一氧化氮(NO)在实验兔放射性肺损伤中的双向作用

目的:观察一氧化氮(NO)在实验兔放射性肺损伤中的双向作用.方法:将实验动物随机分为对照组、L-精氨酸组(L-Arg组)和L-硝基-精氨酸甲酯组(L-NAME组),采用6MvX线对左全肺进行照射, 25Gy,1次.每组分别于照射后1、3、6个月各自处死5只动物,处死前进行左肺肺泡灌洗,灌洗液进行NO测定及肺组织iNOS免疫组化检测和病理分期.结果:NO含量在放疗后1个月,3组均明显升高,但L-NAME组的升高幅度低于前两组.放疗后3-6个月,对照组与L-NAME组NO含量显著降低,而L-Arg组仍高于放疗前水平.iNOS蛋白表达对照组与L-Arg组基本一致,即在照射前和照射后3-6个月,肺间质细胞内几乎未见iNOS阳性表达;在照射后1个月,肺间质中iNOS表达阳性细胞明显增多;而L-NAME组在照射后1个月,肺间质中仅见少量的iNOS表达阳性细胞.对照组放射性肺损伤的发生率明显高于其它两组.结论:NO在放射性肺损伤的发生发展中具有双重作用,适中的NO水平对机体是有益的.     

经方麦门冬汤预防放射性肺损伤及其对血浆TGF-β1的影响

目的 探讨经方麦门冬汤能否预防放射性肺损伤的发生及其对血浆TGF-β1水平的影响.方法 采用前瞻性随机对照设计,将符合入选标准接受根治性放疗的食管癌及Ⅲ期以上的肺癌患者随机分为治疗组和对照组.对照组行单纯放化疗,治疗组在进行放化疗的同时口服麦门冬汤,比较两组患者放射性肺损伤的发生率.在放疗前、放疗完成40 Gy及放疗后1个月测定两组患者血浆TGF-β1的水平.结果 治疗组2级以上(≥2级)放射性肺损伤的发生率为16.67％(5/30),明显低于对照组40.00％ (12/30),差异具有统计学意义(P＜0.05).放疗前,两组血浆TGF-β1水平比较无统计学差异(P＜0.05);放疗完成40Gy时,治疗组血浆TGF-β1水平为(25.23±5.11) ng/ml,对照组为(27.85±5.57) ng/ml,两组比较有统计学差异(t=1.90,P＜0.05);放疗后1个月治疗组TGF-β1水平为(5.74±2.64) ng/ml,对照组为(7.36±3.11) ng/ml,两组间比较有统计学差异(t=2.18,P＜0.05).结论 麦门冬汤可以预防放射性肺损伤的发生;其机制可能与TGF-β1通路有关.     

血浆TGF-β1与放射性肺损伤的相关性研究

目的探讨放疗前后血浆TGF-β1的水平和V20与发生放射性肺损伤的相关性。方法受三维适形放疗的53例肺癌患者,肿瘤总照射剂量40～70Gy,常规分割2Gy/次,5次/周。计划控制V20≤35%,脊髓剂量≤45Gy。应用ELISA方法对患者放疗前后血浆TGF-β1的浓度进行定量检测。结果全组放射性肺损伤的发生率为32.1%(17/53),其中Ⅱ级或Ⅱ级以上发生率为13.2%。放疗结束时,TGF-β1水平升高者放射性肺损伤的发生率为51.9%,明显高于TGF-β1水平正常者(11.5%)(P=0.002),而放疗前TGF-β1水平升高或在正常范围,放射性肺损伤发生率无显著差异(P=0.315)。V20>25%,放疗结束时TGF-β1水平升高,放射性肺损伤的发生率为62.5%,明显高于其它组别;而V20≤25%,放疗结束时血浆TGF-β1正常的患者没有发生放射性肺损伤。结论放疗结束时TGF-β1水平升高与放射性肺损伤密切相关。V20>25%,放疗结束时TGF-β水平升高者,属于发生放射性肺损伤的高危人群。     

胸部肿瘤三维适形放疗急性放射性肺损伤相关因素的分析

目的:分析三维适形放射治疗胸部肿瘤患者发生急性放射性肺损伤的临床、物理和生物学因素,为预测急性放射性肺损伤,优化放疗计划提供参考。方法:对84例胸部肿瘤放疗后发生急性放射性肺损伤的患者进行单因素和多因素Logistic回归及相关分析。采用双抗体夹心ELISA法检测放疗前、后的血浆转化生长因子-β1(TGF-β1)水平;从剂量体积直方图上获取放射物理数据。结果:84例患者中发生急性放射性肺损伤19例,其中Ⅰ级8例,Ⅱ级5例,Ⅲ级5例,Ⅳ级1例,急性放射性肺损伤的发生率为22.62%(19/84);单因素Lo-gistic回归分析显示与急性放射性肺损伤相关的因素有放疗前的肺功能(基础肺功能)、肺V20、化疗和放疗后的血浆TGF-β1升高,P<0.05。结果显示,放疗后总体血浆TGF-β1水平低于放疗前的水平。多因素Logistic回归结果显示,急性放射性肺损伤的独立危险因素为肺V20和基础肺功能(OR值分别为3.094、3.945)。结论:三维适形放射治疗胸部肿瘤时肺的V20和基础肺功能可能是引起急性放射性肺损伤的主要因素。放疗后血浆TGF-β1水平升高还不能作为预测急性放射性肺损伤的指标。     

肺癌患者肺炎衣原体IgG阳性与放射性肺损伤相关细胞因子的关系

背景与目的肺炎衣原体感染与肺癌有密切关系,但肺炎衣原体感染对肺癌放射性肺损伤的影响尚未见报道。本研究旨在探讨肺癌患者肺炎衣原体(chlamydia pneumoniae,Cpn)IgG阳性对放射性肺损伤相关细胞因子的影响。方法观察有病理诊断、初次胸部放疗肺癌患者69例,分别于放疗前、放疗中和放疗后采血冻存,采用酶联免疫吸附法检测血液中Cpn的IgG以及IL-1β、SP-A、TGF-β、TNF-α的含量。结果 69例肺癌患者中CpnIgG阳性21例,阴性48例,阳性率为30.43%。CpnIgG阳性组与阴性组放疗中IL-1β浓度分别为(35.82±10.09)ng/L和(30.01±6.46)ng/L,两组之间有差异无统计学意义(P<0.05),放疗前和放疗后无明显差异。CpnIgG阳性组与阴性组放疗前SP-A的浓度差异无统计学意义,放疗中分别为(641.78±106.81)ng/L和(100.86±61.4)ng/L,有统计学差异(P<0.05),放疗后浓度分别(657.47±115.19)ng/L和(93.23±47.15)ng/L,也有统计学差异(P<0.05)。CpnIgG阳性组与阴性组放疗前、放疗中、放疗后TNF-α浓度两组之间均无统计学差异。CpnIgG阳性组放疗前、放疗中、放疗后TGF-β1的浓度分别(710.67±358.16)pg/mL、(1,002.06±542.16)pg/mL和(2,125.16±1,522.29)pg/mL,阴性组分别为(867.77±412.48)pg/mL、(914.05±425.70)pg/mL和(1,073.36±896.01)pg/mL,两组之间比较放疗后TGF-β1浓度有统计学差异(P<0.05)。结论肺癌患者CpnIgG阳性一定程度上提高了放射性肺损伤相关细胞因子SP-A、TGF-β1、IL-1β的水平,提示可能加重肺癌患者的放射性肺损伤。     

益气活血中药对放射损伤大鼠肺组织TGF-β1和Ⅰ、Ⅲ型胶原合成的影响

目的:观察小剂量重复照射下不同时相大鼠肺组织转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达和Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维的动态变化,以及益气活血中药干预的影响,探讨益气活血中药防治放射性肺损伤的作用及机理.方法:96只Wistar种雌性大鼠随机分为照射加中药组(A组)30只、照射加氨溴索组(B组)30只、单纯照射组(C组)30只、正常对照组(D组)6只.用直线加速器对前3组大鼠右肺进行分次照射(5Gy/次,1次/w,累积剂量为30Gy),于照射开始后第4、6、8、12、26w 5个时间点分别处死3组大鼠各6只,取肺组织切片行TGF-β1和Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维免疫组化检测,观察各组大鼠肺组织不同时相TGF-β1的表达和胶原纤维含量的改变.结果:单纯照射组大鼠肺组织TGF-β1于照射第4w增高,第12w达到高峰;胶原纤维合成在第4w开始,第12w明显增快,至26w达到高峰.中药干预组各时相大鼠肺组织TGF-β1表达及Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维增生程度均明显低于单纯照射组(P<0.05);各时相值与照射加氨溴索组近似,相比无统计学差异(P>0.05).结论:在小剂量重复照射过程中,组织TGF-β1表达与组织胶原纤维合成有明显的同步性,而早期应用益气活血中药可抑制TGF-β1的表达,并减轻早期放射性肺炎的炎症反应和后期放射性肺纤维化的程度,因而对放射性肺损伤具有防治作用.     

汉防己甲素对食管癌放射性肺损伤的保护作用

目的观察汉防己甲素对食管癌放射性肺损伤的保护作用及其机制。方法经病理确诊的食管癌患者78例根据治疗方法不同随机分为2组,治疗组40例在放疗第1天起口服汉防己甲素片40~60mg·d-1,对照组38例仅给予放疗。治疗过程中监测患者血清转化生长因子β1(TGF-β1)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。治疗后评价肺损伤情况。结果治疗组放疗结束后1、3、6个月血清TGF-β1、TNF-α水平均低于对照组(P均<0.05)。治疗组在放疗结束后6个月肺CO弥散量下降比对照组少(P<0.05)。治疗组放射性肺炎和放射性肺纤维化的发生率低于对照组(P<0.05)。结论汉防己甲素能抑制食管癌放疗后TGF-β1和TNF-α的过度表达,阻止肺弥散功能的恶化,可用于放射性肺损伤的预防。     

大鼠急性放射性肝损伤及其保护的实验研究

目的:探讨活性氧自由基(ROS)、一氧化氮(NO)和TGF-β1在大鼠急性放射性肝损伤中的机制及细胞保护剂安福定对大鼠急性放射性肝损伤的保护作用.方法:健康雄性SD大鼠48只,随机分成正常对照组(C组)、安福定组(A组)、单纯照射组(X组)3组各16例.正常对照组不予照射.其余两组给予一次性全肝照射,照射剂量20Gy.安福定组于照射前30 min腹腔内注射安福定200mg/kg;单纯照射组则照射前腹腔注射等容量的生理盐水.结果:照射后第4、8、14天的血ALT、AST、肝组织光镜未出现明显变化.电镜下明显的超微结构改变.单纯放射组大鼠血浆ROS活性明显高于正常对照组(P<0.05).安福定组血浆MDA含量显著低于正常对照组,而SOD活性则高于正常对照组.单纯放射组大鼠血浆NO含量明显高于正常对照组和安福定组(P<0.05).照射后第14天单纯放射组大鼠血浆TGF-131含量明显高于正常对照组和安福定组(P<0.05).结论:ROS、NO和TGF-β1都参与了急性放射性肝损伤.NO和TGF-β1则分别作为炎症介质和炎性细胞因子在损伤的进程中起关键作用.安福定对放射性肝损伤有保护作用.测定血MDA含量及SOD活性、NO和TGF-β1比血ALT、AST更早提示放射性肝损伤.     

丹参酮ⅡA对放射性肺纤维化防治作用的实验研究

目的探讨丹参酮ⅡA对分次照射放射性肺纤维化的防治效果及机制。方法雌性Wistar大鼠,6 MV X线右胸照射,3 Gy/次,5次/周,总量30 Gy。每次照射前1 h腹腔注射丹参酮ⅡA磺酸钠15 mg/kg。照射后5个月取大鼠肺组织进行HE染色、Masson染色、转化生长因子-β1(TGF-β1)免疫组化染色、羟脯氨酸含量及实时荧光定量RT-PCR检测TGF-β1 mRNA的表达变化。结果每克湿肺羟脯胺酸含量在对照组、照射组与丹参酮加照射组分别为(21.99±3.96)、(38.25±7.18)(、28.94±4.29)μg/g。照射组较对照组肺泡炎、纤维化病变加重,羟脯氨酸含量、TGF-β1蛋白及mRNA的表达升高;丹参酮加照射组较照射组肺泡炎、纤维化病变减轻,羟脯氨酸含量、TGF-β1表达下降。结论丹参酮ⅡA能增加肺组织对放射性损伤的耐受,其机制可能通过抑制TGF-β1表达,使炎症及纤维化病变减轻。     

益气活血中药对放射损伤大鼠肺组织TGF-β1和Ⅰ、Ⅲ型胶原合成的影响

目的：观察小剂量重复照射下不同时相大鼠肺组织转化生长因子-β1（TGF-β1）的表达和Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维的动态变化,以及益气活血中药干预的影响,探讨益气活血中药防治放射性肺损伤的作用及机理。方法：96只Wistar种雌性大鼠随机分为照射加中药组（A组）30只、照射加氨溴索组（B组）30只、单纯照射组（C组）30只、正常对照组（D组）6只。用直线加速器对前3组大鼠右肺进行分次照射（5Gy/次,1次/w,累积剂量为30Gy）,于照射开始后第4、6、8、12、26w5个时间点分别处死3组大鼠各6只,取肺组织切片行TGF-β1和Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维免疫组化检测,观察各组大鼠肺组织不同时相TGF-β1的表达和胶原纤维含量的改变。结果：单纯照射组大鼠肺组织TGF-β1于照射第4w增高,第12w达到高峰;胶原纤维合成在第4w开始,第12w明显增快,至26w达到高峰。中药干预组各时相大鼠肺组织TGF-β1表达及Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维增生程度均明显低于单纯照射组（P〈0.05）;各时相值与照射加氨溴索组近似,相比无统计学差异（P〉0.05）。结论：在小剂量重复照射过程中,组织TGF-β1表达与组织胶原纤维合成有明显的同步性,而早期应用益气活血中药可抑制TGF-β1的表达,并减轻早期放射性肺炎的炎症反应和后期放射性肺纤维化的程度,因而对放射性肺损伤具有防治作用。     

益气活血养阴解毒方对大鼠放射性肺损伤的治疗作用

目的 探讨益气活血养阴解毒方对放射性肺损伤的治疗作用以及对血清转化生长因子-β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量的影响.方法 采用随机数字法,将90只大鼠分为A组(空白对照)、B组(照射)、C组(激素+照射)、D组(中药低剂量+激素+照射组)、E组(中药正常剂量+激素+照射组)、F组(中药高剂量+激素+照射组)六组,B~F组大鼠双肺均采用6MV X线照射,建立放射性肺炎模型.分别于放射双肺后的第7 d、14 d、21 d、28 d、60 d随机断颈处死5只大鼠,获得右中肺进行肺部病理学评分,并采血采用ELISA法检测各时期大鼠血清TNF-α和TGF-β1含量.结果 B组各时期肺部损伤评分、血清TGF-β1和TNF-α含量均显著高于其他五组,E组和F组各时期肺部损伤评分、血清TGF-β1和TNF-α含量均显著低于C组;随着中药给药剂量的上升,肺部损伤评分、血清TGF-β1和TNF-α含量呈现下降趋势.结论 与激素相比,加用益气活血养阴解毒方可有效降低大鼠放射性肺损伤、血清TGF-β1和TNF-α含量.     

血管紧张素Ⅱ醛固酮在放射性肺损伤中的表达

  目的  放射性肺损伤是一种常见的、与放射剂量相关的胸部恶性肿瘤放疗并发症, 考虑到对患者严重的不良反应及对治疗的限制, 本实验初步探讨了放射性肺损伤的发生机制。  方法  雌性Wistar大鼠57只, 随机分成三组(每组19只): 对照组(2组), 照射16 Gy组(2组), 照射20 Gy组(2组), 右肺予不同照射剂量(0、16、20 Gy)。2或6个月后, 取大鼠右肺组织, ELISA方法检测肺组织中TGF-β1、血管紧张素Ⅱ、醛固酮含量。  结果  对照组与照射组比较, 大鼠肺组织血管紧张素Ⅱ、醛固酮的表达均有统计学差异, 并且具有放射剂量和时间的依赖性。  结论  初步研究结果显示血管紧张素Ⅱ-醛固酮系统在放射性肺损伤的发生发展过程中具有重要的作用, 但机制需要进一步研究证明。      

常山酮防治放射性肺损伤及其机制的研究*

目的：研究常山酮对放射性肺损伤的防治作用,并探索其可能机制。方法：健康雌性C 57BL/6J 小鼠72只,随机分为对照组、照射组、常山酮组及照射联合常山酮组,每组18只。对照组不做处理;常山酮组每只小鼠予常山酮灌胃1 次/d ,连续1 个月或至处死;联合组灌胃方法同常山酮组,并于灌胃至15d 时予全肺6MV-X 线单次照射12Gy;照射组予全肺照射,照射时间及剂量同联合组;照射后24h 、1 、2 、4 、12、20周各组随机处死3 只,留取肺组织,H&E染色观察肺组织形态、羟脯氨酸碱水解法测定羟脯氨酸含量、免疫组织化学法及RT-PCR 法测定TGF-β 1 的表达水平。结果：H&E染色结果示联合组小鼠各时间点肺泡炎症及（或）肺纤维化程度较照射组均明显减轻。联合组肺组织羟脯氨酸含量低于照射组,至照射后20周达统计学差异（P =0.037）。 免疫组织化学及RT-PCR 结果示照射后各时间点照射组及联合组肺组织中TGF-β 1 表达水平均高于对照组及常山酮组（均P < 0.05）;联合组TGF-β 1 蛋白表达水平于照射后2、4、12、20周显著低于照射组（均P < 0.05）,TGF-β 1 mRNA 水平于照射后4、12周显著低于照射组（均P < 0.05）。 结论：常山酮可抑制胸部照射后小鼠肺组织炎性及纤维化改变,这可能是通过抑制放射导致的肺组织中TGF-β 1 表达升高引起的,有望将常山酮开发为防治放射性肺损伤的新型药物。     

阿米福汀对单次肺照射的保护作用及TGF-β1活性的影响

目的用大鼠放射性肺损伤模式评价阿米福汀对单次肺照射的放射性肺损伤保护作用和对TGFβ1活性变化的影响。方法34只150～160g的Fish344雌性大鼠随机进入照射加药(11只)、单纯照射(11只)、单用药(6只)和正常对照(6只)实验组。用4MVX射线单次28Gy照射右全肺,照射前30min腹腔内注射阿米福汀150mg/kg。每2周观测呼吸频率和血浆转化生长因子(TGFβ1)水平,在6个月后终止观察。肺组织进行羟脯胺酸、胶原蛋白含量、总TGFβ1与活性TGFβ1水平、TGFβ1蛋白表达和巨噬细胞量等检测。结果单纯照射组呼吸频率于第8周发生改变、达(185±13)次/min,3只因呼吸困难终止观察,7只有胸腔积液;照射加药组于第14周开始增加,仅为(125±5)次/min,无呼吸困难和胸腔积液发生。单纯照射组的肺组织结构消失纤维化,照射加药组也有纤维化,但保持大部分肺泡结构。血浆TGFβ1水平呈双峰改变,单纯照射组12周时为(3.2±0.5)ng/ml,较照射加药组(1.3±0.3)ng/ml明显增高(P=0.004);肺组织活性TGFβ1与总TGFβ1含量之比分别为3.9%±0.2%与3.1%±0.2%,单纯照射明显高于照射加药组(P<0.05)。结论阿米福汀不仅能增加肺组织对放射性损伤的耐受,同时也能减少TGFβ1的含量与表达,也许同时能减少TGFβ1的活性表达。     

大鼠心脏组织TGF-β1 mRNA表达水平与放射性损伤关系的实验研究

背景与目的:放射性心脏损伤是影响接受纵隔放疗患者长期生存的预后因素之一,本研究探讨大鼠受照后心脏转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)mRNA水平随时间的变化及与放射性损伤发生发展的关系,为进一步抗纤维化药物治疗放射性心脏损伤的实验研究提供参考。方法:将60只大鼠分为两组。对照组大鼠不接受照射,受照组给予心脏照射20Gy,分别在受照后第1天、第2、4、8、12、24周每组解剖5只大鼠,检测血清肌钙蛋白和肌酸激酶同工酶(isoenzyme of creatine kinase,CK-MB)水平的变化,定量PCR检测心脏组织TGF-β1mRNA表达,并行心脏组织学切片评价心脏受照后损伤程度。结果:照射后24h实验组血清肌钙蛋白即有升高,2周时达到高峰[(0.73±0.11)ng/mL],与对照组[(0.11±0.04)ng/mL]相比差异有统计学意义(P<0.05);实验组CK-MB无明显变化,两组相比差异无统计学意义(P>0.05)。心脏TGF-β1mRNA表达在照射后第1天即出现升高,并在第2、12周出现高峰[受照组为(8.55±1.19)×10-8μg/mL以及(4.63±0.41)×10-8μg/mL,对照组为(1.27±0.11)×10-8μg/mL以及(1.35±0.15)×10-8μg/mL],两组相比差异有统计学意义(P<0.05)。心脏受照后自第2周起纤维细胞比例增加[受照组为(2.87±0.37)%,对照组为(1.14±0.55)%],随时间延长放射性损伤逐渐加重,两组相比差异有统计学意义(P<0.05);心肌组织纤维化程度的变化与TGF-β1mRNA表达水平的变化有显著的正相关性(P<0.05,r=0.48)。结论:TGF-β1参与心肌纤维化的形成。在TGF-β1分泌高峰期使用抗纤维化药物对其水平进行抑制,可能对组织纤维化形成产生预防作用。     

早期放射性肺损伤小鼠中HMGB1表达及作用研究

目的观察C57BL/6小鼠一次性大剂量（15Gy）胸部照射后肺组织高迁移率族蛋白B1（high mobility group protein,HMGB1）表达和支气管肺泡灌洗液（bron choalveolar lavage fiuid,BALF）中HMGB1水平的改变,探讨HMGB1在小鼠放射性肺损伤中的表达及作用。方法 42只C57BL/6小鼠随机分为对照组（6只）、照射12h组（12只）、照射1周组（12只）和照射4周组（12只）,ELEKTA直线加速器一次性15Gy照射小鼠胸部,建立放射性肺损伤模型。在相应的时间点获取BALF并处死照射后及对照组小鼠,保存肺组织标本。采用实时qRT-PCR检测肺组织HMGB1mRNA水平,采用蛋白质印迹法和免疫组化染色分析肺组织HMGB1蛋白水平。BALF中HMGB1、IL-17A、TNF-α和IL-6含量采用ELISA法检测,HE染色后光镜下观察肺组织病理形态变化。结果 HE染色显示,照射1周后肺泡腔内和细支气管壁可见成堆炎细胞浸润,毛细血管充血,肺间质水肿。照射4周后更为明显。HMGB1免疫组化染色显示,照射后肺组织细胞HMGB1表达明显增强。蛋白质印迹结果显示,对照组HMGB1蛋白表达量为0.42±0.10,照射12h组为0.78±0.13,照射1周组为1.23±0.21,照射4周组为1.56±0.22。照射后12h肺组织HMGB1蛋白表达量较对照组明显增高,F=11.809,P=0.035;并随时间延长而进一步升高,P〈0.05。RT-PCR结果显示,对照组肺组织HMGB1mRNA相对表达水平（ΔCt）为9.69±1.40,照射12h组为7.58±1.01,照射1周组为5.45±1.06,照射4周组为3.55±0.73。照射12h组ΔCt显著性低于对照组,F=13.410,P=0.034;并随照射后时间延长肺组织HMGB1mRNA的ΔCt值进一步降低,P〈0.05。ELISA结果显示,小鼠肺照射后各时间点BALF中HMGB1、IL-17A、TNF-α和IL-6水平均明显升高,P〈0.01。结论小鼠肺照射后HMGB1表达改变,且存在时间依赖性;HMGB1参与放射性肺损伤过程。     

替普瑞酮诱导热休克蛋白70表达对小鼠放射性肺损伤的保护作用

目的:探讨替普瑞酮(geranylgeranylacetone,GGA)诱导肺组织表达热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)是否对小鼠放射性肺损伤具有保护作用及其可能的相关机制。方法:104只昆明小鼠随机分为空白对照组、GGA组、照射组及GGA联合照射组。照射前,GGA组和联合组小鼠给予GGA600mg·kg-1·d-1灌胃3d,空白组及照射组则给予等量的0.9%氯化钠溶液预处理。照射组和联合组小鼠给予6MVX线全肺单次20Gy照射,空白组及GGA组仅予伪装照射,照射后各组小鼠处理同前,直至相应检测时间点。RT-PCR分别检测照射后d1和d3的肺组织HSP70和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)mRNA的表达水平;免疫组织化学法评估d1肺组织HSP70阳性细胞水平及分布;苏木精-伊红染色观察d3和d60肺组织形态学改变;Masson三相染色及检测羟脯氨酸(hydroxyproline,Hyp)含量以评估d60肺纤维化程度;ELISA法检测各检测点的血清转化生长因子β1(transforming growth factor-beta1,TGF-β1)水平。结果:照射组小鼠可观察到典型的放射性肺炎及晚期肺纤维化;GGA联合照射组小鼠的肺组织HSP70表达水平较空白组及照射组明显升高,其TNF-αmRNA表达水平、血清TGF-β1总体水平、放射性肺炎、肺纤维化程度及羟脯氨酸含量均低于照射组(P<0.05),GGA组与空白组各项指标间差异无统计学意义。结论:重复GGA灌胃诱导小鼠肺组织表达HSP70对放射性肺损伤具有保护作用,其机制可能与抑制重要的炎性反应因子TNF-α及纤维化相关因子TGF-β1的表达有关。     

卡托普利对小鼠在肺部照射后TGF-β1、TNF-α水平的影响

目的：探讨卡托普利在小鼠放射性肺损伤中对血清转化生长因子-β1（TGF-β1）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的干预影响。方法：雄性C57／BL小鼠，设对照组、右肺单次照射10Gy组、右肺单次照射10Gy＋卡托普利组，于照射后36h、7d、15d、30d采集血液标本，ELISA法测血清中TGF-β1及TNF-α；同期取右肺组织以HE染色制成病理学标本。结果：10Gy照射组在照射后不同时段血清中TGF-β1水平及TNF-α水平均较对照组升高；而单次照射10Gy＋卡托普利组则表现为在不同时段均较对照组水平降低。析因分析结果为时间因素间、处理因素间、交互作用间均有统计学差异（P〈0．05）。病理结果显示10Gy照射组出现进行性加重的炎症改变，而单次照射10Gy＋卡托普利组则与对照组比较无明显区别。结论：卡托普利可以减低小鼠肺照射时TGF-β1、TNF-α等细胞因子浓度，并抑制放射性肺损伤的发生。     

阿米福汀对放射性肺损伤保护作用的实验研究

目的用荷瘤和无瘤大鼠的放射性肺损伤模式评价阿米福汀(Amifostine,WR-2721)的放射性肺损伤保护作用.方法选150～160 g的Fisher-344雌性大鼠,在右后胸壁种植R3230AC人乳腺癌细胞株,肿瘤长至直径为1.0～1.5 cm时和无肿瘤大鼠随机进入实验组.用4 MVX射线、剂量DT35 Gy 5分次5 d照射右全肺,每次照射前30 min腹腔内注射Amifostine(150 mg/kg).照射后观测呼吸频率、肿瘤大小和转化生长因子(TGF-β1)水平.当出现呼吸困难伴体重下降时,终止观察,否则在6个月后终止观察.肺组织进行羟脯胺酸和TGF-β1表达等生物学检测.结果治疗后第3 d体重下降明显,照射加Amifostine(15%)和单用Amifostine(11%)与单纯放射(7%)间有明显的差别.肿瘤生长延迟和肿瘤生长情况及因肿瘤肺转移死亡贡献生存率,用药与未用药者相似.无瘤大鼠单纯照射组的平均呼吸频率增加早(第9周开始)、幅度高(125～127次/min),照射加药组在第12周开始,115～118次/min(P<0.001).单纯照射组羟脯胺酸含量明显高于照射加amifostine组(P=0.042)、单用药组和对照组(P<0.01).血浆TGF-β1含量在照射后1～3个月增加、2个月达高峰,单放组的TGF-β1含量[(5.32±1.21) ng/mL]明显高于用药组[(2.80±0.23)     

吡格列酮对放射性肺炎的预防作用及其机制研究

目的 过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor gamma,PPARγ)是一类由配体激活的核转录因子,参与调节多种炎症介质的释放,但PPARγ是否参与调节放射性肺炎尚不清楚.本实验研究PPARγ激动剂吡格列酮(pioglitazone,PIO)对放射性肺炎的预防作用,并探讨其机制.方法 将BALB/c小鼠80只随机分为正常对照组、单纯照射组、PIO治疗组及照射+PIO治疗组4组,每组20只.X射线全胸单次照射15 Gy建立小鼠放射性肺炎模型,PPARγ激动剂PIO 20 mg/ (kg·d)于照射前1周开始灌服,1次/d,每周称体质量调整1次给药剂量,共8周.分别于照射前、照射后1、4和8用处死小鼠5只,摘取全肺,称湿重,计算肺指数;行肺脏组织学HE染色观察肺组织学变化,ELISA法检测小鼠血清中转化生长因子β1(transforming growth factor beta 1,TGF-β1)、白介素6(in-terleukin 6,IL-6)和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-口)在各组小鼠血清中的变化.结果 各组小鼠无一例死亡.资料经Kolmogorov-Smirnov检验符合正态分布,方差齐.单纯照射组小鼠肺指数最高,F=35.82,P＜0.001;照射组小鼠肺指数显著高于对照组和PIO组,均P＜0.001;照射+PIO组小鼠肺指数显著低于单纯照射组,P＜0.001.不同时间点各组小鼠肺指数差异无统计学意义,F=1.30,P=0.282.照射后肺组织发生广泛炎症改变,小血管和毛细血管扩张、充血,肺间隔和肺泡腔充斥大量水肿液体,使肺泡间隔增厚,肺泡腔减小.肺泡腔以及增厚的肺间质中充斥大量炎性细胞成分,包括巨噬细胞、中性粒细胞、淋巴细胞和红细胞等,表现为充血、水肿和渗出.PIO组则减轻了照射诱发的肺组织充血、水肿和渗出.单纯照射组小鼠TGF-β1、IL-6及TNF-α水平均高于其他3组,差异均有统计学意义,F值分别为128.80、79.18和135.51,均P＜0.001.对照组和PIO组小鼠血清TGF-β1、IL-6及TNF-α水平差异均无统计学意义,P=1.000;照射组小鼠血清TGF-β1、IL-6及TNF-α水平均显著高于对照组和PIO组(均P＜0.001),照射+PIO组小鼠血清TGF-β1、IL-6及TNF-α水平均显著低于单纯照射组(均P＜0.001).照射后4周血清TGF-β1 (F=20.62,P＜0.001)、IL-6(F=8.15,P=0.001)及TNF-α(F=5.96,P=0.005)水平最高,均显著高于照射后1周.但血清TGF-β1与照射后8周相比差异无统计学意义,P=0.460.血清TGF-β1、IL-6及TNF-α水平处理组与照射后时间之间无交互效应.血清中TGF-β1 (r=0.486,P=0.021)、IL-6(r=0.525,P＜0.001)和TNF-α(r=0.573,P=0.005)水平与肺指数呈显著正相关.结论 PPARγ激动弃 PIO能减轻小鼠放射性肺炎,其作用与可能与调节TGF-β1、IL-6和TNF-α的表达水平有关.