活血通络法对激素性股骨头坏死家兔模型的血脂影响

目的：探讨活血通络法对激素性股骨头坏死（SANFH）家兔模型的血脂影响，以研究其作用机制。方法：将40只家兔随机分为空白对照组、SANFH模型组及活血通络方高、中、低3个剂量组，每组8只。用糖皮质激素造成SANFH模型，活血通络方高、中、低3个剂量组分别灌服活血通络汤混悬液10．0、5．0、2．5ml／kg，模型组和空白对照组均灌服10ml／kg蒸馏水，分别于治疗4、6、8周进行脂质代谢相关数据变化的观察和比较。 结果：SANFH模型组总胆固醇（TCHOL）和甘油三酯（TG）明显高于对照组（P〈0．01），活血通络方各剂量组TCHOL和TG均明显低于模型组（P〈0．01），随着剂量的增加TCHOL和TG值明显减少，组间比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：脉络痹阻与SANFH关系密切，活血通络中药能防止SANFH的发展。     

埋线针刀结合骨蚀胶囊对早期激素性股骨头坏死患者血清OPG/RANKL表达的影响

目的:观察埋线针刀结合骨蚀胶囊对激素性股骨头坏死(SANFH)的临床疗效及对病人OPG/RANKL表达的影响。方法:选择SANFH患者50例(56髋),随机分为埋线针刀结合骨蚀胶囊组(25例,27髋)和仙灵骨葆胶囊组(25例,29髋)。比较两组施行试验方案之前与足疗程治疗后Harris评分中疼痛评分、功能积分、骨节活动度积分、总评分以及患者血清中的外周血骨保护素(OPG)、NF-κB受体活化因子配体(RANKL)含量水平的变化。结果:两组患者治疗后Harris评分中骨节活动度、疼痛、骨节功能部分的评分及总分均明显高于治疗前(P0.01),且埋线针刀结合骨蚀胶囊组Harris评分明显高于仙灵骨葆胶囊组(P0.01);干预后两组患者血清OPG明显上升、RANKL水平均下降,具有显著差异(P0.01),且埋线针刀结合骨蚀胶囊组血清OPG水平明显高于仙灵骨葆胶囊组,差异具有统计学意义(P0.01);埋线针刀结合骨蚀胶囊组血清RANKL水平明显低于仙灵骨葆胶囊组(P0.01)。结论:埋线针刀结合骨蚀胶囊治疗SANFH具有一定的临床疗效,发挥作用可能与其调节血清中OPG、RANKL的含量、防止股骨头骨质疏松的发生有关。     

从痰论治激素性股骨头坏死OPG/RANK/RANKL信号调控机制研究进展

近年来,激素的不规范使用导致激素性股骨头坏死(SANFH)的发病率呈上升趋势。中医药防治SANFH疗效确切,受到广泛关注,但由于缺乏药效学机理的分子生物学依据,尚未达到标准化治疗水平。OPG/RANK/RANKL信号通路的发现,为临床防治骨代谢疾病开辟了新途径。该信号通路与SANFH"脾虚生痰-由痰致瘀-因瘀致痹"的病机演变密切相关,从痰论治SANFH的分子生物学效应最终可通过该信号通路调控的微观信息来表达。本文探讨从痰论治SANFH与OPG/RANK/RANKL信号调控机制的相关性,结合骨代谢调控机制探讨SANFH的中医辨治,为临床及深入研究提供依据。     

基于OPG/RANK/RANKL信号通路防治股骨头坏死的中医药研究进展

股骨头坏死（ONFH）是由于股骨头内的供血发生损害,细胞组织等发生变性,逐渐造成骨结构被破坏,股骨头进行性塌陷引起的疼痛及功能障碍性疾病。ONFH的主要病理机制在于微循环损害细胞组织能力下降、骨的吸收与新生骨的重建之间的平衡被破坏,其生物力学发生改变,加速股骨头坏死的病理进展。早期临床表现并不明显,主要为髋部或腹股沟区疼痛或酸痛,休息后可缓解,疾病发展后期可出现疼痛加剧,肢体短缩,下肢无力,行走困难或跛行。目前临床上西医常用促骨形成药、抗凝药和人工关节置换等治疗,但也存在假体松动、感染等诸多问题。研究表明,中医药治疗ONFH从整体出发,应用多功能、多靶点、多系统的中药治疗,保障了治疗途径的安全性和有效性。骨保护素（OPG）/核转录因子-κB受体活化因子（RANK）/核转录因子-κB受体活化因子配基（RANKL）信号通路在维持骨重建的动态平衡中具有关键地位,该通路利用中医药等治疗方式促进生物体内破骨细胞凋亡,减少骨吸收,加速骨形成,对于防治ONFH具有重要作用。该文通过查阅国内外相关文献,对OPG/RANK/RANKL信号通路影响相关细胞因子表达在ONFH中的作用,中药单体、中药复方及中药复方联合物理治疗增加成骨细胞分泌,促进OPG表达,提高细胞因子等表达水平,抑制破骨细胞活性等方式以防治ONFH的研究现状进行综述,为中医药防治ONFH提供新的思路和方向。     

活血通络法对激素性股骨头坏死血液流变学的影响

目的：了解活血通络法对激素性股骨头坏死（SANFH）家兔模型的血液流变学影响,以研究其作用机制。方法：将40只家兔随机分为空白对照组,SANFH模型组及活血通络方高、中、低3个剂量组,每组8只。用糖皮质激素造成SANFH模型,活血通络方高、中、低3个剂量组分别灌服活血通络汤混悬液10.0、5.0、2.5ml.kg^-1,模型组和空白对照组均灌服10ml.kg^-1蒸馏水。分别于治疗4、6、8周进行血液流变学相关数据变化的观测和比较。结果：全血高切、中切、低切黏度及血浆黏度比较,模型组明显高于空白对照组（P〈0.01）。活血通络方各剂量组均低于模型组（P〈0.01）。且随着剂量的增加,血液流变学相关数据明显降低,组间比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：血液流变学异常是SANFH的主要发病机制之一,活血通络方可显著改善SANFH的血液流变学状态。     

活血通络汤基于Notch信号通路对家兔激素性股骨头缺血性坏死治疗作用机制研究

目的研究活血通络汤治疗家兔激素性股骨头缺血性坏死的作用机制。方法将40只日本大耳兔随机分为空白组、模型组、治疗给药组、预防加治疗给药组,每组10只,采用贺西京法制做家兔激素性股骨头坏死模型。预防给药组第2周开始喂服中药饲料,治疗给药组第3周开始喂服中药饲料,模型组和空白组均喂服等量普通饲料。第8周末各实验组耳缘静脉取血,RT-PCR检测白细胞Notch1,Notch2,Notch3,Notch4、DLL1,DLL3,DLL4,Jagged1,Jagged2,Hes1,Hes5,HERP1,HERP2基因表达。同时对股骨头进行病理镜检,计算空骨陷窝率。结果第8周时,活血通络汤预防给药组和治疗给药组家兔股骨空骨陷窝率显著低于模型组(P0.05);相比模型组,预防给药组家兔白细胞Notch1和Notch3 mRNA表达有显著升高(P0.05),而Notch2和Notch4 mRNA表达有显著下调(P0.05);相比模型组,预防给药组和治疗给药组家兔白细胞Hes1和Hes5 mRNA表达有显著下调(P0.05),Jagged1 mRNA表达有显著升高(P0.05);预防给药组和治疗给药组家兔白细胞DLL1和DLL4mRNA表达有显著升高(P0.05)。结论活血通络汤通过早期作用于Notch1或其它成员导致其表达发生变化,从而激活Notch如Notch1-DLL1信号传导通路,而增加Notch1胞内NICD的表达,促进下游靶基因的转录表达,促进血管生成,从而参与对骨细胞增殖的调控,进而促进新骨生成。     

活血通络汤对激素性股骨头缺血性坏死病理形态学的影响

目的:探讨活血通络汤对激素性股骨头缺血性坏死(SANFA)病理形态学的影响。方法:选取月龄为6个月的大白兔40只,分为正常组(8只)和造模组(32只),对造模组32只兔子进行SANFA造模,采用数字随机对照表将造模组分为模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,各8只,其中造模组和正常组灌服蒸馏水,其余均灌服不同剂量的活血通络汤,6周、8周后均取家兔耳缘静脉血测定内皮素(ET)和骨钙素(BGP)水平,持续给药8周后取材,观察病理形态变化。结果:与正常组对比,模型组给药第6周、8周ET均较低,具有统计学意义(P0.05);与模型组对比,低、中、高剂量组ET均显著降低,具有统计学意义(P0.05);低、中、高剂量组组间对比,具有统计学意义(P0.05);与正常组对比,模型组给药第6周、8周BGP均较高,具有统计学意义(P0.05);与模型组对比,低、中、高剂量组BGP均显著升高,具有统计学意义(P0.05);低、中、高剂量组组间对比,具有统计学意义(P0.05)。正常组可见完整股骨头骨小梁及骨小梁中骨细胞,偶见空骨陷窝;模型组骨小梁变细,排列紊乱,且存在骨碎片,存在空骨陷窝;低剂量组骨小梁结构紊乱,胶原纤维增粗;中剂量组骨小梁排列相对整齐,成纤维细胞增多;高剂量组可见骨小梁排列整齐,有新骨形成。结论:活血通络汤能促使激素性股骨头缺血性坏死大白兔股骨头组织修复,抑制病情发展,且疗效与用药剂量、持续时间密切相关。     

基于OPG/RANKL/RANK信号通路探讨三补一活方治疗兔激素性股骨头坏死的机制

目的：探究激素性股骨头坏死(steriod-inducd avascular necrosis of femoral heard, SANFH)的分子机制及三补一活方治疗SANFH的物质基础和生物效应靶点。方法：采用改进的马血清加甲泼尼龙琥珀酸钠的方法制备兔SANFH动物模型,造模5周后随机选取造模兔、正常兔各2只,进行股骨头组织病理学检查,证实造模成功后将动物分成正常组、模型组、三补一活方组3组,每组8只;于分组后第1天,三补一活方组给予三补一活方颗粒剂混悬药液10 mL灌胃,模型组及正常组给予等量生理盐水灌胃,连续灌胃8周。每组随机选取6只动物,采用空气栓塞法处死并取标本待检。采用免疫组化法检测骨保护素(orthopantomgraphy, OPG)/核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor-κB ligand, RANKL)/核因子κB受体活化因子(receptor activator of nuclear factor-κB,RANK)信号通路相关蛋白OPG、RANKL、RANK的表达水平,采用实时聚合酶链反应定量检测...     

从“虚”论治激素性股骨头坏死与OPG/RANK/RANKL系统相关性研究进展

近年研究表明,中医药治疗骨代谢疾病如激素性股骨头坏死疗效确切,受到广泛关注,但由于缺乏药效机制的分子生物学依据,尚未达到科学标准化治疗水平。OPG/RANK/RANKL系统的发现成为骨代谢疾病防治及研究的新切入点,激素性股骨头坏死"脾肾亏虚-由痰致瘀-因瘀致痹"的病机演变与该系统密切相关,从"虚"论治的效应最终可通过该系统轴向调控的微观信息来表达。本文初步探讨激素性股骨头坏死的中医辨治,并结合OPG/RANK/RANKL系统对骨代谢的调控机制阐述其相关性,为该病的防治及后续研究提供依据。     

温阳补肾方对兔激素性股骨头坏死血清OPG、RANK、RANKL的影响

目的：探讨温阳补肾方对兔激素性股骨头坏死血清OPG、RANK、RANKL表达的影响,进一步揭示温阳补肾方对激素性股骨头坏死的作用机制。方法：136只新西兰大白兔随机分为正常组、模型组、中药低、中、高剂量组。造模成功后,分别于给药后第4、8、12周取血清,用酶联免疫法检测OPG／RANK／RANKL含量。结果：第4周时,正常组、中药中、高剂量组RANK、RANKL明显低于模型组（P〈0．01）,而OPG明显高于模型组（P〈0．01）。第8周时,正常组、中药低、中、高剂量组RANK、RANKL明显低于模型组（P〈0．01）,而OPG明显高于模型组（P〈0．01）。第12周时正常组、中药低、中、高剂量组RANK、RANKL明显低于模型组（P〈0．01）,而OPG明显高于模型组（P〈0．01）。结论：大剂量激素使用可上调RANK、RANKL的表达,下调OPG的表达,使骨过度吸收从而破坏骨质导致股骨头坏死。温阳补肾方可以提高OPG表达,降低RANK、RANKL的表达,抑制破骨细胞的活化,促进新骨的形成,是治疗激素性股骨头坏死的作用机制之一。     

补肾活血方对激素性股骨头坏死大鼠股骨头组织中RANKL、Cbfα1表达的影响

目的探讨补肾活血方治疗激素性股骨头坏死的可能作用机理。方法将120只SD大鼠随机分为正常组、模型组、中药组、西药组,每组30只。除正常组外其余各组大鼠臀部肌肉注射甲泼尼龙琥珀酸钠20 mg/kg,每周注射2次,连续注射6周建立激素性股骨头坏死动物模型。造模后中药组给予浓度为96. 67 mg/ml补肾活血方水煎液2 ml灌胃,西药组给予浓度为1. 29 mg/ml的阿仑膦酸钠片水溶液2 ml灌胃。观察各组大鼠股骨头外观形态、HE染色后组织病理学改变,检测股骨头组织中细胞核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、核心结合因子α1 (Cbfα1)蛋白及mRNA表达。结果模型组大鼠股骨头毛糙无光泽,骨质疏松严重;西药组部分股骨头无粗糙面且色泽较鲜亮,偶有色泽稍微晦暗的情况,骨质较坚硬;中药组及正常组股骨头外观及形态正常,骨质坚硬。HE染色显示,模型组股骨头软骨细胞出现大面积坏死,排列不整齐,软骨细胞核聚缩,骨小梁内骨细胞明显减少,空骨陷窝明显增多。中药组股骨头软骨细胞排列欠规则,结构尚完整,空骨陷窝较少见,与正常组最为接近;西药组变化大致与中药组接近,但空骨陷窝较中药组多。中药组和西药组股骨头组织中RANKL、Cbfα1蛋白及mRNA表达均较模型组降低(P 0. 05),而中药组和西药组比较差异无统计学意义(P 0. 05)。结论补肾活血方可能通过下调股骨头组织中RANKL、Cbfα1的表达,从而促进股骨头坏死骨修复及股骨头新生骨的生成。     

活血通络汤对激素性股骨头缺血性坏死模型兔股骨细胞因子表达的影响

目的探讨活血通络汤治疗激素性股骨头缺血性坏死的可能作用机制。方法 96只日本大耳兔随机分为预防+治疗组、治疗组、模型组、空白组,每组24只。采用臀部肌肉注射醋酸泼尼松龙8 mg/kg方法制备激素性股骨头缺血性坏死模型。从第2周开始,预防+治疗组喂服活血通络汤饲料,其余各组喂服普通饲料,每日1次,连续1周。从第3周开始,预防+治疗组和治疗组均喂服活血通络汤饲料,模型组、空白组均喂服等量普通饲料,每日1次,连续6周。采用免疫组织化学法测定兔股骨组织中碱性磷酸酶(AKP)、骨钙素(BGP)、碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)、转化生长因子β1(TGF-β1)、骨形态发生蛋白2(BMP-2)及血小板源性生长因子B(PDGF-B)的表达情况。结果与空白组比较,模型组股骨组织TGF-β1、b FGF、BGP、BMP-2、PDGF-B含量明显降低,APK含量明显升高(P0.05或P0.01);与模型组比较,预防+治疗组、治疗组股骨组织TGF-β1、b FGF、BGP、PDGF-B含量明显升高,APK含量明显降低,预防+治疗组BMP-2含量明显升高(P0.05或P0.01)。结论活血通络汤可能通过上调骨组织中BGF、TGF-β1、b FGF、PDGF表达,下调APK表达,从而促进骨坏死的修复。     

活血通络汤对激素性股骨头坏死模型VEGF、TNF-α影响的研究

目的通过研究活血通络汤对激素性股骨头坏死(steroid induced avascular necrosis of femoral head,SANFH)模型中VEGF(vascular endothelial growth factor,血管内皮因子)、TNF-α(Tumor necrosis factor,肿瘤坏死因子α)的表达变化,来阐述活血通络汤对激素性股骨头坏死的作用机制。方法将192只日本大耳兔随机分组,模型组A、模型组B、模型对照组C、空白对照组D各48只,A、B、C组运用贺西京造模法造模。A组第2周开始喂服中药饲料,B组第3周开始喂服中药饲料,C、D组均喂服等量普通饲料,并于第2、5、8周末检测血中VEGF、TNF-α的含量,观察股骨头病理,计算空骨陷窝率。结果在不同时期比较,随实验时间的延长,在骨陷窝率方面,A组有下降趋势,B、C组均逐渐上升,但B组上升幅度小于C组;在血清VEGF方面,C组呈逐渐下降趋势,A组呈上升趋势,B组虽然呈下降趋势,但其下降幅度要明显小于C组;在血清TNF-α方面,C组逐渐上升,A、B组血清中TNF-α呈现下降趋势(第5周有升高)。结论激素可以导致血中VEGF的表达减弱,TNF-α的表达增强,活血通络汤具有抑制激素使VEGF表达减弱的趋势,下调TNF-α,从而缓解股骨头坏死进展,促进股骨头坏死的修复。     

活血通络法对静息性股骨头坏死的临床和影像表现的干预作用

目的评估活血通络法治疗静息性股骨头坏死患者的临床疗效和影像学表现。方法 2005年6月至2013年1月,回顾55例59髋静息性股骨头坏死患者采用活血通络中药干预前后的临床和影像资料,男39例、女16例,平均年龄(36.4±10.1)岁,平均随访(4.38±2.38)年。病因为激素性、酒精性、特发性的患者分别为28例(28髋)、10例(10髋)、17例(21髋);ARCOⅠ、Ⅱ期分别为10髋、49髋。采用Harris量表评估髋关节功能,SF-36量表评估生活质量,临床与影像学进展分别采用有或无疼痛、有或无塌陷进展进行评估,并与文献报道的静息髋自然转归对比,评价中医药防治股骨头坏死的效果。结果本组股骨头坏死患者均随访2年以上,2-5年40例,5、≤10年13例,10年2例。治疗前后患者的Harris评分无统计学差异(89.7±10.5 vs 96.4±12.0)。SF-36健康量表评分中精神健康状况(P=0.004)及活力(P=0.000)、角色限制(P=0.001)、心理健康(P=0.003)的评分在治疗后均有上升,具有统计学差异。ARCOⅠ、Ⅱ期分别有2髋(20.0%)、3髋(6.1%)出现疼痛;分别有4髋(40.0%)、9髋(18.4%)出现塌陷。与文献报道的静息髋自然转归对比,临床和影像学进展率明显降低。结论活血通络法中药干预静息性股骨头坏死效果明显,降低了临床和影像学进展率,提示股骨头坏死早期诊断、早期治疗的重要性。     

补肾活血汤对激素性股骨头坏死模型大鼠神经肽Y系统的影响

目的 探讨补肾活血汤治疗激素性股骨头坏死(SONFH)的可能作用机制.方法 32只SD大鼠随机分为对照组、模型组、补肾活血汤组和拮抗剂组,每组8只.除对照组外,其余各组依次尾静脉注射内毒素(20μg/kg)2次和臀部肌肉注射强的松(40mg/kg)3次,每次间隔24h,制备SONFH大鼠模型.末次肌肉注射24h后,补肾...     

RANKL/RANK/OPG系统及其在激素性骨坏死中的作用

近几年的研究表明,核因子kB受体活化因子配基/核因子kB受体活化因子/骨保护蛋白(RANKL/RANK/OPG)系统对保持骨重建的动态平衡具有重要意义;糖皮质激素通过影响RANKL/RANK/OPG系统的正常功能导致骨量减少;对RANKL/RANKL/RANK/OPG系统的外源性干预可阻断和逆转骨质吸收.糖皮质激素时RANKL/RANK/OPG系统影响的研究为治疗激素所致骨坏死开辟了广阔的前景.本文拟对近年对RANKL/RANK/OPG系统及其在激素性骨坏死中的病机和治疗研究进展作一综述.     

通络生骨胶囊预防激素性股骨头缺血性坏死的药效学实验

目的探讨通络生骨胶囊对激素性股骨头缺血性坏死的预防作用.方法建立大鼠激素性股骨头缺血性坏死模型. SD大白鼠 120只随机分成正常组、模型组、安妥明组、通络生骨胶囊高、中、低剂量组.每周注射激素 1次,每日灌胃药物 1次.于实验后第 4周、第 8周、第 12周分 3批处死动物,进行股骨头大体形态及光镜检查,墨汁灌注透明片观察,并用全自动图象分析处理系统进行病理图象的分析处理、骨的组织形态学和计量学分析.结果通络生骨胶囊各组骨小梁质量较好,与正常组基本一致;空骨陷窝率较模型组显著降低;股骨头髓腔中脂肪变性程度较模型组明显减轻;软骨下血管计数及软骨下区小血管直径与模型组比较有显著增加(P<0.01),光镜下小血管结构较模型组完整,无明显髓腔内出血征象;墨汁灌注透明片显示血管密度较模型组及安妥明应用组显著增高(P<0.01);成骨细胞计数较模型组显著增加(P<0.01),破骨细胞计数较模型组显著降低(P<0.01).结论通络生骨胶囊对激素性股骨头缺血性坏死有明显的预防作用.     

激素性股骨头坏死大鼠模型内毒素剂量的优选

目的确定建立激素性股骨头坏死(SANFH)模型最佳内毒素剂量。方法 SD大鼠随机分为空白对照组,大肠杆菌脂多糖10、20、40μg/kg组,尾静脉注射大肠杆菌脂多糖2 d后,臀肌注射甲基强的松龙20 mg/kg 3 d以建立SANFH模型,观察造模后大鼠体质量变化,分别于造模4、8、12周检测骨组织形态学、骨组织病理学、股骨骨密度、骨生物力学及骨钙、磷含有量。结果内毒素剂量增至40μg/kg时,对大鼠股骨骨组织形态、骨小梁排列结构的破坏,骨小梁面积的减少更为明显,股骨骨密度及大鼠骨钙、磷含有量的降低更显著。结论建立激素性股骨头坏死动物模型的最佳内毒素剂量为40μg/kg。     

骨复生对激素性股骨头坏死大鼠骨组织中OPG及RANK表达的影响

目的:基于动物模型探讨骨复生对激素性股骨头坏死大鼠骨保护素(OPG),受体活化因子(RANK)信号通路的影响。方法:将80只大鼠随机分为正常组、模型组、中药组、西药组4组,每组各20只。除正常组外其余各组连续2d中每日经尾静脉注射40μg/kg的脂多糖,之后每隔3d臀部肌肉(所有动物统一从右侧臀大肌以45°角匀速注射)注射地塞米松25mg/kg,连续注射6周。观察造模前后以及治疗前后的股骨头X线变化、组织病理学改变以及OPG,NF-κB基因表达情况。结果:1)中药组、西药组双侧股骨头X线结果与正常组最为接近,股骨头大小形态正常,骨密度均匀,骨小梁清晰,但西药组仍有少部分密度不均匀;模型组股骨头密度不均,但股骨头仍完整,偶见透亮囊状阴影。2)正常组细胞结构清晰,空骨陷窝较少见;中药组可见骨细胞大部分正常,空骨陷窝较少;西药组变化大致与中药组接近,但空骨陷窝较中药组多;模型组细胞结构紊乱、细胞萎缩、细胞集聚固缩,空骨陷窝明显存在。3)中药组和西药组分别与模型组比较,中药组和西药组骨组织中RANK的表达均下调,且中药组下调更明显,而中药组和西药组骨组织中OPG表达均上调,差异有统计学意义(P<0.05);中药组和西药组与正常组比较,骨组织中OPG,RANKL及RANK的表达差异无统计学意义(P>0.05);中药组与西药组比较,骨组织中OPG的表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论:骨复生可明显上调OPG的表达,下调RANK的表达,增加骨细胞形成,促进骨量上升,减少骨钙流失,促进骨质成熟,改善股骨头局部缺血缺氧环境,从而有效干预激素性股骨头坏死的形成。