细胞亚群表达升高,Th2型细胞及CD4+、CD25+调节性T细胞减少,细胞免疫异常可能参与慢性心衰的发病机制。 相似文献
7.
目的 观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠T细胞介导的转录调节因子 (T-bet) 、GATA-结合蛋白3 (GATA-3)、孤独核受体(RORgammat)的表达。方法 将30只大鼠随机分为正常对照组、COPD模型组,每组15只。COPD模型大鼠采用烟熏加脂多糖(LPS)气管滴入法建立COPD模型,模型复制成功第28 d,采用肺功能仪检测肺功能,酶联免疫吸附法检测大鼠血清γ干扰素(IFN-γ)、白介素(IL)-4、IL-17表达,Western blot检测肺组织T-bet、GATA-3、RORgammat蛋白表达。结果 与正常对照组比较,COPD模型组大鼠肺功能参数、血清IL-4水平降低,血清INF-γ、IL-17、Th1/Th2,肺组织T-bet、T-bet /GATA-3、RORgammat蛋白表达升高 (P<0.05)。肺功能参数0.3 s用力呼气容积(FEV0.3)与血清INF-γ水平,肺组织T-bet/GATA-3蛋白表达呈负相关, 用力肺活量(FVC)与血清IL-4水平呈正相关,FEV0.3/FVC 与血清Th1/Th2、肺组织T-bet 、T-bet/GATA-3蛋白表达呈负相关,最大呼气流量(PEF)与血清IL-17水平,肺组织T-bet,RORgammat蛋白表达呈负相关(P均<0.05);血清Th1/Th2与肺组织T-bet/GATA-3蛋白表达呈正相关,IL-17与RORgammat呈正相关 (P均<0.05)。结论 COPD的发生与T-bet/GATA-3、RORgammat对Th1/Th2、Th17细胞调控失衡有关。 相似文献
8.
目的探讨补肾固表方对复感儿外周血T辅助细胞1(Th1)和T辅助细胞2(Th2)型细胞因子表达失衡的调节作用。方法采集20例复感儿治疗前后外周血,采用流式细胞仪分选CD4 T细胞,提取细胞总RNA,应用实时荧光定量PCR术,检测T-bet、GATA-3、干扰素(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)基因表达量,并与10例健康对照组进行比较。结果复感儿T-bet mRNA和IFN-γmR-NA表达下降,GATA-3 mRNA和IL-4 mRNA表达升高,与正常组相比,有显著性差异(P<0.01或P<0.05)。补肾固表方治疗后T-bet mRNA上调(P>0.05),IFN-γmRNA上调(P<0.01),GATA-3mRNA和IL-4 mRNA下调(P<0.01),与正常组相比,无显著性差异(P>0.05),其中尤以GATA-3mRNA和IL-4mRNA改变程度明显。结论复感儿间歇期存在Th转录因子及细胞因子基因表达失衡,呈Th2优势应答模式。补肾固表方可使T-bet mRNA和IFN-γmRNA表达量增加,GATA-3mRNA和IL-4 mRNA表达量下降,从转录因子及细胞因子基因水平恢复Th平衡。 相似文献
9.
目的: 探讨咳喘颗粒剂对热型哮喘患儿外周血Th1/Th2细胞的作用。方法: 48例热型哮喘患儿随机分为颗粒组和常规组,各24例;常规组口服中药咳喘颗粒剂,3次/d,3 d为1个疗程,治疗2个疗程;常规组采用常规西药治疗,布地奈德粉吸入剂(100 μg/吸)和硫酸特布他林气雾剂(0.25 mg/喷),2次/d,治疗1周;另取20名健康儿童作为对照组。实时定量PCR检测各组外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中T细胞表达的T盒(T-box expressed in T cells,T-bet) mRNA和GATA连接蛋白3(GATA binding-3,GATA-3)mRNA的表达;ELISA法检测各组血浆IFN-γ和IL-4水平。结果: 颗粒组和常规组总有效率分别为95.83%、91.67%,差异无统计学意义(χ2=0.559,P>0.05)。治疗前,颗粒组和常规组GATA-3 mRNA和IL-4水平明显高于对照组(P 0.05),而T-bet mRNA/GATA-3 mRNA和 IFN-γ/IL-4明显低于对照组(P0.05);但与治疗前相比,颗粒组和常规组GATA-3 mRNA和IL 4水平明显降低(P0.05)。结论: 咳喘颗粒剂通过抑制Th2细胞,纠正Th1/Th2细胞平衡治疗患儿热型哮喘。 相似文献
10.
目的:探讨再生障碍生贫血(再障)小鼠骨髓淋巴细胞的Th1/Th2细胞亚群的漂移与转录因子T-bet和GATA-3的调控作用.方法:建立再障小鼠模型,取再障和正常组小鼠骨髓淋巴细胞,在终浓度为15 mg/L植物血凝素(PHA)条件下培养,用双抗体夹心ELISA方法检测小鼠骨髓淋巴细胞培养上清Th1类细胞因子IL-2、IFN-γ和Th2类细胞因子IL-4、IL-10水平;用RT-PCR技术检测小鼠骨髓淋巴细胞转录因子T-bet和GATA-3 mRNA表达强度.结果:再障小鼠IL-2、IFN-γ水平及转录因子T-bet mRNA表达显著高于正常组(P<0.01);而IL-4、IL-10水平及GATA-3 mRNA表达水平明显低于正常组(P<0.01).结论:再障小鼠出现Th细胞向Th1亚群漂移现象,导致机体Th1细胞的优势应答状态,从而诱导细胞毒性T淋巴细胞对造血干细胞的细胞毒作用,而T-bet表达增强与GATA-3低表达可能是再障Th1优势分化的重要原因. 相似文献
11.
目的 观察间充质干细胞(BMSCs)归巢调节哮喘Th1/Th“2 漂移”与Notch1/Jagged1通路的关系。方法 20只SD大鼠用随机数字表法均分为4组:正常对照组(NC)、模型对照组(MC)、BMSCs移植组(BMSCs)、BMSC+Notch抑制剂组。采用卵清蛋白致敏和激发建立哮喘模型,尾静脉注射BMSCs。HE染色观察肺组织病理形态学,酶联免疫吸附法检测肺组织白介素(IL)-5、IL-13、IFN-γ,RT-PCR法检测肺组织Notch1、Jagged1基因表达,免疫荧光染色检测支气管上皮细胞中CXCR4蛋白表达,免疫印迹法检测肺组织T-bet、GATA-3、Notch1、Jagged1蛋白表达。结果 与NC组比较,MC组IFN-γ、T-bet蛋白表达降低,IL-5、IL-13、GATA-3蛋白表达升高,Notch1、Jagged1mRNA和蛋白表达升高(P<0.05或P<0.01)。与MC组比较,BMSCs组、BMSCs+Notch抑制剂组CXCR4、IFN-γ、T-bet蛋白表达量显著升高,BMSCs组Notch1、Jagged1 蛋白表达降低,BMSCs+Notch抑制剂组IL-5、IL-13、Notch1、Jagged1mRNA和蛋白降低(P<0.05或P<0.01)。与BMSCs组比较,BMSCs+Notch抑制剂组CXCR4、IFN-γ表达升高,IL-13、Notch1mRNA表达降低(P<0.05)。结论 BMSCs向哮喘肺组织归巢对Th1/Th2“漂移”产生调节作用,Notch1/Jagged1通路可能参与其过程。 相似文献
12.
目的探讨Clara细胞分泌蛋白(CC16)及转录因子T-bet、GATA-3在支气管哮喘患者气道炎症中的价值。方法采取病例对照研究,收集25例哮喘急性发作期患者和33例健康对照组。采外周静脉血分离血浆,提取外周血单个核细胞(PBMC),用ELISA测定血浆中CC16、IFN-γ、IL-4的水平;用RT-PCR法检测PBMC转录因子T-bet mRNA和Gata-3 mRNA表达水平。结果哮喘组CC16及IFN-γ分别为(21.96±7.31)ng/mL和(118.73±22.59)pg/mL,明显低于对照组[(64.88±25.27)ng/mL和(145.53±29.50)pg/mL,P均0.01],哮喘组IL-4高于对照组[(425.22±4.37)pg/mL比(69.72±10.15)pg/mL,P0.01]。哮喘组T-bet mRNA、T-bet/GATA-3表达水平(0.12±0.01,0.25±0.04)显著低于对照组(0.48±0.12,1.89±0.65)(P均0.01),GATA-3 mRNA表达(0.45±0.05)较对照组(0.30±0.08)明显升高(P0.01)。CC16与T-bet mRNA表达水平、T-bet/GATA-3呈正相关(r值分别为0.792和0.761,P均0.01);与GATA-3 mRNA无明显相关性(r=-0.146,P=0.551)。结论哮喘患者CC16水平降低,对气道炎症的保护性削弱,可能与T-bet/GATA-3和IFN-γ/IL-4的失衡有关。 相似文献
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老年非小细胞肺癌患者Th1/Th2漂移状态与T-bet/GATA3基因表达的关系 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨老年非小细胞肺癌患者Th1/Th2漂移状态及其与T-bet、GATA3基因表达的关系。方法选取老年非小细胞肺癌患者及健康受试者各120例,双抗夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测各组血浆中Th1类细胞因子γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)和Th2类细胞因子IL-4、IL-10的浓度;梯度离心法分离出单个核细胞(PB-MC),采用RT-PCR方法检测其T-bet、GATA3mRNA水平。结果老年非小细胞肺癌患者Th1型细胞因子IFN-γ、IL-2水平与老年健康受试者比较明显下降[(10.28±0.88)pg/mL vs(16.94±1.05)pg/mL;(9.06±0.85)pg/mL vs(13.96±0.87)pg/mL)],差异均具有统计学意义;老年非小细胞肺癌患者Th2型细胞因子IL-4、IL-10水平与老年健康受试者比较明显升高[(5.98±0.98)pg/mL vs(3.89±0.28)pg/mL;(47.59±2.89)pg/mL vs(40.47±1.28)pg/mL)],差异均具有统计学意义。老年非小细胞肺癌患者Th1型核转录因子T-bet mRNA的表达水平较老年健康受试者下降[(0.85±0.11)vs(1.46±0.09)];老年非小细胞肺癌患者Th2型核转录因子GATA3mRNA的表达水平较老年健康受试者明显增高[(1.51±0.12)vs(0.89±0.10)],差异均具有统计学意义。结论老年非小细胞肺癌患者存在着Th2漂移现象,该现象可能与影响Th1/Th2的极化状态的关键因子T-bet和GATA3的表达失常有关。 相似文献
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15.
目的 探讨Th1、Th2和Th17细胞的变化、转录因子T-bet、GATA-3和STAT-3 mRNA的表达及环境因素与习惯性流产的关系.方法 选取2011年6月~2012年9月河南省开封市妇产医院就诊的50例习惯性流产非孕期患者作为病例组(HA组),同期某社区50例正常非孕妇女为健康对照组(NNP组),分别抽取抗凝静脉血5 mL,应用聚多糖密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC),采用流式细胞仪检测三种亚群细胞的比例,酶联免疫吸附法(ELISA)检测IFN-γ、IL-4和IL-17的含量,实时荧光定量PCR检测T-bet 、GATA-3和STAT-3 mRNA的表达.同时进行环境因素问卷调查,比较两组各环境因素的差异.结果 ①HA组患者Th1、Th17细胞百分比[(11.66±3.45)%、(3.65±0.75)%]均明显高于NNP组[(7.05±1.83)%、(0.72±0.11)%],差异有统计学意义(P<0.05),Th2细胞的百分比[(1.15±0.33)%]低于NNP组[(3.59±0.62)%],差异有统计学意义(P<0.05).②HA组IFN-γ和IL-17在的含量分别为(1163.27±45.25)μg/L和(162.26±25.28)μg/L,明显高于NNP组[(736.25±44.32)、(57.45±11.26) μg/L],差异有统计学意义(P<0.05),而IL-4的含量[(118.45±26.75) μg/L]低于NNP组[(220.45±24.63)μg/L],差异有统计学意义(P<0.05).③与NNP组比较,HA组T-bet和STAT-3 mRNA表达均明显升高,而GATA-3 mRNA的表达明显降低,差异均有统计学意义(均P< 0.05).④HA组BMI≥24.0 kg/m2者所占比例为58%,明显高于NNP组(28%),差异有统计学意义(P<0.05).结论 习惯性流产患者IFN-γ、IL-17的水平较高,而IL-4的水平较低,提示习惯性流产患者体内存在T细胞亚群分化失衡,且此种失衡可能与转录因子T-bet、GATA-3和STAT-3 mRNA的调控有关,同时肥胖可增加习惯性流产发生的可能性. 相似文献