Graves病患者外周血T细胞亚群和共刺激分子的表达及其意义

为研究Graves病患者外周血T细胞亚群及共刺激分子的表达 ,并探讨其在Graves免疫病理机制中的作用 ,本文采用免疫荧光标记和流式细胞仪术检测了 19例Graves病患者和 11例正常人外周血T细胞亚群及共刺激分子 (CD2 8、B7、CD40、CD40L、 4 1BB、OX40 )的表达。结果表明 ,19例初诊Graves病患者外周血T细胞亚群呈现异常改变 ,表现为CD3+ 和CD4+T细胞显著下降 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ,CD4+ /CD8+ T细胞比值倒置 (P <0 0 1) ,共刺激分子CD2 8在T细胞中的表达水平明显下降 (P <0 0 1) ,T细胞亚群CD4+ CD2 8+ 、CD8+ CD2 8+ 细胞数量均减少 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ,而 4 1BB分子表达显著地升高 (P <0 0 5 )。随防 10例治疗后缓解患者 ,T细胞亚群失衡明显改善 ,共刺激分子CD2 8的表达水平上调 (P <0 0 1) ,而4 1BB分子的表达明显下降 (P <0 0 1) ,T细胞亚群CD4+ CD2 8+ 、CD8+ CD2 8+ 细胞数量均增加 (P <0 0 1) ,甲状腺自身抗体甲状腺球蛋白抗体 (TGAb )和甲状腺微粒体抗体 (TMAb )的表达水平均下降 (P <0 0 1,P <0 0 1)。从而表明 ,T细胞亚群的异常及共刺激分子CD2 8、 4 1BB的表达改变与Graves病的免疫病理机制相关。     

T细胞凋亡受体和共刺激分子的表达变化与终末期肾功能衰竭患者细胞免疫功能的关系研究

目的：探究终末期肾功能衰竭患者T细胞亚群的凋亡受体CD95分子与共刺激分子CD28、CDl52（CTLA-4）的表达与细胞免疫功能的关系。方法：采用流式细胞术检测外周血T细胞的凋亡受体CD95（Fas）与共刺激分子CD28／CDl52表达。结果：终末期肾功能衰竭患者CD3^＋T细胞和CD4^＋T细胞比例明显高于健康对照组，CD4／CD8比值增加（P=0．008），CD4^＋T细胞和CD8^＋T细胞上CD95分子表达均上调（P=0．001），以CD8^＋T细胞上CD95分子增加更为明显；CD28和CD152分子在不同T细胞亚群上的表达均上调（P〈0．05），然而，CD4^＋T细胞以CD28分子表达增加为主，而CD8^＋T细胞则CD152分子表达增加为主。结论：终末期肾功能衰竭患者的细胞亚群失衡，共刺激分子CD28和CD152表达异常增加，提示T细胞活化与抑制性调节发生紊乱。T细胞亚群上凋亡受体CD95分子表达增加，以CD8^＋T细胞为主，说明终末期肾功能衰竭者淋巴细胞的减少可能通过两种途径——受体配体途径和负性共刺激分子CD152抑制信号途径，其中以CD8^＋T细胞减少为主，造成患者细胞免疫缺陷。     

重症肌无力外周血单个核细胞CD28-B7共刺激通路相关分子的表达

目的 :探讨重症肌无力 (MG)患者CD2 8 B7共刺激信号通路相关分子的表达及其与MG发病的关系。方法 :用流式细胞仪检测 18例MG患者和 16例健康对照者外周血CD2 8、CTLA4、B7 1、B7 2分子在CD4 T细胞和CD8 T细胞表面的表达。结果 :MG组外周血CD2 8、CTLA4、B7 1、B7 2分子的表达均增强 ,其中CD2 8 细胞的增多主要表现在CD4 T细胞亚群 ,CT LA4的表达增强主要在CD8 T细胞 ,B7 1和B7 2分子在CD4 或CD8 T细胞的表达 ,MG组与对照组无差别。结论 :MG的发病与CD2 8共刺激通路的活化密切相关 ,检测外周血CD2 8共刺激相关分子的表达可反映MG患者的免疫反应状态 ,有助于临床诊断和用药。     

重症肌无力患者外周血B7∶CD28/CTLA4共刺激分子表达的动态变化

目的研究重症肌无力(MG)患者B7∶CD28/CTLA4共刺激通路相关分子表达动态变化及其与MG发病的关系. 方法用流式细胞仪检测18例MG患者和16例健康对照者外周血单个核细胞(PBMC)在经PMA(佛波酯)+ionomycin(钙离子导入剂)刺激的0 h、6 h、24 h、48 h时B7-1、B7-2、CD28、CTLA4分子在CD4+ T细胞和CD8+ T细胞表面的表达. 结果 (1) 0 h,MG患者B7-1、B7-2分子总体表达增加,CD4+、CD8+ T细胞表面B7-1、B7-2的表达未见明显增加,PMA+ionomycin刺激后B7-1、B7-2在CD4+、CD8+ T细胞表面也无增加;(2) 0 h,CD28、CTLA4的表达增强,其中CD28+细胞的增多主要表现在CD4+ T细胞亚群,CTLA4的表达增强主要在CD8+ T细胞,在PMA+ionomycin激活后,CD28表达明显增强,持续到48 h都处于较高水平(与对照组相比P＜0.01),CTLA4表达出现短暂增强,6 h即达高峰,以后下降,与对照组相比无显著增强(P＞0.05). 结论 MG患者外周血中B7∶CD28/CTLA4通路共刺激相关分子表达增高,持续时间延长,检测共刺激分子的表达可反映机体的免疫激活状态,B7∶CD28/CTLA4通路在MG发病中可能起重要作用.     

慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞表面共刺激分子的表达变化及临床意义

目的 探讨T淋巴细胞表面共刺激分子在慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血中的表达及其临床意义.方法 选取我院在2013年3月至2014年3月期间收治的126例CHB患者和90例健康对照者作为研究对象,利用流式细胞术和定量PCR检测CHB患者和健康对照者外周血中T淋巴细胞表面共刺激分子CD28、细胞毒性T淋巴细胞抗原(CTLA)-4、程序性死亡分子(PD)-1、T细胞免疫球蛋白粘蛋白分子(Tim)-3及T淋巴细胞亚群的表达变化,并进行比较分析.结果 CHB患者外周血CD3+、CD4+T细胞百分率及CD4+/CD8+比值均低于对照组,而CD8+T细胞百分率高于对照组,组间比较差异具有统计学意义(分别t=4.0868,7.4660,5.5207和3.8160,均P＜0.01);同时,HBV DNV阳性组患者外周血CD3+、CD4+T细胞百分率及CD4+/CD8+比值均低于HBV DNA阴性组,而CD8+T细胞百分率高于HBV DNA阴性组,组间比较差异具有统计学意义(分别t=5.1567,2.7884,2.9987和2.9087,均P＜0.01);此外,CHB患者外周血共刺激分子CD28+及CTLA-4+的表达量均低于正常对照组,而PD-1和Tim-3的表达量高于对照组,差异具有统计学意义(分别t=6.0546,5.0669和6.3006,8.2151,均P＜0.01);同时,HBV DNA阳性高拷贝组患者外周血共刺激分子CD28及CTLA-4的表达量均低于低拷贝组,而PD-1和Tim-3的表达量高于低拷贝组,组间比较差异具有统计学意义(分别t=3.1293,2.7459,2.8661,2.7960,均P＜0.01).结论 外周血T淋巴细胞亚群及其表面共刺激分子的表达水平对于指导CHB患者的临床治疗和判断预后具有一定的临床意义.     

共刺激分子CD40L在RA患者T细胞亚群中的异常表达

目的　探讨共刺激分子CD4 0L在类风湿关节炎 (RA)患者的T细胞亚群上的表达异常与免疫功能紊乱的关系。方法　用流式细胞仪采用直接免疫荧光法测定 4 6例RA患者和 2 0例健康对照人外周血T细胞表面标志CD3、CD4、CD8的表达情况及CD4 0L在CD4 + T和CD8+ T细胞上的表达。用IMMAGE免疫分析仪 ,速率散射比浊法测定血清中免疫球蛋白的水平。结果　RA患者CD3+ CD4 + 细胞较正常对照组显著增高 (P <0 .0 5 ) ,CD3+ CD8+ 细胞较正常对照组显著降低 (P <0 .0 5 ) ,CD4 + T细胞和CD8+ T细胞上的CD4 0L的表达都较对照组显著增高 (P <0 .0 5 ) ;血清中 3种免疫球蛋白IgG、IgA、IgM的水平均较对照组显著增高 (P <0 .0 5 )。结论　RA患者以CD4 + T细胞活化为主 ,CD4 + T细胞和CD8+ T细胞上高表达的CD4 0L为T细胞活化提供第二信号 ,促使RA患者的细胞免疫功能亢进 ,同时诱导B细胞增生 ,产生大量免疫球蛋白。CD4 0 CD4 0L途径在RA免疫功能紊乱中起了重要作用     

年龄对人细胞毒性T淋巴细胞和自然杀伤细胞中穿孔素表达的影响

目的　通过研究健康儿童、成人和老年人外周血淋巴细胞 (PBL)中细胞毒效应分子穿孔素 (PFP)的表达水平的变化 ,了解细胞毒性T细胞 (CTL )的杀伤活性随年龄增长而下降的分子机制。方法　利用抗人PFP、抗人CD3和抗人CD5 6单克隆抗体 (mAb) ,采用单标记免疫组化染色法 ,检测外周血单个核细胞 (PBMC)中PFP的表达。采用双标记免疫组化染色法 ,检测上述细胞表面标志CD3或CD5 6的表达和细胞内PFP的表达。结果　儿童组、成人组及老年组PBL中表达PFP阳性细胞的百分率 (% ) ,分别为 (2 6 .4± 2 .7) % ,(2 1.6± 3.2 ) %和 (13.4± 2 .0 ) % ,老年组明显下降 ,与其他两组相比较P <0 .0 0 1。 3个年龄组CD3+ T细胞表达PFP的阳性率 (% ) ,分别为 (30 .1± 4 .8) %、(2 1.4± 7.3) %和 (18.8± 4 .2 ) % ,随年龄的增长而显著下降。3个年龄组CD5 6 +NK细胞PFP的表达差别不显著。结论　健康人PBL中PFP的表达随年龄增长而递减 ,CD3+ T细胞亚群PFP表达水平的下降尤其显著。这可能是老年人CTL杀伤活性下降的重要原因之一     

淋巴细胞共刺激信号和凋亡信号异常与RA免疫效应亢进的研究

目的：探究T淋巴细胞表面多种细胞信号分子所介导的细胞活化或凋亡信号在RA患者免疫功能紊乱中的作用。方法：采用流式细胞术检测RA患者外周血T细胞亚群及其表面共刺激分子cD154（cD40L）、CD30和凋亡受体CD95（Fas）的表达。结果：RA患者外周血T细胞亚群偏移，CD4^＋T细胞增加，CD8^＋T细胞减少；共刺激分子CD154在CD4^＋和CD8^＋T细胞上的表达均上调，但CD30分子的表达均降低，并以CD4^＋T细胞降低更为明显。同时，凋亡受体CD95分子在T细胞亚群上的表达均明显增加。结论：RA患者T淋巴细胞表面多种信号分子表达异常，共同导致了RA患者免疫功能紊乱。     

TIM-3 mRNA在外周血单个核细胞不同细胞亚群及活化的T细胞上的表达

目的观察健康人外周血单个核细胞(PBMC)不同细胞亚群和活化的CD4+、CD8+T细胞上TIM-3mRNA的表达,探讨TIM-3mRNA的表达与T细胞功能的关系。方法应用实时定量RT-PCR(realtimeRT-PCR)技术,检测健康人PBMC不同亚群和CD4+、CD8+T细胞受刺激后TIM-3mRNA的表达。结果健康人PBMC中CD14+单核细胞、CD4+T细胞TIM-3mRNA的表达量较高(分别为0.84±0.088、0.64±0.11),CD4+T细胞受非特异性刺激后TIM-3mRNA表达明显升高(0.57±0.065vs0.85±0.080,t=18.07,P<0.0001)。结论TIM-3mRNA可能优先表达在健康人PBMCCD14+单核细胞、CD4+T细胞上,活化后的CD4+T细胞TIM-3mRNA的表达增多,提示TIM-3的表达与TH细胞的功能有关,也可能与单核细胞中某些产生TH1型细胞因子的亚群有关。     

不同组织类型胃癌中增殖性T细胞克隆及细胞因子的表达

目的　探讨不同组织类型胃癌局部免疫细胞及细胞因子表达的特性。方法　采用高敏感放射性标记半定量逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)技术检测胃癌患者癌组织及非癌性黏膜组织中不同T细胞亚群 2 4个亚家族的T细胞受体 β链可变区表达以及T细胞亚群、上皮细胞的细胞因子表达谱。结果　弥散型胃癌组织CD8+ T细胞亚群中增殖性T细胞克隆数目明显低于肠型胃癌 (P =0 0 46 )。弥散型胃癌中 ,癌组织CD8+ T细胞中白细胞介素 (IL) 6、IL 8、CD4+ T细胞中肿瘤坏死因子(TNF) αmRNA的水平 (0 6 1± 0 2 9,0 5 6± 0 2 2 ,0 0 9± 0 0 3)较非癌性黏膜组织中的 (0 14± 0 0 5 ,0 2 7± 0 0 9,0 0 4± 0 0 2 )增高 (P =0 0 2 8,P =0 0 43,P =0 0 46 ) ;而肠型胃癌中 ,癌组织CD8+ T细胞及上皮细胞中IL 8mRNA的水平 (0 5 7± 0 2 5 ,0 2 7± 0 0 7)较非癌性黏膜组织中的 (0 2 1± 0 0 7,0 14± 0 0 6 )增高 (P =0 0 2 8,P =0 0 2 8)。结论　不同组织类型胃癌局部免疫细胞及细胞因子表达的特性不同 ,弥散型胃癌中增殖性T细胞克隆少、局部多种免疫抑制型细胞因子的高表达提示 :弥散型胃癌肿瘤局部的免疫抑制比肠型胃癌更严重。     

脱氢表雄酮对鼠成骨细胞及CD4+T细胞协同刺激分子表达的影响

目的探讨脱氢表雄酮（DHEA）对成骨细胞（osteoblasts，OB）及CD4^＋T细胞表达协同刺激分子的调控作用。方法颅骨酶解法培养鼠OB，体外模拟雌激素撤退；免疫磁珠细胞分选（rnagnetic cell soaing，MACS）法分离CD4^＋T细胞；将OB或CD4^＋T细胞分为对照组、E2及DHEA处理组，并以LPS刺激；以流式细胞术分析OB表面CD80、CD86以及CD4^＋T细胞表面CD28、CTLA-4的表达。结果经E2及DHEA处理后，OB表达CD80、CD86显著增加（P〈0．05，P〈0．01）；CSA可降低对照组及DHEA处理组OBCDS0、CD86的表达（P〈0．01）。除DHEA组CD28^＋T细胞百分比增加外（P〈0．05），其余各组CD4^＋T细胞CD28和CTLA-4的表达无显著改变（P〉0．05）。结论DHEA可上调鼠OB协同刺激分子CD80、CD86表达，该作用可被CsA阻滞；DHEA还上调CD4^＋T细胞CD28的表达，提示可改善骨．免疫调节网络。     

慢性疲劳综合征患者外周血淋巴细胞亚群及CD25^＋调节性T细胞表达的研究

研究慢性疲劳综合征（CFS）患者外周血淋巴细胞亚群及CD25＋调节性T细胞的表达情况。使用流式细胞仪检测84例CFS患者（CFS组）、50例健康体检者（健康对照组）外周血淋巴细胞亚群（T细胞、CD4＋T细胞、CD8＋T细胞、B细胞、NK细胞）及CD25＋调节性T细胞的表达情况。结果显示,CFS组与健康对照组的T细胞、CD8＋T细胞百分率以及CD4＋/CD8＋比值无显著差别（P〉0.05）;而CFS组NK细胞、CD4＋T细胞及CD25＋调节性T细胞百分率显著增高,B细胞百分率显著降低（P〈0.05）。结论：慢性疲劳综合征患者外周血淋巴细胞各亚群比例异常,提示其免疫功能失衡,而CD25＋T调节性细胞可能在该病进程中有重要意义。     

激发型CD28单抗直接激发的T细胞及其表型

1.用羊抗鼠IgG(20μg/ml)包被96孔细胞培养板,再加入游离的激发型CD28单抗(终浓度为5 μg/ml);2.用激发型CD28单抗(10 μg/ml)直接包被96孔细胞培养板,然后分别加入10~5个/孔经E-花结实验获取的人外周血T细胞(PBTC),其中CD3+T>95％。逐日观察细胞的生长状态并绘制生长曲线,用3H-TdR掺入法分析PBTC的增殖效应,用FITC标记的单抗经流式细胞仪(FCM)分析细胞CD3、CD4、CD8、CTLA-4、4-1BB及OX40的表达。逐日细胞计数的结果表明,经羊抗鼠IgG包被后加入游离激发型CD28单抗或直接用激发型CD28单抗包被,均能引发PBTC的活化与增殖效应,激发3 d时的刺激指数(SI)大于9,细胞CD3、CD4、CD8、CTLA-4、4-1BB及OX40的阳性表达率(x±s,％)分别为98.6±0.2、74.4±3.1、22.5±2.0、2.1±0.4、18.4±2.2、35.2±3.5。与XGB7(作为APC)刺激的T细胞相比,经CD28单抗直接激发的T细胞,CD4+/CD8+T细胞的比值及OX40+T细胞的百分率升高(P<0.01),但不表达负性调节分子CTLA-4。     

Impaired expression of CD28 on T cells in hairy cell leukemia

T cells from patients with active hairy cell leukemia (HCL), a chronic B cell malignancy, show poor proliferation in response to allogeneic peripheral blood mononuclear cells (PBMC). In order to study the T cell dysfunction, the expression of several adhesion and costimulatory molecules was analyzed by flow cytometry. Circulating T cells from HCL patients showed increased percentages of CD28(-) in all T cell subsets. In some patients the percentage of CD28(-) T cells within the CD4(+) subset was increased up to 80%. These CD4(+)CD28(-) T cells did not proliferate in a mixed lymphocyte culture (MLC) against allogeneic PBMC. After enrichment for CD4(+)CD28(+) T cells, the proliferative response in the MLC was recovered, but this response was still lower than the proliferative response from control T cells. In conclusion, lack of CD28 on T cells and a restricted T cell repertoire may contribute to immune deficiency in patients with HCL.     

协同刺激分子4-1BB和CD28对人外周血不同T细胞亚群的激活作用

目的 :探讨 4 1BB/ 4 1BBL协同刺激信号在CD4 和CD8 T细胞活化、增殖中的作用 ,并与CD2 8/B7信号作比较。方法 :用抗CD3单抗 (mAb)刺激人外周血单个核细胞 (PBMC)。用阻断型抗 4 1BBLmAb和抗CD80mAb ,分别阻断 4 1BB/ 4 1BBL和CD2 8/B7 1协同刺激信号。利用流式细胞术 (FCM)检测CD4 T细胞、CD8 T细胞的增殖率、CD8/CD4T细胞的比值变化和细胞分泌IFN γ的情况。结果 :用抗 4 1BBLmAb和抗CD80mAb阻断相应的协同刺激途径后 ,CD4 和CD8 T细胞的增殖和细胞分泌IFN γ的水平均明显下降。培养 8d,抗CD3mAb单独刺激组CD8/CD4T细胞的比值为 1.98± 0 .0 6 ;抗 4 1BBLmAb阻断组CD8/CD4T细胞的比值下降为 0 .96±0 .0 3;而在抗CD80mAb阻断组 ,其比值上升为 2 .6 9± 0 .16。结论 :4 1BB分子可在CD4 T细胞和CD8 T细胞的活化、增殖中提供协同刺激信号。 4 1BB分子所介导的协同刺激信号 ,在CD8 T细胞活化及增殖中发挥了更为重要的作用 ;而CD2 8分子所介导的协同刺激信号则更有利于CD4 T细胞的活化     

荧光定量聚合酶链反应检测慢性乙肝患者HBV DNA的意义

目的探讨荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测慢性乙肝患者血清乙型肝炎病毒(HBV)脱氧核糖核苷酸(DNA)的临床意义。方法回顾性分析248例慢性乙肝患者的资料,均采用FQ-PCR技术检测血清HBV DNA,检测乙肝病毒标志物(HBV-M)并对比不同HBV-M患者血清HBV DNA水平;对比不同病情患者血清HBV DNA水平;对比不同HBV DNA表达患者外周血T淋巴细胞亚群水平及异常率,分析患者血清HBV DNA水平与外周血T淋巴细胞亚群水平的关系。结果不同HBV-M患者血清HBV DNA水平对比:HBsAg+HBeAg+HBcAb>HBsAg+HBeAg>HBsAg+HBsAb+HBcAb>HBsAg+HBeAb>HBsAb+HBeAb+HBcAb>HBcAb/HBsAb+HBeAb/HBeAb+HBcAb,除HBcAb、HBsAb+HBeAb、HBeAb+HBcAb血清HBV DNA水平差异无统计学意义(P>0.05),其余每2样本比较差异均有统计学意义(P<0.05);不同病情患者血清HBV DNA水平对比:重度病情患者>中度病情患者>轻度病情患者(P<0.05);不同HBV DNA表达患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+对比,HBV DNA阴性患者>低拷贝患者>高拷贝患者(P<0.05),CD3+、CD4+、CD4+/CD8+异常率对比,HBV DNA阴性患者<低拷贝患者<高拷贝患者(P<0.01);本组患者血清HBV DNA水平与外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均呈负相关(r=-0.789、-0.812、-0.706,P=0.012、0.007、0.001)。结论在慢性乙肝患者中FQ-PCR检测血清HBV DNA水平与HBV-M、病情和外周血T淋巴细胞亚群水平均有密切关系。     

慢性乙型肝炎患者外周血CD45RA+、CD45RO+T淋巴细胞亚群的特点及临床意义

目的：探讨慢性乙型肝炎患者外周血CD4^＋CD45RA^＋、CD4^＋CD45RO^＋、CD8^＋CD45RA^＋和CD8^＋CD45RO^＋T淋巴细胞亚群的特点及其与肝病病情的关系。方法：采集46例轻中度慢性乙型肝炎患者、58例重度慢性乙型肝炎患者和30例健康人的外周抗凝血，应用流式细胞技术三色荧光分析法对其外周血中CD4^＋CD45RA^＋、CD4^＋CD45RO^＋、CD8^＋CD45RA^＋和CD8^＋CD45RO＋T淋巴细胞亚群进行检测。结果：轻中、重度慢性乙型肝炎患者与正常人相比，其外周血中CD4^＋、CD8^＋T细胞均无明显改变；CD8^＋CD45RA^＋T细胞均明显降低，CD8^＋CD45RO^＋T细胞均明显增高，而CD4^＋CD45RA^＋、CD4^＋CD45RO^＋T细胞均无明显改变；重度慢性乙型肝炎患者与轻中度慢性乙型肝炎患者相比，CD8^＋CD45RA^＋T细胞明显降低（P〈0.05），CD8^＋CD45RO^＋T细胞明显升高（P〈0.05）。结论：乙型肝炎慢性化过程中，CD8^＋CD45RO^＋T细胞起重要作用且与慢性乙型肝炎患者病情的进展呈正相关；检测CD4^＋CD45RA^＋、CD4^＋CD45RO^＋、CD8^＋CD45RA^＋和CD8^＋CD45RO^＋T淋巴细胞亚群比检测CD4^＋和CD8^＋T细胞亚群更能正确、充分、全面地了解慢性乙型肝炎的发病机制和预后，从而有效地指导临床治疗。     

Regulation of 4-1BB expression by cell-cell interactions and the cytokines,interleukin-2 and interleukin-4

4-1BB expression increased gradually following T cell activation, and by day 3 post-stimulation with immobilized anti-CD3 (anti-CD3i) or concanavalin A (Con A), splenic T cells were routinely 35–45% 4-1BB⁺ by flow cytometric analysis. 4-1BB was expressed on activated CD8⁺, CD4⁺, CD28⁺ and CD45RB⁺ T cells. Optimal 4-1BB expression was seen by day 6 post-stimulation and was cell density dependent. When T cells were cultured for 6 days at 1 × 10⁶/well in a 24-well plate with anti-CD3i, 82% of the cells were 4-1BB⁺. In contrast, at lower cell densities (4 × 10⁵, 2 × 10⁵ and 1 × 10⁵), optimal 4-1BB expression was observed only if the cultures were supplemented with recombinant interleukin-2 (IL-2) or recombinant IL-4 (IL-4). In agreement, with these results, modes of inducing endogenous IL-2 production such as cross-linking the costimulatory molecule, CD28, or the addition of syngeneic accessory cells to T cells activated with anti-CD3i, resulted in high levels of 4-1BB expression. The addition of interleukin-1α(IL-1α) or interferon-γ (IFN-γ) did not increase 4-1BB expression on anti-CD3i-activated T cells. In addition, if T cells were incubated with IL-2, IL-4, IL-1α, IFN-γ or anti-CD28 alone, no 4-1BB expression was induced. T cells activated with soluble anti-CD3 (anti-CD3s) in the presence of IL-2, IL-4, or accessory cells, did not express higher levels of 4-1BB on their cell surface. These data suggest that initial events crucial for efficient T cell activation, such as signals delivered through the T cell receptor/CD3 complex and the CD28 molecule, are instrumental in regulating subsequent 4-1BB expression.