基于UPLC-Q-TOF-MS的补阳还五汤抗慢性炎症大鼠尿液代谢组学研究

基于超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)探讨补阳还五汤(Buyang Huanwu Decoction, BYHWD)对大肠杆菌脂多糖(LPS)诱导的慢性炎症大鼠尿液中内源性标志物的影响,旨在从代谢组学的角度阐述BYHWD治疗慢性炎症的分子作用机制。雄性SD大鼠随机分成正常组、模型组以及BYHWD低、中、高剂量组(7.5、15、30 g·kg^-1)。模型组及各药物组每周首日尾静脉注射LPS 200μg·kg^-1,并于次日灌胃BYHWD,每日1次,连续4周。给药结束收集尿液样品,应用UPLC-Q-TOF-MS分析各组大鼠的尿液代谢轮廓,结合主成分分析(PCA)、偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)和正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)等多元统计分析方法,分析BYHWD对内源性代谢物的影响;结合单因素方差分析(One-way ANOVA)和变量投影重要度(VIP)筛选出与慢性炎症相关的潜在生物标志物;通过MetaboAnalyst 5.0对鉴定出来的生物标志物进行通路及富集分析。结果显示,在大鼠尿液中筛选和鉴定...     

补阳还五汤治疗大鼠气虚血瘀型脑缺血的代谢组学研究

目的：探讨补阳还五汤对气虚血瘀型脑缺血大鼠生物代谢途径的影响。方法：将30只大鼠随机分为假手术组、模型组和补阳还五汤组(3.49 g/kg)。模型组和补阳还五汤组采用荧光微球诱导多发性脑梗死合并睡眠剥夺,建立气虚血瘀型脑缺血动物模型,并分别给予蒸馏水或补阳还五汤灌胃。假手术组给予蒸馏水灌胃,不睡眠剥夺和微球注射。记录各组大鼠的体质量。实验结束后,处死大鼠,采血分析。酶联免疫吸附试验法检测大鼠血清中血栓素B₂(TXB₂)和6-酮基-前列环素1α(6-keto-PGF_1α)水平。采用液质联用的代谢组学方法检测血清样品。结果：与假手术组比较,模型组大鼠平均体质量明显降低,TXB₂/6-keto-PGF_1α比值升高(均P<0.05);与模型组比较,补阳还五汤组大鼠平均体质量升高,药物干预可降低TXB₂/6-keto-PGF_1α比值(P<0.05)。代谢组学结果显示,假手术组与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05),补阳...     

基于代谢组学的补阳还五汤干预缺血性脑卒中的作用机制研究

目的:利用代谢组学技术探讨补阳还五汤干预缺血性脑中风的作用机制。方法:采用线栓法制备大鼠中动脉局灶性脑缺血模型(MCAO),采用神经功能积分和脑梗死体积测定方法验证补阳还五汤干预缺血性脑中风的药效;采用UPLC-MS测定假手术组、模型组和补阳还五汤给药组大鼠血清中的内源性物质的峰面积,采用偏最小二乘法(Partial Least Squares,PLS-DA)和主成分分析法(Principal Component Analysis,PCA)统计方法进行数据模式分析。结果:与模型组比较,补阳还五汤组神经功能积分显著下降(P<0.05),半脑梗死面积显著降低(P<0.05);PCA散点图中,假手术组、模型组和补阳还五汤组分离良好;内源性代谢物质谷氨酰胺、异亮氨酸、次黄嘌呤、前列腺素2、谷氨酸、脯氨酸、焦谷氨酸、缬氨酸、胆固醇和吲哚丙酸在三组中变化显著(P<0.05⁰.01),为缺血性脑中风的潜在生物标志物。结论:补阳还五汤对局灶性脑缺血模型有明显的神经保护作用,作用机制可能和调节内源性代谢物变化有关。     

补阳还五汤抗胃溃疡的实验研究

目的 :观察补阳还五汤抗实验性胃溃疡的作用。方法 :采用水应激法、利血平性溃疡法和幽门结扎法建立胃溃疡实验模型。分别观察补阳还五汤 0 .6 g/ kg、1.2 g/ kg不同剂量及甲氰咪胍 0 .2 g/ kg对上述各类型溃疡的抑制作用。结果 :补阳还五汤 0 .6 g/ kg对小鼠应激型溃疡、利血平型溃疡和大鼠幽门结扎型溃疡有明显的抑制作用 (P <0 .0 1或 P <0 .0 5 ) ,对胃蛋白酶活性及排出量则无明显改善 (P >0 .0 5 )。结论 :补阳还五汤可用于治疗胃溃疡。     

补阳还五汤对高血压前期大鼠血管炎症保护机制研究

目的:通过观察补阳还五汤对高血压前期大鼠胸主动脉NF-κB信号通路的影响,探讨其对高血压前期血管炎症损伤的保护机制。方法:选择7周龄盐抵抗大鼠(SS)与盐敏感大鼠(DS),随机分成正常组、模型组、模型给药组和正常给药组,每组各10只。各组大鼠以8%Na Cl高盐饲料喂养,期间采用智能无创血压计监测大鼠尾动脉收缩压,造模成功之后,予以补阳还五汤灌胃治疗,每日1次,连续治疗5周。Elisa法检测血清中TNF-α含量;荧光定量PCR法检测胸主动脉TRAF-6、IKK、IκB、NF-κBp65的m RNA表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠TNF-α的含量明显升高,TRAF-6、IKK、NF-κB的m RNA表达显著升高,IκB的m RNA表达明显降低;与模型组比较,模型给药组TNF-α的含量明显降低,TRAF-6、IKK、NF-κB的m RNA表达显著降低,IκB的m RNA表达明显升高。结论:补阳还五汤通过调节TNF-α/NF-κB炎症信号通路,减轻炎症反应,保护血管,从而延缓高血压前期的发展进程。     

补阳还五汤抗脑卒中网络动力学研究

目的 基于补阳还五汤抗缺血性脑卒中的超分子“印迹模板”理论中的物质流量平衡原理,建立网络动力学平衡常数模型,阐明补阳还五汤复方抗脑缺血成分-成分作用关系,为中药复方治疗疾病的复杂作用体系提供新思路。方法 通过UPLC-MS/MS测定补阳还五汤血药成分及其浓度,研究稳态血药浓度内再次给药对体系的扰动,以网络动力学数学模型为媒介,选取20个有效成分作为模型中的节点,计算补阳还五汤网络动力学平衡常数参数,从而以平衡常数矩阵的方式揭示补阳还五汤成分群在体内的作用关系。结果 在构建的平衡常数拓扑网络中,补阳还五汤中10种入血成分对网络有正向调控作用,按作用大小排序为异黄芪皂苷Ⅰ>琥珀酸>刺芒柄花苷>洋川芎内酯H>洋川芎内酯Ⅰ>香草醛>丁烯苯酞>苦杏仁苷>氧化芍药苷>3-羟基-9,10-二甲氧基紫檀烷;另10种成分网络有负向调控作用,按作用大小排序为黄芪皂苷Ⅰ>洋川芎内酯C>阿魏酸>羟基红花黄色素A>藁本内酯>胡萝卜苷>洋川芎内酯A>毛蕊异黄酮>芒柄花素>毛蕊异黄酮葡萄糖苷,异黄芪皂苷Ⅰ、黄...     

补阳还五汤抗老年痴呆药效物质研究

目的:对补阳还五汤进行抗老年痴呆活性物质的研究。方法:补阳还五汤水提液用石油醚萃取后剩余水层采用硅胶柱层析,中高压制备液相等多种色谱技术进行分离纯化,根据理化常数及波谱分析鉴定化合物的结构。结果:从补阳还五汤水提液中分离得到5个化合物,分别为buxmicrophylline E(1),4'-O-methylkuwanon E(2),bavachinone A(3),bavachinone B(4)和albopunctatone(5)。结论:以上化合物均首次从补阳还五汤中分离得到。     

补阳还五汤对MCAO模型大鼠炎症因子水平的作用研究

目的:观察补阳还五汤对缺血性脑损伤炎症因子水平的作用。方法:SD大鼠按体重随机分为假手术组,模型对照组,阿托伐他汀(10mg/kg),补阳还五汤高、中、低剂量组(20、10、5g/kg),用颈内动脉线栓法建立MCAO脑缺血再灌注模型;实验第10周期末,采血,取脑组织,ELISA法测定血清及脑组织中TNF-α、IL-6、IL-8、ROS、NF-κB含量。结果:20、10g/kg补阳还五汤能显著降低模型大鼠血清及脑组织TNF-α、IL-6、NF-κB含量,降低脑组织ROS水平。结论:补阳还五汤能有效降低MCAO大鼠的炎症反应;其对缺血性脑损伤的防治作用可能与降低炎症因子水平,抑制炎症反应有关。     

补阳还五汤血浆指纹图谱的建立

目的:建立补阳还五汤含药血浆指纹图谱,探讨补阳还五汤在大鼠体内的药效物质基础。方法:通过比较补阳还五汤水煎液、补阳还五汤水煎液含药血浆、空白血浆HPLC指纹图谱,推断大鼠口服补阳还五汤水煎液后,血浆中的原型成分及代谢产物。结果:口服补阳还五汤水煎液后,在大鼠血浆中发现了30个入血成分,其中10个为血浆固有成分,1个为溶剂峰,19个为药源性成分,其中4个为药材原型成分,15个为代谢产物,其中2个为黄芪代谢产物,1个为桃仁代谢产物。结论:该研究建立的方法准确、可靠,可用于补阳还五汤水煎液血浆指纹图谱和药效物质基础的研究。     

补阳还五汤对慢性肾脏病大鼠的肾保护作用研究

目的探讨补阳还五汤对慢性肾脏病(CKD)大鼠的肾保护作用。方法取健康雄性SD大鼠40只,随机选取8只大鼠作为正常组,不予任何药物干预;其余大鼠使用0.5%腺嘌呤饲料饲养建立CKD大鼠模型。将造模成功的21只大鼠随机分为3组,每组7只。补阳还五汤组和复方α-酮酸片组分别给予相应药物灌胃4周,模型组给予等量生理盐水灌胃4周。检测各组大鼠灌胃前后血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)和24 h尿蛋白水平;并采用HE和PAS染色,观察各组大鼠肾脏组织病理学表现。结果灌胃4周后,模型组大鼠BUN没有明显变化(P>0.05),24 h尿蛋白水平均明显升高(P均<0.05);补阳还五汤组大鼠SCr、BUN和24 h尿蛋白水平均明显低于灌胃前、模型组和复方α-酮酸片组(P均<0.05);复方α-酮酸片组大鼠灌胃前后上述各指标比较差异无统计学意义(P均>0.05),但各指标水平均明显低于模型组(P均<0.05)。与模型组相比,补阳还五汤组和复方α-酮酸片组大鼠肾脏组织病理表现均有明显改善,肾小球数量显著增加(P均<0.05),肾小管间质病理评分明显下降(P均<0.05),且补阳还五汤组改善情况明显优于复方α-酮酸片组(P均<0.05)。结论补阳还五汤能够有效保护CKD大鼠的肾功能,改善肾组织病理学表现。     

补阳还五汤抗炎免疫药理作用

本研究证明补阳还五汤对小鼠耳壳炎症、腹腔毛细血管通透性及角叉菜胶性关节炎均有显著的对抗作用,对塑料环肉芽肿有明显的抑制作用,表明该方具有对抗渗出性炎症及增殖性炎症的作用。对免疫器官有显著增重作用,对巨噬细胞吞噬功能有明显促进作用并显著增加特异性抗体溶血紊的含量,表明该方对非特异性和特异性免疫功能均有增进作用。为文献记载该方具有"补气、活血、行瘀"之功用提供了科学依据。     

补阳还五汤抗血小板聚集作用

补阳还五汤在临床上广泛用于治疗缺血性脑血管疾病,其作用机制与补阳还五汤及其单味药抗血小板聚集作用相关.     

补阳还五汤干预代谢综合征大鼠中枢胰岛素抵抗的实验研究

目的研究补阳还五汤对代谢综合征大鼠中枢胰岛素抵抗的影响与作用机制。方法以高脂高糖高盐饮食联合小剂量链脲佐菌素(STZ)建立代谢综合征大鼠模型,随机分为模型组、中药补阳还五汤组、西药罗格列酮组,另设正常对照组。各组给予相应受试药物,周期8周。实验结束时,腹主动脉采血,取海马组织。检测各组血糖,双抗体夹心ELISA法测定血清CRP,实时荧光定量PCR技术检测海马IR、IRS-1、IRS-2mRNA的表达水平。结果补阳还五汤组大鼠的血糖、血清CRP含量较模型组均显著降低,海马IR、IRS-1、IRS-2mRNA的表达水平较模型组均显著升高(P0.05)。结论降低血糖,降低血清CRP,升高海马IR、IRS-1、IRS-2mRNA的表达,减轻中枢胰岛素抵抗可能是补阳还五汤干预代谢综合征认知功能障碍的部分作用机制。     

补阳还五汤抗脑缺血损伤的实验研究

补阳还五汤出自清代王清任的《医林改错》,由黄芪、当归尾、芍药、川芎、桃仁、红花、地龙组成,具有补气、活血、通络功效,临床常用于缺血性脑血管疾病及其后遗症的预防和治疗。脑缺血性疾病的病因病理十分复杂,其发生与血管病变、血流动力学、血液学及血液流变异常等诸多因素有关,并伴有脑循环机能和细胞代谢等方面的异常改变,如血管收缩、血小板聚集、局部脑组织水肿、神经细胞变性甚至死亡等。近年来许多学者对该方进行了大量实验研究,较全面地探讨了其抗脑缺血损伤的药理作用及机制。     

基于UPLC-Q-TOF/MS的植物代谢组学技术鉴别林下山参的生长年限

生长年限是影响林下山参质量的重要因素之一。为了对不同生长年限的林下山参进行鉴别,该研究采用基于UPLC-Q-TOF/MS的植物代谢组学技术,并结合PCA和OPLS-DA等多变量统计分析方法对11~15年林下山参芦头的代谢物进行研究。结果表明,不同生长年限林下山参芦头之间的代谢物组成有差异。为了提高鉴别效果,通过变量权重重要性排序(VIP)值筛选出对分类贡献大的差异代谢物,并以筛选的差异代谢物建立11~15年林下山参的OPLS-DA判别模型,模型的解释率和预测率均较高,可用于鉴别市场上常见的11~15年林下山参。该研究建立了一种快速、准确、可靠的林下山参年限鉴别方法,同时也为其他中药材的年限鉴别提供了一种新的思路。     

基于UPLC-Q-TOF/MS的RAW264.7细胞炎症模型的代谢指纹分析

为揭示炎症细胞模型的极性代谢组特征,该文选择RAW264.7细胞为研究载体,以LPS刺激诱导炎症细胞模型,进行细胞代谢组学的指纹分析。具体方法为:筛选、优化了细胞内极性代谢物的提取方法,建立了利用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)进行细胞内代谢组的数据采集方法,采用正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)进行数据处理,筛选并初步鉴定了17种差异代谢物。结果显示,采用MeOH-CHCl_3-H_2O(8∶1∶1)作为提取溶剂,色谱峰数目较多,细胞内极性代谢物提取效率较高,分析方法的稳定性较好;与正常细胞相比,炎症细胞的蛋白质代谢、糖代谢、核苷酸代谢等代谢通路受到扰动。该研究建立了基于UPLC-Q-TOF/MS的RAW264.7细胞代谢组学指纹分析方法,为揭示细胞炎症机制及抗炎药物机制研究奠定基础。     

补阳还五汤治疗慢性萎缩性胃炎

自1984年以来,我们应用补阳还五汤加减治疗慢性萎缩性胃炎32例,其中男19例,女13例;20岁以下者1例,21～40岁15例,41～60岁12例,60岁以上者4例;病程:1～5年者5例,6～10年者16例,10年以上者11例。治疗前均经胃镜或病理检查而确诊。治疗     

补阳还五汤研究概况

<正>补阳还五汤为清代著名医家王清任所创,由黄芪、赤芍、当归、地龙、桃仁、红花组成,有活血补气、祛瘀通络的作用,主要用于气虚血瘀证。随着深入研究,现己广泛应用于多种病症的治疗。现将补阳还五汤的研究概况综述如下。1治疗脑梗死脑梗死属中医"中风"范畴,肝阳上亢及气滞血瘀为常见证型,而补阳还五汤是为气虚血瘀而设,所以在脑梗死治疗中应用广泛。毛小平等观察补阳还五汤     

补阳还五汤对慢性脑缺血大鼠脑组织形态学的影响

目的:探讨补阳还五汤对慢性脑缺血大鼠脑组织形态学的影响。方法:SD大鼠,采用双侧颈总动脉结扎法复制慢性脑缺血大鼠模型。大鼠随机分为5组,即假手术组(给予等体积的生理盐水)、模型组(给予等体积的生理盐水)、补阳还五汤低剂量组[中药低剂量组,剂量为20 g/(kg·d)]、补阳还五汤高剂量组[中药高剂量组,剂量为40 g/(kg·d)]、阳性对照组[金纳多组,剂量为0.045 g/(kg·d)],每组10只大鼠,连续给药4周。结果:HE染色及焦油紫染色显示慢性脑缺血大鼠模型脑组织疏松,顶叶皮质轻度缺血性改变,神经元减少,细胞排列松散,海马CAI区神经细胞数目明显减少,排列紊乱;而各给药组大鼠脑组织损伤程度、细胞减少数目均有所缓解。结论:补阳还五汤能保护慢性脑缺血大鼠海马CAI区神经细胞,改善神经细胞的死亡。