外周血淋巴细胞亚群绝对值和功能的动态监测在肾移植术后早期病毒感染风险预测中的价值

目的探讨不同淋巴细胞亚群的绝对值和功能对于评估肾移植受者术后早期发生病毒感染风险的预测和诊断价值。方法将95例肾移植受者纳入前瞻性观察队列研究,根据术后的免疫状态分为稳定组(77例)和感染组(18例)。分别于术前、术后2周、术后1个月、术后2个月、术后6个月采集外周血样本进行流式细胞检测。比较两组CD4⁺T细胞、CD8⁺T细胞、自然杀伤(NK)细胞绝对值的动态变化,通过检测干扰素(IFN)-γ⁺CD4⁺T细胞、IFN-γ⁺CD8⁺T细胞、IFN-γ⁺NK细胞比例分析两组受者淋巴细胞亚群功能,评估淋巴细胞亚群绝对值和功能在肾移植术后早期对病毒感染的预测和诊断价值。结果在病毒感染时,感染组的CD4⁺T细胞、CD8⁺T细胞、NK细胞绝对值整体处于相对较低的水平;在术后2个月时,感染组的CD4⁺T细胞、NK细胞绝对值均低于稳定组;在术后6个月时,感染组的CD4⁺T细胞、CD8⁺T细胞绝对值均低于稳定组(均为P<0.05)。在病毒感染时,感染组的IFN-γ⁺CD4⁺T细胞、IFN-γ⁺CD8⁺T细胞、IFN-γ⁺NK细胞比例均处于相对较低的水平,尤以IFN-γ⁺CD8⁺T细胞比例降低最为显著;在术后2个月,感染组的IFN-γ⁺CD8⁺T细胞、IFN-γ⁺NK细胞比例显著高于稳定组;在术后6个月,感染组的IFN-γ⁺CD4⁺T细胞、IFN-γ⁺CD8⁺T细胞比例均高于稳定组(均为P<0.05)。logistic回归分析结果显示,术后2个月时,IFN-γ⁺CD8⁺T细胞和IFN-γ⁺NK细胞比例的升高与病毒感染风险增加均相关(均为P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线结果表明,淋巴细胞亚群绝对值联合其IFN-γ分泌功能对于免疫状态低下的受者病毒感染的诊断价值显著高于单用淋巴细胞亚群绝对值(P<0.05)。结论动态监测淋巴细胞亚群绝对值和功能的变化对病毒感染的预测、诊断及指导用药具有重要参考价值。     

125I粒子植入放疗对前列腺癌免疫微环境影响的初步分析

目的:探讨¹²⁵I粒子植入放疗对前列腺癌免疫微环境的影响。方法:利用免疫组织化学技术检测、比较cT_1～3N₀M₀期前列腺癌行¹²⁵I粒子植入治疗前、后前列腺癌细胞PD-L1表达情况,以及肿瘤微环境中CD3⁺T、CD4⁺T、CD8⁺T、PD-1⁺T细胞的表达情况变化。结果:前列腺肿瘤细胞PD-L1阳性表达率为55.6%（35/63）;肿瘤组织中均可见CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺T细胞浸润;55.6%的组织中可见PD-1⁺T细胞表达,但数量较少;经¹²⁵I粒子植入治疗后行经尿道前列腺切除术的前列腺癌组织中,肿瘤细胞PD-L1表达率明显上调95.8%（22/23）,而且表达强度也增加。结论:前列腺癌肿瘤微环境中均可见浸润性T淋巴细胞,但肿瘤抗原特异性T细胞很少;¹²⁵...     

蜕膜CXCR6~(+/-)单核-巨噬细胞在人早孕期母胎界面的表型差异

目的分析正常早孕期和不明原因自然流产妇女蜕膜组织中CXCR6~+单核-巨噬细胞比例及表型差异。方法收集上海复旦大学附属妇产科医院门诊手术室正常早孕期(40例)和不明原因自然流产(20例)妇女的蜕膜组织,分离蜕膜免疫细胞群,采用流式细胞术分析正常早孕组及不明原因自然流产组蜕膜免疫细胞中单核-巨噬细胞所占比例的差异;比较两组妇女蜕膜单核-巨噬细胞(dMΦ)表面CXCR6~+、CD80、CD206的表达差异。结果不明原因自然流产组CD14+dMΦ在蜕膜免疫细胞群(DIC)中所占比例为(9.9±1.63)%,正常早孕期组CD14+dMΦ在DIC中所占比例为(8.9±0.88)%,两组差异并无显著性(P0.05);正常早孕组CXCR6~+在dMΦ的表达率为(40.0±1.90)%,而不明原因自然流产组表达率为(31.22±2.38)%,二者比较有显著差异(P0.05);正常早孕组CD206、CD80在CXCR6~+dMΦ中的表达均显著高于CXCR6~-dMΦ(P0.05),不明原因自然流产组CD206在CXCR6~+dMΦ的表达显著高于CXCR6~-dMΦ(P0.01),CD80并无显著变化(P0.05);与正常早孕组相比,不明原因自然流产组CD206在CXCR6~(+/-)dMΦ中的表达均显著降低(P0.05),CD80在CXCR6~-dMΦ中表达则显著升高(P0.05),在CXCR6~+dMΦ中的表达无显著差异(P0.05)。结论不明原因自然流产妇女中,蜕膜单核巨噬细胞数量并无显著的变化,CXCR6~+dMΦ、表面分子CD206的表达明显降低及CD80的表达明显升高,提示CXCR6~+dMΦ可能参与了自然流产的发病机制。     

蜕膜自然杀伤细胞与不明原因反复自然流产的关系

目的通过测定子宫蜕膜自然杀伤(NK)细胞亚群及其杀伤活性,探讨其在不明原因反复自然流产(URSA)发病中的作用。方法随机选取确定URSA的患者10例为实验组,选取15例正常妊娠(NP组)为对照,采用流式细胞仪检测两组蜕膜组织NK细胞亚群,MTT还原法测定NK细胞杀伤活性。结果URSA组蜕膜中CD56+NK细胞含量显著高于NP组(P<0.01),且URSA组CD56+CD16+细胞亚群含量及CD56+CD16+/CD56+CD16-比值也较NP组显著升高(P均<0.01),而CD56+CD16-细胞亚群含量两组比较无差异(P>0.05)。蜕膜NK细胞活性URSA组为(31.60±2.62)%,而NP组仅为(15.65±2.02)%,两组蜕膜NK细胞活性有显著差异(P<0.01)。结论URSA的发生可能与NK细胞亚群失衡及杀伤活性异常增高而导致母胎间的免疫耐受平衡被打破有关。     

CD47及CRT在人稽留流产蜕膜组织中的表达及意义

目的研究蜕膜组织中CD47及CRT的表达情况及与其相关性。方法选取2017年6月至2018年10月我院妇产科收治并诊断为稽留流产的40例患者作为研究对象,并纳入同期行人工流产的正常早孕患者为对照组(42例)。观察两组患者蜕膜组织中CD47及CRT表达情况,分析CD47及CRT在蜕膜组织中表达的相关性。结果 Western Blot检测结果表明,与对照组比较,稽留流产组患者蜕膜组织中CRT表达极显著升高,CD47表达极显著下降(P<0.01)。CRT在脱膜组织中定位于细胞浆及胞膜呈阳性表达,稽留流产组患者蜕膜组织中CRT表达升高且显著高于对照组(P<0.01)。CD47在蜕膜组织中定位于细胞浆及胞膜呈阳性表达,稽留流产组患者蜕膜组织中CD47表达下降且显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。稽留流产组患者蜕膜组织中CRT的积分光密度值(IOD)水平显著高于对照组,CD47的IOD值显著低于对照组(P<0.01)。两组患者CRT与CD47的IOD水平采用Pearman相关性分析,结果显示稽留流产组蜕膜组织中CRT与CD47的IOD值呈负相关(r=-0.648,P=0.012),对照组患者蜕膜组织中CRT与CD47的IOD值呈正相关(r=0.324,P=0.023)。结论蜕膜组织中CRT、CD47的异常表达,可能对稽留流产进程发挥着重要作用。     

胃癌患者CD4+CD29+T细胞表达及其临床意义

【摘要】〓目的〓探讨CD4⁺CD29⁺辅助性T细胞在胃癌患者中的表达及其临床意义。方法 收集Ⅰ~Ⅳ期胃癌患者共64例、慢性胃炎患者及健康对照组各60例作为观察对象。采用流式细胞术检测外周血CD4⁺CD29⁺T细胞及其细胞因子γ干扰素(IFN-γ)及白介素4(IL-4)水平;采用ELISA法检测三组的细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、转化生长因子β1(TGF-β1)及癌胚抗原(CEA)的含量;分析以上六者的相关性。结果〓胃癌患者CD4⁺CD29⁺T细胞及IL-4水平显著高于慢性胃炎及健康对照组(P<0.05),而IFN-γ明显低于另外两组(P<0.05),但慢性胃炎与健康对照组上述三项指标无统计学差异。Ⅰ~Ⅳ期胃癌患者CD4⁺CD29⁺T细胞及IL-4呈递增趋势,而IFN-γ呈递减趋势,均表现为Ⅲ与Ⅰ期之间、Ⅳ与Ⅲ期之间均存在显著差异(P<0.05)。胃癌患者ICAM-1、TGF-β1及CEA显著高于慢性胃炎及健康对照组(P<0.05),但慢性胃炎与健康对照组上述三项指标无统计学差异。相关性分析显示CD4⁺CD29⁺T细胞及IL-4两者与ICAM-1、TGF-β1及CEA三者当中任意一者均呈正相关性,而IFN-γ与ICAM-1、TGF-β1及CEA三者当中任意一者均呈负相关性(P<0.05)。结论〓CD4⁺CD29⁺T细胞及IL-4表达增加、IFN-γ表达减少是胃癌患者的一个重要免疫学特征,在早晚期胃癌呈显著差异性表达,且三者与胃癌的血管表达相关因子密切相关。     

化疗联合中药在非小细胞肺癌患者术后辅助治疗中的应用效果分析

目的 探讨化疗联合中药在非小细胞肺癌患者术后辅助治疗中的应用效果。方法 回顾性分析2016-01—2019-01鹤壁煤业(集团)有限公司总医院胸外肿瘤科行肺癌手术的56例非小细胞肺癌患者的临床资料。根据术后辅助治疗方法分为对照组和中西医组,每组28例。2组患者术后均采取吉西他滨与顺铂联合化疗,其中中西医组在化疗的基础上联合应用自拟养阴扶正固本汤治疗。比较2组患者干预后的中医证候积分、免疫功能、卡氏评分(KPS)、生活质量评分,以及毒副反应发生率和术后3 a无瘤生存率。结果 2组患者化疗前的中医证候评分、KPS评分、生活质量评分、免疫功能指标(NK、CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺)差异均无统计学意义(P>0.05)。化疗后2组患者的中医证候评分、KPS评分、生活质量评分均较化疗前显著改善,且中西医组的改善效果优于对照组;化疗后2组患者的NK、CD3⁺、CD4⁺均较术前有显著降低或升高,其中中西医组的NK、CD3⁺、CD4⁺指标降低或...     

结肠癌患者外周血CD4+、CD8+细胞PD-1表达水平及其临床意义

目的探讨结肠癌患者外周血CD4⁺、CD8⁺细胞、程序性死亡因子-1(PD-1)表达水平及其临床意义。方法选择2022年8月至2023年8月杭州市肿瘤医院与浙江大学医学院附属浙江医院收治的78例结肠癌患者作为观察组,并选择同期杭州市肿瘤医院与浙江大学医学院附属浙江医院接受体检的70例健康人员作为对照组。比较两组受试者外周血CD4⁺、CD8⁺细胞、PD-1水平,比较观察组不同病理特征患者的外周血CD4⁺、CD8⁺细胞、PD-1水平,采用Pearson相关性分析法分析外周血CD4⁺、CD8⁺细胞、PD-1水平与观察组患者临床病理特征的相关性。结果观察组的外周血CD4⁺细胞低于对照组,CD8⁺细胞、PD-1水平均明显高于对照组(P<0.05);不同肿瘤直径、TNM分期、分化程度、淋巴结转移患者外周血CD4⁺、CD8⁺细胞、PD-...     

感染性肺炎新生儿免疫功能系统评价及临床意义

目的探讨感染性新生儿肺炎免疫功能变化及其临床意义。 方法选取2016年3月至2017年10月深圳市龙华区中心医院新生儿科收治的感染性新生儿肺炎60例为观察组,同期选取健康新生儿60例为对照组。根据肺炎严重程度将观察组分为两个亚组：轻症组（39例）和重症组（21例）;根据新生儿感染性肺炎分期差异分为两个亚组：急性期组（24例）和恢复期组（36例）。入组患儿均于急性期、恢复期采集血样,用于体液免疫指标（免疫球蛋白IgA、IgM、IgG1、IgG2、IgG3、IgG4及补体C3、C4水平）和细胞免疫指标（CD3⁺ T、CD4⁺ T、CD8⁺ T、CD4/CD8、NK细胞）检测。 结果重症组患儿血清IgA、IgG1、IgG2、IgG3、IgG4水平、CD3⁺ T细胞、CD4⁺ T细胞、NK细胞比例及CD4/CD8较对照组和轻症组患儿均显著降低（P均< 0.05）,IgM、C3、C4水平、CD8⁺ T细胞比例较对照组和轻症组患儿均显著升高（P均< 0.05）,差异均有统计学意义。Spearman相关分析发现,血清IgA、IgG1、IgG2、IgG3、IgG4水平、CD3⁺ T细胞、CD4⁺ T细胞、NK细胞比例及CD4/CD8与新生儿感染性肺炎严重程度呈负相关（r =－0.826、－0.826、－0.665、－0.822、－0.826、－0.816、－0.794、－0.824、－0.820,P均< 0.001）;血清C3水平、CD8⁺ T细胞比例与新生儿感染性肺炎严重程度呈正相关（r = 0.467、0.788,P均< 0.001）。急性期患儿血清IgA、IgG1、IgG2、IgG3、IgG4水平、CD3⁺ T细胞、CD4⁺ T细胞、NK细胞比例及CD4/CD8均较恢复期和对照组显著降低（P均< 0.05）,而血清IgM、C3、C4水平、CD8⁺ T细胞均较恢复期和对照组显著升高,差异均有统计学意义（P均< 0.05）。 结论感染性新生儿肺炎细胞免疫和体液免疫功能下降,与疾病严重程度呈负相关,且疾病不同阶段对免疫功能影响较大,应对该类患儿免疫功能加强调控。     

48例成人慢性活动性EB病毒感染的临床特征和外周血淋巴细胞免疫表型

目的探讨成人慢性活动性EB病毒感染（CAEBV）患者的临床特征及外周血淋巴细胞免疫表型。 方法回顾性纳入2017年3月至2019年3月如皋市人民医院收治的48例成人CAEBV感染者,记录患者一般临床资料及EB病毒相关抗体、病毒载量和细胞免疫表型。 结果48例成人CAEBV患者年龄（40.8 ± 14.4）岁,均有发热症状。严重肝功能衰竭、Hermansky-Pudlak综合征（HPS）、中枢神经系统（CNS）病变和间质性肺炎发生率分别为29.2%（14/48）、47.9%（23/48）、12.5%（6/48）和22.9%（11/48）。患者血浆EBV DNA拷贝数中位数为2.9 × 10⁴（5 × 10²～5.8 × 10⁶）拷贝/ml。32例患者完成外周血淋巴细胞免疫表型检测,B细胞、NK细胞、CD4⁺ T细胞、CD8⁺ T细胞水平分别为25 × 10⁹/L（0,19.6 × 10⁹/L）、82.5 × 10⁹/L（54 × 10⁹/L,183 × 10⁹/L）,332.5 × 10⁹/L（178.25 × 10⁹/L,534.25 × 10⁹/L）,302 × 10⁹/L（190 × 10⁹/L,573.5 × 10⁹/L）,53.1%（25/48）患者出现CD4/CD8比值倒置（< 1）。CD38⁺CD8⁺ T细胞百分比中位数为93.2%（49.1%,99.7%）,HLA-DR⁺CD8⁺T细胞百分比的中位数为71.25%（17.1%,97.5%）。 结论成人CAEBV患者的临床特征与其外周血淋巴细胞免疫表型关系密切,B细胞、NK细胞和CD4⁺ T细胞水平多降低。     

三色荧光标记鉴定早孕蜕膜及外周免疫细胞组成

目的建立早孕妇女蜕膜免疫细胞高纯度的分离方法,流式细胞术多色荧光直接标记分析早孕蜕膜及外周血主要免疫细胞的构成比。方法经胶原酶消化、Percoll密度梯度离心、短期培养结合的方法分离纯化蜕膜免疫细胞,采用三色、双色及单色荧光直接标记流式细胞术分别检测早孕妇女和对照组中蜕膜、外周血CD3-CD56+CD16-和CD3-CD56+CD16+NK细胞、NKT和γδT细胞、T细胞和单核细胞的阳性率。结果与外周血相比,蜕膜免疫细胞以CD3-CD56+CD16-数量最多,约占免疫细胞总数的(67.02±18.33)%,T细胞占(11.05±7.22)%,单核细胞占(5.28±0.29)%,NKT细胞占(2.35±1.62)%;早孕妇女外周血T淋巴细胞较正常生育期妇女明显下降(P<0.05),而早孕妇女外周血中NK细胞、NKT细胞、单核细胞数量与对照组相比无显著差别。结论早孕妇女蜕膜中具有与外周血不同的免疫细胞组成,应用多色荧光标记的流式细胞术能够简单、直接地鉴定各免疫细胞亚群。     

不良IVF结局患者NK细胞信号通路调节FoxP3细胞表达的研究

目的探讨IVF不良结局患者叉头样转录因子P3(FoxP3)细胞表达情况及NK细胞信号通路调节机制。方法选取我院自2018年1月至2019年1月间收治的75例IVF不良结局患者作为研究对象,依据失败类型分成3组:实施IVF≥3次均未获得妊娠者(反复失败组)25例、实施IVF后仅生化妊娠患者(生化妊娠组)25例、实施IVF后妊娠12周内胚胎停止发育/自然流产者(流产胚停组)25例;选取同期生育1次健康未孕女性25例作为对照组。所有受检者均于卵泡末期采集静脉血液,EDTA抗凝后密度梯度离心法分离血液中的单个核细胞(PBMC),再用免疫磁珠法分离血液中的NK细胞、CD4+CD25-Treg细胞,流式细胞分析各组NK细胞亚群活性;实时定量PCR检测4组受检者CD4+CD25-Treg细胞中FoxP3 mRNA表达情况,并分析肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的NK细胞对于CD4+CD25-Treg细胞表达FoxP3的影响。结果与健康对照组比较,IVF不良结局各组CD56+、CD56+CD16+NK细胞水平均显著升高(P<0.05);IVF不良结局组中流产胚停组CD56+NK细胞水平显著高于其他两组(P<0.05)。IVF不良结局各组CD4+CD25-Treg细胞FoxP3 mRNA表达水平均显著低于健康对照组(P<0.05),且不良结局组中反复失败组、生化妊娠组CD4+CD25-Treg细胞FoxP3 mRNA表达水平显著低于流产胚停组(P<0.05)。体外刺激实验显示TNF-α诱导NK细胞下调CD4+CD25-Treg细胞FoxP3的表达(P<0.05)。结论IVF不良结局患者外周血中CD56+、CD56+CD16+NK细胞水平显著升高,而Treg细胞中Fox3 mRNA水平显著降低,且NK细胞能够下调Treg细胞中FoxP3的表达。     

复发性流产患者主动免疫治疗后淋巴细胞免疫表型的变化

目的探讨原因不明复发性流产(URSA)患者行淋巴细胞主动免疫治疗(LIT)后淋巴细胞免疫表型的变化对治疗效果的评估价值。方法采用流式细胞术分析URSA患者LIT前后外周血T淋巴细胞、B淋巴细胞、NK细胞和调节性T细胞免疫表型的变化(P0.05)。结果 25例URSA患者经LIT后成功妊娠16例,治疗后所有URSA患者(n=25)和妊娠成功组(n=16)外周血CD3+T细胞、CD4+HLA-DR+T细胞比例较治疗前均明显增加,CD4+T和CD3-CD56+NK细胞比例明显降低(P0.05);而治疗前后B细胞和Treg细胞、CD56bright CD16-NK、CD56dimCD16+NK、CD3+CD56+NKT及CD69+NK细胞比例则无明显变化(P0.05)。结论 LIT后外周血T细胞、NK细胞的比例发生了明显变化,CD4+T细胞、CD3-CD56+NK细胞比例降低和CD3+T细胞、活化CD4+T细胞增加也许有利于维持妊娠,T细胞和NK细胞的免疫表型有望作为LIT疗效评估的一个重要指标。     

Luminex液相蛋白芯片用于研究着床窗期子宫内膜和早孕蜕膜基质细胞的细胞因子的表达谱

目的探索着床窗期子宫内膜和早孕期蜕膜基质细胞的细胞因子谱表达及其对胚胎着床和早期妊娠的可能影响。方法获取着床窗期子宫内膜基质细胞(ESC)和早孕期蜕膜基质细胞(DSC)进行体外培养,采用Luminex液相蛋白芯片技术检测细胞培养上清液中15种细胞因子:肿瘤坏死因子(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-1β、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12、颗粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、颗粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、巨噬细胞炎症蛋白-1α(MIP-1α)、单核细胞趋化蛋白因子-1(MCP-1)、受调节激活的正常T细胞排泌的因子(RANTES)和γ干扰素诱导蛋白10(IP-10)的含量变化,比较两者表达的差异。结果DSC分泌多种细胞因子,与ESC相比,其中TNF-α、IFN-γ、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、IP-10、GM-CSF、G-CSF、MIP-1α、RANTES表达下调,有极显著差异(P<0.001);IL-4表达上调,有显著差异(P<0.01);MCP-1、IL-2和IL-12表达无明显变化。不同时期表达的细胞因子之间存在复杂的相关关系。结论从着床窗期子宫内膜到早孕期蜕膜基质细胞表达的细胞因子谱的水平发生变化,可能对调控胚胎着床和维持早期妊娠起着重要作用。     

胰岛素样生长因子结合蛋白1-3在人早孕期蜕膜和绒毛中的表达及其作用

目的探讨胰岛素样生长因子结合蛋白1-3(IGFBP1-3)在早孕期蜕膜和绒毛中的表达及其作用。方法选取早孕5~7周行人工流产术的蜕膜和绒毛标本共48例,每一孕周分早、中、晚三个时期,每个时期5~6例,以分泌中期(周期第21天)子宫内膜标本为对照。采用免疫组织化学LsAB法和计算机图像分析法对IGFBP1-3在围着床期子宫内膜、蜕膜和绒毛滋养细胞的表达进行定位和定量分析。结果IGFBP1-3在子宫内膜腺、腔上皮、蜕膜细胞和绒毛滋养层中都有表达,其表达在孕5~6周达峰值,与对照的分泌中期内膜比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论IGFBP1-3在早孕期表达增强,推测可能参与了子宫内膜的蜕膜化、滋养层细胞侵袭性以及早期胚胎发育的调节过程。     

外周血CD3^+T淋巴细胞对习惯性流产患者不良妊娠的预测价值

目的探讨习惯性流产(RPL)患者再次妊娠早孕期外周血CD3+T细胞水平与妊娠结局的关系。方法选择2017年12月至2018年10月就诊于我院妇产科的RPL再次妊娠早孕期患者60例为研究对象,选择同期本院常规产检的无既往自然流产史正常早孕妇女50例为对照;收集临床资料,采用流式细胞仪检测两组外周血CD3^+、CD3^+CD4^+、CD3^+CD8^+T细胞水平。根据随访的妊娠结局分为RPL成功分娩组(24例)、RPL再次流产组(36例)和正常成功分娩组(48例),比较各组外周血CD3^+、CD3^+CD4^+、CD3^+CD8^+T细胞水平的差异,分析影响RPL再次流产的危险因素。结果 RPL再次流产组、RPL成功分娩组孕次显著高于正常成功分娩组(P<0.001);RPL再次流产组外周血CD3^+和CD3^+CD4^+T细胞比值显著高于RPL成功分娩组和正常成功分娩组(P<0.05);RPL成功分娩组外周血CD3^+T细胞比值显著高于正常成功分娩组(P<0.05);3组CD3^+CD8^+T细胞比值相比较,差异无统计学意义(P>0.05);单因素和多因素Logistic回归分析显示,CD3^+、CD3^+CD4^+T细胞是影响RPL患者再次流产的独立危险因素(P<0.05);CD3^+T细胞临界值为79.02%时,预测RPL患者再次流产的曲线下面积(AUC)为0.836[95%CI(0.717,0.919)],特异性为91.7%,敏感性为63.9%。结论 RPL患者再次妊娠在早孕期检测外周血CD3^+T细胞将有助于预测患者妊娠结局。     

不同免疫抑制方案对肾移植术受者CD4~+ Foxp3~+ 调节性T细胞的影响

目的 探讨不同免疫抑制剂方案对肾移植术受者外周血CD4~+ Foxp3~+调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)表达水平的影响.方法 定群研究了2006年1月至2008年1月在本移植中心接受初次移植50例随访满1年肾移植受者,分为钙调神经蛋白抑制组(钙调神经蛋白抑制剂+吗替麦考酚酯+强的松)19例,其中环孢素组10例,他克莫司组9例;雷帕霉素组(雷帕霉素+吗替麦考酚酯+强的松)31例.另取20例行规律血液透析终末期肾病患者为对照组.采用流式细胞仪的方法检测3组外周血CD4~+ Foxp3~+ Treg占CD4~+ T细胞的比例,比较各组间表达水平与不同免疫抑制方案的关系.结果 钙调神经蛋白抑制剂组、雷帕霉素组和终末期肾病组3组年龄、性别比无统计学差异(P>0.05).钙调神经蛋白抑制剂组、雷帕霉素组2组冷缺血时间、HLA错配率、群体反应性抗体(PRA)和急性排斥反应发生率无统计学差异(P>0.05).雷帕霉素组和终末期肾病组CD4~+ Foxp3~+ T细胞占CD4~+ T细胞的比例均明显高于钙调神经蛋白抑制组,差异有统计学意义(P<0.01).使用环孢素患者和他克莫司患者外周血中CD4~+ Foxp3~+ T细胞占CD4~+ T细胞的比例之间无显著性差异(P>0.05).结论 肾移植术后服用雷帕霉素组患者外周血CD4~+ Foxp3~+ Treg占CD4~+ T细胞的比例显著高于服用钙调神经蛋白抑制组患者,提示雷帕霉素有助于诱导宿主对移植肾免疫耐受.     

解偶联蛋白2在蜕膜巨噬细胞活性调控中的作用及与复发性流产的关系

目的探讨蜕膜巨噬细胞解偶联蛋白2(UCP2)表达、细胞内活性氧(ROS)、吞噬活性之间的关系及其在原因不明复发性流产发病中的作用。方法采用免疫磁珠法分离11例原因不明复发性流产患者和12例正常早孕妇女蜕膜巨噬细胞,流式细胞技术检测两组蜕膜巨噬细胞UCP2的表达、细胞内ROS水平;同时检测巨噬细胞吞噬活性。结果蜕膜巨噬细胞UCP2表达与细胞内ROS水平负相关(r=-0.572,P0.01),与巨噬细胞吞噬活性负相关(r=-0.462,P0.05)。与正常早孕妇女比较,原因不明复发性流产患者蜕膜巨噬细胞UCP2表达明显下降,细胞内ROS水平升高,其吞噬活性增强。结论UCP2通过控制巨噬细胞内ROS水平,调节细胞活性,在维持正常妊娠免疫耐受和原因不明复发性流产发病中起重要作用。     

Superiority of bone marrow-derived dendritic cells over monocyte-derived ones for the expansion of regulatory T cells in the macaque

Regulatory T cells (Treg) have been identified as playing a pivotal role in the control of tolerance and in the suppression of pathologic immune responses in autoimmune diseases, transplantation, and graft-versus-host disease. Treg expanded ex vivo by dendritic cells could be potential reagents to promote antigen-specific tolerance in vivo. However, in vivo studies have been carried out mostly in rodents and will need validation in primates before clinical application. We characterized macaque dendritic cell derived either from bone marrow with and without prior CD34+ cell selection (BMDC), or from CD14+ peripheral blood mononuclear cells (Mo-DC). We demonstrate that with a semi-mature phenotype, BMDC are superior to Mo-DC in their capacity to expand freshly isolated allogeneic macaque CD4+ CD25+ CD127- Foxp3+ Treg in vitro in the presence of interleukin-2. Moreover, the expanded Treg maintain their phenotype and suppressive activity. These data provide a step toward the use of macaque dendritic cell to expand Treg for future preclinical testing.