肾综合征出血热患者病后和人群疫苗接种后远期免疫学效果研究

目的 了解肾综合征出血热(HFRS)疫苗接种人群和HFRS患者病后的远期(5年以上)免疫学效果。方法 采用间接免疫荧光试验(IFAT)检测血清HFRS特异性IgG抗体，1：20为阳性。对接种组人群抗体滴度＜1：320者，强化免疫1针，15d后静脉采血，同样方法检测IgG抗体。结果接种组人群95例，抗体阳性率100％，GMT40．29；强化免疫人群59例，GMT71．13；疫苗接种组人群在强化免疫前后GMT有显著性差异(P＜0．01)。HFRS患者55例，抗体阳性率100％，GMT97．87；疫苗接种与否对患者病后的血清特异性IgG抗体水平无显著影响。近9年免疫人群的年发病率为16．38／10万，对照人群为73．92／10万，年均保护率77．84％。结论 HFRS疫苗的远期免疫学和流行病学效果较好；HFRS患者病后具有较持久的免疫力。     

应用ELISA法检测人体血清中HFRS抗体的研究

目的：通过检测人体血液中抗肾综合出血热（HFRS）病毒抗体产生情况，分析人体体液免疫效果。方法：以HFRS病毒灭活纯化抗原为包被Ag以HRP-兔抗人IgG结合物为标记抗体，应用间接EUSA法检测随机抽取的20组HFRS双价纯化疫苗接种者免疫前、后血清抗体的产生情况，并采用蚀斑减少中和试验（PRNT）法进行中和抗体的检测。结果：第1针免疫后14天与免疫前比较，90％以上的血清抗体滴度有4倍以上升高；第2针免疫后14天与第1针免疫后14天比较，100％的血清抗体滴度有4倍以上升高；第2针免疫后14天中和抗体阳转率则达90％以上。结论：应用间接ELISA法检测人体血清中HFRS抗体产生情况可以用于分析疫苗免疫前后人体体液免疫效果。     

肾综合征出血热病毒灭活疫苗的研究 Ⅱ、灭活HFRS疫苗的安全性和效力观察

本文总结了HFRS病毒鸡胚组织培养灭活疫苗的研制和效果观察。证明其免疫原性好,安全性可靠。为生产出血热灭活疫苗提供了成功的经验。在小量人体免疫时,第1针血清阳转率为4/5,第2针阳转率达5/5。几何平均滴度显著高于第1针,为1∶33—1∶160。扩大人群免疫效果更进一步证明HFRS抗体阳转率颇理想,于第2针免疫后21天取血检查抗HFRS抗体阳性检出率为百分之百。GMT IFA为183.8,HI为46.6。10份血清中和抗体指数为467.8～17790。受接种者无任何不良反应,也未发生HFRS病毒的感染。     

肾综合征出血热疫区健康人群血清抗体监测

为了解临朐县肾综合征出血热(HFRS)疫区健康人群血清抗体水平，掌握不同流行强度疫区人群隐性感染率及血清抗体滴度、持续时间，以便为制订HFRS防制对策和措施，提供可靠资料，于1997～1999年连续3年对HFRS疫区人群抗体水平进行了监测。调查对象选择流行村、散发村和未发病村中既往无麟患病史，近期无发热的当地居民，应用间接免疫荧光法测IgG抗体。     

McAb-ELISA间接夹心法检测家鼠型HFRS疫区人和动物血清中特异性抗体

用McAb-ELISA间接夹心注和IFAT或酶标SPA染色法平行检测山西地区(家鼠型HFRS疫区)的人及动物血清中HFRS病毒特异性IgM和/或IgG抗体。结果ELISA检测174份HFRS患者血清的阳性率及抗体滴度均明显高于IFAT。检测295份无明确HFRS病史的健康人血清,ELISA的阳性率也高于IFAT。检测215份鼠类血清、102份兔血清及108份猪血清,ELISA的阳性检出率与IFAT或酶标SPA染色法基本相同。用阻断试验等证明本ELISA检出的抗体确为HFRS病毒特异性抗体。     

病毒性心肌炎腺病毒的中和抗体测定

目的 了解血清中和抗体滴度的消长与病毒性心肌炎诊断的相关性，为临床诊断提供依据。方法 用微量中和实验测定33例病毒性心肌炎患者腺病毒3、7、11型中和抗体水平，并与32名正常健康人对照作比较。结果 病毒性心肌炎患者腺病毒中和抗体滴度≥1：16的阳性率为90．9％，正常对照组为31．3％；患者抗体滴度≥1：32的阳性率为72．7％，对照组为18．8％；患者抗体滴度≥1：64的阳性率为54．5％，正常对照组为12．5％；患者抗体滴度≥1：128的阳性率333％，正常对照组为6．3％。结论 血清腺病毒中和抗体的检测．可作为病毒性心肌炎诊断依据之一。     

血清对Ⅱ型脊髓灰质炎病毒感染性滴度检测结果的影响

目的 比较6种不同血清对Ⅱ型脊髓灰质炎病毒感染性滴度（CCID₅₀）检测结果的影响。方法 分别采用6种未处理血清和6种预处理血清组（免疫吸附法）进行Ⅱ型脊髓灰质炎病毒感染性滴度检测（微细胞病变法）,检测了不同组血清中Ⅱ型脊髓灰质炎病毒中和抗体滴度,并使用处理血清组进行促细胞生长试验。最后分析不同血清对感染性滴度的影响。结果 6种未处理血清组病毒感染性滴度检测结果差异有统计学意义（P<0.01）,6种处理血清组病毒感染性滴度差异无统计学意义（P>0.05）。未处理组2号血清的中和抗体滴度为1：4,6号血清的中和抗体滴度为1：8,其余各组血清的中和抗体滴度均<1：4。6种处理血清组的中和抗体滴度均为1：2。血清促细胞生长试验显示6种处理组血清细胞生长趋势正常。结论 Ⅱ型脊髓灰质炎病毒感染性滴度检测前使用免疫吸附对血清进行预处理,可降低血清中存在的中和抗体对检测的影响,为比较不同实验室数据提供可能。     

2011-2015年保定市健康人群脊髓灰质炎抗体水平检测分析

目的 了解保定市健康人群脊髓灰质炎(脊灰)中和抗体水平,评价近几年的接种效果,为相关部门及时制订免疫策略提供一定的科学依据.方法 从保定市23个县、区(市)中每年抽取1个县、区(市)的健康人群,应用微量中和实验法检测脊灰抗体水平.结果 在检测的健康人群血清标本中,脊灰Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型抗体的阳性率分别为 99.83%、99.83%和100.00%,抗体几何平均滴度 (geometric mean titer,GMT) 分别为1∶157.95,1∶154.34 和 1∶149.78.Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型脊灰抗体不同年龄组GMT和不同县、区(市)间Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型抗体阳性率比较差异均无统计学意义.结论 保定市计划免疫冷链系统运转状况良好,脊灰疫苗免疫效果显著,已形成对脊灰病毒有效的免疫屏障.     

兔源性Ⅱ型prM多抗对Ⅰ型登革病毒无增强活性的中和作用

目的从Ⅰ型登革病毒(dengue virus,DENV)感染患者血清中分离病毒,并探究Ⅱ型登革病毒prM多抗对该病毒体外感染细胞的影响。方法用C6/36细胞分离并扩大培养Ⅰ型登革患者血清中的登革病毒,根据细胞病变收取病毒,空斑实验测定病毒滴度。免疫荧光、流式细胞术及qRT-PCR检测病毒对细胞的感染,空斑减少中和实验和抗体依赖增强感染实验测定Ⅱ型登革病毒prM抗体对病毒的中和及增强活性。结果分离扩大培养了一株Ⅰ型登革病毒,滴度达到8×10~7pfu/m L。登革病毒可以在K562细胞复制增值,ana-1细胞可以主动吞噬病毒但病毒在此细胞内不复制。0.1、1μg/m L的多抗与病毒孵育后感染BHK细胞产生的空斑数与未加入抗体的空斑数相比,差异有统计学意义(P0.001)。另外,prM多抗并没有增加登革病毒对K562细胞的感染。结论成功扩大培养DENVⅠ毒株,体外实验结果证明兔源性prM多抗是一种无增强活性的中和型抗体。     

潮汕地区EV71流行特征分析

目的了解潮汕地区儿童肠道病毒71型（EV71）血清流行病学、病原学及临床特征。方法收集不同年龄健康儿童血清,采用微量中和试验方法检测其血清EV71中和抗体的阳性率和几何平均滴度（geometric mean titeGMT）。筛选HFMD患者328例,采用荧光定量RT-PCR检测肠道病毒核酸,并收集相关临床资料综合分析。结果在各年龄组中,0-6个月儿童中和抗体阳性率为78.4%,几何平均滴度为1：36.6;7-12个月血清抗体阳性率则显著下降,为28.4%,GMT为1：8.9。从1岁开始血清抗体阳性率和GMT均有所升高,在2-4岁组阳性率继续升高,而在5-14岁组,阳性率急剧升高为79.3%,GMT为1：71.9。以上各年龄组男女性别间的差别均无统计学意义（P〉0.05）。在所监测的328例HFMD病例中,EV71是主要病原体,是引起重症HFMD的主要病因。结论 EV71在潮汕地区流行情况严重,7-12个月儿童EV71中和抗体水平显著低于其他年龄段的儿童,是EV71感染的高危群体。中和抗体水平偏低可能是引起重症HFMD和死亡病例的主要原因。     

双价肾综合征出血热灭活疫苗免疫原性检测

目的检测生产的双价肾综合征出血热灭活疫苗的免疫原性。方法将生产的各批次双价肾综合征出血热灭活疫苗免疫家兔，并在初次免疫后1wk加免一次，每次免疫接种1mL／只。免疫前和免疫后第28d分别于家兔心脏采血，分离血清运用空斑减少中和实验测定血清的中和抗体滴度。结果所检测的5批双价肾综合征出血热灭活疫苗免疫家兔后其血清的中和抗体滴度均≥1：10，部分批次／家兔的免疫血清其中和抗体滴度≥1：20。结论所检测的5批双价肾综合征出血热灭活疫苗其免疫原性检测结果均达到中国国家药典要求。     

Detections of HFRS Virus Antigen and Antibody by a McAb ELISA Indirect Sandwich Method

An ELISA indirect sandwich method using monoclonal antibodies(McAb)against hem-orrhagic fever with renal syndrome(HFRS)virus has been developed fordetections of HFRS virus antigen and specific antibody.Dynamic changes of HFRS virusantigens in the cells infected and their culture supernatants were observed by indirectfluorescence-antibody technique(IFAT)and ELISA separately.It was shown that HFRSvirus antigens in the cells and in the supernatants peaked separately 8 days and 14 daysafter infection.A hundred and seventy-nine brain and lung specimens of suckling miceinfected were examined by ELISA and IFAT.The positive rates were 72.1% and 68.2%,respectively.Furthermore,the IgM antibodies of 121 sera from HFRS patients wereexamined by ELISA and IFAT.The positive rates were 90.1% and 83.5% respectively.The IgG antibodies of 178 sera from HFRS patients were also examined by the twomethods,and both of the positive rates were 89.3%.The antibody titer measured byELISA was higher than the titer by IFAT.The above results suggest that the ELISA is aspecific and sensitive method and can be used for early diagnosis,epidemiologicalsurveillance and etiological study of HFRS.     

ELISA捕捉法与间接夹心法检测肾综合征出血热患者血清IgM抗体的比较

作者用ELISA捕捉法和间接夹心法平行检测106份第7病日内的肾综合征出血热患者血清IgM抗体,其阳性检出率分别为92.5％和87.7％,其中40份第4病日内的血清阳性率分别为90.0％和85.5％,差异均无显著性意义,但前法检出的抗体滴度(平均1:102 400)明显高于后者(1:3200)     

云南省肾综合征出血热监测结果分析

目的:调查肾综合征出血热(HFRS)在人及啮齿动物中自然感染的情况,为制定相应的预防控制措施提供科学依据。方法:2005年在云南省的监测点泸西、寻甸和永胜县共采集健康人血清329份,在居民区捕获活鼠3种285只并取血清,用间接免疫荧光法测HFRS的IgG抗体。结果:监测区以褐家鼠和黄胸鼠为优势鼠种。人群抗体阳性率为3.04%(10/329)。鼠血清抗体阳性率为5.61%(16/285)。结论:监测区褐家鼠和黄胸鼠中HFRS病毒感染较为普遍,人群中也存在隐性感染。     

微量血凝抑制试验在肾综合征出血热检验诊断中的应用

用我国分离的HFRSV(陈株)血凝素进行微量血凝抑制试验,检测了各代表性疫区出血热病人和实验感染动物血清,并与IFA法比较。结果表明MHIT具有较高的敏惑性、特异性和可重复性,简便易行,既可用于临床早期血清学诊断,也能用于血清流行病学调查,尤其适于基层应用。     

The detection of transmissible gastroenteritis viral antibodies by immunodiffusion.

Precipitating antibodies against transmissible gastroenteritis viral antigens were detected by the immunodiffusion test in two transmissible gastroenteritis viral hyperimmune antisera and in antiserum prepared against haemagglutinating encephalomyelitis virus but not in sera from several species of normal animals, in antisera prepared against a variety of othet viruses and bacteria or sera from swine with bacterial enteritis. When the immunodiffusion test was compared with the virus neutralization test for the detection of transmissible gastroeneritis viral antibodies in 20 swine sera certain samples which contained high titres of virus neutralizing antibodies failed to produce precipitation while other sera were positive in the immunodiffusion test although their virus neutralizing antibody titres were relatively low. Precipitating antibodies were also detected by immunodiffusion in several samples of milk whey from a sow which had been vaccinated with inactivated transmissible gastroenteritis virus.     

Application of Hemagglutination Inhibition Test to the Sero-Diagnosis of Hemorrhagic Fever with Renal syndrome

Hemagglutination inhibition test (HIT) was performed with Chen viurs strain ofhemorrhagic fever with renal syndrome (HFRS) to detect antibodies in the sera of patientsand animals from various endemic regions in China,and compared with immunofluoresc.ent assay (IFA).The results demonstrate that HIT is sensitive,specific,reproducible andsimple.It is applicable to epidemiological seroinvestigation as well as clinicalsero-diagnosis,especially to the grass-roots medical units.     

原位分子杂交检测大鼠肾综合征出血热病毒隐性感染和病毒RNA的体内分布

目的和方法：用异羟基洋地黄毒苷配基－１１－ｄＵＴＰ随机引物延伸法分别标记肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）汉坦株病毒Ｍ与ＳＲＮＡ全片段ｃＤＮＡ作为探针，用核酸原位分子杂交法检测某动物所一批大鼠ＨＦＲＳ病毒的隐性感染及病毒ＲＮＡ的组织细胞定位和分布．结果：９８只大鼠中８８只病毒ＲＮＡ阳性，阳性率８９．７９％，阳性率最高的脏器是肝脏７９／８５，其次为心脏２２／８３，再次为肾脏１４／７９，其余脏器阳性率较低．阳性部位主要在各脏器的实质细胞胞浆内，呈细颗粒状，未见于核内．结论：结果说明本批大鼠ＨＦＲＳ病毒隐性感染率极高；大鼠ＨＦＲＳ病毒ＲＮＡ的阳性检出率明显高于同批大鼠病毒抗原和血清抗体的阳性检出率，说明原位分子杂交检测病毒ＲＮＡ对确定动物病毒隐性感染具有重要的流行病学意义．病毒ＲＮＡ主要存在于肝脏，提示肝脏可能是病毒的主要潜伏部位，病毒可能主要由粪便排除．     

2001-2010年广州市肾综合征出血热监测分析

目的通过分析2001-2010年监测资料,研究广州市肾综合征出血热(HFRS)的流行特征和变化趋势。方法应用描述性流行病学方法分析人间疫情监测、宿主动物监测资料,实验室应用间接免疫荧光法检测鼠血清HV特异性IgG抗体,直接免疫荧光法检测鼠肺汉坦病毒(HV)抗原。结果 2001-2010年共报告HFRS743例,死亡4例,发病率为0.81/10万,病死率为0.54%。发病人数和发病率呈现上升趋势,发病高峰在10月至次年6月,病例集中在天河区、海珠区和白云区,职业分布以工人、家务及待业、商业服务为主,其次是民工和农民。男女比例为3.10∶1,年龄集中在20～50岁。鼠密度为9.64%,鼠血清HV特异性IgG抗体阳性率为4.94%,鼠肺HV抗原阳性率为5.56%。鼠密度和鼠种构成相对稳定,但2004-2010年鼠血清HV特异性IgG抗体阳性率和鼠肺HV抗原阳性率均处于持续上升趋势。鼠种构成主要以褐家鼠(70.01%)为主,其血清HV特异性IgG抗体阳性率(6.02%)和肺HV抗原阳性率(6.58%)在各鼠种中最高。结论广州市HFRS疫情呈现一定的上升趋势,发病风险不断增大,应加强预防控制工作;另外,广州市可能已经由家鼠型疫区演变为混合型疫区,应寻找进一步的相关证据。     

广州市2009年肾综合征出血热监测分析

目的分析广州市肾综合征出血热(HFRS)的流行特征和规律,探讨防制对策。方法采用人间疫情监测、健康人群抗体水平监测、宿主动物监测方法,其中实验室用间接免疫荧光法检测血清特异性IgG抗体,直接免疫荧光法检测鼠肺汉坦病毒(HV)抗原。结果共报告HFRS71例,死亡1例,发病率为0.69/10万,病死率为1.41%;排查病例抗体阳性率为16.14%(188/1165),健康人群抗体阳性率为0.50%(2/400);鼠密度为4.60%(361/7856),鼠肺抗原阳性率为8.31%(30/361),鼠血清抗体阳性率为7.43%(26/350),优势鼠种为褐家鼠。结论广州市HFRS疫情形势较为平稳,但仍然存在病例数上升的压力,应加强疫情监测,落实防鼠灭鼠为主的综合性预防控制措施。