膀胱尿路上皮癌差异表达微小RNA的筛选、验证及意义

目的 分析膀胱尿路上皮癌中差异表达的微小RNA(miRNA),为进一步研究相关miRNA的功能及致癌机制提供平台.方法 收集2008年9月至2009年9月南京军区南京总医院泌尿外科手术获得标本,5份正常膀胱黏膜上皮组织和30例膀胱尿路上皮癌患者膀胱组织(其中浸润癌18例、非浸润癌12例;Ⅰ级10例、Ⅱ级10例、Ⅲ级10例),miRNA芯片分析筛选出差异表达miRNA.重新收集正常膀胱黏膜上皮组织(n=10)和膀胱尿路上皮癌标本(n=50);选4型膀胱尿路上皮癌细胞株,用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)验证miRNA基因芯片结果.结果 Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅰ+Ⅱ+Ⅲ级、浸润性、非浸润性膀胱尿路上皮癌分别与正常膀胱黏膜上皮比较所得的6组差异表达基因中,has-miR-29b-1*均上调,has-miR-300、has-miR-923均下调.浸润性与非浸润性膀胱尿路上皮癌相比有7个差异表达基因,上调6个,下调1个.RT-PCR验证结果 与基因芯片结果 一致;4型膀胱癌细胞株中,T24细胞株RT-PCR验证结果 与基因芯片结果 完全一致.结论 膀胱尿路上皮癌与正常膀胱黏膜上皮组织比较存在差异表达的miRNA,其可能与膀胱尿路上皮癌的发生、浸润、进展密切相关;膀胱尿路上皮癌T24细胞株与膀胱尿路上皮癌有一致的miRNA差异表达.     

MiRNA异常表达对肥胖儿童代谢综合征发生发展的影响

目的探讨微小RNA（microRNA,miRNA）异常表达对肥胖儿童代谢综合征发生发展的影响。方法应用miRNA表达谱芯片检测肥胖合并代谢综合征患儿、单纯性肥胖患儿及正常体重儿童血清中miRNA的表达谱;利用实时定量PCR技术检测其差异表达的miRNA,验证miRNA芯片结果的可靠性;应用软件对筛选出的显著差异表达miRNA的靶基因进行预测。结果单纯性肥胖患儿血清中,上调表达超过1.5倍的miRNA有15个,下调表达超过1.5倍的有11个。肥胖合并代谢综合征患儿血清中9个上调miRNA,7个下凋miRNA。其中肥胖合并代谢综合征患儿hsa-miR-143、hsa-miR-24、hsa-miR-34a和has-miR-29a表达高于单纯性肥胖患儿,下调表达中有hsa-miR-192和hsa-miR-23a表达低于单纯性肥胖儿童。通过生物信息学分析发现了表达显著改变miRNA的共同作用的靶基因。结论筛选出肥胖合并代谢综合征患儿的差异表达miRNA,可能参与其对应共同靶基因,具有调控肥胖儿童合并代谢综合征发生发展的作用。     

宫颈鳞状细胞癌组织中miRNA差异性表达及其靶基因作为诊断标志物的意义

目的: 采用生物信息学方法研究宫颈鳞状细胞癌(CESC)组织中差异性表达的miRNA并预测其靶基因,以期找到影响CESC发生发展及可用于肿瘤标志物的miRNA。 方法: 癌症基因组图谱 (TCGA)数据库中下载3例CESC组织及3例配对正常组织,用统计学方法对差异性表达的基因及miRNA进行筛选,通过靶基因预测网站对差异性表达的miRNA进行靶基因预测,运用KEGG数据库分析靶基因参与的肿瘤相关信号通路。 结果: 与同源正常组织比较,CESC组织有18个miRNA和1180个基因有差异性表达(P<0.05),其中有15个miRNA和411个基因上调,3个miRNA和770个基因下调,采用靶基因预测网站有7个miRNA与预测到的靶基因呈负向调控关系,6个上调miRNA的靶基因下调,1个下调miRNA的靶基因上调,靶基因集中在Wnt、MAPK、P53和cAMP等肿瘤相关信号通路。 结论: 差异性表达的miRNA包括hsa-miR-27a、hsa-miR-148b、hsa-miR-185、hsa-miR-200a、hsa-miR-200b、hsa-miR-221和hsa-mir-133b,差异性表达的miRNA及其靶基因在CESC的发生发展过程中起重要作用,有可能成为诊断CESC的肿瘤标志物。     

结肠癌microRNA表达谱检测及生物信息学分析

目的 探讨miRNA(microRNA,微小RNA)在结肠癌组织中的表达特征及生物学功能.方法 选取临床特征相似的3对结肠癌组织及其配对正常黏膜组织,应用Exiqon miRNA芯片检测miRNA在结肠癌及其配对组织中差异表达情况;3个差异表达的miRNA被选取进行qPCR验证;生物信息学分析差异表达的miRNA及其靶向基因在结肠癌进展中的作用机制.结果 芯片结果显示,在3对结肠癌组织中有201个miRNA出现上调表达,94个下调表达(差异倍数>2),差异有统计学意义(P<0.05).qPCR结果显示,与对照组织比较,选取的3个miRNA中hsa-miR-18b-3p、hsa-miR-31-5p在结肠癌组织中表达上调,hsa-miR-142-3p表达下调,与芯片结果一致,差异有统计学意义(P<0.05).GO及pathway分析显示差异表达的miRNA涉及结肠癌细胞的分化、迁移、定位、增生及RNA、蛋白合成等功能调控,与细胞粘附、结肠癌发生发展等信号途径的激活相关.结论 结肠癌组织中miRNA存在异常表达,可能涉及结肠癌的发生、发展.     

不同腹膜后淋巴结转移能力的卵巢癌细胞小RNA（miRNA）表达差异

 目的  筛选具有腹膜后高淋巴结转移能力的浆液性卵巢癌细胞株,并分析其导致淋巴高转移的相关小RNA (microRNA,miRNAs)。方法   接种人卵巢癌细胞株SKOV-3于BALB/c裸鼠腹腔,从腹膜后淋巴结中筛选出卵巢癌细胞,再次接种于裸鼠腹腔,重复分选4次后获得了稳定的高腹膜后淋巴结转移细胞株SKOV-3/LN403。对比SKOV-3和SKOV-3/LN403细胞的形态、增殖和侵袭能力,应用miRCURYTM LNA Array技术对两者的miRNA进行差异分析,通过real-time PCR验证差异表达的miRNAs。结果  稳定筛选的腹膜后高淋巴结转移卵巢癌细胞株SKOV 3/LN403,淋巴转移率高达90% (n=10),并能成功模拟卵巢癌淋巴转移患者的临床表现。SKOV-3/LN403具有比SKOV-3更强的增殖(P<0.05)和侵袭能力(P<0.01)。miRNA的表达谱提示14种miRNA表达差异明显,包括3种miRNA上调(hsa-miR-886 5p,hsa-miR-640,hsa-miR-801),11种miRNA下调(hsa-let-7a,hsa-miR-30a,hsa-miR-491-3p,hsa-let-7i,hsa-miR-125b-1,hsa-miR-27a,hsa-miR-24,hsa-let 7b,hsa-miR-16,hsa-miR-20a,hsa-miR-26b)。Real time PCR结果和芯片结果一致。结论  SKOV-3/LN403可用于构建卵巢癌腹膜后淋巴结转移模型,其高腹膜后淋巴结转移力与miRNA分子的调控相关,为卵巢癌腹膜后淋巴结转移机制提供潜在研究靶点。     

肾母细胞瘤细胞株与正常胚肾细胞株微小RNA表达谱的差异分析

目的 探讨肾母细胞瘤G401与正常胚肾CCC-HEK-1细胞株中微小RNA(miRNA)分子表达谱的差异,为进一步研究相关miRNA在肾母细胞瘤发病机制中的作用奠定基础.方法 选取G401和CCC-HEK-1的各3个样本分别作为实验组和对照组,采用miRNA芯片筛选两者之间差异表达的miRNA,样品间表达变化标准以上调2倍/下调50.0%作为阈值范围,并用实时定量PCR验证miRNA芯片结果的可靠性.结果 上调超过2倍差异表达miRNA分子71个,其中上调超过8倍差异表达miRNA分子11个;其中下调至50.0%以下差异表达miRNA分子59个,其中下调至12.5%以下差异表达miRNA分子11个.总体上,G401和CCC-HEK-1之间差异表达显著.结论 G401和CCC-HEK-1之间存在差异表达miRNA分子,它们可能与肾母细胞瘤的形成有关.     

microRNA在犬心房纤颤模型中的变化

目的 应用miRNA芯片技术研究小分子RNA(miRNA)对犬心房纤颤(AF)的调节作用,发现了AF的新机制,为新药研究提供了新的靶点.方法 将杂种犬随机分为两组,假手术组(n=4);利用高频起搏器对右心耳进行刺激起搏诱发持续性AF组(n=5),取左心房组织常规抽提总RNA,采用含有468种miRNA的芯片检测系统进行miRNA表达谱差异分析.结果 和假手术组相比,AF模型组的miRNA表达谱中差异表达的miRNA共有10个,其中有4个miRNA上调,6个miRNA下调.结论 miRNA参与了持续性AF的调节作用,提示miRNA是抗心律失常药物作用的新靶点.     

基于TCGA数据库应用生物信息学方法分析和挖掘肺腺癌预后和诊断miRNA研究

目的基于TCGA数据库,应用生物信息学方法分析和挖掘肺腺癌预后和诊断miRNA生物学标志物。方法数据下载:从TCGA下载获取肺腺癌miRNA表达谱数据,包括miRNAseq和临床数据。筛选差异表达miRNAs:应用R-version 3.6.2软件中的edgeR包筛选肺腺癌组织和正常肺组织的差异基因,以│logFC│>2,P<0.05为筛选条件。筛选与预后相关miRNAs:应用R-version 3.6.2软件中的survival包绘制KM生存曲线,筛选与预后相关的miRNAs。筛选可作为肺腺癌诊断的miRNAs:应用R-version 3.6.2软件中的pROC包制作受试者工作特征曲线(ROC)评价与预后相关miRNAs诊断肺腺癌的特异性和敏感性。结果共识别到肺腺癌与正常肺组织差异表达的miRNA 144个,其中上调表达119个,下调表达25个。通过K-M生存曲线筛选出与预后显著相关(P<0.05)的miRNA共13个,分别为hsa-miR-139-3p、hsa-miR-328-3p、hsa-let-7g-3p、hsa-miR-142-3p、hsa-miR-147b...     

基于生物信息学的乳腺癌miRNA生物标志物的筛选

目的 筛选与乳腺癌相关的miRNA生物标志物,为乳腺癌的早期诊断、预后评估以及药物靶点的研究提供参考.方法 从TCGA数据库中收集乳腺癌相关基因芯片数据,将肿瘤组织与正常组织样本数据进行对比分析,筛选差异miRNA与mRNA;预测差异miRNA的潜在靶基因并与差异mRNA取交集,进一步对miRNA进行筛选;采用ROC曲线分析对筛选得到的miRNA进行评价.结果 筛选得到9个差异miRNA,对肿瘤样本和正常样本分类良好.分别为6个上调miRNA:hsa-miR-141、hsa-miR-182、hsa-miR-183、hsa-miR-200a、hsa-miR-200b、hsa-miR-21;3个下调miRNA:hsa-let-7c、hsa-miR-125b-1、hsa-miR-145.结论 筛选得到的差异miRNA可作为乳腺癌的生物标志物,可对乳腺癌的发生进行预测.     

靶向维生素D受体的miRNA的筛选及其对继发性甲状旁腺功能亢进患者甲状旁腺激素分泌的影响

目的 探讨靶向维生素D受体（VDR）基因的miRNA及其对继发性甲状旁腺功能亢进甲状旁腺激素（PTH）分泌的影响。方法 用胶原酶消化法提取、分离和培养出继发性甲状旁腺功能亢进的甲状旁腺组织的原代细胞;运用生物信息学方法及全转录组测序的方法筛选得到靶向VDR的miRNA,双荧光素酶报告基因实验验证筛选出的miRNA与VDR的靶向关系;qRT-PCR及Western blotting检测过表达或抑制miRNA后的对VDR mRNA水平及蛋白水平和对PTH分泌的影响;qRT-PCR和免疫组织化学分别验证部分miRNA、VDR mRNA和蛋白水平的表达差异。结果 成功培养得到甲状旁腺原代细胞;筛选并验证了hsa-miR-149-5p、hsa-miR-221-5p、hsa-miR-222-3p、hsa-miR-29a-5p、hsa-miR-301a-5p、hsa-miR-873-5p、hsa-miR-93-3p均与VDR存在靶向关系;筛选并验证的7个miR中,过表达hsa-miR-149-5p、hsa-miR-301a-5p PTH分泌增加。hsa-miR-149-5p在继发性甲状旁腺功能亢进中高表达（P=0.046）,VDR mRNA（P=0.0267）和蛋白水平表达均下降。结论 hsa-miR-149-5p、hsa-miR-301a-5p可能通过下调VDR基因的表达促进继发性甲状旁腺功能亢进患者PTH的分泌。     

microRNA在食管癌放射抵抗细胞表达谱研究

目的 比较食管癌放射抵抗细胞株与其亲本细胞microRNA表达谱的差异.方法 应用Agilent human miRNA芯片检测人食管癌耐放射细胞株KYSE-150R与其亲本细胞KYSE-150的表达谱.GeneSpring GX 10.0.2数据分析挑选差异表达基因.应用软件对筛选出的显著差异表达miRNA的潜在靶基因进行预测并验证.结果 与亲本细胞相比,KYSE-150R中上调超过2倍的miRNA有l0个,为hsa-miR-1539、hsa-miR-1237、hsa-miR-92b等;表达下调超过2倍的有miRNA有25个,为hsa-miR-185、hsa-miR-18b、hsa-miR-17等.软件预测发现其中18个miRNA有潜在的靶基因,10个miRNAs的靶基因多达200个.显著差异表达的miRNA(如hsa-let-7a、hsa-miR-185、hsa-miR-141、hsa-miR-92b、hsa-miR-22和hsa-miR-301a)与放射抵抗密切相关.结论 筛选出的miRNAs可能通过调控其靶基因而参与食管癌放射抵抗,为临床上放射抵抗的逆转提供全新的靶标和策略.

Abstract：

Objective To identify the differential microRNA expression profiles of acquired radioresistant esophageal cell line established by fractionated ionizing radiation (FIR) versus parental cell line. Methods MicroRNA microarray was employed for detection. Bioinformatic software tools were used to predict the target genes of identified microRNAs. For an understanding of miRNA functions, the GO analysis of abundantly differentially expressed targets of miRNAs was performed by GeneOntology Browser. Results Compared with parental cell line, 10 microRNAs (hsa-miR-1539, bsa-miR-1237, hsa-miR-92b, etc. ) were up-regulated over 2-fold and 25 microRNAs (hsa-miR-185, hsa-miR-18b, hsa-miR-17, etc. ) downregulated in KYSE-150R. Eighteen miRNAs had their target genes, 10 of them had the potential to individually target up to 200 mRNAs. Hsa-let-7a, bsa-miR-185, hsa-miR-141, hsa-miR-92b, hsa-miR-22 and hsa-miR-301a were known as important genes associated with radioresistance. Conclusion These results confirm the involvement of miRNA in radiation resistance. It may potentially help to explain the mechanisms of gene regulation in cellular response to radioresistance.     

hsa-miR-126和hsa-miR-518b在食管鳞癌中的表达

目的探讨食管鳞癌及正常组织微小RNA(miRNA)分子表达谱的差异,寻找并验证具有差异表达的miRNA。方法随机选3例首次诊治食管鳞癌患者的手术切除标本,取癌组织及正常粘膜。采用荧光探针杂交芯片扫描技术,获得食管鳞癌miRNA表达谱,并对表达谱的可靠性进行荧光实时定量RT-PCR验证。另取15例首次诊治食管鳞癌患者手术切除标本的癌组织及正常粘膜,对其中具有表达差异的hsa-miR-126和hsa-miR-518b进行进一步验证。结果得到了食管鳞癌及正常组织的MicroRNA表达谱,分析得到表达变化且具有统计学意义(单侧t检验,P<0.05)的miRNA11个,其中上调1个,下调10个。在另外15对验证样本中,hsa-miR-126上调10例(配对t检验,P<0.05),hsa-miR-518b下调12例(配对t检验,P<0.05)。结论 hsa-miR-126和hsa-miR-518b在食管鳞癌组织和正常组织中存在差异表达,hsa-miR-126在食管癌组织中上调,hsa-miR-518b下调。     

Differential Expression of MicroRNA in Endothelial Cells Incubated with Serum of Hypertension Patients with Blood-Stasis Syndrome

Objective:To screen out blood-stasis syndrome(BSS)-associated microRNA and therefore determine the possible target for treating hypertension.Methods:A high-energy sequencing method and digital gene expression sequencing theory were adopted to sequence microRNA(miRNA) and messenger RNA(mRNA),and to determine differential expression in human umbilical vein endothelial cells incubated with serum samples from hypertension patients with or without BSS,and healthy controls.The results were confirmed using gene prediction software.Results:A total of 13 miRNAs and 11 mRNAs showed statistical difference both in the BSS/normal groups and BSS/non-BSS groups,respectively.Four pairs of target mRNA/miRNA were identified:FRMD4A/hsa-miR-34 a,MAP3K14/hsa-miR-34 a,PER1/hsa-miR-34 a,and FGF2/hsa-miR-132.Conclusion:Four mRNA/miRNA pairs mentioned above seem to be involved in pathogenesis and maintenance of hypertension with BSS.     

甲状腺乳头状癌组织中差异表达miRNA及其靶基因的筛选和预测

目的：分析甲状腺乳头状癌组织中差异表达小分子RNA（miRNAs）并预测其靶基因,寻找影响甲状腺乳头状癌（PTC）发生发展及可用于生物标志物的miRNAs。方法：选取经病理证实的甲状腺乳头状癌组织及配对正常组织切除标本,运用高通量基因芯片的方法对差异表达的基因和miRNAs进行筛选,采用KEGG通路分析差异表达基因的功能,通过预测网站对差异表达miRNA进行靶基因预测,并对分析结果进行qRT-PCR验证。结果：与同源正常组织比较,基因芯片检测出PTC组织有248个miRNAs（ P<0.01）和3 631个基因差异表达（P<0.05）。hsa-miR-101［靶基因：整合素3(ITGA3）］已验证,癌组织中hsa-miR-101表达(59.8%)低于正常甲状腺组织, ITGA3表达（100%）高于正常甲状腺组织,并且与正常组织比较,59.8%PTC组织hsa-miR -101表达下调,同时ITGA3表达上调。结论：hsa-miR-101的靶基因可能为ITGA3,两者在PTC的发生发展中可能发挥重要作用。     

骨关节炎患者成骨细胞胞外体miRNAs表达谱的差异

目的：通过分析骨关节炎(osteoarthritis,OA)患者软骨下骨组织中成骨细胞胞外体miRNAs的表达差异,探究OA发生发展过程中可能涉及的关键胞外体miRNAs。方法：共纳入6名膝OA患者,收集其膝关节软骨下骨组织,选取磨损严重侧为OA组,取磨损较少侧为正常对照组。细胞培养后提取成骨细胞胞外体,进行特征鉴定。提取胞外体miRNAs,用高通量测序并筛选两组间表达差异显著者(log2Ratio≥2)进行靶基因预测分析,并进一步行定量反转录 PCR分析。结果：提取物经鉴定为胞外体,在扫描电镜下呈囊泡状双层膜结构,直径30~200 nm,体积峰度50~150 nm。高通量测序共筛出5个OA组表达显著上调的miRNAs,差异倍数最大者为hsa-miR-4717-5p,预测靶基因为RGS2;定量反转录PCR亦显示OA组hsa-miR-4717-5p相对表达量较对照组显著增高(2.243 vs 0.480,P<0.01)。结论：OA患者成骨细胞胞外体miRNAs表达谱较正常者有显著差异。部分表达显著上调的miRNAs可能通过代谢相关通路介导OA的发生和发展。     

144例维吾尔族与汉族女性子宫内膜癌微小RNA表达特点及临床意义

目的 分析144例女性子宫内膜癌微小RNA(microRNA,miRNA)的表达特点,对比其在维吾尔族与汉族女性子宫内膜癌中的表达差异及其与临床病理特点的内在关联性,阐述临床意义。方法 144例维吾尔族与汉族女性(包括62例维吾尔族和82例汉族),采用Taqman低密度芯片对比两者子宫内膜癌miRNA的表达特点,选取5种miRNA,采用实时定量PCR法验证并分析这些miRNA的表达特点。结果 miRNA表达谱分析显示,Ⅱ型癌突出的特点是许多miRNA在一个民族中表达升高或降低,而在另一个民族中不表达或变化轻微。144例女性的子宫内膜癌miR-141、miR-200a、miR-205表达均升高,维吾尔族女性Ⅰ型癌miR-141/200a表达升高的肿瘤更具侵袭性,而汉族女性Ⅰ型癌的特点相反,miR-200a表达升高的肿瘤侵袭性呈减弱趋势,但Ⅱ型癌miR-200a表达升高的肿瘤趋向更具侵袭性。miR-145、miR-143在维吾尔族与汉族女性子宫内膜癌中的表达特点相反,在维吾尔族表达升高,在汉族显著降低(P<0.05)。维吾尔族中Ⅱ型癌miR-145、miR-143升高更明显,侵袭性相对弱的肿瘤的miR-145表达水平更高,肌层浸润深度<1/2组差异有统计学意义(P=0.042)。汉族女性Ⅰ/Ⅱ型癌中miR-145和miR-143的表达均降低,侵袭性强的Ⅰ型癌中两者降低得更明显,但差异无统计学意义;Ⅱ型癌不具此特点。结论 维吾尔族与汉族女性子宫内膜癌miRNA表达存在一定差异性,miR-141/200a/205在子宫内膜癌中普遍表达升高,但miR-141/200a在维吾尔族与汉族Ⅰ/Ⅱ型子宫内膜癌中扮演的角色可能不尽相同。miR-145/143在维吾尔族与汉族女性子宫内膜癌中的表达特点相反,但可能均发挥抑癌作用。     

144例维吾尔族与汉族女性子宫内膜癌微小RNA表达特点及临床意义

目的 分析144例女性子宫内膜癌微小RNA(microRNA,miRNA)的表达特点,对比其在维吾尔族与汉族女性子宫内膜癌中的表达差异及其与临床病理特点的内在关联性,阐述临床意义。方法 144例维吾尔族与汉族女性(包括62例维吾尔族和82例汉族),采用Taqman低密度芯片对比两者子宫内膜癌miRNA的表达特点,选取5种miRNA,采用实时定量PCR法验证并分析这些miRNA的表达特点。结果 miRNA表达谱分析显示,Ⅱ型癌突出的特点是许多miRNA在一个民族中表达升高或降低,而在另一个民族中不表达或变化轻微。144例女性的子宫内膜癌miR-141、miR-200a、miR-205表达均升高,维吾尔族女性Ⅰ型癌miR-141/200a表达升高的肿瘤更具侵袭性,而汉族女性Ⅰ型癌的特点相反,miR-200a表达升高的肿瘤侵袭性呈减弱趋势,但Ⅱ型癌miR-200a表达升高的肿瘤趋向更具侵袭性。miR-145、miR-143在维吾尔族与汉族女性子宫内膜癌中的表达特点相反,在维吾尔族表达升高,在汉族显著降低(P<0.05)。维吾尔族中Ⅱ型癌miR-145、miR-143升高更明显,侵袭性相对弱的肿瘤的miR-145表达水平更高,肌层浸润深度<1/2组差异有统计学意义(P=0.042)。汉族女性Ⅰ/Ⅱ型癌中miR-145和miR-143的表达均降低,侵袭性强的Ⅰ型癌中两者降低得更明显,但差异无统计学意义;Ⅱ型癌不具此特点。结论 维吾尔族与汉族女性子宫内膜癌miRNA表达存在一定差异性,miR-141/200a/205在子宫内膜癌中普遍表达升高,但miR-141/200a在维吾尔族与汉族Ⅰ/Ⅱ型子宫内膜癌中扮演的角色可能不尽相同。miR-145/143在维吾尔族与汉族女性子宫内膜癌中的表达特点相反,但可能均发挥抑癌作用。     

Role of vascular endothelial growth factor-C and -D mRNA in breast cancer

Vascular endothelial growth factor (VEGF)-C and VEGF-D belong to the VEGF family, and are thought to be involved in lymphangiogenesis and angiogenesis. At present, this is the only known system that can induce lymphatic vessel growth in the body. However, the roles of VEGF-C and VEGF-D in breast cancer tissue have not been clarified. In the present study, we measured the mRNA expression of VEGF-C and VEGF-D in the breast cancer tissue of 109 patients by real-time polymerase chain reaction (RT-PCR). Between non-infiltrating breast cancer (n=6) and infiltrating breast cancer (n=103), there were no significant differences in the mRNA expression of VEGF-C and VEGF-D. In infiltrating cancer, the expression of HER2 exhibited a positive correlation to VEGF-C and VEGF-D mRNA expression (p=0.027, p=0.048). However, mRNA expression ofVEGF-C and VEGF-D did not exhibit any significant correlation to lymphatic vessel invasion or lymph node metastasis. Among patients without lymph node metastasis, the mRNA expression of VEGF-C and VEGF-D for patients with lymphatic vessel invasion was significantly higher than that for patients without lymphatic vessel invasion (p=0.001, p=0.050). The results suggest that, in breast cancer, VEGF-C and VEGF-D are involved in lymphatic vessel invasion prior to lymph node metastasis, and their expression decreases after lymph node metastasis occurs.     

微小RNA在结肠癌组织中的表达及其临床意义

目的 研究结肠癌组织与对应正常结肠组织微小RNA(miRNA)的表达特征及其在结肠癌诊断中的意义.方法 取天津市肿瘤医院2004至2007年手术切除的15例晚期结肠癌组织标本及其癌旁正常组织标本.通过定量PCR(qRT-PCR)法检测6例结肠癌及其癌旁正常结肠组织的手术标本中200种miRNA的表达情况,应用问题分析(PAM)法对其他9例结肠癌组织及其癌旁正常结肠组织进行定性判断(癌和非癌).结果 6例结肠癌及其癌旁正常结肠组织中存在132种miRNA,其中47种miRNA在结肠癌发生过程中表达量显著下降(＜0.66).应用PAM法对9对结肠癌组织/远端正常结肠组织进行定性判断的结果与病理切片诊断结果基本一致(吻合度准确率11/12).结论 miRNA与结肠癌的发生发展有密切的联系,有可能成为一个有效的肿瘤标志物以进行结肠癌的早期预测和诊断.