抗白色念珠菌鸡卵黄抗体(IgY)的研制

目的：观察鸡蛋黄中抗体的产量、纯度、来源及稳定性。方法：应用白色念珠菌作为抗原免疫25周龄Leghorn鸡，通过改良水溶法（WD）提取蛋黄中抗体IgY，双紫外光测定抗体含量，SDS-APGE电泳检测抗体纯度，Western blot免疫印迹法测定该抗体来源，ELISA检测热处理后的抗体活性。结果：抗体含量13mg/ml蛋黄液，抗体纯度达到95%，Western blot免疫印迹证明该抗体与鸡血清中的IgG具有相同的分子量和抗原性。ELISA检测热处理后的抗体活性，其具有良好的热稳定性。结论：鸡蛋黄内含有丰富的抗体，通过WD水溶提取法可得到高产量，高纯度的特异性抗体IgY，证明其来源于鸡血清中的IgG，对热具有高度稳定性。     

卵黄抗体IgY应用于医药领域的研究进展

由于卵黄抗体(IgY)在分子结构和生物学上的优势,使得IgY制备成了热门的抗体研究领域.本文综述了IgY在抗肿瘤、抗病毒、胃肠道疾病预防等方面的研究进展,指出IgY可以用来替代传统的IgG抗体,具有广阔的研发前景.     

抗内毒素IgY的制备及稳定性研究

目的 用大肠杆菌J5制备特异抗内毒素IgY，探索防治内毒素血症的新途径。方法 用大肠杆菌J5作抗原免疫25周龄Roman鸡，水溶法提取抗体，进行SDS-PAGE及Western blot分析，通过酶联染色反应检测其免疫学活性，ELISA检测其时酸、碱和酶的稳定性。结果 抗体含量为11．4mg／ml蛋黄液，纯度为92．3％，分子量为180KD，初步鉴定其时内毒素具有特异性结合作用，并且对酸、碱、酶有很好的稳定性。结论 用大肠杆菌J5株免疫鸡可刺备出特异性抗内毒素的IgY，且具有良好的稳定性，作为口服制剂为预防和治疗内毒素血症奠定了基础。     

抗白色念珠菌IgY的稳定性与应用研究

目的：观察抗白色念珠菌鸡蛋黄抗体IgY的稳定性与体外生物学效应。方法：用水溶法从免疫鸡蛋黄中提取抗白色念珠菌抗体IgY,ELISA法检测抗体耐热,耐酸,耐碱的稳定性,观察IgY抑制白色念珠菌生长和抑制白色念珠菌粘附肠上皮细胞（IEC－6）,结果：IgY在巴氏消毒后活性为对照的61％,在pH7.0至3．0酸性环境中活性改变不显著,在pH7.9,37℃作用150min活性仍对照的60％,IgY在10mg/ml时能明显抑制白色念珠菌生长和对肠上皮细胞的粘附,明显降低细胞上清二胺氧化酶（DAO）释放。结论：鸡蛋黄抗抗IgY具有高度稳定性和良好的体外生物学效应。,     

抗肌A—A^＊0201重链卵黄抗体的制备及初步鉴定

OBJECTIVE: To prepare a high-titer specific and efficient egg yolk immunoglobulin (IgY). METHODS: The antigen of HLA-A* 0201 heavy chain was used to immunize the hens together with Freud's adjuvant and the eggs these hens laid were collected. IgY was purified from the egg yolk by water extraction, salt precipitation with ammonium sulfate and dialysis. The immunoactivity of the IgY was measured by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and its purity was determined by SDS-PAGE. RESULTS: The titer of IgY was 1 10(6) as shown by ELISA, with protein concentration of 9.77 mg/ml. The purity of the resultant IgY was more than 90% as suggested by SDS-PAGE analysis. CONCLUSIONS: The antigen of HLA-A* 0201 heavy chain along with complete Freund adjuvant is effective to elicit an immune response of hens for producing IgY antibodies in high yields.     

抗脑囊虫头节和囊壁鸡卵黄抗体的制备

鸡卵黄免疫球蛋白IgY(Yolk Immunoglobulin)是近几年研究的热点,本文把IgY用于对脑囊虫抗体的制备,为囊虫抗体的获取开辟了新思路.自新鲜病猪肉中摘取猪囊尾蚴,用TBS缓冲液浸洗并吸干水分.然后将头节和囊壁剥离,经离心及饱和硫酸铵溶液处理制成抗原.用分光光度法测定蛋白含量.将抗原与福氏完全佐剂混合制成乳浊液,免疫34周龄美国海兰特产蛋母鸡40只,分为2组,每组20只.分别进行头节和囊壁抗原的免疫,每只鸡以1ml抗原于左右背部和胸部多点注射.     

鸡卵黄抗体的制备及其不均一性

介绍了免疫期卵黄液中白蛋白（牛）抗体效价和亲合力的变化。研究了ＰＨ对稀释卵黄液去脂效果，以及硫酸铵浓度对ＩｇＹ浓缩、纯化效果的影响。探讨了抗白蛋白ＩｇＹ的异质性。实验表明稀释卵黄液酸化处理和ＩｇＹ盐析的最适合条件分别是ＰＨ５．１和２．２ｍｏｌ／Ｌ。经免疫亲和柱层析或金属螯合亲和柱层析后，白蛋白抗体样品均出现多个不同层析行为的抗体峰。实验提示免疫卵黄液中不仅可能存在不同亲合力、特异性的白蛋白抗体，还     

抗脂蛋白脂酶卵黄抗体IgY的制备

目的:用人脂蛋白脂酶制备鸡卵黄抗体,并研究其应答持久性、稳定性.方法:用纯化的人脂蛋白脂酶免疫生蛋鸡,琼脂糖免疫扩散法测定IgY抗体效价变化.PEG法结合Sephadex-150凝胶过柱提取抗体;ELISA法测抗体对酸、碱、酶的稳定.结果:免疫后大约3～4周抗体效价达到高值,此高效价可持续3个月;抗体含量为8.11mg/ml蛋黄;IgY在70℃以下基本不失活;在pH4～10时活性无明显变化;胃蛋白酶处理90min后IgY活性稳定.结论:用人脂蛋白脂酶免疫鸡可制备高效价的特异抗体IgY,抗体应答时间持久、稳定性好.     

抗致龋病IgY的制备及防龋功能的观察

目的：制备具有高效免疫活性的抗致龋菌鸡卵黄免疫球蛋白（ＩｇＹ），评估其临床防龋功能。方法：以变形链球菌皮下注射免疫产蛋母鸡，采用聚乙二醇（ＰＥＧ）两步沉淀法提取ＩｇＹ，微量凝集试验检测ＩｇＹ免疫效价及交叉免疫特性，并观察其抑菌效果，与含氟漱口水比较其临床防龋功能。结果：作者制备的ＩｇＹ免疫效价为１：５１２，具有抑制变形链球菌生长，并与其他较常见的变形链球菌ｃ、ｅ、ｆ血清型结合发生交叉凝集反应，经临床验证结果表明ＩｇＹ漱口水与含氟漱口水龋患发生率相近。结论：抗变形链球菌鸡卵黄免疫球蛋白制剂具有防龋功能。     

抗内毒素IgY体外拮抗内毒素效应的实验研究

目的观察抗内毒素鸡卵黄抗体(IgY)在体外拮抗内毒素(LPS)的作用.方法①用不同浓度IgY与LPS直接体外中和作用,检测剩余LPS的量,观察二者的量效关系;②以培养的原代人脐静脉内皮细胞(HUVEC)为模型,加入一定浓度的FITC-LPS及IgY,观察各时相点细胞的荧光强弱变化;③加入一定浓度的LPS及IgY,观察各时相点培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)的活性变化.结果①当二者浓度比为16:1时,有较好的量效关系;②在4、8、12 h 3个时相点,单纯FITC-LPS结合组细胞均显示较亮的荧光,且强弱没有明显的区别,在IgY拮抗组的3个时相点,荧光均有减弱,以8、12 h较明显;③LDH的活性在LPS攻击8 h后明显升高(P＜0.01),IgY拮抗组LDH的活性在8h后明显降低(P＜0.01).结论在体外,特异性IgY有较强的拮抗LPS的作用.     

以类脂A为靶点应用生物传感器技术筛选抗内毒素中草药

目的以细菌内毒素活性中心类脂A(Lipid A)为靶点,应用生物传感器技术,从42种中草药水煎液中筛选拮抗内毒素作用的中药。方法将Lipid A包被于生物传感器的疏水性样品池,通过生物传感器测定中药与Lipid A的结合能力;对具有高亲和力的中药与内毒素作用,再次测定其与Lipid A的结合能力,并通过定量的内毒素中和实验进一步的对生物传感器的测定结果进行验证。结果在筛选的42种中草药中,观察到赤芍、大黄、青果、栀子等中药能与Lipid A高亲和力结合;通过与内毒素作用后的二次检测,发现赤芍、大黄、青果等中草药含有较高Lipid A结合的有效成分,定量内毒素中和实验的测定结果与生物传感器的定性检测结果一致。结论以Lipid A为靶点,应用生物传感器技术,筛选拮抗内毒素中草药的方法,具有快速、高效、直观、准确的优点。     

抗大肠杆菌IgY对大鼠全腹照射后肠源性感染的预防作用

目的　建立大鼠全腹照射模型 ,观察抗大肠杆菌IgY管饲对大鼠肠粘膜结构的变化和细菌移位的影响及对肠源性感染的预防作用 ,为临床上预防放射性肠粘膜损害以及肠源性感染提供实验依据。方法　健康SD大鼠 30只 ,体重 ( 2 0 0± 2 0 ) g ,雌雄各半。大鼠随机分为 3组 (每组 10只 ) :正常对照组 (A组 )、照射对照组 (B组 )、IgY预防组 (C组 )。用直线加速器对大鼠进行全腹照射 ,总照射剂量为 10 0 0cGy。自照射前一天开始进行IgY管饲。A、B两组大鼠不灌任何药物 ,C组大鼠以 10 %抗大肠杆菌IgY水溶液 1.5ml管饲 ,q12h。持续 4d。照射后第 4天处死大鼠 ,无菌条件下打开腹腔 ,取肝、脾及肠系膜淋巴结制成匀浆 ,行细菌培养 ,统计细菌移位率 ;从心腔采血 ,分离血清 ,测定内毒素水平。结果　B组细菌移位明显 ,肝、脾、淋巴结组织细菌培养总阳性率达 96 .7% ,血清内毒素水平明显升高 ;C组肝、脾、淋巴结组织细菌培养总阳性率为 6 .7% ,血清内毒素水平下降 ,且与A组相比均有显著性差异 (P <0 .0 5～ 0 .0 0 1)。结论　抗大肠杆菌IgY能明显降低全腹照射后肝、脾、肠系膜淋巴结的细菌培养阳性率 ,提示具有保护大鼠肠粘膜屏障 ,减少细菌移位的作用 ;并且能改善反映大鼠肠源性感染的指标 ,降低血中内毒素 ,提示对肠源性     

卵黄抗体的分离提取和纯化方法

卵黄抗体性能稳定,具有较强抵抗热酸、碱的能力,室温下可保持6个月的活性,4℃下放置几年活性不减,易于大规模生产等许多优点,卵黄免疫球蛋白的纯化方法和哺乳动物的纯化方法不同,包括有机物沉淀法,有机溶剂抽提法,天然胶法和水稀释法等粗提方法;凝胶过滤层析,离子交换层析和亲和层析等精细纯化方法。本文就卵黄抗体的分离和纯化方法的优缺点作一比较。     

鹭科和鸬鹚科卵黄抗体的纯化

目的纯化鹭科具有代表性的夜鹭及鸬鹚科具有代表性的鸬鹚的卵黄抗体IgY。方法采用了水稀释法和硫酸铵分级沉淀法粗提IgY,再过HiTrap IgY Purification HP柱子进一步纯化。结果经两步纯化,得到了纯化的鸬鹚和夜鹭的卵黄抗体IgY,经SDS-PAGE检测为电泳纯,夜鹭和鸬鹚的卵黄抗体的相对分子质量约为180×103。结论证实了鸬鹚和夜鹭的卵黄抗体IgY的存在及其特性,为这两种鸟类的卵黄抗体IgY纯化,二级抗体制备提供了参考。     

抗伴放线放线杆菌IgY的制备及其抑菌研究

目的用伴放线放线杆菌诱导母鸡产生特异性IgY抗体,以及抑制其生长。方法应用免疫接种法,水稀释法及盐析法提取和纯化IgY抗体,液体培养抑菌法测定抗伴放线放线杆菌IgY抗体对伴放线放线杆菌的抑制作用,以及ELISA法测定IgY抗体效价。结果(1)85.63%~90.35%纯度的IgY结合抗原的效价达1∶32 000;(2)细菌浓度为5×105CFU/mL,IgY抗体浓度为5.0 mg/mL,1.0 mg/mL时,培养24 h抑菌率分别为31.60%、10.24%明显高于对照组的0.00%(P<0.01,P<0.05);培养72 h抑菌率分别为64.20%、53.21%明显高于对照组的0.00%(P<0.01);(3)细菌浓度为1×105CFU/mL,IgY抗体浓度为5.0 mg/mL,1.0 mg/mL时,培养24 h抑菌率分别为35.71%、30.95%明显高于对照组的0.00%(P<0.01,P<0.05);培养72 h抑菌率分别为65.11%、54.04%明显高于对照组的0.00%(P<0.01)。结论伴放线放线杆菌能够诱导母鸡产生高效价的特异性IgY;特异性抗伴放线放线杆菌IgY抗体在一定的浓度内有抑制伴放线放线杆菌生长的作用。