异丙酚预处理对拟AD模型大鼠海马CA1区ChAT表达的影响

目的 观察异丙酚预处理对拟阿尔茨海默病(AD)大鼠海马CA1区胆碱乙酰转移酶(choline acetyl-transferase,ChAT)表达的影响,分析异丙酚的脑保护作用.方法 30只健康雄性SD大鼠随机分为对照组、拟AD模型组(简称模型组)和异丙酚预处理组(简称异丙酚组).模型组、异丙酚预处理组在大鼠海马CA1区微量注射冈田酸(Okadaic acid,OA),建立拟AD大鼠模型.异丙酚预处理组大鼠于拟AD模型制作前30 min,腹腔注射异丙酚100 mg/kg.然后用免疫组化方法观察大鼠海马CA1区ChAT的表达.结果 30只大鼠顺利完成全部实验的有27只,模型组和异丙酚预处理组有2只大鼠死亡、1只出现偏瘫无法进行余下实验,这可能与动物的个体差异不能耐受实验有关.随机取27只大鼠作为结果分析样本(每组9只).①模型组与对照组大鼠相比:海马CA1区ChAT免疫组化阳性表达明显减少(P＜0.05);②异丙酚预处理组与模型组大鼠相比:海马CA1区ChAT免疫组化阳性表达明显增多(P＜0.05).结论 拟AD模型建立前30 min异丙酚预处理能增强ChAT的表达,有明显的脑保护作用.     

银杏内酯对拟AD模型大鼠空间学习记忆能力和脑内ChAT表达的影响

目的探讨银杏内酯对拟AD大鼠学习记忆能力影响的可能机制。方法大鼠海马OA(Okadaic acid)微量注射,银杏内酯灌胃。水迷宫实验检测大鼠学习记忆能力;West-ern blot实验检测大鼠海马烟碱型胆碱能受体的表达;免疫组化观察大鼠脑内ChAT的表达。结果与对照组比较,模型组大鼠学习记忆能力明显下降(P<0.01),烟碱型胆碱能受体表达减少(P<0.05),ChAT免疫阳性神经元减少(P<0.05)。与模型组相比,银杏内酯组大鼠学习记忆能力明显提高(P<0.01),烟碱型胆碱能受体表达增多(P<0.05),ChAT免疫阳性神经元增多(P<0.05)。结论银杏内酯提高拟AD大鼠的学习记忆能力可能与其改善模型鼠胆碱能系统的功能有关。     

银杏内酯对OA诱导拟AD大鼠行为学和海马bcl-2表达的影响

目的研究银杏内酯对冈田酸(OA)诱导拟AD大鼠行为学和海马CA1区bcl-2表达的影响。方法大鼠海马CA1区多次微量注射OA,建立拟AD动物模型。部分模型动物同时用银杏内酯灌胃。Morris水迷宫实验检测大鼠学习记忆能力,免疫组化方法观察大鼠海马CA1区bcl-2表达。结果与拟AD模型组相比,银杏内酯组水迷宫定向航行试验平均潜伏期明显缩短(P<0.05或P<0.01);空间探索试验原站点象限活动时间明显延长(P<0.05),站台穿越次数明显增多(P<0.05)。大鼠海马CA1区bcl-2阳性表达明显增多(P<0.05)。结论促进海马CA1区bcl-2表达上调,从而减少神经细胞的凋亡是银杏内酯改善拟AD大鼠学习记忆的可能机制之一。     

川芎嗪对拟AD小鼠脑胆碱乙酰基转移酶和NMDA受体的影响

目的探讨川芎嗪(TMP)对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠脑胆碱乙酰基转移酶(ChAT)和N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体的影响。方法 56只小鼠随机分为五组:正常对照组(A组,10只)、D-半乳糖(D-gal)模型组(B组,10只)、TMP低、高剂量组(C、D组,各12只)和哈伯因阳性对照组(E组,12只)。Morris水迷宫测试学习记忆功能,同时进行大脑皮层、海马ChAT活性测定和NMDA受体结合试验。结果与A组相比,B组学习记忆能力和海马NMDA受体含量均下降(P<0.01);TMP可明显改善模型小鼠的学习记忆能力,增强皮层和海马ChAT活性,上调海马NMDA受体数目(P<0.05)。结论 TMP可明显提高模型小鼠的学习记忆功能,这可能与增强ChAT活性及保护NMDA受体有关。     

银杏内酯B对胚胎大鼠中脑神经元发育的影响

目的:探讨银杏内酯B(GB)对胚胎大鼠中脑神经元发育的影响。方法:体外原代培养胚胎大鼠中脑神经细胞,实验分6组:对照组、NGF(神经生长因子)阳性药物组、GB组、KA(海人藻酸)毒性模型组,NGF+KA组、GB+KA组,采用SP法进行免疫组化染色,观察中脑神经细胞在不同条件处理下,神经特异性烯醇化酶表达情况;测量NSE(神经特异性烯醇化酶)阳性神经细胞数、胞体面积、突起数/细胞、最长突起长度在不同组间的差异。结果:NGF组和GB组4项指标值均大于对照组;KA组则小于对照组;GB+KA组和NGF+KA组明显大于KA组,小于对照组。NGF组和GB组;GB+KA组和NGF+KA组之间差异无显著性。结论:GB可促进胚胎大鼠中脑神经元发育。其机制可能与提高糖代谢过程中NSE酶蛋白的表达有关。     

银杏内酯对结扎大鼠冠状动脉致心肌缺血的影响

目的:研究银杏内酯对大鼠心肌缺血的保护作用.方法:大鼠按体重分为7组,分别为银杏内酯10,20,40mg·kg-1组,银杏叶提取物150mg·kg-1组,普萘洛尔5mg·kg-1组,模型组和正常组.采用结扎冠状动脉左前降支造成心肌梗死模型,分别测定手术后各组大鼠的心肌损伤范围(坏死及缺血范围),血清磷酸肌酸激酶(CPK)、乳酸脱氢酶(LDH)活性及心肌组织中丙二醛(MDA)含量.结果:银杏内酯(10,20,40mg·kg-1)能明显减轻心肌损伤,降低心肌缺血大鼠血清中LDH和CPK活力及MDA含量.结论:银杏内酯对结扎大鼠冠状动脉所致心肌缺血损伤具有明显的保护作用.     

银杏内酯联合胰岛素对拟阿尔茨海默氏病大鼠学习记忆的作用

目的：观察银杏内酯和胰岛素联合应用对拟阿尔茨海默氏病（Alzheimer disease，AD）大鼠学习记忆能力的影响，并探讨其作用的可能机制。方法：大鼠海马CAl区微量注射冈田酸（Okadaic acid，OA），建立AD大鼠模型，侧脑室微量注射胰岛素、胃灌注银杏内酯进行预处理。检测大鼠学习记忆能力，观察海马CA1区神经原纤维缠结（neurofibrillary tangle，NFr）及神经胶质原纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein，GFAP）的表达。结果：与模型组比较，银杏内酯组、联合组的学习记忆能力明显改善（P〈0．05）；CA1区NFT和GFAP表达减少（P〈0．05），联合组更为显著（P〈0．05）。结论：银杏内酯和胰岛素联合应用对拟AD大鼠学习记忆的改善作用强于单用银杏内酯，同时减少海马CA1区神经细胞Tau蛋白的磷酸化以及神经胶质细胞增生和肥大，这可能是改善模型鼠学习记忆能力的机制之一。     

银杏内酯C对正常大鼠在体心功能的影响

目的:探讨银杏内酯C(Ginkgolide C,GC)对正常大鼠在体心功能的影响。方法:正常大鼠麻醉后,用连接压力换能器的插管经右侧颈总动脉逆行插入左心室,并用PowerLab生物信号采集系统检测心功能。经颈静脉分别给予生理盐水、1‰的二甲基亚砜(DMSO)、100μmol/L的GC、1 000μmol/L的GC各1mL,通过连续记录左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末压(LVEDP)、心脏收缩期左心室内压上升的最大变化速率(+dp/dtmax)、舒张期左心室内压下降的最大变化速率(-dp/dtmax)和心率(HR)等心功能指标来测定给药前后心功能的变化。结果:与正常条件下相比,给予浓度为100μmol/L的GC 1mL后,对心功能各指标均无明显影响;给予浓度为1 000μmol/L的GC 1mL后对正常大鼠心脏产生正性肌力的作用,能明显增强左心室内压差(△LVP)、+dp/dtmax、-dp/dtmax等心功能指标,但对HR无明显影响。结论:银杏内酯C能增加左心室内压力差,增强心肌的收缩和舒张功能,而对心率没有影响,对心脏具有一定程度的正性肌力作用。     

恒河猴大脑注射Aβ1-42 和Thiorphan对胆碱能神经元影响的研究

目的 观察颅内灌注Aβ1-42和Thiorphan给药后恒河猴基底、核大脑皮质等部位胆碱能神经元的改变.方法 将恒河猴4只,分为对照组(1只)与实验组(3只),对照组开颅后只注射0.9%氯化钠溶液,实验组开颅后先注射Thiorphan到猕猴的基底核和大脑皮质消耗已存在的Neprilysin,然后再缓慢的注射孵育好的纤丝状Aβ1-42,再植入含有Thiorphan的微渗透泵到基底核.免疫组织化学方法检测大脑切片胆碱乙酰转移酶(ChAT)免疫反应活性及阳性神经元数量及形态学改变.结果 给药后实验组恒河猴基底核、皮质等部位的胆碱能神经元数量减少和ChAT水平降低.结论 Aβ1-42和Thiorphan联合颅内给药后损害大脑基底核、皮质等部位的胆碱能神经元.     

银杏内酯B对肺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的：探讨银杏内酯B（Ginkgolide B,GB）抑制肺癌细胞增殖,诱导细胞凋亡的作用机制。方法：以人肺腺癌细胞A549、人肺鳞癌细胞NCI-H520、人非小细胞肺癌NCI-H1975共3种肺癌细胞株为实验对象,MTT法检测GB对肺癌细胞增殖的抑制作用;Transwell小室法检测GB对肺癌细胞侵袭力的影响;划痕法检测GB对肺癌细胞迁移能力的影响;流式细胞术检测GB对肺癌细胞增殖周期、凋亡的影响;Western blot检测Bcl-2、Bax、Cleaved caspase-3蛋白表达。结果：GB对A549、NCI-H520及NCI-H1975细胞的生长抑制作用均呈时间和剂量依赖性,抑制率随着GB浓度的增加和处理时间的延长而升高;GB处理细胞后,小室膜下表面的细胞数与对照组相比明显减少,对A549、NCI-H520及NCI-H1975细胞的侵袭抑制率分别为35.6%、28.9%、30.2%;GB作用后肺癌细胞较对照组移行愈合率明显降低（P<0.05）。与对照组相比,低、中、高剂量的GB作用于肺癌细胞后,各给药组细胞G₀/G₁比例均明显升高（P<0.05）,细胞凋亡率显著增加（P<0.05）,并呈剂量相关性。并下调Bcl-2蛋白表达、上调Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达（P<0.05）。结论：GB对肺癌细胞的侵袭迁移具有明显的抑制作用,对肺癌细胞生长的抑制作用与阻断细胞增殖周期、诱导凋亡有关。其作用机制与下调Bcl-2蛋白表达、上调Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达水平有关。     

丹参、川芎嗪复方制剂对老年性痴呆模型大鼠红细胞及脑组织SOD、MDA的影响研究

目的:研究丹参、川芎嗪复方制剂(DCs)对老年性痴呆(AD)模型大鼠红细胞及脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的影响。方法:以AlCl3和D-半乳糖复制AD大鼠模型,以脑复康作阳性对照,观察DCs对AD模型大鼠红细胞及脑组织SOD、MDA的影响。结果:DCs组大鼠红细胞及脑组织中SOD活性显著高于AD模型组(P<0.05或P<0.01);MDA含量显著低于AD模型组(P<0.05或P<0.01)。结论:DCs能有效提高AD模型大鼠红细胞及脑组织SOD的活性,降低MDA含量。     

健脑生智口服液对老年痴呆大鼠的学习记忆功能的影响

目的：研究健脑生智口服液对老年痴呆模型大鼠学习记忆功能的影响。方法：大鼠60只,采用腹腔注射东莨菪碱法和AlCl3法复制老年痴呆模型,随机分为正常对照组、模型组、阳性脑复康组（0．301g·kg^-1）、健脑生智口服液高剂量组（16．8g·kg^-1）、中剂量组（8．4g·kg^-1）、低剂量组（4．2g·kg^-1）,测定脑组织中SOD、MDA、Na^＋ -K^＋-ATP酶活性及血清、脑组织中AchE活性、脑蛋白含量。结果：健脑生智口服液能升高脑组织SOD活性、降低MDA活性,提高Na^＋-K^＋-ATP酶活性,降低脑、血清中AchE活性,增加脑蛋白含量。结论：健脑生智口服液能增强老年痴呆大鼠的学习记忆能力。     

Meserine对胆碱酯酶活性及东莨菪碱诱导痴呆小鼠学习记忆的影响

目的：考察新型胆碱酯酶抑制剂Meserine对胆碱酯酶活性及东莨菪碱（Scopolamine）诱导的胆碱能障碍痴呆模型小鼠学习记忆的影响。方法：选取小鼠脑匀浆、血浆、人源重组AChE（rHuAChE）为体外酶源,测定Meserine抑制AChE／BuChE的活性、选择性及酶动力学。通过鼻腔给药后检测脑部AChE活性和ACh浓度评价Meserine对小鼠脑内胆碱能系统的调节。选用避暗及水迷宫实验考察Meserine对痴呆模型小鼠学习记忆功能的影响。结果：Meserine对AChE和BuChE都具有较好的抑制活性,IC50分别为（65．2±3．2）nmol／L和（86．7±4．9）nmol／L,并对rHuAChE呈现非竞争性抑制。经鼻给药Meserine可显著抑制脑内AChE活性、升高ACh水平,且二者变化的时程具有一致性,给药15min后,AChE抑制活性最强（26．9％）,ACh浓度最高（1269．0ng／g）。行为学实验结果显示,经鼻给药Meserine（10μg／kg）能显著改善东莨菪碱诱导的痴呆模型小鼠的工作记忆及空间学习能力,较模型组具有统计学差异（P〈0．OlVS东莨菪碱组）。结论：上述结果提示Meserine为强效非竞争性胆碱酯酶抑制剂,经鼻给药Meserine可通过调节脑内胆碱能系统有效改善东莨菪碱诱导的痴呆模型小鼠的学习记忆功能。     

Methyl group balance in brain and liver: Role of choline on increased S-adenosyl methionine (SAM) demand by chronic arsenic exposure

Arsenic toxicity has been related to its interference with one carbon metabolism, where a high demand of S-adenosylmethionine (SAM) for arsenic methylation as well as a failure of its regeneration would compromise the availability of methyl groups for diverse cellular functions. Since exposed animals show disturbances of methylated products such as methylated arginines, myelin and axon membranes, this work investigates whether alterations of SAM, choline and phosphatidylcholine (PC) in the brain of arsenic exposed rats are associated with myelin alterations and myelin basic protein (MBP) immunoreactivity. Also these metabolites, morphologic and biochemical markers of methyl group alterations were analyzed in the liver, the main site of arsenic methylation. In adult, life-long arsenic exposed rats through drinking water (3 ppm), no changes of SAM, choline and PC concentrations where found in the brain, but SAM and PC were severely decreased in liver accompanied by a significant increase of choline. These results suggest that choline plays an important role as methyl donor in arsenic exposure, which could underlie hepatic affections observed when arsenic exposure is combined with other environmental factors. Also, important myelin and nerve fiber alterations, accompanied by a 75% decrease of MBP immunoreactivity were not associated with a SAM deficit in the brain.     

毛果芸香碱治疗原发性干燥综合征44例疗效观察

目的观察毛果芸香碱治疗原发性干燥综合征所致口干的疗效和不良反应。方法44名原发性干燥综合征患者参加本随机双盲对照试验。患者随机接受4mg毛果芸香碱或16mg必嗽平片剂。每天4次,共28d。通过对主观口干症状评价和唾液量分泌量测定方式进行全面评估。结果与对照组相比,毛果芸香碱组口干不适症状获得显著改善、唾液分泌量明显增加。结论表明毛果芸香碱治疗干燥综合征口干有效、安全,而且耐受性良好。     

复合氨基酸注射液（17AA）中N—乙酰—L—酪氨本通讯N—乙酰—L—半胱氨酸的HPLC测定

对复合氨基酸注射液（17AA）中含量较低的N-乙酰-L-酪氨酸及N-乙酰-L-半胱氨酸用HPLC法进行测定,采用阳离子交换色谱柱,以水（取0.05mol/L硫酸1ml置1000ml量瓶中以水定容,调节pH至3.0)为流动相,检测波长为210nm。该方法在10-100ug/ml范围呈良好的线性,相关系数分别为0.9996和0.9999,平均回收率分别为99.94%和99.72%,RSD分别为0.42%及1.19%。     

Amelioration of cognitive deficits and neurodegeneration by curcumin in rat model of sporadic dementia of Alzheimer's type (SDAT)

Recent evidence indicates that curcumin (CUR), the principal curcuminoid of turmeric, exhibits antioxidant potential and protects the brain against various oxidative stressors. The aim of the present study was to examine the modulating impacts of CUR against cognitive deficits and oxidative damage in intracerebroventricular–streptozotocin (ICV–STZ) infused rats. Rats were injected bilaterally with ICV–STZ (3 mg/kg), while sham rats received the same volume of vehicle and then supplemented with CUR (80 mg/kg) for three weeks. After two weeks of ICV–STZ infusion, rats were tested for cognitive performance using passive avoidance and water maze tasks and then sacrificed for biochemical and histopathological assays. ICV–STZ rats showed significant cognitive deficits, which were significantly improved by CUR supplementation. CUR supplementation significantly augmented increased 4-hydroxynonenal (4-HNE) and malonaldehyde (MDA), thiobarbituric reactive substances (TBARS), hydrogen peroxide (H₂O₂), protein carbonyl (PC) and oxidized glutathione (GSSG); decreased levels of reduced glutathione (GSH) and its dependent enzymes (Glutathione peroxidase [GPx] and glutathione reductase [GR]) in the hippocampus and cerebral cortex; and increased choline acetyltransferase (ChAT) activity in the hippocampus of ICV–STZ rats. The study suggests that CUR is effective in preventing cognitive deficits, and might be beneficial for the treatment of sporadic dementia of Alzheimer's type (SDAT).     

酸性寡糖对阿尔茨海默病模型小鼠脑内基因表达的影响

目的应用基因芯片检测酸性寡糖971对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠脑内基因表达谱的影响。方法 Balb/c小鼠随机分为对照组、AD模型组(β-AP_25-35侧脑室注射)和971给药组，采用Morris水迷宫测试小鼠行为学改变；提取各组小鼠大脑皮层总RNA，与含有1 176个基因的cDNA表达谱芯片进行杂交。并用RT-PCR对其中5个基因表达进行验证。结果AD模型组寻找平台潜伏期比对照组显著延长，给予971可使其明显缩短。基因芯片结果显示，模型组与对照组存在表达差异的基因共有31个，其中上调19个，下调12个；给药组与模型组存在表达差异的基因共有17个，其中上调13个，下调4个。RT-PCR结果显示基因变化趋势与芯片结果相符。结论酸性寡糖971改善AD模型小鼠学习记忆功能可能与DNA损伤修复、神经生长、突触可塑性、免疫应答等相关基因的表达变化有一定关系。